全 文 ：第３３卷 第６期　　　　　 　　　　　 渔　业　科　学　进　展　 Ｖｏｌ．３３，Ｎｏ．６
２　０　１　２年１　２月　　　　　　　　ＰＲＯＧＲＥＳＳ　ＩＮ　ＦＩＳＨＥＲＹ　ＳＣＩＥＮＣＥＳ　 Ｄｅｃ．，２０１２
山东半岛大叶藻的抽样调查与鉴定
刘　坤１，２　刘福利２　王飞久２＊　孙修涛２　汪文俊２
丁昌玲２　梁洲瑞２　李　涛２
（１上海海洋大学水产与生命学院，２０１３０６）
（２农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所，青岛２６６０７１）
摘　要　　２０１１年８～１０月对山东半岛大叶藻进行了调查研究，并对山东半岛大叶藻进行了分类鉴
定。结果显示，山东半岛主要存在３种大叶藻科（Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ）种类，分别是大叶藻属Ｚｏｓｔｅｒａ的大叶
藻Ｚｏｓｔｅｒａ　ｍａｒｉｎａ　Ｌ．、矮大叶藻Ｚｏｓｔｅｒａ　ｊａｐｏｎｉｃａ　Ａｓｃｈｅｒｓｏｎ　＆Ｇｒａｅｂｎｅｒ以及虾形藻属Ｐｈｙｌｌｏｓｐａ－
ｄｉｘ的红须虾形藻Ｐｈｙｌｌｏｓｐａｄｉｘ　ｉｗａｔｅｎｓｉｓ　Ｍａｋｉｎｏ。其中，大叶藻分布广泛，莱州湾、俚岛、小石岛、
楮岛、汇泉湾等地均发现有大叶藻存在，莱州湾地区大叶藻呈斑状分布，汇泉湾呈零星分布，俚岛、小
石岛、楮岛地区呈片状分布；矮大叶藻分布较少，莱州湾地区呈斑状分布，广饶地区零星分布；红须虾
形藻仅发现于青岛石老人海水浴场，呈斑状分布。调查还发现，山东半岛近海沿岸大叶藻海草场都存
在不同程度的退化和破坏，除俚岛、小石岛、楮岛的大叶藻呈片状分布以外，其他地区的大叶藻均呈斑
状分布或者零星分布。日照东港地区的海草场更是破坏严重，且本次调查范围内未发现大叶藻存在。
关键词　　大叶藻　　海草　　ＩＴＳ　　分布调查　　种类鉴定
中图分类号　Ｑ９４９；Ｓ９１７　　　文献识别码　Ａ　　　文章编号　１０００－７０７５（２０１２）０６－００９９－０７
国家公益性行业（农业）科研专项（２０１００３０６８）资助
＊通讯作者。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｆｊ＠ｙｓｆｒｉ．ａｃ．ｃｎ
收稿日期：２０１２－０３－２８；接受日期：２０１２－０４－２５
作者简介：刘 　坤（１９８７－），男，硕士研究生，主要从事海藻生物学研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｉｙａｒｄ＠１２６．ｃｏｍ，Ｔｅｌ：１８２５３２７６１０１
Ｓｕｒｖｅｙ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ　ａｌｏｎｇ　Ｓｈａｎｄｏｎｇ　Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ　ｃｏａｓｔ
ＬＩＵ　Ｋｕｎ１，２　ＬＩＵ　Ｆｕ－ｌｉ　２　ＷＡＮＧ　Ｆｅｉ－ｊｉｕ２＊　ＳＵＮ　Ｘｉｕ－ｔａｏ２　ＷＡＮＧ　Ｗｅｎ－ｊｕｎ２
ＤＩＮＧ　Ｃｈａｎｇ－ｌｉｎｇ２　ＬＩＡＮＧ　Ｚｈｏｕ－ｒｕｉ　２　ＬＩ　Ｔａｏ２
（１　Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｑｕａｔｉｃ　ａｎｄ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｏｃｅａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１３０６）
（２　Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｍａｒｉｎｅ　Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，
Ｙｅｌｏｗ　Ｓｅａ　Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｆｉｓｈｅｒｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｑｉｎｇｄａｏ　２６６０７１）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ　　Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ａｎｄ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ　ａｌｏｎｇ
ｔｈｅ　ｃｏａｓｔ　ｏｆ　Ｓｈａｎｄｏｎｇ　Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ，ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ　ｓｕｒｖｅｙ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｄｕｒｉｎｇ　Ａｕｇｕｓｔ～Ｏｃｔｏｂｅｒ，
２０１１．Ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ＩＴＳ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｔｏ　ｉｄｅｎｔｉｆｙ　ｔｈｅ　Ｚｏｓ－
ｔｅｒａｃｅａｅ　ｓａｍｐｌｅｓ．Ｔｈｒｅｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｗｅｒｅ　ｆｏｕｎｄ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｓｕｒｖｅｙ，ｎａｍｅｌｙ，Ｚｏｓｔｅｒａ　ｍａｒｉｎａ　Ｌ，Ｚｏｓ－
ｔｅｒａ　ｊａｐｏｎｉｃａ　Ａｓｃｈｅｒｓｏｎ　＆ Ｇｒａｅｂｎｅｒ，ａｎｄ　Ｐｈｙｌｌｏｓｐａｄｉｘ　ｉｗａｔｅｎｓｉｓ　Ｍａｋｉｎｏ．Ａｍｏｎｇ　ｔｈｅｍ，Ｚ．
ｍａｒｉｎａｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ　ｍｏｓｔ　ｗｉｄｅｌｙ　ｂｕｔ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｔｔｅｒｎｓ　ｉｎ　ｅａｃｈ　ｐｌａｃｅ：ｍｏｔｔｌｅｄ　ｉｎ　Ｌａｉｚｈｏｕ　Ｂａｙ，
ｓｐｏｒａｄｉｃ　ｉｎ　Ｈｕｉｑｕａｎ　Ｂａｙ，ａｎｄ　ｉｎ　ｌａｒｇｅ　ｓｔｒｅｔｃｈｅｓ　ａｌｏｎｇ　ｔｈｅ　ｃｏａｓｔ　ｏｆ　Ｌｉｄａｏ，Ｘｉａｏｓｈｉｄａｏ　ａｎｄ　Ｃｈｕｄ－
ａｏ．Ｚ．ｊａｐｏｎｉｃａ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　ｌｅｓｓ　ｂｉｍａｓｓ，ｓｈｏｗｉｎｇ　ａ　ｍｏｔｔｌｅｄ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｌａｉｚｈｏｕ　Ｂａｙａｎｄ　ａ
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　渔　业　科　学　进　展 第３３卷　
ｓｐｏｒａｄｉｃ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｇｕａｎｇｒａｏ　Ｃｏｕｎｔｙ．Ｐ．ｉｗａｔｅｎｓｉｓ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｏｎｌｙ　ｉｎ　Ｓｈｉｌａｏｒｅｎ　Ｂｅａｃｈ　ｉｎ
Ｑｉｎｇｄａｏ　ｗｉｔｈ　ａ　ｐａｔｃｈｙ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｓｕｒｖｅｙ　ａｌｓｏ　ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｔｈａｔ　ｓｅａｇｒａｓｓ　ｂｅｄｓ　ｏｆ　Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ
ａｌｏｎｇ　Ｓｈａｎｄｏｎｇ　Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ　ｃｏａｓｔ　ｈａｖｅ　ｂｅｅｎ　ｄａｍａｇｅｄ　ａｎｄ　ｈａｖｅ　ｄｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ　ｉｎ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｄｅｇｒｅｅｓ．Ａ－
ｌｏｎｇ　ｔｈｅ　ｃｏａｓｔ　ｏｆ　Ｌｉｄａｏ，Ｘｉａｏｓｈｉｄａｏ，ａｎｄ　Ｃｈｕｄａｏ，Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ　ｉｎ　ｌａｒｇｅ　ｓｔｒｅｔｃｈｅｓ，
ｗｈｉｌｅ　ｉｎ　ｏｔｈｅｒ　ｓｕｒｖｅｙｅｄ　ａｒｅａｓ　ｉｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ａ　ｐａｔｃｈｙ　ｏｒ　ｓｐｏｒａｄｉｃ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ．Ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｙ，ｓｅａｇｒａｓｓ
ｂｅｄｓ　ｏｆ　Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ　ａｌｏｎｇ　Ｒｉｚｈａｏ　ｃｏａｓｔ　ｓｅｅｍｅｄ　ｔｏ　ｂｅ　ｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙ　ｄｅｓｔｒｏｙｅｄ，ａｎｄ　ｎｏｎｅ　Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ
ｓｐｅｃｉｅｓ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ　　Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ　　Ｓｅａｇｒａｓｓ　　ＩＴＳ　　Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｓｕｒｖｅｙ
Ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
海草Ｓｅａｇｒａｓｓ是生活于热带和温带海域浅水中的单子叶植物，能完全生长于沉水环境，具有完整的根、
茎、叶系统（中国湿地编辑委员会　１９９９）。海草在浅海地区以形成广阔草场的方式对世界范围内近海海洋生
态系统做出贡献，其中大叶藻就是典型的代表（叶春江等　２００２）。中国大叶藻科Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ包含大叶藻属
Ｚｏｓｔｅｒａ和虾形藻属Ｐｈｙｌｌｏｓｐａｄｉｘ两个属，大叶藻属包括大叶藻Ｚｏｓｔｅｒａ　ｍａｒｉｎａ　Ｌ．、丛生大叶藻Ｚｏｓｔｅｒａ　ｃａｅ－
ｓｐｉｔｏｓａ　Ｍｉｋｉ、具茎大叶藻Ｚｏｓｔｅｒａ　ｃａｕｌｅｓｃｅｎｓ　Ｍｉｋｉ、宽叶大叶藻Ｚｏｓｔｅｒａ　ａｓｉａｔｉｃａ　Ｍｉｋｉ、矮大叶藻Ｚｏｓｔｅｒａ　ｊａｐｏｎ－
ｉｃａ　Ａｓｃｈｅｒｓｏｎ　＆Ｇｒａｅｂｎｅｒ；虾形藻属Ｐｈｙｌｌｏｓｐａｄｉｘ包括黑须虾形藻Ｐｈｙｌｌｏｓｐａｄｉｘ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ　Ｍａｋｉｎｏ和红须
虾形藻Ｐｈｙｌｌｏｓｐａｄｉｘ　ｉｗａｔｅｎｓｉｓ　Ｍａｋｉｎｏ。在我国主要分布于辽宁、河北、山东，厦门、福建、广东、广西、台湾
（范航清等　２００９）。目前，对大叶藻科的研究主要集中在形态解剖学、生态学与生理学等领域（叶春江等　
２００２）。而对大叶藻资源的调查及其分类与分布的研究较少。近年来，山东半岛大叶藻资源的调查研究也鲜见
报道。最早在２０世纪８０年代初，杨宗岱等（１９８１）对山东沿海海草的分布、生产力及其结构与功能进行了初步
探讨；２００８年，郭　栋等（２０１０）对山东近海沿岸大叶藻种类进行了初步调查，并发现４种大叶藻种类。之后几
年对山东半岛海草资源的调查研究未见报道。近几十年来，由于自然环境的变迁和人为因素的影响，世界范围
内大叶藻的资源都处于不断衰退之中，对大叶藻地理分布与分类的调查研究工作就有其必要性和紧迫性。为
进一步了解当前山东半岛海域大叶藻的种类与分布情况，本研究分别选取山东半岛沿岸海域８个地点对大叶
藻的生物量和分布情况做了调查研究，并在形态特征鉴定的基础上，基于ＩＴＳ序列对采集的大叶藻样品进行
了分类鉴定和序列特征分析，以期为进一步开展大叶藻资源调查研究、海草场修复提供参考依据。
图１　大叶藻调查地理位置
Ｆｉｇ．１　Ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌ　ｌｏｃａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ　ｓｕｒｖｅｙ
１　材料与方法
１．１　大叶藻的调查与采集
本研究于２０１１年８～１０月间，选取山东半岛近
海沿岸有代表性的８个地点对大叶藻进行调查并采
样（图１）。采样时植株间至少间隔２ｍ，每个群落采
集２２株植株。有些采样地点大叶藻衰退严重，适当
减少了采集植株数。日照东港地区大叶藻衰退严
重，调查未发现大叶藻群落。采集好的样品用海水
初步清洗，装入封口袋，做好标记带回实验室。
１．２　大叶藻种类形态特征鉴定
对采集的样品进行整理、拍照并制作蜡叶标本。将所有样本按照形态特征分组，然后参照《中国植物志》、
《中国海草植物》以及相关文献，对每组样品进行形态特征鉴定。鉴定结果分组编号。
００１
　第６期 　　刘　坤等：山东半岛大叶藻的抽样调查与鉴定
１．３　大叶藻种类分子鉴定
１．３．１　基因组ＤＮＡ提取
根据形态鉴定的结果，每个种类随机选取８个样品，提取ＤＮＡ。ＤＮＡ提取的试剂盒选用ＴＩＡＮＧＥＮ植
物基因组ＤＮＡ提取试剂盒（ＴＩＡＮＧＥＮ，北京）。
１．３．２　ＰＣＲ扩增
引物设计参考相关文献（李　渊等　２０１１），由上海Ｓａｎｇｏｎ公司合成。扩增在Ｌｉｆｅ　Ｅｘｐｒｅｓｓ　ＴＣ－９６／Ｇ／Ｈ
（ｂ）ＰＣＲ仪上进行。反应体系：１０×Ｂｕｆｆｅｒ　５μｌ，ｄＮＴＰ　４μｌ，ｄｄＨ２Ｏ　３３．２５μｌ，Ｔａｑ酶０．２５μｌ，ＤＮＡ模版１μｌ，
正反向引物各１μｌ，总体积５０μｌ。反应条件：９４℃ ４ｍｉｎ，９４℃ ４０ｓ，５６℃ ４０ｓ，７２℃ ３０ｓ，４０个循环，
７２℃１０ｍｉｎ。
１．３．３　ＤＮＡ序列测定
ＰＣＲ扩增产物用１％琼脂糖凝胶电泳检测，在ＵＶＰ凝胶成像系统下成像保存。ＰＣＲ扩增产物以ＰＣＲ引
物为测序引物进行单向测序，由上海Ｓａｎｇｏｎ公司完成。测得序列处理后提交至ＧｅｎＢａｎｋ。
１．３．４　序列数据分析
供试的ＩＴＳ序列在ＧｅｎＢａｎｋ数据库中Ｂｌａｓｔ检测比对，得到与其最相似序列的物种名、登陆编号及相似
率。用 ＭＥＧＡ软件对测得的ＩＴＳ序列和从ＧｅｎＢａｎｋ中通过Ｂｌａｓｔ检索获得的参考序列进行系统发育分析，
并构建进化树，用Ｋｉｍｕｒａ２－ｐａｒａｍｅｔｅｒ模式计算遗传距离，所有对位排列结果中的空位或缺失数据做完全删除
处理，进化距离分析采用近邻法（ＮＪ，Ｎｅｉｇｈｂｏｒ－ｊｏｉｎｉｎｇ）。系统树的每个分支的统计学显著性分析以自展法进
行检验，重复次数为１　０００次。
２　结果与分析
２．１　山东半岛大叶藻种类形态鉴定
根据所有样本的形态特征，将样本分成３组，并分别编号Ｙ、Ｓ、Ｘ，其形态特征分别描述如下：
Ｙ组，根茎匍匐，直径２～４ｍｍ，节间生有１枚先出叶和多数须根。先出叶仅具鞘而无叶片，长２～５ｍｍ，
膜质，半透明，呈闭合的套管状，顶端钝，腹侧稍凹陷，具３脉。营养枝短，具叶３～８枚；叶鞘膜质，管状，长５～
１５ｍｍ，后期呈不规则的撕裂状；叶耳长约１ｍｍ，极尖；鞘内小鳞片２或４，线形，长可达５０ｃｍ以上，宽３～
６ｍｍ，全缘，先端钝圆或稍具突尖；初级叶脉５～７条。
Ｓ组，根茎粗短，匍匐，直径约５ｍｍ，每节具叶１枚，纤根两条。植株基部常为一丛缠结的红棕色毛状纤维
所包围，长可达１０ｃｍ；茎短缩，节间长４～５ｍｍ。叶互生，具鞘；叶鞘长可达２５ｃｍ，叶耳钝尖，叶舌短，新月
形，５脉；叶片线形，长１００～１５０ｃｍ，宽１．２５～４．５ｍｍ，下部全缘，上部边缘具连续的鳍刺状齿，后部分脱落形
成断续的细齿，叶端钝；初级叶脉５条。
Ｘ组，具发达的根状茎，根茎匍匐，直径０．５～１．５ｍｍ，节间长５～３０ｍｍ，节生１枚先出叶和两条纤细根。
先出叶仅具鞘而无叶片，长约２ｃｍ，边缘稍叠压，抱茎，呈半透明的膜质，无叶耳。营养枝２～４枚；叶稍长２～
１０ｃｍ，边缘膜质，叶耳钝圆，长０．３～０．５ｍｍ，鞘内小鳞片２，披针形，长约１ｍｍ，叶舌明显；叶片线形，深绿色，
长５～３５ｃｍ，宽１～２ｍｍ，先端钝或微凹，近基部略窄，略分叉；初级脉３条，平行，中脉与顶端增宽或分叉，侧
脉边缘生，与中脉在叶片顶端连接，脉间附束３～５条，次级脉间隔１～４ｍｍ，与初级脉垂直排列。
根据各组样本的形态特征，并参照《中国植物志》、《中国海草植物》以及相关文献，初步将３组样本（编号
Ｙ、Ｓ、Ｘ）分别鉴定为大叶藻、红须虾形藻、矮叶大叶藻。
２．２　山东半岛大叶藻种类分子鉴定
基于形态特征的分类鉴定不仅受样本生长环境、生长时期等客观因素的影响，而且形态性状的选取和判断
受主观因素的影响也较大（李海波等　２００７）。故此，基于ＩＴＳ序列的鉴定技术，作者对所采集大叶藻样本进
１０１
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　渔　业　科　学　进　展 第３３卷　
一步进行分子鉴定，以期弥补形态鉴定的局限性。分别从３组（编号Ｙ、Ｓ、Ｘ）大叶藻样本中随机选取８株植
株，测定其ＩＴＳ序列并进行比对分析。结果发现，３组大叶藻组内植株间的ＩＴＳ序列相似率高达９９％以上，甚
至１００％，说明组内样本同属大叶藻一个种。将每组ＩＴＳ序列在ＧｅｎＢａｎｋ数据库中进行Ｂｌａｓｔ比对分析，结果
发现Ｙ、Ｓ、Ｘ组样本分别是大叶藻、矮叶大叶藻、红须虾形藻（表１），与基于形态特征的鉴定结果相同。
Ａ．大叶藻植株的形态；Ｂ．矮大叶藻植株的形态；Ｃ．红须虾形藻植株的形态；
Ｄ．大叶藻的地下茎及根；Ｅ．矮大叶藻的地下茎及根；Ｆ．红须虾形藻的地下茎及根
Ａ．Ｅｘｔｅｒｎａｌ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｚ．ｍａｒｉｎａ　Ｌ．；Ｂ．Ｅｘｔｅｒｎａｌ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｚ．ｊａｐｏｎｉｃａ　Ａｓｃｈｅｒｓｏｎ　＆Ｇｒａｅｂｎｅｒ；
Ｃ．Ｅｘｔｅｒｎａｌ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｐ．ｉｗａｔｅｎｓｉｓ　Ｍａｋｉｎｏ；Ｄ．Ｕｎｄｅｒｇｒｏｕｎｄ　ｒｈｉｚｏｍｅｓ　ｏｆ　Ｚ．ｍａｒｉｎａ　Ｌ．；
Ｅ．Ｕｎｄｅｒｇｒｏｕｎｄ　ｒｈｉｚｏｍｅｓ　ｏｆ　Ｚ．ｊａｐｏｎｉｃａ　Ａｓｃｈｅｒｓｏｎ　＆Ｇｒａｅｂｎｅｒ；Ｆ．Ｕｎｄｅｒｇｒｏｕｎｄ　ｒｈｉｚｏｍｅｓ　ｏｆ　Ｐ．ｉｗａｔｅｎｓｉｓ　Ｍａｋｉｎｏ
图２　３种大叶藻科植株的形态、地下根茎
Ｆｉｇ．２　Ｅｘｔｅｒｎａｌ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ｕｎｄｅｒｇｒｏｕｎｄ　ｒｈｉｚｏｍｅｓ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ
表１　与大叶藻ＩＴＳ序列最相似的物种
Ｔａｂｌｅ　１　Ｓｐｅｃｉｅｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ＧｅｎＢａｎｋ　ｄａｔａｂａｓｅ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｔｈｒｅｅ　Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ
编号
Ｎｕｍｂｅｒ
形态鉴定结果
Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔ
ＧｅｎＢａｎｋ最相似物种
Ｍｏｓｔ　ｓｉｍｉｌａｒ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　ＧｅｎＢａｎｋ
登录号
Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　ｎｕｍｂｅｒ
相似率
Ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ（％）
Ｙ 大叶藻 Ｚ．ｍａｒｉｎａ　Ｌ． Ｚ．ｍａｒｉｎａ　Ｌ． ＨＱ４４５９４１　 ９９
Ｓ 红须虾形藻 Ｐ．ｉｗａｔｅｎｓｉｓ　Ｍａｋｉｎｏ　 Ｐ．ｉｗａｔｅｎｓｉｓ　Ｍａｋｉｎｏ　 ＨＱ６６０５９６　 ９９
Ｘ 矮大叶藻 Ｚ．ｊａｐｏｎｉｃａ　Ａｓｃｈｅｒｓｏｎ　＆Ｇｒａｅｂｎｅｒ　 Ｚ．ｊａｐｏｎｉｃａ　Ａｓｃｈｅｒｓｏｎ　＆Ｇｒａｅｂｎｅｒ　 ＡＹ０７７９９１　 ９９
另外，对３组大叶藻的ＩＴＳ序列连同从ＧｅｎＢａｎｋ下载的３个最近缘物种的ＩＴＳ序列，共６个序列一起做
系统发育树，结果发现，Ｙ、Ｓ、Ｘ　３组大叶藻几乎与各自从ＧｅｎＢａｎｋ检索比对得到的最相似物种以１００％ｂｏｏｔ－
ｓｔｒａｐ值聚在一起，结合表２显示的相似率，提示这３组大叶藻应该各自与其最相近的物种为同一种大叶藻。
２０１
　第６期 　　刘　坤等：山东半岛大叶藻的抽样调查与鉴定
注：标星号的样本序列为作者所测，其余样品序列来自ＧｅｎＢａｎｋ
Ｎｏｔｅ：Ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｍａｒｋｅｄ　ｗｉｔｈ　ａｓｔｅｒｉｓｋｓ　ｗｅｒｅ　ｅｘａｍｉｎｅｄ　ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ，ａｎｄ　ｏｔｈｅｒｓ　ａｒｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　ＧｅｎＢａｎｋ
图３　基于大叶藻ＩＴＳ序列构建的ＮＪ系统发育树
Ｆｉｇ．３　Ｎｅｉｇｈｂｏｒ－ｊｏｉｎｉｎｇ　ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｔｒｅｅ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｒＤＮＡ　ＩＴＳ　ｒｅｇｉｏｎ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ
２．３　山东半岛各地大叶藻种类、生物量及生境特征
鉴于形态学和ＩＴＳ序列的鉴定结果，在山东半岛共发现３种大叶藻科海草，分别是大叶藻属的大叶藻和
矮大叶藻，以及虾形藻属的红须虾形藻（表２）。其中，大叶藻分布广泛，莱州湾、俚岛、小石岛、楮岛、汇泉湾等
地均发现有大叶藻存在，莱州湾地区大叶藻呈斑状分布，汇泉湾呈零星分布，俚岛、小石岛、楮岛地区呈片状分
布；矮大叶藻分布较少，莱州湾地区呈斑状分布，广饶地区零星分布；红须虾形藻仅在青岛石老人海水浴场有发
现，呈斑状分布。调查还发现山东半岛近海沿岸大叶藻海草场都存在不同程度的退化和破坏，除俚岛、小石岛、
楮岛的大叶藻呈片状分布以外，其他地区的大叶藻均呈斑状分布或者零星分布。日照地区的海草场更是完全
破坏，本次调查未发现有大叶藻存在。调查还发现，大叶藻与矮大叶藻偏好泥与泥沙底质，而红须虾形藻偏好
砂砾与砾石底质（图４），其地下根茎生长形态差异是适应不同底质的结果。因此，对大叶藻海草床进行修复
时，评估修复海域的底质类型并选择相应修复物种，能够增加移植的成活率。
表２　山东半岛采样地点大叶藻种类分布情况
Ｔａｂｌｅ　２　Ｓｐｅｃｉｅｓ　ａｎｄ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ　ａｌｏｎｇ　ｔｈｅ　ｃｏａｓｔ　ｏｆ　Ｓｈａｎｄｏｎｇ　Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ
调查地点Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ　ｓｉｔｅｓ 大叶藻分布种类Ｓｐｅｃｉｅｓ 分布特点Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ
东营市广饶县
Ｇｕａｎｇｒａｏ　Ｃｏｕｎｔｙ，Ｄｏｎｇｙｉｎｇ　Ｃｉｔｙ
矮大叶藻
Ｚ．ｊａｐｏｎｉｃａ　Ａｓｃｈｅｒｓｏｎ　＆Ｇｒａｅｂｎｅｒ
零星分布Ｓｐｏｒａｄｉｃ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ
莱州湾Ｌａｉｚｈｏｕ　Ｂａｙ
大叶藻Ｚ．ｍａｒｉｎａ
矮大叶藻Ｚ．ｊａｐｏｎｉｃａ　Ａｓｃｈｅｒｓｏｎ　＆Ｇｒａｅｂｎｅｒ
斑状分布，两种海草间生
Ｓｐｏｔｔｅｄ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ，ｔｗｏ　ｓｐｅｃｉｅｓ
俚岛Ｌｉｄａｏ 大叶藻Ｚ．ｍａｒｉｎａ　Ｌ． 片状分布Ｐａｔｃｈｙ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ
小石岛Ｘｉａｓｈｉｄａｏ 大叶藻Ｚ．ｍａｒｉｎａ　Ｌ． 片状分布Ｐａｔｃｈｙ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ
楮岛Ｃｈｕｄａｏ 大叶藻Ｚ．ｍａｒｉｎａ　Ｌ． 片状分布Ｐａｔｃｈｙ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ
汇泉湾 Ｈｕｉｑｕａｎ　Ｂａｙ　ｉｎ　Ｑｉｎｇｄａｏ 大叶藻Ｚ．ｍａｒｉｎａ　Ｌ． 零星分布Ｓｐｏｒａｄｉｃ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ
青岛石老人海水浴场
Ｓｈｉｌａｏｒｅｎ　Ｂｅａｃｈ　ｉｎ　Ｑｉｎｇｄａｏ
红须虾形藻Ｐ．ｉｗａｔｅｎｓｉｓ　Ｍａｋｉｎｏ 斑状分布Ｓｐｏｔｔｅｄ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ
３０１
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　渔　业　科　学　进　展 第３３卷　
图４　３种大叶藻的生境
Ｆｉｇ．４　Ｈａｂｉｔａｔ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ
３　讨论
大叶藻是北半球沿海分布最广泛的一类海草，通常在沿海或岛屿周围较浅的水域中形成广大的群落（ｄｅｎ
Ｈａｒｔｏｇ　１９７０），是近海生态系统中重要的组成部分。大叶藻的存在不仅为其他生物提供了栖息场所和食物
来源（Ｐｈｉｌｉｐｓ　１９８４；Ｔｈａｙｅｒ　ｅｔ　ａｌ．　１９８４），还有利于海底基质的稳定和缓冲潮流对海底沉积物的扰动（Ｆｏｎ－
ｓｅｃａ　ｅｔ　ａｌ．　１９８５）。而且大叶藻对环境中的重金属离子的循环也有一定的作用。在我国大叶藻的分布十分广
泛，山东、河北、辽宁沿海均可以见到。据１９８２年调查结果，仅莱州湾芙蓉岛附近就有大约１　３３４ｈｍ２的大叶藻
种群分布（中国海湾志编写委员会　１９９１），２００２年叶春江等（２００２）前去调查取样时却很少。据报道，山东省
历史上分布有５种海草，２００８年郭　栋等（２０１０）的调查只发现４种海草。本次调查只发现３种。十几年前，
青岛沿岸大叶藻多见于水下１～２ｍ，现在只在水下４～５ｍ才能发现（叶春江等　２００２），说明我国大叶藻群体
的种类和生物量都处于衰退之中。
导致大叶藻自然资源衰退的原因目前尚不完全清楚。研究表明，人为因素影响和自然变迁可能是主要原
因（王亚民等　２０１０）。本次调查中，日照东港地区大叶藻海草床几乎完全退化，究其原因主要是近几年日照近
海沿岸大规模地进行围海造田开挖养殖池，将原本丰富的大叶藻资源破坏殆尽。东营广饶县也同样存在近海
沿岸开发过度的情况，莱州湾地区斑状分布的大叶藻与矮大叶藻也面临着正在开挖的海参池的威胁；青岛汇泉
湾地区大叶藻零星分布，主要由于近岸入海的污染物大量增加，阻碍了海草正常的光合作用，造成海草床无法
正常延续；俚岛、小石岛、楮岛地区大叶藻连片分布，生物量较大，但是渔民在围网捕鱼、打桩等生产活动中会践
踏海草，影响其生长；另外，浅海海域生物多样性的破坏、气候变化和外来物种都对海草床的生长产生了影响
（王亚民等　２０１０）。大叶藻资源保护已经是迫在眉睫，针对当前大叶藻资源的实际状况以及造成大叶藻资源
衰退的自然和人为因素，作者建议：其一，可考虑在一些重要海草分布区划定海草床生态系统自然保护区，严格
控制人类活动对海草床的影响，从而使海草自然地恢复到受损之前的状态；其二，可在适宜的海底播种大叶藻
或移植采自健康大叶藻群体的植株，从而达到恢复海草场的目的。
总之，本研究对山东半岛大叶藻群体进行了抽样调查，并结合形态特征和分子特征对大叶藻样本进行了鉴
定和分类，初步摸清了山东半岛沿岸大叶藻的种类、分布、生物量以及生境特征。发现山东半岛大叶藻草场正
处于衰退的不利状况中。结合实际调查资料，初步分析了大叶藻海草场退化的原因，并提出了相应的建议和对
策，可为下一步大叶藻资源保护、海草场建设和近海生态环境修复提供参考。
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２０１２年１２月２０日
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