全 文 ：　　 [文章编号 ]　 1671-587Ⅹ ( 2002) 03-0232-03
[收稿日期 ]　 2001-09-23
[基金项目 ]　国家自然科学基金资助课题 ( NSF 20173057)
[作者简介 ]　石　磊 ( 1968- ) ,女 ,吉林省长春市人 ,讲师 ,医学硕士 ,主要从事天然药物的研究。
* 　通讯联系人
虎眼万年青多糖增强非特异性免疫和体液免疫的作用
石　磊1 ,李　娟2 ,刘志强 1 ,刘淑莹 1*
( 1. 中国科学院长春应用化学研究所 ,吉林 长春 130022; 2.吉林大学公共卫生学院 )
[摘　要 ]　目的:研究虎眼万年青多糖对机体非特异性免疫和体液免疫功能的影响。方法:采用小鼠
碳廓清单核巨噬细胞吞噬功能测定法筛选出虎眼万年青多糖中的有效组分 ,即 60%醇浓度的虎眼
万年青中性多糖 ( OCAPS3 ) ;采用溶血素测定方法研究不同剂量 OCAPS3对小鼠抗体形成的影响。
结果: OCAPS3能显著提高巨噬细胞的吞噬功能以及抗体生成的能力。 结论:证明虎眼万年青多糖
能有效地增强小鼠的非特异性免疫和体液免疫功能。
[关键词 ]　虎眼万年青中性多糖 ;巨噬细胞吞噬功能 ;非特异性免疫 ;体液免疫 ;溶血素
[中图分类号 ]　 Q539;　 R392. 11　　 [文献标识码 ]　 A
　　虎眼万年青 ( Ornithogalum caudatum Ait. ) ,
俗名珍珠草 ,为百合科多年生草本植物 [1-2 ]。 从同属
虎眼万年青中分离出的皂甙 O SW-1[3-4 ]对肺癌、乳腺
癌有明显的抗癌活性。 体外抗 P338淋巴细胞白血
病活性结果表明 , OSW-1是常见抗癌药物喜树碱、
阿霉素、紫杉醇抗癌活性的 10～ 100倍 [ 5 ] ,并已由
Deng等人首次合成 [6 ]。为了进一步了解多糖在提高
机体免疫功能方面的作用机理 ,本文作者首先通过
非特异性免疫功能试验 [7 ] ,筛选出具有显著增强小
鼠巨噬细胞吞噬功能的 60%醇浓度的虎眼万年青
中性多糖 ( OCAPS3 )。 参照一种改进的体液免疫功
能测定方法 - 溶血素测定方法 [8 ] ,对 O CAPS3在小
鼠体液免疫方面的作用作进一步的研究。
1　材料与方法
1. 1　动　物　昆明种小鼠 120只 ,体重
18～ 22 g ,雌雄兼用 ,由吉林大学新民校区动物室提
供 ,随机分成 7组、 5组 ,每组 10只。 常规颗粒饲料
喂养 ,自由饮水。
1. 2　吞噬功能试验用药及方法　按蒸馏水对
照组、虎眼万年青中性多糖 ( OCAPS1 )、 40%醇浓度
中 性 多糖 ( O CAPS2 )、 60%醇浓 度 中 性多 糖
( OCAPS3 )、 80%醇浓度中性多糖 ( OCAPS4 )、酸性
多糖 ( OCAPS5 )、人参茎叶皂甙组 ( Rg1 ) ,将小鼠随
机分为 7组 ,每天灌胃给药 1次 ,剂量分别为蒸馏水
对照组 20 ml· kg- 1 ,人参皂甙茎叶组 0. 02 g· kg- 1
( 0. 05%的溶液 , 20 m l· kg- 1 ) ;其它组多糖浓度均
为 2 g· kg- 1 ( 5%的悬浊液 , 20 m l· kg- 1 ) ,连续
10 d。末次给药 1 h后 ,由每只小鼠尾静脉注射已配
好的 16 g· L- 1的胶体碳悬液 0. 1 m l /10 g体重。然
后根据预试验结果 ,在 2 min和 15 min时 ,用吸管
(预先用肝素溶液湿润 )经小鼠眼后静脉丛取血 ,每
次 0. 02 ml,连续 3次 ,将血液置于事先准备好的盛
有 5 ml 0. 1% NaHCO3溶液的试管中 ,摇匀。 在分
光光度计 640 nm波长处分别测定光密度值 A1和
A2。最后将小白鼠颈椎脱臼处死 ,分别称取肝、脾重
量。 按下式计算吞噬指数 (α):
α= logA1-logA2
t2- t1
1 /3× 体重肝重+ 脾重
1. 3　溶血素试验用药及方法　实验设 5组 ,每
组 10只小鼠 ,每天灌胃给药 1次 ,剂量为蒸馏水对
照组 20 ml· kg- 1体重 ,人参茎叶皂甙对照组
0. 02 g· kg- 1 ( 0. 05%的溶液 , 20 ml· kg- 1体重 ) ,
OCAPS3 3个剂量组 2. 0、 1. 0、 0. 5 g· kg- 1体重
( 5%的悬浊液 , 20 m l· kg- 1体重 )。 连续给药 10 d
后 ,第 11天取保存的绵羊红细胞 ,用生理盐水洗涤
3次 ,离心 ,弃上清液 ,洗涤后的红细胞以 3∶ 5(体积
比 )用生理盐水稀释 ,使红细胞浓度为每毫升约
—232—
第 28卷　第 3期
2002年 　
吉　林　大　学　学　报　 (医　学　版 )
Journa l o f Jilin Univ er sity ( Medicine Edition)
　 Vol. 28　 No. 3　
2002
DOI : 10. 13481 /j . 1671 -587x. 2002. 03. 006
20亿个。按每只鼠 0. 2 m l腹腔注射 ,免疫 4 d后 ,将
小鼠处死 ,摘除小鼠眼球 ,将每只小鼠血分别滴至小
试管内 ,室温放置 1 h,将凝固血与管壁剥离 ,使血
清充分渗出 , 1 h后离心 ,上层血清用生理盐水稀释
后取 1 ml,再加入 0. 5 m l绵羊红细胞。置于冰浴中
冷却 ,加入 1 ml补体 (以生理盐水 1∶ 10稀释过的
豚鼠血清 ) ,离心 ,取上清液进行血红蛋白比色测定。
样品空白对照以 1 ml生理盐水代替血清样品 ,绵羊
红细胞及补体加入量与样品反应管相同。 取上述离
心后所得上清液 1 ml及 3 ml都氏试剂 ,振荡均匀 ,
放置 10 min后 ,于 540 nm波长下比色 ,测定样品及
绵羊红细胞半数溶血时的 A值。按下列公式计算每
只小鼠样品的半数溶血值 ( HC50 ):
HC50=
样品的 A值
绵羊红细胞半数溶血时的 A值×稀释倍数
2　结　果　
2. 1　虎眼万年青各多糖组分对巨噬细胞吞噬
功能的作用　实验结果表明 ,与对照组相比 ,
O CAPS1、 OCAPS3和 OCAPS5对巨噬细胞吞噬功
能均显示不同程度的增强作用 ,其中以 O CAPS3效
果最为显著 ,结果见表 1。
Tab. 1 　 Effects o f OCAPS on phagocy tosis o f
mac rophages in mice (x± s, n= 10)
Group
Dose
(wB /g· kg- 1 ) α
Cont rol - 3. 96± 0. 64
Rg1 0. 02 5. 01± 0. 49* *
OCAPS1 2. 0 4. 63± 0. 71*
OCAPS2 2. 0 4. 24± 0. 60
OCAPS3 2. 0 4. 88± 0. 53* *
OCAPS4 2. 0 4. 59± 0. 69
OCAPS5 2. 0 4. 67± 0. 73*
　　* P < 0. 05, * * P < 0. 01　 com pared wi th con t rol
2. 2　 O CAPS3对小鼠抗体形成溶血素的影响
　试验结果表明 ,与对照组相比 ,组分 OCAPS3高、
中剂量组有明显的增强小鼠体液免疫功能的作用 ,
结果见表 2。
3　讨　论
以往实验结果表明 ,虎眼万年青中总生物碱、总
皂甙、总多糖对不同的肿瘤细胞株均显示出一定的
抑制作用 ,推测其可能是通过抗肿瘤免疫功能所致。
本文作者从虎眼万年青中性多糖对机体免疫功能的
影响入手 ,进一步讨论了其抗肿瘤的作用机理。多糖
　　 Tab. 2　 Effec ts o f neut ral po ly sa ccharides OC APS3 on
haemolysin fo rma tion in mice ( x± s,n= 10)
Group Dose(w B /g· kg- 1 ) HC50
Contro l - 244. 10± 35. 38
Rg1 0. 02 779. 78± 136. 77* *
High dose of OC APS3 2. 0 541. 85± 118. 67*
Middle do se of OCAPS3 1. 0 543. 63± 156. 76*
Low dose o f OCAPS3 0. 5 277. 05± 50. 17
　　* P < 0. 05, * * P < 0. 01　 compared wi th cont rol
类化合物具有抗肿瘤的作用 ,其作用的发挥主要依
赖于对免疫功能的调节。 单核巨噬细胞的吞噬能力
是衡量机体非特异性免疫功能的标志之一 ,它承担
着吞噬销毁细胞内寄生菌、真菌和损伤、衰老的自身
细胞的职能 ,巨噬细胞碳廓清指数的多少可以反映
其吞噬功能的强弱 ,与肿瘤免疫相关 ,在免疫反应中
起着重要的作用 [9 ]。针对病原微生物 ,体液免疫起着
抗感染、免疫调理等作用 ,它可能通过产生抗体与对
应的抗原特异性集合产生各种生物学效应。 虎眼万
年青多糖在促进巨噬细胞吞噬功能的非特异性免疫
活性的基础上 ,使巨噬细胞处理和传递抗原的能力
增强 ,提高了抗体的水平。
由此可见虎眼万年青的防癌、抑癌作用机制可
能与其对机体多种免疫细胞的激活有密切关系。
OCAPS3对小鼠 T、 B淋巴细胞转化率和 NK、 LAK
细胞活性的作用及对小鼠脾细胞产生白细胞介素 -2
( IL-2)的影响等多种细胞因子的研究工作正在进行
当中 ,实验结果将进一步阐明虎眼万年青多糖提高
机体抗肿瘤免疫的作用机制 ,为进一步开发利用这
一天然药物资源提供理论依据。
[参考文献 ]
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Immunopotentiating ef fects of polysaccharides of the Ornithogalum
caudatum Ait on non-specif ic and humoral immunity
SHI Lei
1 , LI Juan
2 , LIU Zhi-qiang
1 , LIU Shu-ying
1
( 1. Changchun Inst itute of Applied Chemistry , Chinese Academy of Sciences ,
Changchun 130022, China; 2 School of publ ic heal th , Jil in University )
[Abstract ]　 Objectiv e: To study the immunomoderating ef fects of the polysaccharides f rom Orni thogalum
caudatum Ait ( OCAPS) on the non-speci fic and humo ral immuni ty in mice. M ethods: The effectiv e
component o f OCAPS3 was screened by determing the phagocy tosis of macrophage wi th carbon pa rticle
clea rance test to obtain the effects on non-specific immuni ty , and further study about i t s effect on
haemoly sin fo rming cel l test in mice. Resul ts: The component OCAPS3 could effecient ly enhance the
phagocytosis of macrophage and increase the number of haemo lysin fo rming cells. Conclusion: The
component OCAPS3 was proved to potentia te the function of bo th non-speci fic and humoral immuni ty in
mice.
[Key words ]　 polysaccharides of Orni thoga lum caudatum Ait ( OCAPS) ; phagocy tosis of macrophage;
haemolysin forming cell
贲门失弛缓症的胸腔镜手术治疗 (附 15例报告 )
解放军第 208医院胸心外科　邹瀛波　郑　军　郑晓方　李志宏
1　临床资料　 1998年 9月 - 2001年 11月 ,用胸腔镜手术治疗贲门失弛缓症 15例 ,其中男 6例 ,女 9例 ,年龄 28～
65岁 ,平均 42. 8岁。术前准备同传统的开胸食管疾病手术。手术在全麻、双腔管气管插管、单肺 (健侧肺 )通气情况下进行。采
用右侧卧位 ,术者站在病人的背侧。通常采用 3～ 4个 1. 5～ 2. 0 cm长的切口 ,胸腔镜切口位于肩胛线内侧第 7、 8、 9肋间 ,另外
3个操作切口在第 6肋间的腋前线、腋后线 ,锁骨中线的第 4或 5肋间。 进胸后 ,在肺萎陷的情况下 ,寻找下肺韧带并切断之 ,
充分暴露并切开纵隔胸膜 ,将左下肺拉向肺门区 ,充分暴露食管床。 纤维胃镜经口插入食管腔 ,胃镜顶端向左侧倾斜 ,显露下
段食管。 在膈肌和下肺静脉间纵行分开肌层 ,达食管环形肌时再向上下分离切断环形肌 ,达粘膜下层 ,使食管粘膜充分膨出。
食管肌层切开长度约 6～ 8 cm。胃、食管交界处肌层切开时 ,用 5爪内镜牵拉器向腹侧挤压膈肌 ,充分暴露贲门 ,胃侧肌层切开
长度约 0. 5～ 1. 0 cm。贲门环形肌被切开时 ,胃镜操作者会感觉到食管、胃交界处镜身顺利通过。然后在肌层和粘膜间向两侧
钝性分离食管 ,达到食管周径 1 /3～ 1 /2,确保粘膜膨出。纤维胃镜充气观察粘膜膨胀和有无食管粘膜破裂。
2　结　果　本组病人手术经过基本顺利 ,平均手术时间为 85 min,术后平均住院为 5 d,无严重手术并发症 ,均痊愈出
院。 其中有 1例患者因粘连严重转为开胸手术 ,中转手术率为 6. 7%。
3　讨　论　本组就手术操作技术而言 ,未遇到明显困难 ,无严重并发症发生。 结果表明 ,胸腔镜手术对贲门失弛缓症是
可行的 ,具有病人疼痛轻、恢复快、住院时间短的优点。 食管位于后纵隔 ,位置较深 ,为了胸腔镜显示器清楚辨认食管周围组织
和操作方便 ,采取以下做法:①贲门失弛缓症手术采取左胸入路。②术中采取双腔管气管插管 ,患侧肺充分萎陷。 ③贲门解剖
位置于膈下 ,胸腔镜手术时 ,腋前线切口要低于膈肌顶 ,便于术中将膈肌向腹腔方向挤压 ,充分显露腹段食管和贲门。
胸腔镜手术治疗食管疾病 ,术中操作要预防食管、胃粘膜破裂及血管或胸导管等副损伤。 为了减少并发症发生应做
到: ①食管游离中遇有条索样组织用钛钉夹闭或电凝止血 ,但贲门失弛缓症手术食管粘膜下出血不使用钛钉 ,以防粘膜损伤。
②贲门失弛缓症食管肌层切开和食管平滑肌瘤切除 ,术口经口插入纤维胃镜支撑食管 ,不仅有利操作 ,还能监测粘膜有无损
伤 ;③贲门失弛缓症肌层切开从食管下段开始 ,纵行肌、环行肌分两层切开 ,环行肌切开用 90°内镜电烙剥离钩将肌层挑起后
再电烙切断。
—234— 吉林大学学报 (医学版 )　 2002年　第 28卷　第 3期