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青香茅降压活性部位的筛选



全 文 :收稿日期:2015-06-10; 修订日期:2015-09-15
基金项目:新疆维吾尔自治区科技支疆项目(No. 201491173)
作者简介:王 琦(1990-) ,女(汉族) ,山东莱州人,新疆医科大学硕士研
究生,主要从事中维药研究工作.
* 通讯作者简介:耿 直(1957-) ,男(汉族) ,河北宁晋人,新疆医科大学
研究员,硕士学位,主要从事中医药研究工作.
* 通讯作者简介:兰 卫(1969-) ,男(汉族) ,江苏泰兴人,新疆医科大学
教授,硕士研究生导师,硕士学位,主要从事中医药研究工作.
青香茅降压活性部位的筛选
王 琦1,王 莹2,张刚强1,耿 直1* ,兰 卫1*
(1.新疆医科大学中医学院,新疆 乌鲁木齐 830011;
2.新疆医科大学附属中医医院,新疆 乌鲁木齐 830002 )
摘要:目的 研究香茅的四种萃取物对家兔动脉血压的影响。方法 用 24 只健康家兔随机分为空白对照组、阳性对照组、
石油醚部位组、乙酸乙酯部位组、正丁醇部位组及水部位组。各组家兔经兔耳缘静脉分别给药,实验组给予香茅乙醇提
取液的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取物 ,空白对照组给予 0. 52%吐温 - 80 双蒸水,阳性对照组给予卡托普利,应用
BL - 420F生物机能实验系统记录仪观察各组家兔动脉血压的变化情况。结果 与空白对照组相比,香茅乙酸乙酯萃取物
组平均动脉血压描记曲线有明显降低(P < 0. 05) ,香茅石油醚、正丁醇和水萃取物组与空白对照组相比无显著性差异(P
> 0. 05)。结论 通过降压活性部位筛选实验,发现香茅的乙酸乙酯萃取物可使家兔血压明显下降。
关键词:降压活性筛选; 香茅石油醚萃取物; 香茅乙酸乙酯萃取物; 香茅正丁醇萃取物; 香茅水萃取物
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2015. 12. 031
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2015)12-2897-02
Screening of Active site of the Extracts of Cymbopogon caesius on antihypertensive effect
WANG Qi1,WANG Ying2,ZHANG Gang-qiang1,GENG Zhi1* ,LAN Wei1*
(1. Xinjiang Medical University Institute of TCM,Urumqi,830011,China;2. Subsidiary Chinese Medicine Hospi-
tal of Xinjiang Medical University,Urumqi 830002,China)
Abstract:Objective To research the infucence of four kinds of extracts of Cymbopogon caesius on rabbit artery blood pressure.
Methods With 24 healthy rabbits were randomly divided into blank control group,positive control group,petroleum ether parts
group ,ethyl acetate parts group,n - butyl alcohol parts group and water parts group . Groups were investigated by the rabbit ear
marginal vein respectively,the experimental group give Cymbopogon caesius ethanol extract of petroleum ether,ethyl acetate,n -
butanol and water extract,blank control group to give 0. 52% twain - 80 pairs of steaming water,positive control group given cap-
topril,Application of BL - 420F biological function experiment system recorder observed between groups of rabbit artery blood
pressure changes. Results Compared with the blank control group,Cymbopogon caesius ethyl acetate extract group had significantly
lower mean arterial blood pressure trace curve(P < 0. 05) ,compared with blank control group Cymbopogon caesius petroleum e-
ther,n - butanol and water extract group have no significant difference (P > 0. 05). Conclusion By step - down active site
screening experiment and found that the ethyl acetate extract of Cymbopogon caesius can make rabbits significantly lower blood
pressure.
Key words:Antihypertensive activity screening ; Petroleum ether extract ; Ethyl acetate extract; Water soluble extract
香茅为禾本科植物青香茅 Cymbopogon caesius (Ness)Stapf.
以及其同属数种植物的干燥茎叶[1],又名香茅草、柠檬香茅、柠
檬草、大风茅等,属多年生草本植物。在我国主要分布于广东、云
南等地[2],全株具有特异香气,嚼之有麻舌感。香茅的全草均可
入药,除了具有祛风解表、温中止痛、祛瘀通络、止泻的功效外,还
有除臭、杀菌的功能,主治风寒感冒,全身疼痛,湿痹,腹痛,跌打
损伤,食欲不佳等[3]。香茅还具有良好的镇静、解痉的作用[4],
青香茅性辛、温,具有祛寒、催情醒脑,温经止痛的功效[5]。非洲
民间用于治疗感冒引起的发热和焦虑症;南美洲,如巴西等国,
已经开发出清热解毒的保健茶[6]。古巴民间也把香茅作为一种
药用植物,常用其作为抗高血压、抗炎的治疗[7]。近年来,科研
工作者较多集中在对香茅抗炎、抗氧化、抗肿瘤等药理作用的研
究,而对香茅降血压作用的研究非常少,本实验通过对香茅有效
成分的提取及降压作用的研究,进一步筛选出香茅中降压活性成
分存在的部位,为香茅临床应用和降压药品开发提供科学基础和
理论依据。
1 仪器与材料
1. 1 仪器 压力换能器,BL - 420F生物机能实验系统(成都泰盟
科技有限公司) ,电子天平(梅特勒一托利多仪器有限公司) ,旋
转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)、电热恒温鼓风干燥箱(上海齐
欣科学仪器有限公司) ,DRT - SX 型智能数显恒温电热套(郑州
长城科工贸有限公司)。
1. 2 药品与试剂 香茅(购买于新疆维吾尔药业) ,经新疆医科
大学中医学院中药资源教研室盛萍教授鉴定为禾本科植物香茅
(Cymbopogon caesius)的干燥地上部分;20%乌拉坦溶液等,肝素
钠注射液,石油醚(天津富宇精细化工有限公司) ,乙酸乙酯(天
津永晟精细化工有限公司) ,正丁醇(天津富宇精细化工有限公
司) ,吐温 - 80 为(天津富宇精细化工有限公司)均为化学纯,卡
托普利(山西津华晖星制药有限公司,批准文号:国药准字
H19993357)。
1. 3 动物 健康家兔 24 只,体重 2. 0 ~ 2. 5 kg,批号:SCXK(新)
2011 - 0003 由新疆医科大学实验动物中心提供。
2 方法
2. 1 药材提取及萃取[8] 香茅干燥全草 8. 8kg,粉碎后加入 10
倍量的 95%乙醇回流提取 2 次,每次 1. 5h。香茅提取液抽滤后,
合并滤液用旋转蒸发仪减压回收乙醇,得到香茅醇提物的浓缩
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 12 时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 12 期
液,分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、纯化水萃取至颜色变淡,合
并各部位萃取液,分别回收溶剂,采用鼓风干燥得到香茅石油醚
萃取物 110. 8g、香茅乙酸乙酯萃取物 88. 6g、香茅正丁醇萃取物
143. 1g、香茅水萃取物 102. 8g。
2. 2 药物制备 根据文献查阅,香茅最常用生药剂量为每日
15g[9],将不同部位的萃取物分别换算成家兔注射剂量[10]。
取香茅石油醚萃取物 66. 8mg 加到 0. 156ml 和 29. 844ml 双
蒸水,过滤得到 2. 23mg /ml石油醚萃取物溶液,待用;
将香茅乙酸乙酯萃取物 53. 4mg 加到 0. 156ml 和 29. 844ml
双蒸水,过滤得到 1. 78mg /ml乙酸乙酯萃取物溶液,待用;
将香茅正丁醇萃取物 86. 3mg 加到 0. 156ml 和 29. 844ml 双
蒸水,过滤得到 1. 78mg /ml正丁醇萃取物溶液。
取香茅水萃取物 62. 0mg加到 0. 156ml和 29. 844ml双蒸水,
过滤得到 2. 07mg /ml水萃取物溶液[11,12]。
2. 3 家兔动脉血压检测 使用 20%乌拉坦溶液(5mL /kg)经家兔
耳缘静脉给药,待家兔四肢肌紧张力明显减低,角膜反射消失,痛
觉消失后,将麻醉好的家兔背位于兔解剖台上,使头部后仰,四肢
用棉线绳固定在兔解剖台支架上,固定好后,剪去颈前部的兔毛,
用手术刀于正中纵向切开颈部皮肤,长约 5 ~ 6cm,钝性分离皮下
组织(勿伤及颈部静脉,及时止血)分离气管,行气管插管术后,
轻轻用弯头止血钳将右侧颈总动脉分离出来,铺两根浸湿的棉线
备用,在家兔的远心端处用棉线对动脉结扎牢固,在颈总动脉近
心端处轻轻用动脉夹闭,眼科剪在动脉上沿心脏方向剪一“V”字
斜形的小切口,用弯头眼科镊小心提起剪口处,将准备好的动脉
套管(套管内已注满肝素溶液)由切口插入动脉管内,用备用线
将套管尖端固定于动脉管内,并在上方打结固定,并且将余线结
扎于套管的侧管上,防止实验中脱滑,经血压换能器与 BL - 420F
生物信号采集系统连接,观察给药前与给药后家兔血压的变化。
2. 4 动物分组及处理 将家兔 24 只随机分为 6 组:空白对照组、
阳性对照组、石油醚部位组、乙酸乙酯部位组、正丁醇部位组和水
部位组。经家兔耳缘静脉分别给予配置好的香茅石油醚萃取物
溶液;香茅乙酸乙酯萃取物溶液、香茅正丁醇萃取物溶液和香茅
水萃取物溶液;正常对照组给予等量 0. 52%吐温 - 80 双蒸水;阳
性对照组给予卡托普利 0. 295mg /ml的 0. 52%吐温 - 80 双蒸水;
所有家兔在给药前、给药后分别采集数据。
2. 5 实验数据处理 数据均以 珋x ± s 标准差表示,各组间差异的
显著性采用方差分析,用 SPSS17. 0 统计软件进行统计。
3 结果
3. 1 香茅不同溶剂提取物经耳缘静脉注射对家兔舒张的影响
见表 1。
表 1 香茅不同提取液对家兔舒张压的影响(珋x ± s)
组别 例数
剂量
/ml
舒张压 /mmHg
给药前 给药后
空白对照组 4 3 101. 25 ± 13. 15 98. 25 ± 10. 28
阳性对照组 4 3 97 ± 10. 46 69. 25 ± 17. 23
石油醚萃部位组 4 3 92. 25 ± 7. 13 90 ± 7. 07
乙酸乙酯部位组 4 3 91. 25 ± 6. 55 68 ± 17. 41*
正丁醇部部位组 4 3 94 ± 8. 60 91. 25 ± 3. 30
水部位组 4 3 95. 25 ± 12. 09 94. 25 ± 8. 96
与空白对照组相比,* P < 0. 05;1mmHg≈0. 133kPa
3. 2 香茅不同溶剂提取物经耳缘静脉注射对家兔平均动脉压的
影响 见表 2。
表 2 香茅不同提取液对家兔平均动脉压的影响(珋x ± s)
组别 例数
剂量
/ml
平均动脉压 /mmHg
给药前 给药后
空白对照组 4 3 109. 75 ± 6. 08 104. 25 ± 6. 85
阳性对照组 4 3 102 ± 7. 02 89. 75 ± 13. 67
石油醚部位组 4 3 101. 75 ± 5. 74 99. 75 ± 6. 85
乙酸乙酯部位组 4 3 96. 5 ± 5. 07 79. 25 ± 14. 03*
正丁醇部部位组 4 3 99. 25 ± 6. 13 95 ± 3. 56
水部位组 4 3 102 ± 7. 62 100. 5 ± 6. 81
与空白对照组相比,* P < 0. 05;1mmHg≈0. 133kPa
4 讨论
香茅是一种被广泛使用并可作为药食两用的植物资源,在我
国分布非常广,不仅具有治病、保健与美容的功效,很多地区也把
香茅作为一种重要的食材。近几年来,科研人员对香茅抑菌、抗
氧化、抗肿瘤等药理作用研究较多,而对香茅的降压作用几乎未
见报道,因此本课题小组在确定香茅有降压作用的基础上,用香
茅的四种不同提取物进行家兔急性降压实验,筛选出香茅降压活
性部位,通过实验结果与数据分析,与空白对照组相比,香茅的乙
酸乙酯提取物可以使家兔的舒张压、平均动脉压显著降低(P <
0. 05) ,初步判断可能是香茅乙酸乙酯部位中含有的某类化学成
分使血管扩张,从而降低了家兔的舒张压,收缩压较空白对照组
虽然在统计学没有显著差异,但是根据生物机能实验系统记录仪
观察各组家兔动脉血压的变化情况,血压描记曲线有降低,且降
压作用都比较迅速。说明香茅乙酸乙酯提取物中含有较多的降
压成分,但其具体降压活性成分及降压作用机制,有待继续研究。
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