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多叶越南槐对小鼠急性肝损伤的保护作用



全 文 :多叶越南槐对小鼠急性肝损伤的保护作用*
张 颖1 钟正贤1 卢文杰2 牙启康2
(1 广西中医药研究院·南宁 530022 2 广西中药质量标准研究重点实验室·南宁 530022)
摘 要 目的:探讨多叶越南槐对小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:分别采用硫代乙酰胺(TAA)、四氯
化碳(CCl4)和异硫氰酸萘酯(ANIT)复制小鼠急性肝损伤模型,检测多叶越南槐对小鼠血清中转氨酶活
性及胆红素含量的影响。结果:多叶越南槐可明显降低 TAA、CCl4 和 ANIT 致小鼠急性肝损伤模型血清
转氨酶活性及胆红素含量。结论:多叶越南槐对小鼠急性肝损伤具有明显保护作用。
主题词 急性肝损伤 /中医药疗法 多叶越南槐 /治疗应用 小鼠
多叶越南槐 Sophora tonkinensis Gagnep. var. polyphylla S.
为豆科槐属植物,与山豆根(越南槐)Sophora tonkinensis是同
科同属同种的根,是越南槐的一个变种,生长于石山区,分布
于广西、广东、云南、贵州和江西等省[1]。其性寒,味苦,具有
清热解毒、消肿利咽之功效,常用于火毒蕴结、咽喉肿痛、齿
龈肿痛、肺热咳嗽、肝炎等疾患的治疗。因多叶越南槐与山
豆根具有相似性状和药效,广西民间把多叶越南槐当作山豆
根药材使用,《广西中药材标准》1990 版也将多叶越南槐作
为山豆根药材的植物来源之一收载[2]。根据多叶越南槐的
功效和民间应用,本实验研究了多叶越南槐对不同化学肝毒
剂造成的动物急性肝损伤的保护作用。
1 实验材料
1. 1 动物 昆明种小鼠,体重 18 ~ 22g,雌雄各半,由广西
医科大学实验动物中心提供,清洁级,许可证号:SCXK(桂)
2003 - 0003。
1. 2 药物 多叶越南槐醇提物:由广西中医药研究院中药
化学研究所提供,4. 25g生药 /g,实验时用蒸馏水研磨配制成
药液备用。联苯双酯:为浙江万邦药业有限公司产品,批号:
100717。
1. 3 试剂 ANIT:美国 Sigma 公司产品;TAA:上海市化学
工业学校产品。血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶
(AST)、血清总胆红素(T - Bil)试剂盒:均为长春汇力生物
技术有限公司产品。
1. 4 仪器 722 型光栅分光光度计:上海分析仪器三厂产
品。FA1004 型万分之一电子天平:上海精密科学仪器有限
公司产品。
2 方法与结果
2. 1 对 TAA诱发小鼠急性肝损伤的影响[3] 取昆明小鼠
50 只,雌雄各半,随机分为正常组、模型组、联苯双酯(0. 2g /
kg)组、多叶越南槐大、小剂量(7. 2、3. 6g /kg)组,每组 10 只。
每日灌胃给药 1 次,连续 7 天。末次给药后 1 小时,除正常
对照组外,其余各组腹腔注射 TAA50mg /kg。禁食 16 小时后
摘眼球取血,用试剂盒测定血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转
氨酶(AST)活性。采用 PEMS3. 1 统计软件分析数据,所得
实验数据以均数 ±标准差(x ± s)表示,采用 t检验作组间比
较差异显著性。结果见表 1。
2. 2 对 CCl4 所致小鼠急性肝损伤的影响
[4] 取昆明种小
鼠 50 只,雌雄各半,分组及给药同 2. 1。末次给药后 1 小时,
除正常对照组外,其余各组腹腔注射 0. 1% CCl4(10ml /kg)
花生油溶液。禁食 20 小时后摘眼球取血,用试剂盒测定血
清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性的影响。结
果见表 1。
2. 3 对异硫氰酸萘酯(ANIT)所致小鼠急性肝损伤的影
响[5] 取昆明小鼠 50 只,分组及给药同 2. 1。第 7 天除正
常对照组外,其余各组 ig给予 0. 6% ANIT 90mg /kg染毒,中
毒后继续给药 2 天,模型组则给以同体积生理盐水。各组于
中毒 48 小时后摘眼球取血,用试剂盒测定血清总胆红素(T
- Bil)含量和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性。结果见表 1。
表 1 多叶越南槐对急性肝损伤小鼠转氨酶活性、胆红素含量的影响(x ± s)
组别 n
剂量
(g /kg)
TAA CCl4 ANIT
ALT
(mmol /L)
AST
(mmol /L)
ALT
(mmol /L)
AST
(mmol /L)
ALT
(mmol /L)
T - Bil
(μmol /L)
正常组 10 - 1. 84 ± 0. 44** 3. 30 ± 0. 45** 1. 88 ± 0. 49** 3. 77 ± 0. 41 2. 57 ± 1. 93** 6. 57 ± 2. 24**
模型组 10 - 15. 25 ± 2. 96 6. 40 ± 1. 03 16. 70 ± 6. 45 7. 30 ± 2. 83 13. 62 ± 0. 70 195. 28 ± 60. 46
联苯双酯 10 0. 2 9. 61 ± 4. 48** 5. 37 ± 0. 80* 1. 31 ± 0. 54*** 4. 86 ± 0. 81* 7. 56 ± 2. 34** 152. 37 ± 19. 82*
多叶越南槐(小) 10 3. 6 11. 77 ± 4. 05* 3. 68 ± 1. 39** 11. 39 ± 2. 89* 4. 80 ± 0. 48* 12. 32 ± 1. 46* 153. 67 ± 26. 76
多叶越南槐(大) 10 7. 2 10. 56 ± 4. 51* 3. 80 ± 1. 16** 10. 69 ± 4. 91* 4. 86 ± 1. 13* 12. 04 ± 2. 06* 140. 71 ± 35. 66*
与模型组比较* P <0. 05,**P <0. 01(下同)
* 广西自然科学基金项目 No. 2010GXNSFA013135
3 讨论 目前对越南槐的研究和利用主要集中在山豆根
·523·中国中医药科技 2012 年 7 月第 19 卷第 4 期 July 2012 Vol. 19 No. 4
上,其它种类报道较少,加大对其它越南槐种类的研究,寻找
新的药源或发现新的有效成分,将会使越南槐的利用和开发
前景更加广阔。根据越南槐具有抗肝炎的临床功用及抗炎
等药理作用研究报道,本文采用 TAA、CCl4、ANIT 致肝损伤
小鼠模型,对多叶越南槐进行抗肝损伤作用实验研究,以期
探讨其保肝降酶的药理作用。
TAA造成肝损伤的机制是 TAA 干扰 RNA 从细胞核到
细胞质的转运过程而影响蛋白质的合成,其可能损害肝细胞
膜,致使细胞的离子环境破坏,导致肝细胞坏死 [6]。CCl4 是
经典的化学性肝损伤动物模型制备毒剂,其致肝损伤的机制
是 CCl4 进入体内后,在肝细胞内质网中经细胞色素 P450 依
赖性混合功能氧化酶的代谢,生成活泼自由基,损伤肝细胞
膜结构与功能的完整性,迅速出现肝脂肪化及坏死等形态学
变化即导致肝细胞损伤。两种途径最终均导致肝细胞浆中
可溶性溶酶渗出入血,血清转氨酶明显升高[7]。ANIT则 是
一种间接肝毒剂,它损伤肝细胞,又损害肝胆管,能诱发肝脏
尤其是胆管上皮细胞损害,引起血液中胆红素和转氨酶急剧
升高,胆汁流量减少,炎性细胞增加以及肝细胞坏死等类似
于人类肝内胆汁淤积的病理改变[8]。
本实验结果表明,与模型组比较,多叶越南槐醇提物能
降低 TAA 和 CCl4 所致肝损伤小鼠的血清 ALT 活性和 AST
活性;降低 ANIT所致肝损伤小鼠血清 ALT活性,明显抑制 T
- Bil含量的升高(P < 0. 05) ;证实多叶越南槐对小鼠急性
肝损伤有一定的保肝降酶作用。
参考文献
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国中医药科技,2009,16(5) :372.
[5] 李燕婧,钟正贤,陈学芬,等.长柱十大功劳与阔叶十大功劳水
提物药理作用比较.中医药导报,2010,16(9) :92.
[6] 巴根那,高玉峰,青玉.蒙药地格达 - 4 味汤对化学性肝损伤的
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)
金沸草散加减治疗外感后久咳 49 例临床观察
李卫河
(杭州师范学院医学院附属余杭医院·余杭 311100)
1 临床资料
1. 1 病例选择 ①近期有感冒病史,且好转后继发咳嗽,咳嗽持续
或反复发作 1 个月以上,夜间咳嗽加剧,痰少,并见咽干、咽痒,受冷
空气及刺激性气味后易发作;②肺部无阳性体征,血常规、胸片检查
无异常;⑧支气管激发试验阴性:④排除其他原因引起的咳嗽。
1. 2 一般资料 108 例均为 2006 - 10 ~ 2010 ~ 10 本院中医科门诊
患者,随机分为治疗组 49 例和对照组 49 例。治疗组男性 28 例,女
性 21 例;年龄 3 ~ 76 岁;病程 14 天 ~ 6 个月。对照组男性 30 例,女
性 19 例;年龄 4 ~ 78 岁;病程 15 天 ~ 6 个月。两组一般资料无显著
性差异(P > 0. 05) ,具有可比性。
2 治疗方法
2. 1 治疗组 用金沸草散加减治疗。处方:旋覆花(包煎)10g、白
芍药 12g、生甘草 5g、荆芥 15g、苏叶 10g、前胡 10g、法半夏 10g、杏仁
10g、白芥子 10g、桔梗 10g、浙贝母 10g、川贝母 3 ~ 5g、葶苈子 10 ~
20g。每日 2 剂,水煎,顿服。7 天为 1 个疗程,共治疗 2 个疗程。
2. 2 对照组 予口服头孢丙烯胶囊(广州白云山光华药业生产,批
号:29015)0. 5g,每日 2 次。7 天为 1 个疗程,共治疗 2 个疗程。
统计学处理:采用 SPSS13. 0 版软件包进行 Ridit分析。
3 结果
3. 1 疗效标准 临床治愈:咳嗽症状完全消失,2 周以上未发作;好
转:咳嗽症状有不同程度减轻,咳嗽次数减少或咳嗽间隙延长;无效:
咳嗽症状未见改善。
3. 2 结果 见表 1。
表 1 两组临床疗效比较(n)
组别 n 治愈 好转 无效 总有效率(%)
治疗组 49 35 12 2 95. 92*
对照组 49 9 15 24 48. 98
与对照组比较* P < 0. 05
4 讨论 外感后久咳经西医治疗效果欠佳的患者,笔者采用金沸草
散加减治疗获良效。旋复花肃肺降气、豁痰蠲饮;其味辛,能宣散肺
气达于皮毛,一降一宣,便可恢复肺朝百脉、主治节之功能;其味咸,
咸者入肾,而能纳气下行以归根,使胃中的痰涎或水饮下行而出,不
复上逆犯肺,恢复肺的生理功能;可见旋复花一味药可作用于肺胃肾
三脏,通利上中下三焦。由芍药和甘草两味中药等量组成芍药甘草
汤系张仲景《伤寒论》中的著名方剂。现代药理研究证实其具有明
显的解痉、镇痛、抗炎等多种作用[1]。故用本方时,诸药均可加减,
唯旋覆花、白芍、甘草 3 味为不可挪移之药。另外加用葶苈子 10 ~
20g是国医大师颜德馨独到的经验,也蕴含了经方葶苈大枣泻肺汤
的精义。此外方中荆芩、苏叶、前胡、半夏、杏仁、白芥子、桔梗、贝母,
与主药协同共奏宣散肺气、降逆化痰、蠲饮止咳之功。
本观察结果显示,治疗组、对照组总有效率分别为 95. 92%、
48. 98%,组间比较差异有统计学意义(P < 0. 05)。提示金沸草散加
减治疗外感后久咳疗效良好。
参考文献
[1] 朱爱江,方步武,吴咸中,等 . 芍药甘草汤的抗炎作甩研究 .
天津医药,2009,37(2) :120. (修回:2012 - 02 - 10)
·623· 中国中医药科技 2012 年 7 月第 19 卷第 4 期 July 2012 Vol. 19 No. 4