全 文 ：泥螺养殖滩涂异养菌群和弧菌的检测*
王国良1* *
陆彤霞1
金
珊1
於
宏1
钱云霞1
王一农1
林宝定2
( 1 宁波大学海洋与水产系,宁波 315211; 2慈溪市三北镇, 宁波 315331)
Detection of heterotrophic bacteria and vibrios in shoal of Bullacta exarata. WANG Guoliang, LU Tongx ia,
JIN Shan, YU Hong , QIAN Yunx ia, WANG Yinong, L IN Baoding ( Department of Oceanology and Fishery ,
N ingbo University , N ingbo 315211, China) .
Chin. J . A pp l . Ecol . , 2003, 14( 3) : 479~ 480.
The number o f hetero trophic bacteria and vibrios in shoal for Bullacta exarata r earing fluctuated mainly within
1. 25
104~ 7. 21
104 cfu
g - 1 and 0~ 1. 08
104 cfu
g - 1, respectively. 173 strains of bacteria, mainly be

long to 13 genera were isolated. The predominant genera w ere composed of Bacillus , Photobacter ium , Pseu

domonas , V ibr io and some gener a of Enter obacter iaceae. The number of bacter ia changed in line w ith t he alter

at ion of the temperature, and was especially affected by the or ganic matter content after the use of pest icide. The
predominant genera such as Bacillus were closely related w ith the environmental deterioration of rearing shoal.
Key words
Bullacta exarata, Rearing shoal, Heter otrophic bacteria, V ibrios.
文章编号
1001- 9332( 2003) 03- 0479- 02
中图分类号
Q938. 1
文献标识码
A
* 浙江省科委资助项目( 991102071) .
* * 通讯联系人.
2001- 05- 25收稿, 2001- 08- 06接受.
1
引

言
泥螺( Bullacta exarata)隶属腹足纲软体动物, 肉质鲜
嫩、营养丰富, 是浙江沿海重要的滩涂养殖品种. 至 2000 年
浙江省养殖面积已达 1. 13
104 hm2, 由于实行生态养殖, 本
轻利厚,广受养农的青睐. 随着泥螺养殖生产的发展, 养殖业
的自身污染和陆源排污水的大量入海,养殖生态环境越趋恶
化,使生物病原大量滋生, 自 1995 年以来常诱发养殖泥螺的
暴发性死亡 .有关海洋滩涂环境细菌的研究至今未见报道.
为探明泥螺养殖周期内暴发性死亡与滩涂环境的关系, 对养
殖滩涂的细菌菌群组成及其生态特性进行了检测分析.
2
材料与方法
2
1
样品采集
1999 年 2 月28 日~ 5月 12日 ,依潮汐 15 d 去慈溪市三
北镇泥螺养殖场定点取样;从养殖滩涂的上、中、下 3 个位置
各定 2 个平行点,刮去涂面 1 cm 后采集,泥样放入无菌培养
皿中于 2 h 内带回实验室.
2
2
研究方法
2
2
1 细菌培养和计数
异养细菌采用 PGY 培养基, 弧菌
采用中国腹泻病控制上海试剂供应研究中心生产的 T CBS
培养基.泥样经稀释后以平板倾注法种入培养基,置 28
恒
温培养箱中培养, 48 h 后取不同稀释度的双列平板计算细菌
菌落数.
2
2
2 细菌分离和鉴定
每批样品以平板涂布法分离细菌,
从 PGY 平板上随机挑选, 划线分纯后, 作细菌鉴定用. 革兰
氏阴性细菌按 Oliver [ 8]提供的海洋细菌鉴定检索图进行. 革
兰氏阳性细菌按
一般细菌常用鉴定方法
[ 3]和
海洋调查规
范
[ 10]提供的图式进行.分离菌株均鉴定至属.
3
结果与分析
3
1
泥螺养殖滩涂异养菌和弧菌的数量分布


对泥螺养殖周期内的滩涂以定位定点连续采样,作细菌
培养计数, 结果取平均值(图 1) .由图 1 可见, 异养菌数波动
于 1. 25
104~ 7. 21
104 cfu
g- 1 ,弧菌数波动于 0~ 1. 08

104 cfu
g - 1, 均呈现随气温上升而菌数增加的趋势, 但相对
比较平缓, 不如养虾池中菌数变化明显[ 4, 5, 6] . 这与养殖滩涂
开放于海洋大水体以及昼夜潮汐影响有一定的关系.
图 1养殖滩涂中细菌数量的变化
Fig. 1 Variat ion of bacterial numbers in the rearing shoal.
a)异养菌 Heterotrophic bacteria; b)弧菌 Vibrios.
3
2
养殖滩涂异养菌和弧菌的增长情况


不同日期养殖滩涂中的细菌数量以及增长量见表 1. 异
养菌数增长量最低为 2. 86 倍, 最高可达 5. 77 倍;弧菌数的
增长最高可达到6. 33倍 . 5月12日未能检出弧菌, 因在菌
量稀少的情况下, TCBS 选择培养基平板倾注法存在的检测
缺陷是个原因, 如采用 MPN 法会更精确. 各批样品中 ,以 4
月 12 日的细菌量增长最高.
应 用 生 态 学 报
2003 年 3 月
第 14 卷
第 3 期






























CHINESE JOURNAL OF APPLIED ECOLOGY, Mar. 2003, 14( 3)
479~ 480
表 1
不同日期养殖滩涂中的细菌数量
Table 1 Bacterial numbers in the rearing shoal at different periods(
103 cfu
g- 1)
细菌名称
Bacteria
name
日期 Date(month
date)
2. 28
细菌数
Bacterial
numbers
增长量*
Growth
rate
3. 15
细菌数
Bacterial
numbers
增长量
Grow th
rate
4. 12
细菌数
Bacterial
numbers
增长量
Growth
rate
4. 27
细菌数
Bacterial
numbers
增长量
Grow th
rate
5. 12
细菌数
Bacterial
num bers
增长量
Growth
rate
异养细菌 12. 5 1 35. 81 2. 86 72. 1 5. 77 58. 33 4. 67 49. 5 3. 96
Heterot rophic bacteria
弧菌 Vibrios 1. 71 1 0. 88 0. 51 10. 83 6. 33 4. 42 2. 58 0 0
* 增长量以 2月 28日的细菌数为 1计算 Grow th rate w as com puted in terms of the bacterial numbers of Feb. 28.
3
3
泥螺养殖滩涂中细菌的菌群组成


从养殖滩涂泥样中分离获得 173 株异养细菌,归属于 13
个菌属.其中芽孢杆菌属 ( Bacillus )、发光杆菌属( Photobac

terinm)、假单胞菌属( Pseudomonas )、弧菌属( Vibr io )和肠杆
菌科( Enterobacteriaceae) 的部分属为优势菌群, 分别占总菌
株的 32. 4、20. 8、12. 1、5. 2 和 8. 7% (表 2) . 这些占总数
79. 2%的 5 个优势菌属与养殖泥螺消化道内的优势菌属相
同,但在百分含量上有很大差异(另文发表) .
表 2
养殖滩涂中的细菌菌群
Table 2 Bacterial flora in the rearing shoal
属
名
Genus
数
量
Num ber
百分比
Percentage
(% )
Photobacter inm 36 20. 8
Bacil lus 56 32. 4
Pseud omonas 21 12. 1
En terobacteriaceae 15 8. 7
Vibrio 9 5. 2
Aer omonas 1 0. 6
Micrococcus 1 0. 6
Xan thomonas 2 1. 2
A lcaligenes 7 4. 0
A cinetobacter 2 1. 2
Corynebac terium 7 4. 0
Plesiomonas 3 1. 7
Flarobacter ium 3 1. 7
未定 Uncertain 10 5. 8
总计 T otal 173 100
4
讨

论


由图 1 和表 1可见, 4 月 12 日检测的泥螺养殖滩涂中异
养菌数和弧菌数明显较其它时间高, 这与采样前 2 天养民施
用过三唑磷农药杀灭敌害生物密切相关. 泥螺养殖过程中,
沙蚕、虾蛄等敌害生物与泥螺竞争涂面上的底栖硅藻等植物
性饵料. 故杀灭敌害生物有利于泥螺的生长, 但敌害生物的
大量死亡、分解, 增加了养殖滩涂中的有机物含量, 给细菌的
生长繁殖提供了营养条件,导致菌量上升. 多数报道认为, 弧
菌是海洋环境中的条件致病菌,常引起许多鱼类和贝类等海
洋养殖动物的病害[ 1, 2, 7, 11] . 这种人为因素引起的弧菌数量
大幅上升,会增加养殖泥螺弧菌性病害发生的可能性. 因此,
强调谨慎使用或禁止使用农药.


在泥螺养殖滩涂中, 芽孢杆菌属占总菌株的 32. 4% , 革
兰氏阴性细菌占63% , 与 Rheinheimer 的报道相近[ 9] . 通常在
海水中革兰氏阴性细菌有 80% ~ 90% , 甚至更高,芽孢杆菌
却非常少.芽孢杆菌属和假单胞菌属等在养殖滩涂中占优势的菌群,是滩涂中代谢分解活力旺盛的菌群, 对蛋白质和多
糖类的分解能力较强. 长期不间歇的滩涂养殖, 使这类细菌
的代谢产物积聚,促进了滩涂养殖环境的
老化
或恶化. 发
生养殖泥螺暴发性死亡的滩涂, 大都可见滩涂泥质发黑现
象.泥螺养殖依赖于滩涂环境, 养殖滩涂环境的变化或恶化
可能是造成泥螺暴发性死亡的重要诱发因素.
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作者简介
王国良, 男, 1955 年生, 副教授 ,主要从事水产养殖动物病害 防治研究, 发表论 文 30 余 篇. T el: 0574

87600373, E
mail: wanggl@ nbip. net. cn
480 应
用
生
态
学
报

















14卷