全 文 ：王海英，杨国亭，任广英，等． 精制白桦木醋液与日本花柏和侧柏精油的 GC － MS分析［J］． 江苏农业科学，2012，40(1) :276 － 279．
精制白桦木醋液与日本花柏和侧柏精油的 GC －MS分析
王海英1，杨国亭1，任广英2，王 芳1
(1．东北林业大学林学院，黑龙江哈尔滨 150040;2．黑龙江省林业技术推广站，黑龙江哈尔滨 150090)
摘要:分析了精制白桦木醋液与日本花柏和侧柏精油的提取得率及挥发性活性成分，寻找活性化合物。精制白桦
木醋液、日本花柏和侧柏精油的气相色谱 －质谱分析结果表明，贮藏桶上部和下部精制白桦木醋液提取得率(0． 36、
0． 46 g /L)相近;主要挥发性成分相近，质量分数略有不同，共有化合物主要由酚类、酮类、醛类化合物组成，愈创木酚
是共有质量分数最高的化合物，贮藏桶上部和下部精制白桦木醋液可以合并开发利用。日本花柏和侧柏精油主要由
醇类和萜烯类化合物组成，α －杜松醇和柏木醇是其主要共有化合物，α －杜松醇是日本花柏精油质量分数最高的化
合物，柏木醇是侧柏精油质量分数最高的化合物。愈创木酚、α －杜松醇和柏木醇是具有开发潜力的活性化合物。
关键词:白桦木醋液;日本花柏与侧柏精油;气相色谱 －质谱分析
中图分类号:O657． 63 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2012)01 － 0276 － 03
收稿日期:2011 － 02 － 20
基金项目:中央财政林业科技推广示范项目(编号: ［2009］1 号) ;本
科生创新性实验项目(编号:10102250107)。
作者简介:王海英(1970—) ，女，山东文登人，博士，副教授，主要从事
植物天然产物化学和植物资源开发利用研究。E － mail:haiying-
wang908@ yahoo． com． cn。
木醋液是木材、木材加工剩余物或废弃物(如木屑等)以
及森林抚育采伐获得的枝桠和枝条等通过炭材干馏设备中导
出的蒸气气体混合物经冷凝分离、精制后得到的液体产物。
广义上的木醋液包括竹(木)醋液、玉米芯(木)醋液等。木醋
液用途广泛，可以作为抑菌剂、杀虫剂、植物生长调节剂等环
境友好型农药应用于农业，还可以利用木醋液的抑菌活性精
制木醋液，开发抑菌剂应用于除农业以外的食品、医药、化妆
品以及洗涤品等行业［1 － 6］。植物精油是植物通过次生代谢生
物合成含有挥发性成分的混合物，常通过水蒸气蒸馏、压榨
(柑橘类果皮等)等方法提取，个别原料也可用干馏法提
取［7 － 8］。周文富等采用干馏法提取杉(Cunninghamia lanceo-
lata)根精油，将杉根条分装于小铁笼中，放于干馏釜中，干馏
1 h升温至 105 ℃，馏出水分和木醋液等;1． 5 h升温至 150 ℃
后馏出萜烯，少量的木醋液、醛、酮等;2 h升温至 320 ℃，有杉
根油、树脂酸、沥青等高沸点物馏出;逐步升温至 420 ℃(一
般 380 ℃即没有馏出物) ，此温度下主要是促使杉根中的纤
维素、半纤维素、木素、树脂酸受热分解。馏出物木醋液、醇、
醛、酮等化合物经分离处理后，得到 1 种棕红色黏稠焦味的杉
原油，经分离得到杉根精油［8］。90 ℃就开始有杉根精油馏
出，杉根精油主要馏程组分为 170 ～ 250 ℃的化合物，其研究
结果表明干馏法提取的精油不如水蒸气蒸馏提取的精油香
纯。何文君等进行了不同木醋液生物活性的比较研究，研究
结果表明玉米(Zea mays)芯、松(Pinus)塔、核桃(Juglans re-
gia)枝和核桃壳 4 种木醋液对棉花立枯病原菌(Thanatepho-
rus cucumeris)、柿子炭疽病原菌(Colletotrichum gloeospori-
oides)、苹果腐烂病原菌(Valsa mali)等的抑制效果较好，木醋
液中有抑菌活性的化合物主要为酸类和酚类化合物［9 － 10］。
张珊珊报道核桃壳木醋液中抗氧化活性的主要是酚类物
质［11］。蔚芹等的研究结果表明，不同温度段苹果枝木醋液抑
菌及抗氧化活性分别与其中高含量的有机酸和酚类物质有
关，且初步确定毛白杨(Populus tomentosa)木醋液抑菌活性成
分为乙酸和酚类物质［12 － 13］。毛巧芝等研究杏表明，杏
(Prunus)树枝木醋液抑菌主要化学成分是苯酚及其他酚类化
合物［19］;苦杏(Prunus)壳木醋液抑菌活性和化学成分，结果
初步确定苦杏壳木醋液抑菌活性物质为酚类、乙酸和糠
醛［15］。周岭等报道，棉秆木醋液的酚类物质远远高于杂木木
醋液［16］。雷军锋等报道，梨(Pyrus)木木醋液含有多种食品
用香料成分，主要是有机酸、酚类和酮类等［17］。母军等的研
究结果表明，杉(Cunninghamia lanceolata)木针叶材木醋液和
杨(Populus)木阔叶材木醋液酚类成分的组成含量有一定差
别［18］。徐社阳等报道，木醋液中除了主要成分乙酸外，还含
有含量较少、种类繁多的酮类、酚类、脂类、醛类、醇类等化合
物［19］。张善玉等进行了精制木醋液的安全性评价研究。芳
香植物白桦(Betula platyphylla Suk．)的树叶、树皮等富含精
油，是东北林区的主要阔叶树种，木材黄白色［21 － 23］，丁为
民［24］对其树皮精油进行了研究。芳香植物日本花柏
(Chamaecyparis pisifera Sieb． et Zucc． Endl．) ］和侧柏(Platy-
cladus orientalis Linn． Franco．)均富含精油。日本花柏原产日
本，木材坚韧耐用，边材白色，心材褐黄色，耐腐性强;侧柏为
中国特有树种，木材淡黄褐色，富含树脂，耐腐力强［21，25］。周
文富等证明，在收集过程中木醋液与精油的收集馏分温度是
有交叉的，木醋液成分主要是以乙酸为主，精油成分一般以萜
烯类和醇类等化合物为主［8］。本研究对贮藏期 8 年的白桦木
醋液仿制精油进行精制，并采用气相色谱 －质谱分析与比较
精制白桦木醋液、日本花柏和侧柏精油的挥发性成分，为木醋
液的精制新产品开发利用提供基础数据。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
供试木醋液为 2003 年 1 月从黑龙江省兴隆镇木醋液研
发中心炭窑采集的样本，炭化用材为白桦的采伐剩余物。采
—672— 江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 1 期
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2012.01.015
集的木醋液静置 3 个月后，虹吸上清液，用质量分数为 5%木
炭粉(木炭粉粒径≤0． 5 mm，市售)处理虹吸后的木醋澄清
液，搅拌 10 min，静置 48 h，利用木炭粉吸附木醋液中的焦油
使之产生沉淀，再虹吸上清液，所得澄清液经 4 层纱布过滤 2
次后，即为白桦木醋液，运回东北林业大学实验室。2010 年
12月分别虹吸贮藏桶上部和下部白桦木醋液作为本试验供
试材料。
日本花柏和侧柏于 2004 年 8 月中旬采自湖北省竹山县
九华林场。日本花柏和侧柏均为 20 年年轮，分别按从根到梢
的顺序平均锯为 3 段，依次标记为下部、中部和上部(每段
1． 1 m) ，于 8 月末运到东北林业大学实验室，自然气干 2 个月
后，将中部和上部树干按从根到梢的顺序再次锯成 5 ～ 7 cm
厚的圆盘，贮存于冰柜中备用。取日本花柏中部和上部树干
圆盘(近根端) ，分别将该圆盘的心材以年轮(每 5 年轮)均匀
分为 4 组，本试验材料为年轮低于 5 年、处中部和上部心材的
日本花柏和底部边材侧柏，共计 3 种供试材料，将每一部分材
料用粉碎机粉碎，制备成通过孔径为 2 mm筛子的试样，盛于
磨口塞玻璃瓶并置于冰柜中备用。
1． 2 白桦木醋液的精制及日本花柏和侧柏精油的提取
将贮藏桶上部和下部的 2 种白桦木醋液分别蒸馏 3 h，日
本花柏中、上部心材 2 种样品分别水蒸汽蒸馏提取 3 h，侧柏
样品水蒸汽蒸馏提取 6 h。提取液分别用乙醚萃取，加入适量
无水 Na2SO4 干燥 15 min，过滤后置于 40 ℃水浴下蒸干乙醚
溶剂，分别得到精制白桦木醋液、日本花柏和侧柏精油。贮藏
桶上部和下部精制白桦木醋液提取得率分别为 0． 36、
0． 46 g /L;日本花柏年轮低于 5 年处中部和上部心材精油提
取得率分别为 0． 689%、0． 437%;侧柏精油得率为 0． 044%。
1． 3 气相色谱 －质谱分析
用正己烷(色谱纯)分别将 5 种试样配制成质量浓度为
0． 04 g /mL的正己烷溶液，利用 GC － MS 6890N － 5973insert
气相色谱 －质谱联用仪(美国 Agilent 公司生产)分别对 5 种
试样进行 GC － MS 分析。色谱分析条件:色谱柱为
DB －17MS毛细管柱(30 m × 0． 25 mm × 0． 25 m) ，检测器为
FID检测器。精制白桦木醋液色谱分析条件:初始温度
100 ℃(保持 2 min) ，以 20 ℃ /min 的升温速度升到 160 ℃
(保持2 min) ，再以 50 ℃ /min 的升温速度升到 250 ℃(保持
20 min) ;进样口温度 270 ℃，进样量 1． 0 L，不分流，氦气载
气，流速 1 mL /min。日本花柏和侧柏精油色谱分析条件:初
始温度 80 ℃(保持 4 min) ，以 10 ℃ /min 的升温速度升到
135 ℃(保持 5 min) ，再以 5 ℃ /min 的升温速度升到 235 ℃
(保持 2 min) ;进样口温度 270 ℃，进样量 1． 0 L，分流比
10 ∶ 1，氦气载气，流速 1 mL /min。质谱分析条件:EI离子源，
接口温度 280 ℃，离子源温度 230 ℃，轰击电压 70 eV，相对分
子质量扫描范围 15 ～ 500 u。
2 结果与讨论
5 种试样 GC － MS的总离子流色谱图分别经计算机质谱
库自动检索、解析和部分化合物的人工解析，通过面积归一化
法计算各化合物的质量分数，得到精制白桦木醋液以及日本
花柏和侧柏精油主要挥发性成分和含量(表 1、表 2)。
表 1 精制白桦木醋液主要挥发性成分
化合物名称
精制木醋液化合物质量分数(%)
贮藏桶上部 贮藏桶下部
环戊酮 1． 37
糠醛 2． 20 2． 43
5 －甲基 －糠醛 2． 32 3． 10
2 －环戊烯 －1 －酮 0． 94
2 －甲基 －2 －环戊烯 －1 －酮 1． 88
2，3 －二甲基 －2 －环戊烯 －1 －酮 3． 39 2． 98
3，4 －二甲基 －2 －环戊烯 －1 －酮 1． 26
2，3，4 －三甲基 －2 －环戊烯 －1 －酮 1． 00
4 －乙基 － 2 －羟基 － 2 －环戊烯 － 1 －
酮
1． 31
乙酰基呋喃 1． 63
苯酚 14． 72 17． 77
2 －甲基苯酚 9． 29 9． 29
4 －甲基苯酚 11． 80 9． 64
2，4 －二甲基苯酚 2． 02
愈创木酚 23． 73 33． 61
4 －甲基愈创木酚 9． 51 14． 05
4 －乙基愈创木酚 4． 31 5． 87
3，5 －二甲基吡唑 2． 72
3，5 －二甲基 －2，5 －二氢 －2 －呋喃酮 1． 00
柏木醇 3． 67
从表 1 可以看出，贮藏桶上部精制白桦木醋液主要由酚
类、酮类、醛类和醇类化合物组成，主要挥发性成分为愈创木
酚(23． 73%)、苯酚(14． 72%)、4 － 甲基苯酚(11． 80%)、
4 －甲基愈创木酚(9． 51%)、2 －甲基苯酚(9． 29%)、4 －乙基
愈创木酚(4． 31%)和柏木醇(3． 67%) ;贮藏桶下部精制白桦
木醋液主要由酚类、酮类、醛类化合物组成，主要挥发性成分
为愈创木酚(33． 61%)、苯酚(17． 77%)、4 － 甲基愈创木酚
(14． 05%)、4 －甲基苯酚(9． 64%)、2 －甲基苯酚(9． 29%)和
4 －乙基愈创木酚(5． 87%)。
从表 2 中可以看出，日本花柏中部和上部心材精油以及
侧柏精油主要由醇类和萜烯类化合物组成，日本花柏中部心
材精油主要挥发性组分为 α － 杜松醇(32． 40%)、可巴烯
(12． 11%)、δ －杜松醇(9． 82%)、γ －依兰油烯(9． 36%)、柏
木醇(7． 55%)和 γ －桉叶醇(6． 06%) ;日本花柏上部心材精
油主要挥发性成分为 α － 杜松醇(34． 13%)、δ － 杜松醇
(12． 69%)、可巴烯(9． 34%)、γ －杜松烯(9． 28%)、柏木醇
(8． 71%)和 γ －桉叶醇(3． 83%) ;侧柏精油主要挥发性成分
为柏木醇(30． 65%)、罗汉柏烯(11． 91%)、α － 杜松醇
(9． 19%)、雪松烯(5． 29%)和花侧柏烯(4． 64%)。δ －杜松
醇与 α －杜松醇为同分异构体，经计算机质谱库自动检索、解
析和人工解析以及查阅文献初步确定，δ －杜松醇有待进一步
分离、鉴定［26 － 27］。
3 结论与讨论
贮藏桶上部和下部精制白桦木醋液提取得率(0． 36、
0． 46 g /L)相近，日本花柏年轮低于 5 年处中部和上部心材精
油提取得率(0． 689%和 0． 437%)相近，且高于侧柏精油提取
得率(0． 044%)。
—772—王海英等:精制白桦木醋液与日本花柏和侧柏精油的 GC － MS分析
表 2 日本花柏和侧柏精油主要挥发性成分
化合物名称
精油化合物质量分数(%)
日本花柏
中部心材
日本花柏
上部心材
侧柏
罗汉柏烯 1． 33 11． 91
α －柏木烯 0． 88
γ －杜松烯 9． 28
δ －杜松烯 2． 13 2． 20 2． 00
γ －依兰油烯 9． 36 0． 92
α －紫穗槐烯 0． 92
可巴烯 12． 11 9． 34 2． 63
卡达烯 3． 32 1． 24 0． 66
马兜铃烯 2． 37
愈创木烯 1． 37
愈创木 －3，9 －二烯 0． 79
雪松烯 0． 59 5． 29
花侧柏烯 0． 61 4． 64
茄萜 －1，4 －二烯 2． 56
长叶蒎烯 1． 53
8，9 －脱氢新异长叶烯 1． 02
epi －双环倍半水芹烯 2． 59
榄香醇 1． 49 2． 35
柏木醇 7． 55 8． 71 30． 65
γ －桉叶醇 6． 06 3． 83
α －杜松醇 32． 40 34． 13 9． 19
δ －杜松醇 9． 82 12． 69
绿花倒提壶醇 1． 39
邻苯二甲酸二丁酯 1． 24
β －花侧柏酮 0． 23
贮藏桶上部和下部白桦精制木醋液主要由酚类、酮类、醛
类化合物组成，愈创木酚、苯酚、4 －甲基愈创木酚、4 －甲基苯
酚、2 －甲基苯酚和 4 －乙基愈创木酚是其主要共有化合物，
愈创木酚是质量分数最高的化合物，愈创木酚具有技术开发
潜力［28］。日本花柏中部和上部心材精油以及侧柏精油主要
由醇类和萜烯类化合物组成，α －杜松醇和柏木醇是其主要
共有化合物，α －杜松醇是日本花柏中部和上部心材精油质
量分数最高的化合物，柏木醇是侧柏精油质量分数最高的化
合物。α － 杜松醇具有杀螨活性，且为木材抗白蚁活性成
分［29 － 30］。叶舟等证明柏木醇具有抗蚁、抗螨、抗菌的活
性［31 － 32］。根据周文富等的研究结果可以看出，虽然干馏法可
以提取木醋液和植物精油，二者的主要收集馏程温度是有区
别的，先馏出的木醋液挥发性成分主要以乙酸为主，含有含量
较少的酮类、酚类、醛类、醇类等化合物，接着馏出的精油挥发
性成分主要以萜烯类和醇类化合物为主，还含有酮类、酚类、
醛类等化合物［8］。二者馏程温度有交叉，挥发性成分和含量
都有差异。干馏法提取的精油不如水蒸汽蒸馏提取的精油味
香纯，因此干馏法是木醋液的最佳提取方法，水蒸汽蒸馏是提
取植物精油的较佳传统方法之一。酸类、醇类和酚类等化合
物是具有抑菌潜力的化合物，木醋液和植物精油在抑菌、抗氧
化等产品开发上可以互相借鉴。
日本以阔叶材为原料制出的农业用木醋液品质基准
为［33］:有机酸(以醋酸计)4%以上;密度(20 ℃)为 1． 020 0 ～
1． 040 0 g /cm3;pH值为 2． 3 ～ 3． 5;外观为褐色透明液。在制
造日期和制造业者标明上也有规定。本试验所用白桦木醋液
有 8 年贮藏期。关于木醋液的保质期，需要根据不同用途分
别制定，农业上的应用可以参考日本农业用木醋液品质基准。
木醋液随着贮藏期的增加，化学成分会发生变化，尤其是一部
分挥发性成分会挥发流失。本试验所用白桦木醋液 2003 年
含有乙酸和苯酚等挥发性成分［34］，随着贮藏期的延长，挥发
性成分会有流失，而且由于白桦木醋液气相色谱 －质谱分析
时的前处理是不同的(2003 年采用分配法［35］等前处理，2010
年蒸馏法且借鉴精油的前处理方法) ，也会造成挥发性成分
分析差异。有 8 年贮藏期的白桦木醋液经过精制后，挥发性
成分主要是酚类化合物，酚类化合物具有抑菌、抗氧化活
性［9 － 11］。8 年贮藏期的白桦木醋液有机酸(以醋酸计)含量、
pH值以及精制后愈创木酚的分离、鉴定及其抑菌活性等有待
进一步深入研究。
参考文献:
［1］潘永亮，杜金芳，孙鑫河． 木醋液在农业生产上的应用与发展
［J］． 现代化农业，1999(2) :8 － 9．
［2］史咏竹，杜相革． 木醋液在农业生产上的研究新进展［J］． 中国
农学通报，2003，19(3) :108 － 109，114．
［3］王海英，杨国亭，周 丹． 木醋液研究现状及其综合利用［J］． 东
北林业大学学报，2004，32(5) :55 － 57．
［4］周 岭，蒋恩臣，张 强，等． 木醋液的精制方法及其在农林生产
上的应用［J］． 可再生能源，2007，25(4) :56 － 60．
［5］柏美娟，孔祥峰，印遇龙． 木醋液研究进展［J］． 饲料工业，2008，
29(16) :63 － 64．
［6］平 安，杨国亭，于学军． 木醋液在农业上的应用研究进展［J］．
中国农学通报，2009，25(19) :244 － 247．
［7］Berger R G． Flavours and fragrances:chemistry，bioprocessing and
sustainability［M］． Berlin:Springer Press，2007:43 － 86．
［8］周文富，黄忠兴，徐 芃，等． 杉根精油分离及其化学成分测定
［J］． 精细化工，2007，24(11) :1095 － 1098．
［9］何文君． 不同木醋液生物活性的比较研究［D］． 杨凌:西北农林
科技大学，2010:9 － 38．
［10］翟梅枝，何文君，王 磊，等． 3 种木醋液化学成分与抑菌活性研
究［J］． 西北植物学报，2010，30(6) :1247 － 1252．
［11］张珊珊． 核桃壳木醋液的生物活性与化学成分研究［D］． 杨凌:
西北农林科技大学，2010:6 － 35．
［12］尉 芹，马希汉，朱卫红，等． 不同温度段苹果枝木醋液化学组
成、抑菌及抗氧化活性比较［J］． 林业科学，2009，45(12) :16 －21．
［13］尉 芹，马希汉，徐明霞． 杨树木醋液的化学成分分析及抑菌试
验［J］． 林业科学，2008，44(10) :98 － 102．
［14］毛巧芝，赵 忠，马希汉． 杏树枝木醋液的制取及其抑菌活性和
化学成分分析［J］． 西北农林科技大学学报:自然科学版，2009，
37(10) :91 － 96．
［15］毛巧芝，赵 忠，马希汉，等． 苦杏壳木醋液抑菌活性和化学成
分分析［J］． 农业机械学报，2010，41(2) :164 － 170．
［16］周 岭，万传星，蒋恩臣． 棉秆与杂木木醋液成分比较分析［J］．
华南农业大学学报，2009，30(2) :22 － 25．
［17］雷军锋，朱建平，石起增． 梨木木醋液的有机成分分析［J］． 林
业科学，2008，44(8) :155 － 157．
［18］母 军，于志明，李 黎，等． 木材剩余物的木酢液制备及其成
分分析［J］． 北京林业大学学报，2008，30(2) :129 － 132．
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—872— 江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 1 期
王帅兵，左伟勇，洪伟鸣，等． 猪尿和猪肝中克伦特罗 ELISA方法的建立及初步应用［J］． 江苏农业科学，2012，40(1) :279 － 282．
猪尿和猪肝中克伦特罗 ELISA方法的建立及初步应用
王帅兵1，左伟勇1，2，洪伟鸣1，2，袁宗辉3，朱善元1，2
(1．江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏泰州 225300;2．江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室，江苏泰州 225300;
3．农业部兽药残留基准实验室 /农业部食品安全评价重点开放实验室，湖北武汉 430070)
摘要:以自制的单克隆抗体为基础，优化间接竞争 ELISA 条件，建立标准曲线 y = － 24． 778． 306x + 53． 744，r2 =
0． 993 4，线性范围为 0． 1 ～ 27 μg /L，IC50为 1． 8 μg /L(n = 25) ，最低检测限(LOD)为 0． 1 μg /L。尿液经叔丁基甲醚提
取，回收率为 68． 24% ～ 100． 73%;肝脏用盐酸水解，加 KH2PO4 缓冲液(pH 值 3． 0)提取，过 C18柱净化，回收率为
80． 45% ～ 98． 45%;变异系数均小于 20%，尿液和肝脏中的 LOD 为 0． 3 μg /L、0． 3 μg /kg。用该方法检测喂药动物尿
液和肝脏中的克伦特罗残留，特异性良好，适用于猪尿和肝脏中克伦特罗残留筛选。
关键词:克伦特罗;ELISA;猪尿;猪肝;优化;应用
中图分类号:S859． 84 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2012)
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［19］徐社阳，陈就记，曹德榕． 木醋液的成分分析［J］． 广州化学，
2006，31(3) :28 － 31．
［20］张善玉，金光洙，金在久，等． 精制木醋液的安全性评价［J］． 中
国野生植物资源，2005，24(2) :54 － 55，66．
［21］王羽梅． 中国芳香植物［M］． 北京:科学出版社，2008:113 －
115，349 － 350．
［22］匡可任，李沛琼． 中国植物志［M］． 北京:科学出版社，1979:
112 － 115．
［23］聂绍荃，袁晓颖，杨逢建． 黑龙江植物资源志［M］． 哈尔滨:东
北林业大学出版社，2003:167 － 170．
［24］丁为民． 白桦树皮中生物活性物质的提取与利用技术研究
［D］． 哈尔滨:东北林业大学，2010:44 － 76．
［25］郑万钧，傅立国． 中国植物志［M］． 北京:科学出版社，1978:322
－ 324，339 － 340．
［26］許增謙． 酸桔葉部精油成分之研究［D］． 台湾:中原大學，2006:
61．
［27］Borg － Karlson A K，Norin T． Configurations and conformations of
torreyol(δ － cadinol) ，α － cadinol，T － muurolol and T － cadinol
［J］． Tetrahedron，1981，37(2) :425 － 430．
［28］李 红，蒋晓煌，蒋孟良，等． 采收对竹子中愈创木酚含量影响
的研究［J］． 中国药事，2010，24(5) :441 － 443．
［29］Chang S T，Chen P F，Wang S Y，et al． Antimite activity of essential
oil and their constituents from Taiwania cryptomerioides［J］． Journal
of Medical Entomology，2001，38(3) :455 － 457．
［30］龚玉霞，张文慧，姜自见，等． 台湾杉叶挥发油的成分及其生物
活性［J］． 江苏农业科学，2008(5) :235 － 236．
［31］叶 舟，林文雄，陈 伟，等． 杉木心材精油抑菌活性及其化学
成分研究［J］． 应用生态学报，2005，16(12) :2394 － 2398．
［32］杨 静，陆顺忠，李秋庭，等． 冻析法从杉木油中分离柏木醇的
研究［J］． 广西林业科学，2009，38(1) :39 － 41．
［33］炭ゃきの会． 環境を守ゐ炭と木酢液［M］． 東京:家の光協会，
1991:172 － 173．
［34］王海英． 木醋液对植物生长调节机理研究［D］． 哈尔滨:东北林
业大学，2005:23 － 43．
［35］木材炭化成分多用途利用技術研究組． 木炭と木酢液の新用途
開發研究成果集［M］． 東京:全国林業改良普及協会，1990:297
－ 314．
克伦特罗(clenbuterol，CL)是一种 β －肾上腺素受体激动
剂，对食品动物具有促生长和提高瘦肉率的作用，但易残留在
动物组织中使消费者发生急性中毒。欧盟［1］和美国［2］均禁
止将该药作为饲料添加剂应用于食品动物，我国也于 2002 年
将其列入禁用药名单。然而，由克伦特罗残留引起的人类食
物中毒事件时有发生［3 － 5］，因此灵敏、快速、简便、实用的检测
方法是有效监测克伦特罗滥用和残留的基本手段。克伦特罗
残留检测方法主要有仪器方法和 ELISA 方法。与仪器方法
相比，ELISA灵敏、特异、简便、快速且检测的样本量大、成本
收稿日期:2011 － 03 － 09
基金项目:江苏省泰州市科技发展计划(编号:TN1014)。
作者简介:王帅兵(1979—) ，女，湖北黄梅人，硕士，讲师，主要从事药
物残留研究与分析工作。E － mail:wicewine@ sina． com。
通信作者:朱善元，教授，研究方向为生物制药。E － mail:jstzzsy@
126． com。
低，是目前进行宰前及屠宰现场检测克伦特罗的筛选法。现
有试剂盒大多以多克隆抗体为基础，特异性不理想。为提高
检测特异性和检测效率，降低检测成本，本研究以单克隆抗体
为基础，建立猪尿液和肝脏中克伦特罗残留的检测方法，并通
过动物试验进行考核，为研制克伦特罗快速检测试剂盒奠定
坚实基础。
1 材料与方法
1． 1 主要材料
盐酸克伦特罗(clenbuterol·HCl，CL·HCl) ，含量 98%
以上，由华南农业大学药理室惠赠;沙丁胺醇、妥洛特罗、非诺
特罗、特布他林、多巴胺、肾上腺素均为 Sigma 公司标准品;
HRP －羊抗小鼠 IgG;3，3，5，5 －四甲基联苯胺(TMB) ;叔丁
基甲醚(tert － butylmethyl ether，MTBE) ，分析纯;酶标板，8 ×
12 孔，NUNC公司;酶标仪，MagellanCE V 2． 50;低温高速离心
—972—江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 1 期