全 文 ：临赓与实验病理学杂志 1 9 8 6年至 2卷第 2期
< >实验研究心
了哥王对大鼠实验性鼻咽癌的促发作用
甚江 医学院肿瘤研 完室 唐慰革 黄培根 赵明伦 廖少玲
中国预 防 医学中心病毒学研 究所 曾 毅
!…一|l||, |祠le||
一般认为 , 鼻咽癌与 E B病毒 、 环 境
致癌物和促癌物 , 及遗传因素等有关 。 王
衡文 ( 1 9 6 5 ) “ ’ 、 湖南医学 院 ( 1 9 7 7 )
` “ ’ , ’ 及湛江医学院 ( 1 9 7 5 ) “ ’ 用 化 学
致癌剂诱发大 、 小鼠鼻咽癌 , 均相继获得
成 .功 。 区宝祥等 ( 1 9 8 2 ) ’ “ ’ 用硫酸 镍 协
同二亚硝基呱嗓 , 曾促发大鼠鼻咽癌 。 上
述研究已在证实环境病因方面取得成果 ,
但由 E B病毒诱发的鼻咽癌迄今尚未 见 有
报道 。 I t o等 ( 1 9 8’ 1 ) ` 日 ’ , 曾毅等 ( 1 9 5 3
)
` ” , 曾将环境因素与病毒病因研究相结
合 , 用大戟科 ( E u p h o r b i a e e a e ) 和 瑞
香科 ( T h y m e l a e a e e a e ) 植物提取物 , 诱
发离体培养的 R a ij 细胞产生 E B病毒 早 期
抗原 , 并促成 E B病毒 引起 淋 巴 细 胞 转
化。 但此类植物在整体研究中对鼻咽癌的
的发生有否作用还未见报道 、 为此 , 我们研
究了广西苍梧及梧州鼻咽癌高发区常见 的
中草药, 瑞香科的了哥王 〔w i ks t r o e m -
i a i n d i e a ( L ) C
.
A
. 人4 e y 〕 , 与 亚 硝
胺类致癌剂共同应用 , 对动物 鼻咽癌发生
的作用 。
材料与方法
致癌剂 : 二亚硝基呱嗓 ( 简称呱嗓 )
由本室合成 , 熔点为 1 57 ~ 1 58 ’ C 。 以少量
吐温80 搅匀后 , 加入注射用水 , 配制成每
m l含呱唤 g m g的注射液 。
了哥王提出物浸膏 : 由中国预防医学
中心病毒研究所肿瘤室提供 。 将了哥王浸
育溶于丙酮 , 每 m l含了哥王提取物 1 0 m g 。
动物: 本室杂交繁殖的非纯种大白鼠
72 只 , 约二月龄 , 雌雄各半 , 分 为三组 :
1
、 呱嗦 + 了哥王组 : 大鼠 32 只 , 每
只皮下注射一次呱嗓 1 m l 。 十天后开始给
了哥王液每次。 . 1 m l滴 介 , 每周二次 , 连
续七周 。
2
、 呱嚓组 : 大鼠 20 只 , 每只仅皮下
注牙一次呱啼 1 rn l作对照 。
3
、 了哥王组 : 大鼠20 只 , 每只只给
了哥王液滴鼻 , 方法与 l 组同 , 亦 为 对
谓 “不完全化生 ” 的细胞形态 , 对于其化
生的意义 , 似乎也难以解释 , 所以 , 这些
纤毛细胞虽有来源于化生的可能 , 但根据
不是十分充分 的 。
参考文南又
1
. 梁平等 : 中华内科杂志 1 9 3 2 2 1 , 2 20
2
. 刘彤华等 : :仁华医学杂志 1 9 日2 6 2 : 2 6 2
3 G o l dm
a n
}于, e t a l . I_ a b I n v e s t 19 6 8 1 8
; 2 0 3
4
. 工学诚 : 中国医科大学学报 19 8 2 1 1 , 5
5
.
T h o r n d y k o M C
:
C
e
l l T i
s s
R
e s 1 0 7 7
1 8 4
, 5 3 9
6
.
M
o r t o n JE
:
B id R e v 19 6 0 3 5
: 勺2
7
. 钟 慈声主编 : 细胞和组织 的超微结构 人 民
卫尹鱿出版社: 19 8谧 2 3 3 17 3页
( 图片地子于三 、
DOI : 10. 13315 /j . cnki . cjcep. 1986. 02. 022
所有大鼠停药后连续观察 180 ~0 2 5
天 , 然后处死 。 取出完整鼻咽 , 用 B o u in
液固定 , 经 J e 叮 ik n液脱钙 , 石蜡 包 埋 ,
连续切片 , H E染色 , 光学 显 微 镜 下 观
察。
结 果
除了哥王组见 1 例鼻咽粘膜上皮发生
非典型增生 ( l 级 ) 及 l 例发生乳头状瘤
外 , 两个对照组的主要病变均为上皮增生
和鳞状化生 , 未见癌 ( 表 1 ) 。
表 l 各 且 大 鼠 鼻 咽 粘 膜 病 变 情 况
痛润)浸只期(早全丁l 另IJ 观察期满动物数( 只 ) 鳞化(只 ) 乳头状诩( 只 )
1卜典烈
( 只攒生 原位癌( 只 ) 发癌率( % )生增)状只头(乳
呱 , 了组
呱嚓组
了哥工 州
丧 2
1 4 10 8 0 0 0 0 0
15 10 8 1 1 0 0 0
. . 0 . 曰 . 目 . . . 口 .曰一 . 口曰 . 喇 . . ` 曰山` . . 曰呱了组六 鼠鼻咽癌变情况
编号 原
_
_ _少 _ 期 _ _ 浸 _ _ _ _ 润 癌形态 上皮类型 分化程度
3 一 1
5 一 4
l 一 1
2 一 2
4 一 4
6 一 4
柱状上皮癌变
鳞状上支心变
乳头状
脑回状
草 状
乳头状
鳞状细胞癌
鳞状细胞癌
鳞状细胞癌
柱状细胞癌
I 级
l 、 I 级
1 、 I 级
I 级
呱 、 了组有 6 只鼠鼻咽粘膜 发 生 癌
变 , 2 只鼠为原位癌 ( 图 1 ) , 4 只鼠为
早期浸润癌 , 发癌率 2 6 . 1% ( 表 l 、 2 ) 。
4例早期浸润癌中 , 3 例为分化较低 ( I
~ I 级 ) 的鳞状 细胞癌 , 均无角化现象 (
图 2 ) 另 1例为柱状细胞癌 , 癌细胞呈柱
状 , 并有少数形成腺腔样结 构 , 内含淡蓝
染的粘液 ( 图 3 ) 。 所有 6 例癌组织均以
乳头状 、 脑回状或覃状向管腔生长 , 甚至
引起管腔阻塞 ( 图 2 ) 。 4 例早期浸润癌
的癌细胞均突破基底膜 , 侵入 上 皮 下 组
织 。 其他鼻咽粘膜增生 、 化生及非典型增
生病变均较对照组多见 。
讨 论
湖南医学院肿瘤研究室认为 , 二亚硝
基呱嚓是一 种对鼻咽粘膜有特殊亲和力的
致癌剂 ` ” 。 与其他亚 硝基化合物相似 , 其
诱癌作用与剂量有关 ` . ’ 。一次大剂量或多
次小剂量长时间作用均可致癌 。 潘世成等
用二亚 硝基呱嗓诱发大鼠鼻咽癌 , 每周皮
下注射二次 , 每次 1 . s m g , 最小积累总量
为 9 m g , 停药后观察六个月 , 5 0 % 发生
了鼻咽鳞状细胞癌 。
了哥王属瑞香科植物 , 民间常用作消
炎解毒的中草药 , 是广东成药 “ 解毒消炎
片 ” 的主要成份 ` 。 ’ 。 曾毅等 ` ” 亦发 现 其
提取物有诱发R a ij 细胞的 E B病舜早 期 抗
原和增强 E B病毒转化淋巴细胞的作 用 。
按 H e e k e r ( 1 9 6 5 ) ` , 。 ’ 研究促 癌 作
用模型的经 典实验方案 , 本实验 : ( 1 )
呱嗓组大鼠只接受一次机小剂量 ( 即所谓
阀下剂量 的二亚硝基呱嗓 g m g , 为潘世成
等所 用可致癌的最小积累总量的 1 / 1 0 , 实
验观察期内未见诱发鼻咽癌 。 陆 彝 芬 等
` , ` ’ 的实验也证实了这一点。 ( 2 ) 了哥
王组大鼠连续接受了哥王灌14 次 , 未见诱
发鼻咽癌 。 ( 3 ) 呱 、 了组大鼠接受一次
同样剂量的呱嗓 , 然后连续接受 14 次同样
剂量的了哥王 , 结果有 2 6 . 1% 的动物 发生
了鼻咽癌 。 ( 4 ) 关于单独多”次应用恒定
剂量的呱漆可诱发鼻咽癌 已被证实 ( 见前
3尽咤 临床与实验病理学杂志 9 16 8年第 2卷第 2丁
实验性大鼠鼻咽癌间质反应的观察
暨南大学医学院病理解剖学教研室 谢作煊 古建乃
关于鼻咽癌间质反应的研究 , 过去都
是用人体的材抓 主要研究鼻咽癌的间质
改变与临床表现和血清孚变化的关系 , 以
分析其生物学意义 “ ’ 2 ’ 。 本研究通过实验
性大鼠鼻咽癌在诱癌的不 同时期将各种病
变及其相应的间质改变联系起来 , 视其 间
质反应是否随着实质的发展而发展 , 并分
析其间质反应的生物学意义 。
材料和方法
W I
S t a r系大鼠 1 5 4只 , 体重 1 0 0~ 1 5 0
g
, 雌雄各半 , 随机分实验组 和对照组 : 再
随机分成 n 批 , 每批实验组 10 只 , 对照组
4 只 。 实验组动物用 。 . 5%二亚硝 基 呱 毗
嗓 ( D N )P 生理盐水溶液 , 按每 k g休重 1之
m g颈背皮下注射 。 每周二次 , 每 二 周 称
一次休重 , 调整给药剂量 。 对照组动物给
注射等量生理盐水 , 注射后 自第一 个月至
第十一个月 , 每隔 1个月 ( 30 天 ) 处 死 一
批 , 迅速取出鼻咽 , 用 液 氮 冷 冻 , 在
一 2 0 O C恒温连续切片 ( 8 件) , 分别作 工I E ,
A N A E
, 弹力纤维 (橙黄G醛品 红 法 ) ,
网状纤维 ( G o m o r is 法 )和肥大细胞 (甲 节
胺 蓝 、 甲篆绿 )等染色 。 光镜下观 察 。
结 果
一 、 大鼠正常鼻咽粘膜的组织学特点
大鼠的鼻咽粘膜上皮有鳞状上皮 , 假
)
。因此 ,实验结果表明对大鼠鼻咽癌的发
生 , 二亚硝基呱嗓符合肿瘤始动因子的作
用 , 了哥王则符合肿瘤促进因子的作用 。
后者与公认的促癌物巴 豆 油 因 子 A : 、
( T P A ) 的作用 相似 , 这也已为胡 垠 玲
等 ( 1 9 8 5 ) ` ” ’ 的实验所验证 , 且较镍的
促癌作用大 26 倍以上 。 }于e c k e r等报 告 瑞
香科和大戟科植物可含与 T P A 的促 癌 有
效成份佛波 ( P h o r b ol 、 ) 类似或有关的脂
类 ` ’ 。 ’ , 了哥王虽属瑞香科 , 但其促癌机
理和激活E B病毒产生抗原及促进淋 巴 细
胞转化的作用是否与之有关 , 尚待进一 步
研究 。
( 承王宗锐 、 李飞虹 、 张艺强 、 黄文
明同志协叻工作 , 谨致谢意` )
参考文南丸
1
. 王 衡文 : 实验生物学报 1 9 6 5 10 , 190
2
. 湖南医学 院肿瘤研究室 : 湖南 医学 院医学
研究资料 19 7 7 2 1一 2 8页
3
. 湖南医学院肿瘤研究室 : 湖南省参加全国
舆咽癌防治协作过第五次会议资料 1 9 7 0 3。一 39
页
4
. 湛江医学院病理 教研室 : 洪医通讯 19 7 8
1 0一 1 5页
5
. 区 宝祥 等 : 癌症 1 , 5 2 1 ( 2 ) : 5 6
6
.
Y o ll e i It o
, e t a l : C a n e e r C a m P a i g n
V o l 5 N
e w Y
o r
k G
u s t a v F i
s e h e r V e r l a g
19 8 1
7
.
Z e n g Y i
, e t a l
:
I
u t e r v i r o lo g y l o 8 3
1 9 , 2 0 1
8
. 潘 世成主编 : 肿瘤 第一版 人民卫生出
版社 19 8 4 17 6 页
9
. 全国中草药汇编编写组 : 全国中草药汇 编
上册 人民卫生出版社 1 9 7 5 1 页
20
. 杨 简 等译 : 月中瘤的科学基础 科学出版社
19 8 4 3 8 5一 39 4页
1 1
. 卜占彝芬等 : 癌症 1 9 8 3 2 ( 2 ) : 10 0
12
. 胡垠玲等 : 中华肿瘤杂志 19 8 5 6 4 17
州
( 图片兄插 页第 2 面 )
鼻咽癌旁原 位癌的组织病理学特征 (正文见第 8面 )
奏明癌旁原位 嘶 .累及全层 , 鳞状知胞塑 I H E 二 : `。
鼻明癌旁 喊 位 窗 佳及上曳中 、 下部 , 柱状细胞 塑明 J 匕 10 又 10鼻咽痛夯佩位感 , 另一发生于 想 ’锗者 . 鳞状细胞拍 ) H E I 。 义 4 0
了哥王对大鼠实验性鼻咽癌的促发作用 ( 正文见第34 面 )
23-图
}到 l 呱 了力l _ 鼻明习j膜发
」三的原位癌 40 试 3 . 3
图 2 l[ 期浸润癌 , 癌组红 l呈脑 回状生长 , 突入管
腔 2 0 x 3 . 3
图 3 早期浸润癌 , 癌细胞皇柱状 , 并形成腺腔样结构 , 内含粘液
实验性大鼠鼻吧癌间质反应的观察 ( 正文见第 36 面 )
图 l 诱癌 6个少侧壁外生」
.大鼠鼻咽性乳头状瘤
血管周围可见 3级肥大细胞 ( 图中呈不规则粗 黑点 ) 的反应 。 T ol iu d讯 e图 3 诱癌 1 个月 , 大鼠弃咽底 壁浸润癌 , 纤维母细胞明显增多 , 排列成簇伏 。 b甘兮1H E
图 2
X 16 0
火 16 0
先天性心脏病肺血管改
变的观察 ( 正文见第 26 面 )
家兔实验性骨髓型呼吸窘迫综合征肺的病理形态观察及其发病机理的探讨 ( 正文见第 43 面 )
图 1
图 2
5 6卜细动脉中膜肌性肥厚 H E 4 0 x 3 . 3
3 2邻动脉平滑肌及内膜灶性增厚 , 管腔几
乎阻塞 H E 10 x 2 . 5 图 1图 2 小血臂四血停滞
, 开见 徽阻性浴成 月 匕 义 2 5 0
,l\ 血管周围炎 弋及淋巴细胞及大单核细胞为主 )
H E X 4 0 0
肥厚性心肌病的病理形态分析 ( 附 2 例批告 , ) ( 正文见第30 而 )
图 l 煦片中间偏右 见窄 (H E x 16 0 ) 冠状动脉
, 该动脉周围之心肌纤维为收 lj2 纤维替代 , 并累及动脉 , 使管 壁增厚 ,
2 照片右下方为肥大之心肌纤维 , 其间质中见灶性淋巴细胞浸润 ( H E 只 管腔
共
4 0 0 )
小图