全 文 ：第 32 卷第 6 期
2013 年 12 月
中 国 野 生 植 物 资 源
Chinese Wild Plant Ｒesources
Vol． 32 No． 6
Dec． 2013
收稿日期:2013 － 05 － 07
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81360684);广西自然科学基金资助课题 (2011GXNSFA018046) ;广西中医药科技专
项资助课题(GZKZ 10 － 128);广西教育厅课题(201106LX425) ;广西中医药管理局课题(gzzc1047) ;广西医学科学
实验中心开放基金专项资助项目(KFJJ2011 － 04)。
作者简介:李涂蓝(1991 －)，女，药学专业本科在读。研究方向:天然产物化学、药物化学。E-mail:litulan925@ 163． com
* 通讯作者:黄锁义(1964 －)，男，教授，硕士研究生导师。研究方向:天然产物化学、药物化学、食品卫生、中草药与植物化学。
E-mail:huangsuoyi@ 163． com
doi:10． 3969 / j． issn． 1006 － 9690． 2013． 06． 006
薏苡茎总碱抗氧化性研究
李涂蓝，林明霞，黄锁义* ，李 容
(右江民族医学院 药学系，广西 百色 533000)
摘 要 目的:研究薏苡茎总碱的抗氧化性。方法:用超声辅助法( 以 75%乙醇作为溶剂) 和减压蒸发辅助法( 利
用旋转蒸发仪) 提取薏苡茎总碱; 用普鲁士法测定其对 Fe3 +的还原能力; 用紫外分光光度法测定其清除 DPPH自由
基的能力、清除超氧自由基的能力、用丁基羟基茴香醚( butylated hydroxylanisole，BHA) 作对照测定其对 Fe2 +的螯
合能力。结果:薏苡茎总碱有较强的还原 Fe3 +的能力、清除 DPPH 自由基的能力、清除超氧自由基的能力、螯合金
属离子 Fe2 +的能力。结论:薏苡茎总碱具有较强的抗氧化性。
关键词 薏苡茎;总碱; 抗氧化性
中图分类号:Ｒ282． 71 文献标识码:A 文章编号:1006 － 9690(2013)06 － 0016 － 03
Study on the Antioxidant Effect of Total Alkaloids
from Stem of Job’s Tears
Li Tulan，Lin Mingxia，Huang Suoyi* ，Li Ｒong
(Department of Pharmacy，Youjiang Medical College for Nationalities，Baise 533000，China)
Abstract Objective:Study on the antioxidant effect of total alkaloids from Stem of Job’s Tears． Meth-
ods:Total alkaloids from Stem of Job’s Tears are extracted by the use of ultrasound auxiliary method with
75% ethanol as solvent and decompression evaporation auxiliary method with rotary evaporator． The Abil-
ity of reducing Fe3 + from total alkaloids is tested by Prussia method． The ability of clearing·O －2 ，
DPPH·，of chelating Fe2 + with the comparison to BHA is tested through the ultraviolet spectrophotome-
try． Ｒesults:Total alkaloids from Stem of Job’s Tears can effectively clear·O －2 、DPPH·，reduce Fe
3 +
and chelate Fe2 + ． Conclusion:The total alkaloids from Stem of Job’s Tears have significant antioxidant
effect．
Key words Stem of Job’s Tears;total alkaloids;antioxidant effect
生物碱是自然界中广泛存在的一大类碱性含氮
有机化合物，大多具有较复杂的氮杂环结构，并具有
广泛的生理活性和碱性，是许多药用植物的有效成
分。据有关报道，生物碱具有抗肿瘤、抗菌等在医药
方面的活性，也具有杀虫、抗生育等在农药方面的活
性。一些生物碱作为植物源农药有其独特的功效，
并已取得良好的效果，因此对天然生物碱的研究、开
发、利用引起了人们广泛的关注［1］。
现广泛应用的合成抗氧化剂如丁基羟基甲苯
(butylatedhydroxytoluene)、叔丁对甲氧酚制剂(buty-
lated hydroxyanisole)等由于具有潜在毒性和致癌作
用而受到人们的排斥［2］。我国中草药资源极其丰富，
对中草药的熟悉和利用由来已久，以天然植物抗氧化
剂取代合成抗氧化剂是今后医药工业发展的趋势［3］。
薏苡为禾本科(Poaceae)薏苡属(Coix)植物薏苡
(Coix lachrymal-jobi L．)的干燥全草。薏苡仁(Semen
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第 6 期 李涂蓝，等:薏苡茎总碱抗氧化性研究
Coicis)为禾本科植物薏苡(Coix lachrymal-jobi L．)
的干燥成熟种仁，自 1963 年版的《中国药典》就已
开始收载。薏苡具有利水渗湿、健脾止泻、除痹、排
脓和解毒散结等功能，主治水肿、脚气、小便不利、脾
虚泄泻、湿痹拘挛、肺痈、肠痈、赘疣和癌肿等［4］。
目前，已出现了对薏苡茎多糖的抗氧化性、薏苡仁蛋
白的功能、薏苡叶多糖的抗氧化性等的研究，为薏苡
的开发利用提供了一定的理论依据，为了充分利用
薏苡这种草本植物，为了让生物碱的研究更进一步，
且目前尚未发现有关报道研究薏苡茎总碱的抗氧化
性，本实验从薏苡茎中提取总碱，研究其抗氧化作
用，为开发利用广西壮药薏苡提供理论依据。
1 材料、试剂与设备
1． 1 材料 薏苡茎干品(采自广西百色市西林
县)。
1． 2 试剂 DPPH(Aladdin Industrial Corporation)、
BHA (Aladdin Industrial Corporation)、菲 洛 嗪
(Aladdin Industrial Corporation)、其它所用试剂均为
分析纯。
1． 3 主要仪器 GN2085 电子天平(上海民桥精密
科学仪器有限公司)、SHZ － DIII 循环真空泵(巩义
市予华仪器有限责任公司)、ＲE － 3000 旋转蒸发器
(上海亚荣生化仪器厂)、HHS － 21 － 4 电热式恒温
水浴(江苏金坛宏凯仪器厂)、722N 可见分光光度
计(上海精密科学仪器有限公司)、KQ5200DB 型数
控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
2 试验方法
2． 1 薏苡茎总碱的提取
取粉碎的薏苡茎干品于圆底烧瓶中，用 75%乙
醇超声提取，抽滤，减压浓缩得浸膏。分别取总碱浸
膏，用 75%乙醇溶解并定容于 100 mL容量瓶中，配
成不同浓度的总碱溶液备用。
2． 2 薏苡茎总碱体外抗活性氧自由基作用研究
2． 2． 1 还原 Fe3 +的能力 采用普鲁士兰法测定样
品还原 Fe3 +能力。在系列 10 mL 具塞比色管中依
次加入不同浓度的样品溶液 2． 0 mL，0． 2 mol /L
pH6． 6 磷酸盐缓冲液2． 0 mL和 1%铁氰化钾 2． 0
mL，混匀后置于 50 ℃水浴中反应 20 min，然后加入
10%三氯乙酸 2． 0 mL，混匀，如溶液浑浊离心
(3 000 r /min)10 min，取上清液 2． 0 mL，加入蒸馏
水2． 0 mL和 0． 1%的三氯化铁溶液 0． 5 mL，混匀，以
试剂空白作参比，在 700 nm 处测定吸光度值，吸光
度值增加表明还原力增强。
图 1 不同浓度的薏苡茎总碱溶液还原 Fe3 +
能力的吸光度变化曲线
由图 1可知，随着薏苡茎总碱溶液浓度的增大，
吸光度也随之增大，表明其对 Fe3 +的还原能力增加。
当总碱溶液浓度为 2 mg /mL时，吸光度为0． 942。
2． 2． 2 清除 DPPH 自由基能力试验 DPPH 在有
机溶剂中是一种稳定的自由基，其醇溶液呈紫色，具
有单一电子，能接受一个电子或氢离子，与氧化剂发
生反应，颜色发生变化，由深紫色变为淡黄色，在波
长为 517 nm下具有最大吸收。可用紫外分光光度
法测定。以高浓度逐渐稀释的方式检测不同样品溶
液对自由基的清除率，以自由基清除率为 50%时样
品的浓度(IC50)来衡量样品对自由基的清除能力。
IC50越小，表明样品清除自由基的能力越强。
取新配制的(6 × 10 －4 mol /L)DPPH 溶液 0． 5
mL，分别加入不同浓度的样品溶液，混匀后用无水乙
醇定容至 5 mL，室温下暗光反应 30 min，在 517 nm
处测定其吸光度 A，平行 3 次。按下式计算清除率。
清除率(%)=［(A1 － A2)/A1］× 100%
A1:空白吸光度(t = 0 min);
A2:反应 30 min后吸光度
图 2 不同浓度的薏苡茎总碱溶液与清除率的变化关系
由图 2 可知，随着薏苡茎总碱溶液浓度的增加，
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中 国 野 生 植 物 资 源 第 32 卷
其对 DPPH的清除率增加，当清除率接近 50%时，
薏苡茎总碱溶液的浓度为 1． 2 mg /mL，浓度较小，所
以其清除 DPPH自由基的能力较强。
2． 2． 3 清除超氧自由基作用 取 0． 05 mol /L、
pH8． 2 的 Tris － HCl 缓冲液4． 0 mL于干燥具塞比色
管中，置 25 ℃恒温水浴预热 20 min，分别加入不同
浓度的样品 0． 2 mL，再加入 2． 5 mmol /L 的邻苯三
酚 0． 8 mL，混匀后 25 ℃恒温水浴中准确反应4 min，
立即加入 10 mmol /L HCl 2 滴终止反应，以蒸馏水
做参比，在 320 nm处测定吸光度 A。按下式计算清
除率。
清除率(%)=［1 －(A1 － A2)/A0］× 100%
A0:加邻苯三酚但不加样品时的吸光度;
A1:加样品和邻苯三酚时的吸光度;
A2:加样品但不加邻苯三酚时的吸光度
图 3 不同浓度的薏苡茎总碱溶液与清除率的变化关系
由图 3 可知，随着薏苡茎总碱溶液浓度的增大，
其对超氧自由基的清除率增大，当浓度大于
0． 8 mg /mL且小于 1． 6 mg /mL 时，薏苡茎总碱溶液
对超氧自由基的清除率随着浓度的增大急剧升高，
当浓度为 2． 0 mg /mL 时，清除率达到 67． 2%，说明
其具有较强的清除超氧自由基的能力。
2． 2． 4 金属离子( Fe2 + ) 螯合能力 取相同浓度不
同体积的样品及对照品 BHA 溶液于系列 10 mL 比
色管中，加入 0． 2 mol /L FeSO40． 1 mL溶液中，混匀，
再加入 5 mol /L Ferrozine 0． 2 mL，用 65%乙醇定容
到 5 mL，剧烈振荡混合物后，室温下放置 10 min。
试剂空白作参比，于562 nm处测定吸光度，平行 3
次。吸光度值越低表示金属螯合能力越强。
螯合率(%)=(A0 － A1)÷ A0 × 100%
A0:不加样品时的吸光度值;
A1:加入样品时的吸光度值
图 4 不同体积的薏苡茎总碱溶液与螯合率的变化关系
由图 4 可知，薏苡茎总碱溶液与 BHA都具有螯
合 Fe2 +的能力，且螯合能力随着浓度的增大而增
大。当薏苡茎总碱溶液(2． 0 mg /mL)的体积大于
0． 3 mL时，其对 Fe2 +的螯合能力比 BHA强。
3 结论与展望
由本实验可知，薏苡茎的总碱具有较强的还原
能力和清除自由基的能力。其可以把 Fe3 +还原为
Fe2 +，且还原能力随着浓度的增大而增大;当其对
DPPH清除率接近 50%时，其浓度为 1． 2 mg /mL，浓
度较小，所以其清除 DPPH自由基的能力较强;其对
超氧自由基的清除率随着浓度的增大而增大，当浓
度为 2． 0 mg /mL时，清除率达到 67． 2%，所以此清
除率较强;当薏苡茎总碱溶液(2． 0 mg /mL)的体积
大于 0． 3 mL 时，其对 Fe2 +的螯合能力比 BHA 强，
说明其具有较强的螯合能力。
自由基是引起机体损伤的化学物质，对生物组
织和代谢可造成直接伤害，从而引发心脏病、癌症
等疾病，更能引起生物机体的衰老加快［2］。消除体
内过多的自由基，抗氧化，防衰老已经是当务之急。
从本实验可以看出，薏苡茎总碱具有较强的抗氧化
性，这预示着薏苡茎在抗氧化领域具有开发潜力。
本实验对薏苡茎总碱的抗氧化性做了研究，为广西
壮药薏苡茎的开发利用提供了一定的理论依据。
参考文献:
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