全 文 :药 物 生 物 技 术
Pharmaceut ical Biotechno logy 2008 ,15(4):293 ~ 295
广西莪术挥发油化学成分的分析*
陈 旭1 , 曾建红1 , 戴 平1 , 葛 静2
(1.桂林医学院药学院 , 广西 桂林 541000;2.广西中医学院药学院 , 广西 南宁 530001)
摘 要 采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对广西莪术挥发油进行分离测定。色谱柱 HP-5MS 毛细管柱
(30.0 m×250μm×0.25μm), 进样温度 250℃, 不分流;程序升温:初始 65℃恒温2 min , 以5℃/min升至 90℃恒
温 3 min ,以 20℃/min 升至 103℃恒温 3 min ,以 8℃/ min 升至 150℃恒温 15 min ,以 20℃/ min 升至 280℃。结合
计算机检索对分离的化合物进行结构鉴定 ,用色谱峰面积归一化法测定各成分的相对百分含量。结果共分离得
到 52 个气相色谱峰 ,鉴定出 20 种化学成分 , 其中 β-榄香烯 、莪术酮 、莪术醇 、莪术二酮 4种主要抗肿瘤活性成分
均能检测到。此方法可用于莪术原料药材和莪术挥发油制剂的检测和相对含量测定。
关键词 广西莪术;挥发油;气相色谱-质谱;抗肿瘤活性成分
中图分类号:Q78 文献标识码:A 文章编号:1005-8915(2008)04-0293-03
广西莪术 Curcuma kwangsiensis S.G..Lee
e t C.F .Liang 是中国药典收载的 3种基原莪术(蓬
莪术 Curcuma phaeocaulis val.,广西莪术 Curcu-
ma kwangsiensis S.G..Lee et C.F .Liang 和温郁
金Curcumawenyuj in Y.H .Chen et C.Ling)中的
一种 ,为姜科姜黄属植物的干燥根茎。多年生草本
植物 ,广西是其主产地。莪术的主要药用部位为根
和根茎 ,挥发油是莪术的主要活性成分[ 1] 。文献报
道莪术油具有抗肿瘤 、抗病毒等作用 ,其中 β-榄香
烯 、莪术酮 、莪术醇 、莪术二酮是莪术的主要抗肿瘤
活性成分[ 2] 。本实验采用气相色谱-质谱联用
(GC-MS)的方法对广西境内道地产区的广西莪术
挥发油化学成分进行了分析 ,为广西莪术挥发油的
质量控制提供理论依据。
1 材料与仪器
1.1 材料
2007年 1月采自广西莪术主产区 ,材料采收
后洗净 、切片 、晒干 、打碎 ,过 20目筛 ,干燥器储藏
备用 。药材经本教研室鉴定为姜科姜黄属植物广
西莪术。
1.2 仪器与试剂
美国 Agi lent5973N-6890气相色谱-质谱联用
仪。FA1004型电子天平 ,上海精科天平仪器厂制
造;调温加热器 ,上海电理仪器厂制造;挥发油测定
器及回流冷凝装置一套。本实验所用试剂均为分
析纯 。
2 实验方法
2.1 挥发油的提取
称取上述广西莪术药材 50 g ,置 1 000 m l圆底
烧瓶中 ,根据 2005年版中国药典一部附录 XD 挥
发油测定法提取挥发油和计算其得率 。
2.2 色谱条件
色谱 柱 HP-5MS 毛 细管柱 (30.0m ×
250μm ×0.25μm);载气为高纯氦气 ,体积流量
1.0 m l/min;进样量 1 μl;程序升温:65℃恒温
2 min , 65℃~ 90℃(5℃/min)恒温 3 min , 90 ~
103℃(20℃/min)恒温 3 min , 103 ~ 150℃
(8℃/min)恒温 15 min , 150 ~ 280℃(20℃/min);
不分流 ,进样温度 250℃;进样量 1 μl;倍增器电压
1 435 v;接口温度 280℃;离子源温度 230℃,电离
方式 EI;电子能量70 ev;溶剂延迟3 min;扫描质量
范围:45 ~ 550 amu。
2.3 定性定量分析
取莪术挥发油 1 μl(乙醚溶液),用气相色谱-
293
* 收稿日期:2008-03-10 修回日期:2008-05-29
基金项目:“广西莪术质量与道地产区生态环境的研究”广西自然科学基金(桂科字 0447101)。
作者简介:陈旭 , 1966年 3月出生 ,女 ,汉族 ,副教授 ,在读博士 , 研究领域:中药及中成药质量标准及标准物质的研究。作者联系电
话:13978323015。
质谱联用仪分析鉴定 ,分别检出 52个峰及对应的
质谱峰 ,得到 GC-MS 指纹色谱图 ,各色谱峰相应
的质谱图经计算机谱检索及人工解析研究其化学
结构 。通过化学工作站数据处理系统 ,按峰面积归
一化法进行计算求得各化学成分在挥发油中的相
对含量。
3 结 果
3.1 挥发油的提取结果
取上述样品 5份 ,每份 50 g ,按 2.1 项条件提
取挥发油及得率 , 样品中挥发油平均提取得率为
2.178 4%, RSD为 0.22%,挥发油含量在药典控
制范围内 ,且方法重复性良好 ,结果见表 1 。
Tab 1 The ex traction r ate of essential oil
No. ex traction r ate of essentia l oil(%) RSD(%)
1 1.742
2 1.789
3 2.013 2
4 2.572
5 2.776
3.2 GC-MS 指纹色谱图
按 2.2 项色谱条件对样品进行测定 ,鉴定出
20个主要化合物 ,且主要抗肿瘤活性成分 β-榄香
烯 、莪术酮 、莪术醇 、莪术二酮与其它成分分离良
好。GC-MS法分析得到广西莪术的 GC-MS 指纹
色谱图见图 1。
Fig 1 To tal-io n Chromatog ram o f the Curcuma Kwang-
siensis essential oil
3.3 GC-MS 指纹图谱特征成分分析
通过 GC-MS 检测了广西莪术挥发油含有 52
种成分 ,鉴定了 20种主要化合物 ,主要为萜类及倍
半萜衍生物。研究已表明莪术油的主要抗肿瘤活
性成分为 β-榄香烯 、莪术酮 、莪术醇 、莪术二酮
等[ 2] ,本研究中采用的色谱条件使上述四种主要成
分与其它成分分离良好 , 其相对含量分别为
5.88%、5.64%、3.22%、5.04%。所鉴定的广西莪
术挥发油中的化学成分及所得的主要化学成分在
挥发油中的相对峰面积百分含量见表 2。
Tab 2 Chemical constituents o f essential oil from Curcuma
Kwang siensis
No. Constituents Rela tive
content(%)
1 a-蒎烯 a-Pinene 1.36
2 莰烯 Camphene 2.92
3 D-柠檬烯 D-Limonene 1.30
4 桉油素 Eucalypto l 8.20
5 2-壬醇 2-Nonanol 2.00
6 樟脑 Campho r 9.40
7 龙脑 Borneo l 2.66
8 异龙脑 I sobo rneol 3.20
9 α-丁子香烯 alpha.-Caryophy llene 3.14
10 莪术烯 Curzerene 8.80
11 α-石竹烯 α-Caryophy llene 1.86
12 β-石竹烯 β-Caryophyllene 1.78
13 δ-榄香烯 δ-Elemene 1.90
14 β-榄香烯 β-Elemene 5.88
15 δ-瑟林烯 δ-Selinene 3.70
16 莪术酮 Curzerenone 5.64
17 莪术醇 Curcumol 3.22
18 莪术二酮 Curdione 5.04
19 吉马酮 Germacrone 9.28
20 β-榄香烯酮 β-Elemenone 12.60
4 讨 论
(1)据文献报道[ 3-4] ,广西莪术不含 β-榄香烯和莪
术醇 ,或者莪术醇含量很低 ,一直以来影响了莪术
油制剂质量的控制。但本研究对其主要活性成分
均能检测到 ,这可能与样品来源及色谱条件有关 ,
因此有关广西莪术的主要有效成分还需进一步
研究 。
(2)本实验中曾采用DB-WAXET R , HP-1及 HP-
5等不同极性的毛细管柱对本品进行分离 ,结果以
HP-5毛细管柱分离效果最好 , β-榄香烯 、莪术酮 、
莪术醇 、莪术二酮等抗肿瘤活性成分均得到了基线
分离 ,用面积归一化法对莪术挥发油进行了相对含
量的测定 。
294 药 物 生 物 技 术 第 15 卷第 4 期
参 考 文 献
[ 1 ] 聂小华 ,敌宗华 ,尹光耀 , 等.提取技术对温莪术挥发油化学
成分及其体外抗肿瘤活性的影响[ J] .药物生物技术 , 2003 ,
10(3):152
[ 2 ] 陈淑莲 , 游静 , 王国俊.超临界流体萃取分析蓬莪术挥发性
成分[ J] .中草药 , 2000 , 31(12):92.
[ 3 ] 杨丰庆 ,李绍平 , 陈莹 , 等.不同来源莪术中莪术醇 、吉马酮 、
莪术二酮 GC-定量分析[ J] .药物分析杂志 , 2005 , 25(7):827.
[ 4 ] 罗春兰 ,吴爱琴.不同品种莪术挥发油成分 GC-MS 分析[ J] .
广东药学 , 2005 , 15(2):10.
Analysis on Chemical Constituents of Essential Oil from Curcuma
Kwangsiensis
CHEN Xu1 , ZENG Jian-hong1 , DA I Ping1 , GE Jing2
(1.Departionent o f Pharmacy , Guilin Medical Col lege , Guilin , 541000 , China;2.Depart inent o f
Pharmacy , Guang xi College o f Chinese Trad it ional Medicine , N anning , 530001 , China)
Abstract T o study chemical consti tuents of essential oil and to determine main components of ant i-
tumo r activity f rom Curcuma kw ang siensis , the chemical consti tuents of essential oil w ere separated and
identified by GC-MS on a HP-5 column(30.0 m ×250 μm ×0.25 μm)w ith , Inlet temperature 250℃,
spli tless.Temperature prog ramming started at 65℃, holding fo r 2 min , then increased at 90℃ at a rate
of 5℃/min , and then increased at 103℃ at a rate o f 20℃/min , holding fo r 3 min , af ter that increased at
150℃ at a rate of 8℃/min , holding fo r 15 min , and f inally increased a t 280℃at a rate o f 20℃/min.The
relative contents in the essential oil w ere identified by area nomalizaion.Fif ty-tw o peaks appeared in GC
spect ra.Tw enty chemical consti tuents w ere dete rmined and four components of anti-tumo r act ivity w ere
dete rmined:β-elemene , curdione and curcumol , curzerenone.The method can be used in detect ing and
assaying the content for thedrug of curcuma materials and its preparat ion.
Key words Curcuma kzoangsiensis , Vo latile oil , GC-MS
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