全 文 ：第 23 卷 第 3 期
1 9 81年 5月
植 物 学 报
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银杉 ( ca ht ay a ar gy ,叩 hy al ) 的胚培养 ,
愈伤组织诱导和愈伤组织上芽的分化*
陈 维 伦 郭 东 红
(中国科学院植物研究所 )
E M B R Y O C U L T U R E
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银杉 ( C 。 人ay 。 。 gy or 砂刃l 。 ) 是稀有珍贵植物 , 有“ 活化石 ” 之称 。 目前仅在我国广西 、
四川 、贵州 、 湖南等地有少量分布 。 银杉无性繁殖较难 , 种子繁殖时成苗率也极低 。 我们
用广西花坪所产的种子作材料 , 初步试验了它的胚培养 , 愈伤组织的诱导和芽的分化 。
种子先用 9 5多 的酒精浸泡 , 沉底的种子再用千分之一的异汞消毒十分钟 , 然后用无
菌水冲洗多次 。 剥去种皮 , 接种在改良的 M on in er 培养基上切(此培养基原用于银杏的幼
胚培养 , 我们采用它的大量元素成分 , 微量元素 , 有机成分和铁二倍于 M s 培养基 〔刀 , 蔗糖
3务 , 琼脂 0 6多 , 培养基 p H 值 5 . 5 ) 。 除去种皮的种子在培养基上萌发缓慢 , 一个月左右
只有少数可以萌动 。 但如果切除部分胚乳 ,使胚芽部分暴露 (注意 ,不要损伤胚芽 ) , 则大
部分种子可以迅速萌发 , 一个月左右子叶可完全展开 , 真叶开始生长 (图 1 ) 。 如果将胚乳
完全剥除 , 在此培养基上大部分离体胚不能正常生长 。 银杉幼苗在自然界生长极其缓慢 ,
在上述培养基中也是如此 , 生长半年仅形成 5一 6 片真叶 , 根长 3一斗厘米 , 侧根极少 (图
)z
。 在培养时 ,光照不宜过强 , 一般以 5 0 一 1 0 0 0 勒克司的散射光为宜。 光照过强时 , 叶
片灼伤 , 幼苗枯死 。
用萌动后 10 天左右 , 长约 1 厘米的幼苗上的子叶和下胚轴作为诱导愈伤的外植体 。
基本培养基同上 , 附加激动素 。 . 5 毫克 /升 , 2 . 4一 D , l一 2 毫克 /升 (或蔡乙酸 5 毫克 /升 ) ,
谷氨酞胺 2 0 毫克 /升 , 酪蛋白水解物 2 0 毫克 /升 。 在黑暗中培养时 ( 25 ℃ ) , 外植体切口
表面愈伤组织缓慢形成 。 二个月后 , 将愈伤组织切下后在上述培养基中继代培养 (图 3 ) 。
如移至光下培养时 , 它迅速转绿 , 生长较快 。 由下胚轴诱导的愈伤组织经一次继代培养
后 ,将它转移到 2 , 4一D 浓度降低到 1 毫克 /升 (其他成分不变 ) 的培养基上 , 并转移至光下
培养时 , 可见到绿色小芽形成 , 每个芽有若千丛生小叶组成 (图 4 、 5) 。 当芽形成后 , 愈伤
组织逐渐褐变 。 目前还无法使芽进一步长大并形成植株 。
本文于 1 9 8。 年 9 月收到。
* 本实验所用银衫种子由本所分类室马成功同志 , 植化室应万芬 、何关福同志提供 , 特此致谢。
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图 1银衫的胚培养 , 一个月后照相 。 左 ,带有完整胚乳的种子 亨右 , 切除部分胚乳的种子形成 的幼苗 贯
图 2 银杉幼苗 , 已生长半年 ; 图 3 下胚轴愈伤组织 ; 图 4 , 5 愈伤组织上芽的形成
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参 考 文 献
[ 1 ] M
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M 二 1 9 7 8 : C u l t u r e o f z y g o t i e e m b r y o s
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I n : F r o n it e r s o f P l a n t T i s s u e uC l t
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2 7 7一2 8 6 .
[ 2 ] M
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. 哑 0 0 9 . , 1 9 6 2 : A r e vi s e d m e d ium f o r r a p i d g r o w ht a n d b i o a s sa y w i比 Ot -
b a e co 桩明如 e u l t ur e s , 尸丙万召`o 乙. 尸 Za 几 t r 肠仍 , 1 5 : 4 7 3一镬 9 7 .