全 文 ：　　基金项目:安徽省高等学校省级自然科学研究重点项目(No.2006KJ095A)
作者单位:1.安徽医科大学(合肥 230032);2.安徽医科大学第一附属医院
通讯作者:李　俊 , Tel:0551-5161131, E-mail:lijun@ahmu.edu.cn
豹皮樟总黄酮降低 2型糖尿病大鼠血糖的
可能机制研究
孙玉秀 1　鲁云霞 1　汪凌云 1　李丹丹 1　章　秋 2　张吕钊 1　杨　枫 1　李　俊 1
摘要 目的 探讨豹皮樟总黄酮降低 2型糖尿病(T2DM)大鼠血糖的可能机制 。方法 T2DM大鼠给
予豹皮樟总黄酮(totalflavonoidsoflitseacoreana, TFLC, 400 mg/kg)或阳性对照药二甲双胍(MET, 400 mg/
kg)灌胃治疗 6周 。各组大鼠空腹血清作常规生化指标测定 ,肝脏作 HE染色和透射电镜观察;肝匀浆作丙
二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)分析;RT-PCR检测大鼠肝脏中蛋白酪氨酸磷酸酶 1B(proteintyrosine
phosphatase1B, PTP1B)的表达。结果 糖尿病大鼠经 TFLC或 MET治疗后葡萄糖耐量明显改善 ,空腹血糖
(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素(FINS)、游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密
度脂蛋白胆固醇(LDL-C)显著下降 ,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显增加 ,肝匀浆 MDA含量下降 , SOD
活性升高 , 2个治疗组的各指标之间差异无统计学意义。光镜下 T2DM组肝脏有明显的脂肪变性 ,电镜下肝
脏线粒体肿胀 ,内质网断裂 , TFLC组和 MET组均有不同程度的改善 。T2DM组肝脏中 PTP1B的表达明显升
高 , TFLC组 PTP1B表达显著降低 , MET组 PTP1B的表达无明显改变 。结论 TFLC可明显降低血糖和血
脂 ,减轻肝脏组织的氧化应激 ,其改善胰岛素抵抗 ,可能与其降低 T2DM大鼠肝脏中 PTP1B的表达 ,增强胰
岛素信号通路有关 。
关键词 2型糖尿病大鼠;豹皮樟总黄酮;蛋白酪氨酸磷酸酶 1B;降血糖;胰岛素信号通路
StudyontheMechanismofActionofTotalFlavonoidsofLitseaCoreanaforReducingBloodGlucose
LevelinRatwithType2 DiabetesMelitusSUNYu-xiu, LUYun-xia, WANGLing-yun, etalDepartmentofBio-
chemistry, AnhuiMedicalUniversity, Hefei(230032)
ABSTRACT　Objective ToexplorethepossiblemechanismoftotalflavonoidsofLitseacoreana(TFLC)
onreducingbloodglucoselevelinratwithtype2diabetesmelitus(T2DM).Methods MaleSDratsofT2DMal-
locatedintwogroupsweretreatedwith400mg/kgTFLCormetforminrespectivelyviagastrogavagefor6weeks.
Bloodroutinebiochemicalindicesinratsweremeasured;pathologyofrats′liverwasexaminedwithHEstainun-
dertransmissionelectronmicroscopy;levelsofmalondialdehyde(MDA)andsuperoxidedismutase(SOD)in
liverhomogenateweredetermined, andtheexpressionofproteintyrosinephosphatase1B(PTP1B)inliverwas
detectedusingRT-PCRattheterminaloftheexperiment.Results Biochemicalmeasuringshowedthattheglu-
cosetoleranceofratsaftertreatmentwasmarkedlyimprovedinbothgroups.Meantime, levelsoffastbloodglu-
cose(FBG), glycohemoglobin(HbA1c), fastbloodinsulin(FINS), freefatyacid(FFA), totalcholesterol
(TC), triglyceride(TG)andlowdensitylipoprotein-cholesterol(LDL-C), aswelasMDAlevelinliverwerede-
creased, whilelevelsofhighdensitylipoprotein-cholesterol(HDL-C)inbloodandSODinliverweresignificantly
increasedinbothgroupsaftertreatment, showinginsignificantdiferencebetweentwotreatmentgroups.Light
microscopicexaminationshowedmarkedlyfatydegenerationofliver, andelectronmicroscopicexamination
foundmitochondriaswelingandendoplasmicreticulumbreakageinliverofT2DMrats, butthesechangeswere
amelioratedtosomeextentaftertreatment.TheelevatedPTP1BexpressioninliverofT2DMratswasdecreased
intheTFLCtreatedgroup, butunchangedinthemetformintreatedgroup.Conclusion TFLCcansignificantly
decreasethebloodlevelsofglucoseandlipidandameliorateoxidationstressinliver;itsmechanismofactionin
improvinginsulinresistancemightberelatedwithitssuppressiononPTP1Bexpressioninrat′slivertoenhance
·617·中国中西医结合杂志 2010年 6月第 30卷第 6期 CJITWM, June2010, Vol.30, No.6
theinsulinsignalingpathway.
KEYWORDS ratwithtype2diabetesmelitus;totalflavonoidsofLitseacoreana;proteintyrosinephospha-
tase1B;bloodglucosereducing;insulinsignalingpathway
近年来 2型糖尿病(T2DM)的患病率和发病率在
逐年提高 ,但关于 T2DM的病因学国内外一直颇有争
议 。对人体和动物模型的研究表明 , PTP1B可导致胰
岛素受体去磷酸化 ,衰减胰岛素信号 ,引起胰岛素抵抗
(insulinresistance, IR),瘦素抵抗(leptinresistance)及
影响脂代谢等而导致肥胖症和 T2DM的发生 〔1〕。
豹皮樟(LitseacoreanaLeve)属樟科 、木姜子属 ,老
鹰茶是豹皮樟的树叶按茶叶生产方法加工的饮品 ,俗
称 “白茶 ”,我国南方各民族民间长期饮用 ,属于纯天
然绿色有机保健饮品 。
药理学实验证明豹皮樟总黄酮(totalflavonoidsof
litseacoreana, TFLC)具有抗氧化 、降血脂 、抗炎及免疫
调节等功效 ,且没有剂量限制性毒性和明显不良反
应 〔2, 3〕。有文献报道 TFLC具有明显的降血糖作用 ,其
机制可能与其促进胰岛素分泌和调节脂质代谢紊乱有
关 〔4〕。本实验室前期实验证实 TFLC对重组人 PTP1B
蛋白(rhPTP1B)的活性有明显的抑制作用 〔5〕 ,故拟在
动物整体水平上进一步证实 TFLC与 PTP1B的关系 ,
并探讨 TFLC降低 T2DM大鼠血糖的可能机制。
材料与方法
1　材料
1.1　动物　雄性 Spague-Dawlay(SD)大鼠 58
只 ,清洁级 ,体重(180±20)g,由安徽医科大学动物实
验中心提供 。
1.2　药物及试剂　TFLC由安徽医科大学药学院
天然药物化学室研制〔6〕 ,取豹皮樟干燥叶片 ,乙醇提
取 ,乙醚萃取而得 ,用 0.4%羧甲基纤维素钠溶解。二
甲双胍(MET),片剂 ,深圳中联制药有限公司 , 批号
0803103,用时以无菌生理盐水配成混悬液。链脲佐菌
素(streptozotocin, STZ)和完全弗氏佐剂(completefre-
undsadjuvant, CFA):Sigma公司;空腹血糖(FBG)、总
胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、高
密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇
(LDL-C)测定试剂盒:南京建成生物工程研究所产品;
糖化血红蛋白(HbA1c)试剂盒:上海名典生物工程有
限公司;空腹胰岛素 (FINS)放免分析试剂盒:北京北
方原子能研究所(批号 081020);凝胶图像分析软件:
Gel-Pro3.1;用软件 PrimerExpress设计引物 ,由上海
生工生物工程技术服务有限公司合成 。
2　方法
2.1　造模　将 SD大鼠随机分为对照组(NC)12
只和模型 (T2DM)组 46只。 NC组不做任何处理。
T2DM组参照孙俊英等 〔7〕的方法制备 T2DM模型 ,在
脂肪乳剂灌胃 22周后行高胰岛素 -正常血糖钳夹实
验确定 IR,腹腔注射 12 mg/kgSTZ, 次日腹腔注射
CFA, 0.5 mL/kg,每周 1次 ,每次注射后 3天取尾血测
定 FBG, FBG>7.8 mmol/L以上者确定为造模成功 , 3
次均不达标者退出实验。
2.2　给药方法　随机将造模成功的 39只大鼠分
为 T2DM组 、TFLC治疗组和 MET治疗组。实验药物
根据大鼠体重灌胃给药 , TFLC剂量为 400 mg/(kg·
d);MET剂量为 400 mg/(kg· d),持续 6周。 NC组
和 T2DM组以无菌生理盐水灌胃 。
2.3　口服葡萄糖耐量试验(oralglucosetolerance
test, OGTT)　每组大鼠各取 6只 ,用 50%葡萄糖溶液
(2g/kg)灌胃 ,于空腹及服糖后 0.5、1、2 h取尾血测
定血糖 。
2.4　血清生化指标测定　治疗结束后各组大鼠
行股静脉放血 ,分离血浆测 HbA1c含量 ,分离血清测
FBG、TC、TG、FFA、HDL-C、LDL-C、FINS,其中 HbA1c
采用 HPLC法确定。
2.5　肝脏组织的形态学观察和肝匀浆的 MDA
含量 、SOD活性测定　迅速摘取少量肝脏组织 , 2.5%
戊二醛溶液固定 , PBS洗涤 , 1%锇酸后固定 ,梯度乙醇
逐级脱水 ,环氧树脂包埋 ,超薄切片 ,醋酸铅和醋酸铀
电子染色 ,用日产 JEM-1230型透射电镜观察摄像;取
肝脏组织常规 HE染色 ,光镜下观察拍照;肝脏组织匀
浆后离心取上清 ,分别测定 MDA含量和 SOD活性 。
2.6　肝脏组织中 PTP1BmRNA表达水平的分析
提取肝脏组织总 RNA,逆转录成 cDNA, PTP1B引物
上游为 5′-CATCGAGGGCGCCAAGTTCATCA-3′, 下游
为 5′- AGACGCCGCAGACCGCATCCTA-3′, 529 bp,
GAPDH(内参)上游为 5′-TGCCACTCAGAAGACTGT-
GG-3′,下游引物为 5′-TGTGAGGGAGATGCTCAGTG-
3′, 575 bp。PCR反应为 94℃ 40 s, 58 ℃ 40 s, 72 ℃
40 s,共 35个循环 ,琼脂糖凝胶电泳后照相 ,进行半定
量分析 。
3　统计学方法　所有数据均以 x±s表示 , 用
SPSS11.5统计软件进行单因素的方差分析。
·618· 中国中西医结合杂志 2010年 6月第 30卷第 6期 CJITWM, June2010, Vol.30, No.6
结 果
1　T2DM大鼠的成模率　本实验一共有雄性 SD
大鼠 58只 ,随机选取 12只作为 NC组 ,其余为高脂喂
养组 ,给予高脂肪乳剂灌胃 。 22周后行腹腔注射 STZ
和 CFA造模 , 4只大鼠可能由于个体差异血糖值未能
达标退出实验 ,死亡 3只 ,将造模成功的 39只大鼠随
机分为 T2DM组 、TFLC组和 MET组。至终点时 , NC
组共死亡 2只 ,剩 10只;T2DM组死亡 3只 ,剩 10只;
TFLC组死亡 3只 , 剩 10只;MET组死亡 2只 ,剩 11
只 。死亡原因主要为灌胃不当 、感染及麻醉意外等 。
2　各组大鼠的 OGTT结果比较(表 1)　T2DM组
的 FBG及服糖后 0.5、1及 2h的血糖值均显著高于 NC
组 ,而 TFLC及 MET组 FBG及服糖后 0.5、1及 2h的血
糖值均低于 T2DM组(P<0.01),表明 T2DM组的葡萄
糖耐量显著降低;经过治疗后 , TFLC及 MET组 2h的血
糖值均接近 NC组 ,表明其葡萄糖耐量明显改善 。
表 1 各组大鼠的 OGTT结果比较 (mmol/L, x±s)
组别 n 血糖
0h 0.5h 1.0 h 2.0h
NC 6 6.90±1.43 20.60±3.04 9.92±1.46 6.81±1.57
T2DM 6 15.45±2.53＊ 28.40±3.15＊28.00±3.23＊ 24.80±4.15＊
TFLC 6 6.73±1.28■ 20.72±2.49■15.45±1.25＊■ 7.43±1.98■
MET 6 8.00±2.20■ 19.31±2.56■15.80±1.58＊■ 7.22±1.64■
　　注:与 NC组比较 , ＊P<0.01;与T2DM组比较 , ■P<0.01
3　各组大鼠血清生化指标比较(表 2)　结果显
示 , TFLC和 MET组血液中 FBG、HbA1c、FINS、TC、TG、
FFA均较 T2DM组显著降低(P<0.01);两组比较差异
无统计学意义(P>0.05),说明 TFLC组能明显改善
T2DM大鼠的高血糖和高血脂状态 ,降低 FFA含量 。
4　肝脏 HE染色结果　HE染色光镜观察 NC组
肝细胞排列整齐 ,肝小叶规则 ,细胞中央有大而圆的
核 ,细胞质均匀。 T2DM组肝细胞肿胀 ,细胞内可见大
小不等的脂滴空泡 ,小叶内及汇管区有炎细胞浸润。
TFLC组和 MET组能减少肝细胞内脂滴空泡数目 ,减
轻炎细胞浸润 ,较好地保护肝细胞(图 1)。
进一步观察肝脏的电镜下病理改变。在透射电镜
下 NC组肝细胞细胞核周隙正常 、内质网排列整齐 ,线
粒体形态正常 ,无扩张。 T2DM组肝细胞内可见线粒
体肿胀 ,内室肿胀 ,嵴减少 ,形成较宽的电子透亮区 ,出
现空泡化;内质网扩张 ,断裂 ,形成筛状结构;核周隙增
宽 ,细胞质内有大小不等的脂滴 。TFLC组可见细胞质
内有少量脂滴 ,内质网有断裂现象 ,线粒体轻度扩张 ,
核周隙恢复正常 。MET与 TFLC结果相似。结合肝指
表 2 各组大鼠血清生化指标比较 ( x±s)
组别 n FBG(mmol/L)
FINS
(mU/L)
HbA1c
(%)
TC TG LDL-C HDL-C FFA
(mmol/L)
NC 10 3.84±0.38 13.10±1.90 9.05±0.60 1.11±0.25 0.86±0.04 0.23±0.06 2.03±0.69 0.65±0.14
T2DM 10 13.79 ±1.87＊ 18.49±1.34＊ 18.22±1.5＊ 8.54±0.56＊ 4.21±0.33＊ 4.33±0.94＊ 1.29±0.54＊ 1.54±0.39＊TFLC 10 4.47±0.42■ 13.74±2.94■ 10.34±0.9■ 2.86±0.30■ 1.57±0.25■ 0.23±0.07■ 1.86±0.22■ 0.57±0.23■
MET 11 7.97±0.94■ 16.32±3.77■ 10.88±1.1■ 3.02±0.21■ 2.08±0.40■ 0.34±0.11■ 1.57±0.16■ 0.93±0.32■
　　注:与 NC组比较 , ＊P<0.01;与T2DM组比较 , ■P<0.01
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数(肝重 /体重)、肝匀浆的 MDA和 SOD数据 , TFLC能
较好地逆转 T2DM大鼠肝脏的氧化应激(图 2和表 3)。
表 3 各组大鼠肝脏代谢指标的变化比较 ( x±s)
组别 n 肝脏指数 MDA(nmol/mgpro)
SOD
(U/mgpro)
NC 10 2.56±0.20 4.84±1.21 23.05±4.83
T2DM 10 3.61±0.37＊ 13.01±2.92＊ 8.14±2.95＊
TFLC 10 2.79±0.24■ 6.77±1.53■ 15.52±3.46■
MET 11 2.91±0.33■ 8.36±1.74■ 12.51±3.22■
　　注:与 NC组比较 , ＊P<0.01;与T2DM组比较 , ■P<0.01
5　肝脏组织中 PTP1B表达量的改变 　RT-PCR
的结果显示:NC组 PTP1B低表达 , T2DM组 PTP1B高
表达 , TFLC组表达最低 , MET组表达居中(图 3)。半
定量分析结果表明与 NC组 (44%)相比 , T2DM组
PTP1B明显高表达(242%, P<0.01);而 TFLC组可明
显降低 PTP1B的表达(34%),与 NC组比较 ,差异无
统计学意义(P>0.05), MET组 PTP1B表达也降低
(91%),但没有 TFLC组明显。
由上述结果证实 , T2DM大鼠肝脏组织中 PTP1B
高表达 ,而 TFLC可降低 T2DM大鼠 PTP1B的表达 ,
MET组基本上不影响 PTP1B的表达;TFLC降低血糖
的体内作用靶点之一很可能在 PTP1B上。
讨 论
糖尿病的发病机制复杂 ,与环境因素和遗传因素
的共同作用有关 。胰岛素抵抗(Insulinresistance, IR)
与胰岛功能受损是 T2DM的发病机理中不可缺少的两
个重要因素 ,尤以前者为甚 。在糖尿病发生前 IR往往
已经存在 ,其主要原因是骨骼肌中胰岛素促进葡萄糖
摄取和代谢的作用减弱 ,即胰岛素信号通路的减弱。
本研究先用高脂乳剂灌胃雄性 SD大鼠 ,造成大鼠 IR,
再给予小剂量的 STZ和次日小剂量 CFA联合加强破
坏部分胰岛 ,虽然造模时间较长 , 但成模率高 ,高达
84.8%(39/46)。
现有的治疗 T2DM药物主要着眼于高水平的血糖
而非导致高血糖的原因 ,不能完全针对糖尿病的病理
生理变化 , 需要长期服药 , 药物副作用大。吕雄文
等 〔4〕研究了 TFLC对糖尿病小鼠和大鼠模型的降血糖
作用及部分机制 ,结果表明 TFLC具有良好的降血糖
活性 ,可能是通过直接刺激胰岛 β 细胞释放胰岛素 、
保护胰岛 β细胞或促进受损 β细胞修复 、抑制过多内
源性肝葡萄糖生成和调节脂质代谢紊乱等多种途径发
挥作用 ,本研究结果表明 TFLC能降低空腹血糖和血
脂 ,改善糖耐量 ,修复受损的 β细胞 。
T2DM患者组织线粒体功能障碍和线粒体数量减
少 、氧化磷酸化受损是造成组织胰岛素抵抗的重要原
因之一 〔8〕。腹部大量脂肪沉积 ,血 FFA水平升高 ,导
致肝脏 IR和胰岛 β细胞功能衰退 ,是发生 T2DM的重
要机制之一 。 TFLC能减轻血清 FFA含量 ,进而减少
FFA对胰腺的毒性作用 ,同时降低肝脏中 MDA含量 ,
升高 SOD活性 ,减少肝细胞中的氧化应激。病理照片
显示 TFLC能减少肝细胞内脂滴数目及减轻内质网断
裂情况 。
有关 TFLC降低 T2DM大鼠的血糖及 PTP1B与
TFLC的关系尚未见文献报道 。PTP1B表达的靶组织
主要有肝脏 、骨骼肌和脂肪组织等 , 我们重点讨论
TFLC能否改善 T2DM大鼠肝脏的病理学变化和改变
肝脏 PTP1B基因的表达。研究结果表明 , TFLC能显
著改善肝脏的病理学变化 ,降低 PTP1B在肝脏组织中
的表达 。
对于黄酮类化合物抗糖尿病及其并发症的药理作
用研究大多在实验阶段 ,临床试验仅是少部分。由于
天然植物或药物中的黄酮类化合物毒性小 ,不仅可降
低血糖 ,且可抑制并发症的发展 ,因此应用总黄酮化合
物作为治疗药物及从黄酮类化合物中提取新的有效成
分 、研究其药理药效 〔9〕 ,国内外都十分重视。
目前已被证实具有降糖作用的植物种类很多 ,根
据其应用的方式 、广泛程度和历史可大致分为常用蔬
菜 、茶叶 、谷物 、植物药等 4类。近年来国内外对茶叶
的深入研究表明 ,茶叶富含多种矿物质 、氨基酸等营养
成分以及茶多酚 、儿茶素等具有多种保健作用的功能
因子 ,特别是对茶叶降糖作用的研究成果为糖尿病患
者提供了一种简便易行 、便于长期坚持且十分经济的
控制病程发展的方法 。
参 考 文 献
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(收稿:2009-04-27　修回:2010-03-15)
2010中国医师协会中西医结合医师大会第一轮通知
　　2010中国医师协会中西医结合医师大会定于 2010年 11月 5— 7日在上海国际会议中心 、上海世博会议大酒店举行。会议由
中国医师协会中西医结合医师分会主办 ,复旦大学附属中山医院 、中国中西医结合杂志社 、《中华脑血管病杂志(电子版)》编辑部
承办 , 中国中医科学院西苑医院 、第二军医大学长征医院 、复旦大学附属华山医院 、复旦大学附属肿瘤医院 、第二军医大学长海医
院 、上海中医药大学 、北京粲业医药科技发展中心等多家机构协办。现将有关事项通知如下。
征文范围与论文摘要格式　(1)中西医结合 、中医 、西医临床或基础研究;(2)未来中西医结合医学展望;(3)医师维权与自律
的策略与展望;请将论文摘要及作者简介(字数 500字以内 , 不需要全文)与一张两寸彩色照片 , 在 2010年 7月 30日以前通过电子
邮件 word文档发送至 dingfangcai@163.com;联系人:蔡定芳 , Tel:13701645937。参加会议人员注册方法 , 请登录中国医师协会中西
医结合医师分会网站 http://www.cmda-dsim.cn;联系人:安静 ,贾春艳 , 朱鑫明;电话:010-51655678转 806, 802, 801。
第三次全国中西医结合内分泌代谢病学术大会暨糖尿病论坛征文通知
　　“第三次全国中西医结合内分泌代谢病学术大会暨糖尿病论坛”将于 2010年 10月 22日— 25日在山东召开 , 大会由中国中西
医结合学会内分泌专业委员会主办 ,山东省中西医结合学会内分泌专业委员会 、北京中医药学会糖尿病专业委员会协办。会议将
邀请国内外著名专家就内分泌代谢疾病最新进展做专题报告 ,重点研讨内分泌疾病治疗领域热点 、难点问题 , 介绍和推广新技术 、
新经验。本次会议还将增选专业委员会常务委员 、委员 , 并成立 “中国中西医结合学会内分泌专业委员会青年委员会”,举办学术论
坛。
征文内容　(1)糖尿病:糖尿病 、糖耐量异常 、糖尿病肾病 、糖尿病心脏病 、糖尿病脑血管病 、糖尿病神经病变 、糖尿病足 、糖尿病
视网膜病变 、糖尿病急症的中西医结合诊治;糖尿病饮食治疗 、糖尿病运动治疗等非药物疗法;糖尿病教育;1型糖尿病;CGMS监测
的临床应用;2型糖尿病干预研究及应用前景;中西医结合科研方法在糖尿病研究领域的应用;中西医结合糖尿病专科建设思路与
方法;中医药防治糖尿病及其并发症的机理研究 、中医药防治糖尿病及其并发症的药物开发;糖尿病易感基因研究现状 、胰岛 β 细
胞功能评估方法 、单基因突变糖尿病临床研究等。 (2)代谢综合征:肥胖及其相关病的诊断与治疗;代谢综合征的概念探讨及干预
研究。 (3)甲状腺疾病:甲亢 、甲亢突眼 、甲减 、甲状腺炎 、甲旁亢 、甲旁减的诊治和相关基础研究。 (4)其他内分泌代谢病:痛风与高
尿酸血症 、骨质疏松及代谢性骨病 、内分泌高血压 、下丘脑 --垂体 、肾上腺 、性腺疾病 、生长发育调节等诊治和相关基础研究。 (5)
糖尿病学科建设与专病管理。
征文要求　论文使用 word格式排版 , 请提交电子版全文和 800 ～ 1 000字摘要各 1份 , 通过 E-mail发送至:weijunping@126.
com;同时将打印稿寄至:北京市宣武区北线阁 5号(邮编 100053)魏军平收;信封及 E-mail上均请注明 “全国中西医内分泌大会投
稿”;请自留底稿 , 恕不退稿。
截稿日期　2010年 8月 31日。
·621·中国中西医结合杂志 2010年 6月第 30卷第 6期 CJITWM, June2010, Vol.30, No.6