全 文 ：Vol. 35 No. 10
Oct. 2015
第 35卷 第 10期
2015年 10月
中 南 林 业 科 技 大 学 学 报
Journal of Central South University of Forestry & Technology
Doi:10.14067/j.cnki.1673-923x.2015.10.003 http: //qks.csuft.edu.cn
收稿日期：2015-04-22
基金项目：中央财政林业补助资金项目（GXZC2015-G2-0021-JY）；广西科学研究与技术开发计划课题（桂科转 1346004-32）；广
西自然基金项目（2010GXNSFA013068）；北海市科技项目（北科合 201203033）
作者简介：莫竹承，副研究员；E-mail：mo_zhucheng@126.com
引文格式：莫竹承，庞万伟，刘 珏，等 . 膝柄木叶片诱导愈伤组织研究 [J].中南林业科技大学学报，2015, 35(10): 13-17, 39.
卫矛科植物膝柄木最早于 1979年在广西北海
市南康镇下担村被发现，当时定名为库林木属华
库林木 kurrimiasinica Chang et S.Y. Liang[1]，是我
国特有的热带树种 [2]，被收录入《中国植物红皮
书》（第一册）中。1995年李先琨 [3]用定量评价
指标体系评估了广西珍稀濒危植物优先保护序列，
把膝柄木 Bhesa sinica列入了最优先予以保护的种
类。联合国环境署保护监测中心 2001年的报告中
也将 Bhesa sinica收录为中国特有濒危植物 [4]。在
诚静容和黄普华主编的《中国植物志》45卷 3册
（1999年）中将膝柄木 Bhesa sinica归并到 Bhesa
robusta (Roxb.) D. Hou（见 http://frps.eflora.cn/frps/
Bhesa%20robusta）膝柄木 Bhesa robusta不再是中
国特有种。1999年国务院批准《国家重点保护野
生植物（第一批）》名录中，膝柄木 Bhesa robusta
为一级保护野生植物，在 2004年《中国物种红色
名录》中将一级保护植物膝柄木定为极危（CR）
等级 [5]。
膝柄木种群小（我国野生种群不到 10株），
种子量少且发芽率低，通过有性繁殖恢复种群极
为困难 [6]，探讨无性繁殖技术对膝柄木种群的保
护有重要意义。膝柄木属与南蛇藤属、美登木属、
巧茶属同属于卫矛亚科 Celastroideae南蛇藤族
Celastreae。对与膝柄木同族的其它属植物，如对
膝柄木叶片诱导愈伤组织研究
莫竹承 1,2，庞万伟 3，刘 珏 3，李 滨 3
（1. 广西科学院广西红树林研究中心，广西 北海 5 36000；2. 广西红树林保护重点实验室，广西 北海
536000；3. 北海市林业局，广西 北海 536000）
摘 要：为了抢救性保护我国濒危植物膝柄木，以叶片外植体为培养材料，在叶片背面划痕，配制MS培养基
附加不同浓度的 2,4-D和 6-BA，设置不同的暗培养时间，做 3个重复的 L3（43）正交设计试验，探讨各因子对
膝柄木叶片诱导愈伤组织的影响。结果表明各因素对愈伤组织诱导率的影响大小顺序为：暗培养时间＞ 2,4-D＞
划痕数，6-BA的影响未能达到显著水平。诱导膝柄木叶片愈伤组织各因素最佳浓度组合是：2,4-D=1.0 mg/L，
6-BA=0.5 mg/L，划痕 =4～ 5条，暗培养 =30天。
关键词：膝柄木；叶片；愈伤组织；诱导率
中图分类号：S722.3+7 文献标志码：A 文章编号：1673-923X(2015)10-0013-05
Study on callus induction of Bhesa robusta leaves
MO Zhu-cheng1,2, PANG Wan-wei3, LIU Jue3, LI Bin3
(1.Guangxi Mangrove Research Center,Guangxi Academy of Science, Beihai 536000, Guangxi, China; 2.Guangxi Key Lab of Mangrove
Conservation, Beihai 536000, Guangxi, China; 3. Beihai Municipal Forestry Bureau, Beihai 536000, Guangxi, China)
Abstract: To urgently conserve the national endangered plant Bhesa robusta, a leaf tissue culture experiment under 4 factors condition
of abaxial scratch, MS medium supplement with vary concentration of auxin 2,4-D andcytokinin 6-BA , dark culture period was carried
on. The experiment was designed in L3(4
3) orthogonality experiment, 3 replicates. The results showed the ranking of factors activity to
induce callus is Dark culture period ＞ 2,4-D ＞abaxial scratch, the effect of cytokinin 6-BA is not significanctly. In B.robusta leaf tissue
culture experiment, the optimum combination factors for callus induction is MS medium + 2,4-D1.0 mg/L + 6-BA0.5 mg/L, leaf abaxial
scratchs = 4～ 5, about 30 days continuously culture in dark environment .
Key words: Bhesa robusta; leaf segments; callus; induction rate
莫竹承，等：膝柄木叶片诱导愈伤组织研究14 第 10期
南蛇藤 Celastrus orbiculatus[7-8]、苦皮藤 Celastrus
angulatus[9]、云南美登木 Maytenus hookeri[10-11]］等
种类开展的组织培养研究均取得了一定的进展，
因此本文将参照相近亲缘种类的组培方案制定膝
柄木组培研究方法，探讨膝柄木的无性繁殖技术，
为种群的保护恢复探索新的技术路径。
1 材料与方法
1.1 叶片采集与消毒
在人工种植的膝柄木幼树上剪取新长出嫩叶，
叶龄一般在 10～ 30日之间，叶片长约 10cm，红色、
淡红色到嫩绿色，柔软。
将幼叶带回实验室用毛刷擦拭表面，放入烧
杯中用流水冲洗 1h。先用 70%酒精浸 泡 30秒，
无菌水冲洗 1次；再用 0.1%氯化汞 (HgC12)浸泡
8 min，无菌水冲洗 3次后用无菌滤纸吸干，在无
菌操作台上将叶背面划痕，切除叶中脉，将叶片
分割成约 2 cm2的小片用于接种。
1.2 接种及培养
按教材配方配制 MS 固体培养基 [12]，琼
脂粉用量为 4.0g/L，附加 4% 蔗糖。培养基
附加的植物生长调节剂为：生长素类用二氯
苯 氧 乙 酸 (2,4-Dichlorophenoxyacetic acid ，
简称 2,4-D)，细胞分裂素类用 6- 苄氨基嘌呤
(6-Benzylaminopurine， 简 称 6-BA 或 BAP)， 浓
度分别为 0.5，1.0，2.0mg/L；调节培养基 pH至
5.8~6.0，121℃高压灭菌 15 min。接种时叶片外植
体背面与培养基接触，背面划痕数分密（4～ 5条）、
疏（1～ 2条）和零划痕 3种类型，接种后置于培
养架上暗培养 10～ 30天。考察 4种因素（生长
素 2,4-D、细胞分裂素 6-BA、划痕数和暗培养时间）
对膝柄木外植体诱导愈伤组织的影响，各因素水
平见表 1。
表 1 膝柄木叶片组培试验各因素水平
Table 1 Levels of different factors in leaf segments tissue
culture test of Bhesarobusta
水平 \因素 A( 2,4-D) /(mg·L-1)
B(6-BA )
/(mg·L-1) C(划痕数 ) D(暗培养 )-日
1 0.5 0.5 4~5 10
2 1.0 1.0 1~2 20
3 2.0 2.0 0 30
将表 1中的 4因子 3水平用 L9(34)正交表设计
实验，共做 9组实验，每组实验 3个重复，每组
接种 20 瓶，每 1 重复接种 180 瓶，每瓶接种 1
个叶片外植体，3个重复共接种了 540瓶。培养第
10天按设计方案保持暗培养或用日光灯连续光照
培养，光照强度为 1 500～ 2 000 Lx，培养室温度
控制在 25℃左右，每隔 3d观察记录一次愈伤组织
发育情况。当遇有发霉时立即将外植体消毒转瓶，
接种到相同成份的培养基上。
考察指标为接种 30日后愈伤组织诱导率，计
算方法如下：
诱导率 =(诱导出愈伤组织的外植体数／活外
植体数 )×100%。
用 SPSS17.0统计分析软件进行分析。
2 结果分析
2.1 实验结果统计
在实验过程中观察记录发现：较密的划痕数
外植体愈伤组织出现较早，在 3个重复中，划痕
数 4～ 5条的外植体培养不到 20天便开始出现愈
伤组织，无划痕的外植体出现愈伤组织的时间最
迟，通常在培养 25～ 26天才出现。经 30天培养
后愈伤组织诱导率结果整理于表 2.
表 2 膝柄木叶片组培实验结果
Table 2 Experimantal result of B.robustaleaf segments
tissue culture
实验号 A(2,4-D)
B
(6-BA)
C(划
痕数 )
D(暗
培养 )
诱导率 /%
重复 1 重复 2 重复 3
1 1 1 1 1 88 85 91
2 1 2 2 2 85 77 78
3 1 3 3 3 89 79 85
4 2 1 2 3 100 97 92
5 2 2 3 1 82 82 85
6 2 3 1 2 91 91 88
7 3 1 3 2 90 79 85
8 3 2 1 3 100 91 82
9 3 3 2 1 83 76 79
2.2 各因素对愈伤组织诱导的影响
通过单变量方差分析，比较各因素对愈伤组
织诱导率的效应，见表 3。
结果显示：A（2,4-D）、C（划痕数）、D（暗
培养）的伴随概率 p（表中 Sig.）均小于显著性水
平 0.05，因此认为这 3个因子对诱导率有显著影响，
其中暗培养影响最大，其次是 2,4-D，最后是划痕
数，6-BA对诱导率无显著影响。
15第 35卷 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报
2.3 暗培养对愈伤组织诱导的影响
暗培养时长这一因素的 3个水平的诱导率分
别是水平 1（暗培养 10天）=83.444%，水平 2（暗
培养 20天）=84.889%，水平 3（暗培养 30天）
=90.556%，基于这些均值采用 LSD（最小显著差
异法）进行成对比较得到以下结果（见表 4）。
表 4 暗培养各水平成对比较†
Table 4 Pairwise comparisons of dark culture period
(I)暗培养 (J)暗培养 均差 (I-J) 标准差 Std. Error Sig.
1
2 -1.444 2.219 .523
3 -7.111* 2.219 .005
2
1 1.444 2.219 .523
3 -5.667* 2.219 .020
3
1 7.111* 2.219 .005
2 5.667* 2.219 .020
† *. 在0.05水平上的显著差异。
结果表明暗培养水平 3与 1、2之间的诱导率
在 0.05水平上有显著差异，即暗培养 30天明显提
高愈伤组织诱导率。
2.4 植物生长调节剂对愈伤组织的影响
生长素类激素 2,4-D各水平的诱导率均值分
别是：水平 1=84.111%，水平 2=89.778%，水平
3=85%，成对比较结果见表 5。
表 5 2,4-D各水平成对比较†
Table 5 Pairwise Comparisons of 2,4-D Concentrations
(I) 2,4-D (J) 2,4-D 均差 (I-J) 标准差 伴随概率 Sig.
1
2 -5.667* 2.219 .020
3 -.889 2.219 .693
2
1 5.667* 2.219 .020
3 4.778* 2.219 .045
3
1 .889 2.219 .693
2 -4.778* 2.219 .045
† *. 在0.05水平上显著差异。
表中数据显示 2,4-D水平 2与 1、3之间的诱
导率有显著差异，即培养基中 2,4-D最佳浓度为
1 mg/L。
尽管 6-BA在各因素中对诱导率的影响力不
显著，但因素内不水平之间的诱导率可能会有显
著性差异，为此计算 6-BA各水平的平均诱导率分
别是：水平 1=89.667%、水平 2=84.667%和水平
3=84.556%，做成对比较结果见表 6。
表 6 6-BA各水平成对比较
Table 6 Pairwise Comparisons of 6-BA Concentrations
(I) 6-BA (J) 6-BA 均差 (I-J) 标准差 伴随概率
1
2 5.000* 2.219 .037
3 5.111* 2.219 .033
2
1 -5.000* 2.219 .037
3 .111 2.219 .961
3
1 -5.111* 2.219 .033
2 -.111 2.219 .961
† *. 在0.05水平上显著差异。
比较结果表明，6-BA水平 1与水平 2、3之
间的诱导率有显著差异，即在培养基中 6-BA浓度
0.5 mg/L比其它两种较高浓度能明显提高愈伤组
织的诱导率。
2.5 划痕对愈伤组织诱导的影响
划痕数的 3个水平的诱导率均值分别是水平
1=89.667%，水平 2=85.222%，水平 3=84%，成对
比较结果见表 7。
表 7 划痕数各水平成对比较
Table 7 Pairwise comparisons of scratch lines
(I)划痕数 (J)划痕数 均差 (I-J) 标准差 伴随概率
1
2 4.444 2.219 .060
3 5.667* 2.219 .020
2
1 -4.444 2.219 .060
3 1.222 2.219 .588
3
1 -5.667* 2.219 .020
2 -1.222 2.219 .588
† *. 在0.05水平上显著差异。
结果表明，划痕数只有水平 1 与水平 3 之
间的诱导率有显著差异，也就是说较密的划痕
（4 ～ 5 条）比无划痕外植体的愈伤组织诱导率
明显较高。
由此可以认为这 4个因素的最佳组合是：
A2B1C1D3， 即 2,4-D=1.0 mg/L，6-BA=0.5 mg/L，
划痕 =4～ 5条（密），暗培养 =30天。
考虑到 6-BA对诱导率的贡献达不到显著水
平，从节约资源的角度考虑可以省掉，变成 3因
素组合，即 A2C1D3，这一推测是否正确还应通过
试验验证。
表 3 因素间效应检验
Table 3 Tests of Between-Subjects Effects
变差来源 三类平方和 自由度 均方 F Sig.
A(2,4-D) 167.185 2 83.593 3.774 .043
B(6-BA) 153.407 2 76.704 3.463 .053
C(划痕数 ) 160.074 2 80.037 3.614 .048
D(暗培养 ) 254.296 2 127.148 5.741 .012
Error(随机 ) 398.667 18 22.148
莫竹承，等：膝柄木叶片诱导愈伤组织研究16 第 10期
经过 30天培养，9个试验组愈伤组织诱导结
果见图 1。图中显示第 4、8组因出现愈伤组织较
早，获得的愈伤组织块较大，具有较强的再生能力。
其次是第 6、3、5、2组，各愈伤组织已经成团块
结构；第 7、1、9组产生愈伤组织较晚，愈伤组
织块较小且分散。
图 1 膝柄木叶片愈伤组织诱导 30天试验结果
Fig.1 Bhesa robusta leaf Callus induced after 30 days culture in Orthogonal test
3 讨论与结论
叶片组培繁殖是对珍稀濒危植物抢救保
护的重要措施，我国特有的珍稀植物金花茶
Camellia nitidissima Chi.、 单 种 属 植 物 青 钱 柳
Cyclocaryapaliurus(Bata1.)Iljinskaja的叶片组培均
获得愈伤组织 [13-14]。本文的实验结果表明了膝柄
17第 35卷 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报
木也能通过组培快繁方式实现种群繁殖与保护。
植物生长调节剂种类、浓度与比例被认为是影
响愈伤组织诱导的重要因素。生长素类 2,4-D和细
胞分裂素类 6-BA(BAP)是叶片愈伤组织诱导培养中
最常用的种类，2,4-D不但常用于叶片愈伤组织诱导，
还对红花黄钟木 Tabebuiarosea的子叶、下胚轴、胚
根等不同类型外植体产生愈伤组织有促进作用 [15]。
6-BA主要作用是促进愈伤组织诱导，如在野生型拟
南芥叶愈伤组织诱导中最佳浓度为 0.5 mg/L[16]，浓
度过高易导致玻璃化。也有用于促进萌芽，如促进
珍贵阔叶树种刺楸 Kalpanaxseptemlobus休眠芽和
幼嫩茎段的腋芽萌发 [17]。
唐佳佳等 [18] 将 2,4-D+ 6-BA激素组合用于
黑荆树 Acacia mearnsii叶片组织培养，结果表
明在 MS培养基中，6-BA 以 0.5 mg/L、2,4-D 以
1.5 ～ 2.0 mg/L 最 佳，MS+6-BA 0.5 mg/L +2,4-
D 1.5 mg/L的愈伤组织诱导率高达 60% 以上。
在药用百合 Liliu sp.鳞茎增殖组培中，MS+6-BA
0.2 mg/L +2,4-D 0.4 mg/L是最适培养基 [19]。在玉
蕊 Barringtoniaracemosa叶片愈伤组织诱导中，
MS+2,4-D 1.5mg/L +Kinetin0.5 mg/L 的诱导率达
100%[20]。山楂树 Crataegusazarolu s L. var. aronia
叶片在MS培养基中添加 2,4-D 1.0 mg/L +BAP1.0
mg/L 诱导愈伤组织最有效 [21]；在 MS+2,4-D
2 mg/L + BAP 0.5 mg/L培养基中诱导浩浩巴树
Simmondsiachinensis叶片 20～ 22天获得愈伤组
织 [22]。这些结果与本文中的最佳植物生长调节剂比
例培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L +6-BA 0.5 mg/L一致。
对唇形科鼠尾草属两种植物 Salvia offi cinalis
和 S. fruticosa的叶片组培发现较低的光密度 (50
mmol·m-2s-1)促进愈伤组织产生并诱导形成体细
胞胚 [23]。在怀山药 Dioscorea opposita叶片组培
中，直接进行光培养，愈伤诱导率只有 50~55%，
先暗培养后再光培养叶片的愈伤组织诱导率可达
100%，暗培养时间越长愈伤组织产量越大 [24]。对
苹果 Maluspumila叶片组培发现，先暗培养 14 d
再光培养与先暗培养 21 d再光培养叶片的愈伤组
织诱导率都达 100％，采用叶片远轴面接触培养
基比近轴面接触培养基的愈伤诱导率高约 25～
30%[25]。白木香 Aquilariasinensis叶片组培试验也
表明暗培养和叶片背面接触培养基有利于愈伤组
织诱导 [26]。本文研究也认为暗环境条件有利于诱
导膝柄木叶片愈伤组织。
膝柄木叶片外植体背面划痕可促进愈伤组织
诱导为本文的新发现，在其它植物组培试验中尚
未发现此类报道。主要原因是划痕能够增加外植
体与培养基的有效接触，促进营养物质的吸收和
细胞分裂与增殖。
本文的研究结论是在暗培养时间、叶片划痕
数、2,4-D和 6-BA四类因素中，暗培养时间对
膝柄木叶片愈伤组织诱导率的影响最大，其次为
2,4-D和划痕数，6-BA的作用不明显。
膝柄木叶片组培诱导愈伤组织最佳条件是：
MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L，叶背划痕数
4～ 5条，连续暗培养 30天。
参考文献：
[1] 张宏达 , 粱盛业 .中国卫矛科植物新记录的属 -库林木属 [J].
中山大学学报 : 自然科学版 , 1981,(1):100-101.
[2] 粱盛业 .膝柄木属植物在我国首次发现 [J].广西林业科技 ,
1988,(1):33-34.
[3] 李先琨 .广西珍稀濒危植物优先保护评价 [J]. 广西科学院学
报 ,1997,13(3):9-16.
[4] H. Gillett.Forest occurring species of conservation concern: Review
of status of information for FRA 2000 (July 2001)[M]. UNEP World
Conservation Monitoring Centre, Cambridge, UK, 2001.
[5] 汪 松 ,解 焱 .中国物种红色名录 [M].北京 :高等教育出版
社 ,2004.
[6] 莫竹承 ,范航清 ,李蕾鲜 ,等 .濒危植物膝柄木生存现状及其
恢复对策 [J].广西科学院学报 ,2008,24(2):134-137.
[7] 尹淑莲 ,郭伟珍 ,林 艳 ,等 .南蛇藤试管苗生根培养基及移
栽基质的筛选 [J].林业科学 ,2006,31(3):5-7.
[8] 郭伟珍 ,林 艳 ,邢存旺 ,等 .南蛇藤的组织培养和快速繁
殖 [J]. 植物生理学通讯 ,2005, 41(5):645.
[9] 马 艳 ,肖娅萍 , 胡雅琴 .苦皮藤组织培养与植株再生 [J].中
草药 ,2003,34(10):4-7.
[10] 福 圊 ,刘贤旺 .云南美登木的组织培养 [J].江西中医学院学
报 ,1991,3(2):42-43.
[11] 程治英 ,王锦亮 ,蒙桂英 .美登木的茎段培养 [J]. 植物生理学
通讯 ,1984,(2):38.
[12] 邱运亮 ,段鹏慧 ,赵 华 .植物组培快繁技术 [M].北京 :化学
工业出版社 ,2010.
[13] 高宇琼 ,赖钟雄 .金花茶体胚和叶片愈伤组织培养 [J].亚热
带农业研究 ,2010,6(2):130-135.
[14] 上官新晨 ,郭春兰 ,蒋 艳 ,等 .培养基和植物激素对青钱
柳茎段和叶片愈伤组织诱导的研究 [J].江西农业大学学报 ,
2006, 28(5): 678-682.
[15] J. M. P. Porto,P. Duarte, R. Paiva, et al. Induction and
Characterization of embryogeneic callus in Cotyledons Leaves
of Tabebuiaroseo alba[J]. Journal of Agricultural Science and
Technology B 2(2012), 950-955.
（下转第 39页）
39第 35卷 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报
and Management, 2004,200:347- 360.
[37] Hunziker U, Brang P. Microsite patterns of conifer seedling
establishment and growth in a mixed stand in the Southern
Alps[J]. Forest Ecology and Management, 2005,210:67-79.
[38] 尹华军 ,程新颖 ,赖 挺 ,等 .川西亚高山 65年人工云杉林种
子雨、种子库和幼苗定居研究 [J].植物生态学报 ,2011,35(1):
35-44.
[39] O’brien M J,O. haraK L, Erbilgin N, et al. Overstory and shrub
effects on natural regeneration processes in native Pinus radiata
stands[J]. Forest Ecology and Management, 2007,240:178-185 .
[40] Zimmerman JK, Pascarella J B, Aide T M. Barriers to forest
regeneration in an abandoned pasture in Puerto Rico[J].
Restoration Ecology, 2000,8:350-360 .
[41] 胡 蓉 ,林 波 ,刘 庆 .林窗与凋落物对人工云杉林早期更
新的影响 [J].林业科学 ,2011,47(6):23-29.
[本文编校：吴 彬 ]
[16] LIN Na, YUHAN Kai-zong, XIAO Li-na, et al. Study on the
Callus Induction of Wild Arabidopsis thaliana Leaves[J].
Agricultural Science＆ Technology, 2011,12(1):82-84,107.
[17] 张丽杰 ,赵丽蒙 ,韩冬雪 ,等 .珍贵阔叶树种刺楸离体繁殖技
术 [J].经济林研究 ,2014,32(4):127-134.
[18] 唐佳佳 ,尚旭岚 ,洑香香 .黑荆树愈伤组织诱导、增殖与分
化 [J].中南林业科技大学学报 ,2014,34(9):38-43.
[19] 金亚征 ,俞凤芳 ,车瑞香 ,等 .药用百合组织培养快繁技术研
究 [J].经济林研究 ,2013,31(1):124-128.
[20] Z. D. Dalila,H. Jaafar and A. A. Manaf. Effects of 2,4-D and
kinetin on callus induction of Barringtonia racemosa leaf and
endosperm explant in different types of basal media[J].Asian
Journal of Plant Sciences,2013,12(1):21-27.
[21] G . Chaâban i , J . Taba r t ,C . Keve r s , e t a l . E ff ec t s o f
2,4-dichlorophenoxyacetic acid combined to 6-Benzylaminopurine
on callus induction, total phenolic and ascorbic acid production,
and antioxidant activities in leaf tissue cultures of C rataegus
azarolus L. var. aronia[J]. Acta Physiologiae Plantarum, 2015,
37(16):
[22] S. Cumar, M. Mangal, A. K. Dhawan, et al. Callus induction and
plant regeneration from leaf explants of jojoba[J]. India Journal
of Biotechnology,2013,12:544-547.
[23] S. Kintzios, A. Nikolaou, M. Skoula. Somatic embryogenesis and
in vitro rosmarinic acid accumulation in Salvia officinalis and
S. fruticosa leaf callus cultures[J]. Plant Cell Reports, 1999, 18:
462-466.
[24] 郭君丽 ,王俊甫 ,蒋福稳 ,等 .光质和 2,4-D对 47号怀山药叶
片愈伤组织诱导形成的影响 [J].北方园艺 ,2012,(15):174-176.
[25] 崔 美 ,焦其庆 ,陈学森 ,等 .苹果叶片愈伤组织的诱导培
养 [J].山东农业科学 ,2012,44(3):17-20.
[26] 林 超 ,马新业 ,刘 锋 ,等 .白木香叶片外植体愈伤组织诱
导研究 [J].北方园艺 ,2013, (8):97-100.
[本文编校：吴 彬 ]
（上接第 17页）