全 文 ：薏苡茎乙酸乙酯提取物抗氧化性研究
郭圣奇ａ，　黄挺章ａ，　李远辉ａ，　马忠丽ａ，　齐梁煜ｂ，　卢善善ｃ，　黄锁义ｄ＊
（右江民族医学院：ａ．临床学院；ｂ．基础学院；ｃ．护理学院；ｄ．药学院；广西 百色５３３０００）
摘　要：以薏苡茎为对象，研究薏苡茎乙酸乙酯提取物抗氧化活性。薏苡茎经乙酸乙酯加热回流后
提取其有效成分，采用紫外分光光度法测定其抑制超氧阴离子（Ｏ－２·）的能力、清除ＤＰＰＨ·自由基
的能力以及用丁基羟基茴香醚（ＢＨＡ）作对照测定其对Ｆｅ２＋的螯合能力。结果表明薏苡茎乙酸乙
酯提取物有较强的清除ＤＰＰＨ·自由基的能力、清除超氧阴离子（Ｏ－２·）的能力、螯合金属离子
Ｆｅ２＋的能力。因此薏苡茎乙酸乙酯提取物具有较强的抗氧化性。
关键词：薏苡茎；乙酸乙酯提取物；抗氧化
中图分类号：Ｒ２８４．２　　　文献标志码：Ａ
文章编号：０３６７－６３５８（２０１５）０４－０２１９－０３
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｅｔｈｙｌ　Ａｃｅｔａｔｅ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｖｅ　ｆｒｏｍ
Ｓｔｅｍ　ｏｆ　Ｃｏｉｘ　Ｌａｃｈｒｙｍａ－ｊｏｂｉ　Ｌ．
ＧＵＯ　Ｓｈｅｎｇ－ｑｉ　ａ，　ＨＵＡＮＧ　Ｔｉｎｇ－ｚｈａｎｇａ，　ＬＩ　Ｙｕａｎ－ｈｕｉ　ａ，　ＭＡ　Ｚｈｏｎｇ－ｌｉ　ａ，
ＱＩ　Ｌｉａｎｇ－ｙｕｂ，　ＬＵ　Ｓｈａｎ－ｓｈａｎｃ，　ＨＵＡＮＧ　Ｓｕｏ－ｙｉ　ｄ＊
（Ｙｏｕｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆｏｒ　Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ：ａ．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ；ｂ．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｂａｓｉｃ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ；
ｃ．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｎｕｒｓｉｎｇ；ｄ．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ；Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｂａｉｓｅ　５３３０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｓｔｅｍ　ｏｆ　ｃｏｉｘ　ｌａｃｈｒｙｍａ－ｊｏｂｉ　Ｌ．ｗａｓ　ｓｔｕｄｉｅｄ．
Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔ　ｏｆ　ｓｔｅｍ　ｏｆ　ｃｏｉｘ　ｌａｃｈｒｙｍａ－ｊｏｂｉ　Ｌ．ｗａｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｂｙ　ｈｅａｔｉｎｇ　ａｎｄ　ｒｅｆｌｕｘｉｎｇ　ｉｎ　ｅｔｈｙｌ
ａｃｅｔａｔｅ　ｓｏｌｖｅｎｔ．Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｍｅａｓｕｒｅ　ｔｈｅ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｏｒ　ｃｌｅａｒｉｎｇ
Ｏ－２·ａｎｄ　ＤＰＰＨ·ａｎｄ　ｆｏｒ　ｃｈｅｌａｔｉｎｇ　Ｆｅ２＋ｉｎ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｗｉｔｈ　ｂｕｔｙｌ　ｈｙｄｒｏｘｙ　ａｎｉｓｏｌｅ（ＢＨＡ）．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ
ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｓｔｅｍ　ｏｆ　ｃｏｉｘ　ｌａｃｈｒｙｍａ－ｊｏｂｉ　Ｌ．ｈａｄ　ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｃｌｅａｒｉｎｇ
Ｏ－２·ａｎｄ　ＤＰＰＨ·ａｎｄ　ｃｈｅｌａｔｉｎｇ　Ｆｅ２＋．Ｓｏ，ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｖｅ　ｆｒｏｍ　ｓｔｅｍ　ｏｆ　ｃｏｉｘ　ｌａｃｈｒｙｍａ－ｊｏｂｉ　Ｌ．
ｈａｖｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｅｆｆｅｃｔ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｓｔｅｍ　ｏｆ　ｃｏｉｘ　ｌａｃｈｒｙｍａ－ｊｏｂｉ　Ｌ．；ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｅｆｆｅｃｔ
收稿日期：２０１４－０２－０３；修回日期：２０１５－０１－１９
基金项目：国家自然科学基金资助项目（８１３６０６８４）；广西自然科学基金资助项目（２０１１ＧＸＮＳＦＡ０１８０４６）；广西中医药科技专项资助课题
（ＧＺＫＺ１０－１２８）；广西教育厅课题（２０１１０６ＬＸ４２５）；广西中医药管理局课题（ｇｚｚｃ１０４７）
作者简介：郭圣奇（１９９２－），男，广西右江人，本科生。主要研究方向：天然产物化学、药物化学、中草药与植物化学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｕｏｓｈ－
ｅｎｇｑｉ１２３５８＠１６３．ｃｏｍ；＊联系人Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｕａｎｇｓｕｏｙｉ＠１６３．ｃｏｍ。
　　自由基，机体氧化反应中产生的有害化合物，具
有强氧化性，可损害机体的组织和细胞，进而引起慢
性疾病及衰老效应。众多权威研究表明，负离子能
够消减自由基，减缓人体衰老，增强人体免疫力［１］。
随着科学技术日新月异的发展，抗氧化的研究也在
快速更新，呈现以不同方法提取并研究其抗氧化性
为主要趋势的发展方向。
薏苡（ｃｏｉｘ　ｌａｃｈｒｙｍａ－ｊｏｂｉ　Ｌ．）为禾本科（ｇｒａ－
ｍｉｎｅａｅ）薏苡属（ｃｏｉｘ　Ｌ．）草本植物，其干燥成熟种
仁称为薏苡仁，为常用中药，味甘、淡，性微寒［２］。能
·９１２·第４期 化　　学　　世　　界 　
健脾益胃，利月除湿，缓和拘挛，清肺热。主治水肿、
脚气、小便不利、脾虚泄泻、湿痹拘挛、肺痈、肠痈、赘
疣和癌肿等，素有“滋补保健之王”的美誉［３］。《本草
纲目》称其“为饮香，益中空膈”。《琐碎录》也记载着
它有“暑月煎饮，暖胃，益气血”的功效［４］。目前，已
出现了对薏苡叶总碱的抗氧化性、薏苡叶多糖的抗
氧化性等的研究，对薏苡茎提取物的抗氧化活性研
究相对较少，薏苡茎乙酸乙酯提取物抗氧化活性的
测定及研究仍是一片空白。为此，本实验对薏苡茎
有效成分用乙酸乙酯进行提取，采用紫外分光光度
法测定抑制Ｏ－２·能力、清除ＤＰＰＨ·自由基能力以
及对Ｆｅ２＋的螯合能力，以研究其抗氧化作用，为开
发利用广西壮药薏苡提供科学理论依据［５］。
１　仪器与试剂
１．１　仪器
回流装置；ＲＥ－３００旋转蒸发仪（上海阿荣生化
仪器厂）；电热恒温旋风干燥箱（ＤＨＧ－９０７０Ａ型）：
上海精密设备有限公司；电子天平（ＧＮ２０８５型，上
海民桥精密科学有限公司）；７５５Ｂ紫外可见分光光
度计（上海精密仪器公司）；台式离心机（ＴＤＬ８０－２Ｂ
型，上海安亭科学仪器厂）；ＨＨ－Ｓ型水浴锅（巩义市
英峪予华仪器厂）。
１．２　试剂
薏苡茎（采自广西百色市西林县，右江民族医学
院民族医学教研室覃道光副教授鉴定为禾本科薏苡
的茎）；乙酸乙酯；无水乙醇；邻苯三酚；盐酸；过氧化
氢；水杨酸；三羟甲基氨基甲烷；ＢＨＡ；ＤＰＰＨ 等均
为ＡＲ。
２　方法
２．１　工艺流程
称取薏苡茎干燥粉末８０ｇ，与８００ｍＬ的乙酸
乙酯浸泡１ｈ，加热回流提取２ｈ，抽滤取滤液，旋转
蒸发除去溶剂，烘干制成浸膏，称量，用乙酸乙酯溶
解制备不同浓度的薏苡茎提取液备用。
２．２　清除ＤＰＰＨ·自由基能力试验
ＤＰＰＨ·是一种稳定的自由基，在５１７ｎｍ处有
强吸收。当有自由基消除剂存在时，ＤＰＰＨ·的单
电子被配对而使颜色变浅，在最大吸收波长处的吸
光度变小，而且这种颜色变浅的程度与配对电子数
成化学计量关系［６］。因此可用紫外分光光度计法定
量测 定。取０．５ ｍＬ 新 配 置 的 ＤＰＰＨ 溶 液 ｃ
（ＤＰＰＨ·）６×１０－４　ｍｏｌ／Ｌ置于１０ｍＬ的具塞比色
管中，然后加入１ｍＬ浓度分别为０．６、１．０、１．４、
１．８、２．２ｍｇ／ｍＬ的样品溶液，无水乙醇定容至５
ｍＬ，室温暗光下反应３０ｍｉｎ，以无水乙醇调零，在
５１７ｎｍ波长处测定其吸光度Ａ。以高浓度逐渐稀
释的方式检测不同浓度样品溶液对自由基的清除
率，以自由基清除率为５０％时样品浓度（ＩＣ５０）来衡
量样品对自由基的清除能力。ＩＣ５０越小，表明样品
清除自由基能力越强［７］。
清除率（％）＝［（Ａ１ －Ａ２）÷Ａ１］×１００％
式中：Ａ１—反应时间ｔ＝０ｍｉｎ时空白吸光度；Ａ２—
反应时间ｔ＝３０ｍｉｎ时吸光度。
２．３　金属离子（Ｆｅ２＋）螯合能力
取浓度相同、体积不同的样品溶液及对照品
ＢＨＡ溶液于一系列１０ｍＬ具塞比色管中，加入０．２
ｍｏｌ／Ｌ　ＦｅＳＯ４０．１ｍＬ溶液，混匀，再加入５ｍｏｌ／Ｌ
菲洛嗪０．２ｍＬ，用无水乙醇定容到５ｍＬ，充分震荡
混合物后，室温下放置１０ｍｉｎ。以无水乙醇调零，
于５６２ｎｍ处测定吸光度，平行３次。吸光度值越低
表示金属螯合能力越强。
螯合率（％）＝ ［（Ａ０ －Ａ１）÷Ａ０］×１００％
式中：Ａ０—不加样品时的吸光度值；Ａ１—加入样品
时的吸光度值。
２．４　清除超氧阴离子能力
采用邻苯三酚法［８］。取０．０５ｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ＝８．２
的Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液４．５ｍＬ于干燥具塞比色管中，
加入２．０ｍＬ无水乙醇，混匀后置于２５℃恒温水浴
预热２０ｍｉｎ，分别加入不同浓度的样品溶液０．２ｍＬ
（２５℃恒温水浴预热），再加入３ｍｍｏｌ／Ｌ的邻苯三
酚（２５℃恒温水浴预热）０．３ｍＬ，混匀后室温下准确
反应４ｍｉｎ，立即加入１．５ｍＬ的１０ｍｍｏｌ／Ｌ　ＨＣｌ溶
液终止反应，以Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液、无水乙醇、ＨＣｌ三
种混合溶液作空白试剂为参比，于３２１ｎｍ处测定
吸光度Ａ。
清除率（％）＝［１－（Ａ１ －Ａ２）÷Ａ０］×１００％
式中：Ａ０—加入邻苯三酚但不加样品液时的吸光
度；Ａ１—加入邻苯三酚和样品液的吸光度；Ａ２—样
品液但不加入邻苯三酚的吸光度。
３　结果与讨论
３．１　薏苡茎乙酸乙酯提取物对 ＤＰＰＨ·的清除
作用
薏苡茎乙酸乙酯提取物对ＤＰＰＨ·清除能力的
测定结果见图１。由图１可知，随着薏苡茎提取液
浓度的增加，对ＤＰＰＨ·的清除作用增大，自由基清
除率为５０％时样品浓度（ＩＣ５０）为１．４ｍｇ／ｍＬ，表明
·０２２· 化　　学　　世　　界　 ２０１５年
薏苡茎乙酸乙酯提取物清除ＤＰＰＨ·自由基的能力
较强。
图１　不同浓度的薏苡茎乙酸乙酯提取液对
ＤＰＰＨ·自由基的清除率变化关系
３．２　薏苡茎乙酸乙酯提取物对金属离子（Ｆｅ２＋）的
螯合能力
薏苡茎乙酸乙酯提取物对金属离子（Ｆｅ２＋）螯
合能力的测定结果见图２。由图２可知，薏苡茎乙
酸乙酯提取物与ＢＨＡ溶液都具有螯合Ｆｅ２＋的能
力，且螯合能力随浓度增大而增大。当薏苡茎提取
溶液的体积大于０．３ｍＬ时，其对Ｆｅ２＋螯合能力相
对于ＢＨＡ显著提高。
图２　相同浓度不同体积的薏苡茎乙酸乙酯
提取 液 和 ＨＢＡ 对 金 属 亚 铁 离 子
（Ｆｅ２＋）螯合能力的变化关系
３．３　薏苡茎乙酸乙酯提取物对超氧阴离子（Ｏ－２·）
的清除作用
薏苡茎乙酸乙酯提取物对超氧阴离子清除能力
的测定结果见图３。从图３可知，随着薏苡茎乙酸
乙酯提取液浓度的增大，其对超氧阴离子（Ｏ－２·）的
清除率增大。在实验研究的浓度范围内，其对超氧
阴离子（Ｏ－２·）的清除率随着浓度的增大而升高，当
浓度为２．０ｍｇ／ｍＬ时，其清除率达到９５．２９％，说明
薏苡茎乙酸乙酯提取物具有较强的清除超氧自由基
（Ｏ－２·）能力。
图３　不同浓度的薏苡茎乙酸乙酯提取液对
超氧自由基的清除率变化关系
４　结论
通过实验发现，薏苡茎乙酸乙酯提取物对清除
ＤＰＰＨ·自由基的能力具有较好的作用。当溶液体
积大于０．３ｍＬ时，对金属离子（Ｆｅ２＋）螯合能力与
ＢＨＡ溶液相比显著提高；清除超氧阴离子（Ｏ－２·）
能力随薏苡茎浓度的增加而增强，当浓度达到２．０
ｍｇ／ｍＬ，清除率达到９５．２９％。因此，薏苡茎乙酸乙
酯提取物具有较强的抗氧化活性。这说明以乙酸乙
酯提取薏苡茎的有效成分在抗氧化领域中具有开发
价值，为广西壮药薏苡的开发利用提供了科学理论
依据。
参考文献：
［１］　王胜告，王雪原．茉莉花根醇提物体外抗氧化作用
［Ｊ］．中国老年学杂志，２０１２，３２（５）：１００１－１００２．
［２］　谢燕飞，覃冬，潘廷啟，等．广西壮药薏苡茎多糖的提
取及抗氧化性研究［Ｊ］．中国处方药，２０１２，１０（２）：４３－
４５，４８．
［３］　余珊，司珂珂，尤萍，等．广西壮药薏苡叶多糖的提取
及体外抗氧化性研究［Ｊ］．食品工业，２０１２，３３（１０）：
５７－５９．
［４］　杨海梅，黄凯敏，苏汶君，等．薏苡叶总碱抗氧化研究
［Ｊ］．微量元素与健康研究，２０１４，３１（１）：２２－２３．
［５］　李涂蓝，林明霞，黄锁义，等．薏苡茎总碱抗氧化性研
究［Ｊ］．中国野生植物资源，２０１３，３２（６）：１６－１８．
［６］　杨红红，符悦冠，肖烽，等．中药茜草根乙酸乙酯萃取
物的分离及抗氧化活性研究［Ｊ］．武汉工程大学学报，
２０１０，３２（１２）：１－５．
［７］　林明霞，李涂蓝，潘冬贵，等．鸡骨草醇提物体外抗氧
化自由基作用研究［Ｊ］．中国现代应用药学，２０１３，３０
（１０）：１０４７－１０５０．
［８］　吴慧平．当归不同炮制品清除自由基和抗脂质过氧化
作用［Ｊ］．中国中药杂志，１９９６，２１（１０）：
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
５９９．
（上接第２１８页）
［９］　孙小玲，曹小燕，陆晶晶，等．超声相转移催化氧化
环己烯制备己二酸 ［Ｊ］．化学世界，２０１３，５４（７）：４０４－
４０６．
·１２２·第４期 化　　学　　世　　界