全 文 ：第 38 卷 第 1 期
2009 年 1 月
内蒙古师范大学学报(自然科学汉文版)
Journal of Inne r Mongolia Norma l Unive rsity(Natural Science Edition)
Vo l.38 No.1
Jan.2009
收稿日期:2008-07-18
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30570344)
作者简介:杨　静(1985-),女 ,江西九江人 ,天津师范大学硕士研究生 ,主要从事化学生态学研究
通讯作者:刘　强(1953-),男 ,内蒙古包头人 ,天津师范大学教授 ,主要从事生态学研究 , E-mai l:lqt jnu@126.com.
鄂尔多斯半日花粗提物对七种植物病原菌的抑菌性
杨　静 , 田　蕾 , 刘　强 , 高雯芳
(天津师范大学 化学与生命科学学院 , 天津 300387)
摘　要:为了探讨鄂尔多斯半日花的保护措施及其科学利用价值 , 测定了该植物 6 种不同溶剂的粗提物在
100 g/ L时对番茄镰刀茎病菌 、稻曲病菌 、棉花黄萎病菌 V 991 、黄瓜黑星病菌 、芦笋茎枯病菌 、葡萄炭疽病菌和苹果
黑星病菌 7种植物病原菌的抑菌活性.结果表明 , 乙酸乙酯粗提物的总体抑菌效果最好 , 对番茄镰刀茎病菌 、棉花
黄萎病菌 V 991和黄瓜黑星病菌的抑菌活性很强 , 抑菌率均高达 100%, 对稻曲病菌亦达 80.1%;水煮粗提物对
5 种植物病原菌抑菌活性较强;6 种粗提物对芦笋茎枯病菌的抑菌活性普遍偏低.
关键词:鄂尔多斯半日花;粗提物;抑菌活性
中图分类号:Q 946.887　　文献标识码:A　　文章编号:1001--8735(2008)06--0076--03
鄂尔多斯半日花(Helianthemum ordosicum)为西鄂尔多斯荒漠特有植物 ,也是古地中海孑遗植物 ,被
列为国家二级保护植物[ 1] .关于该植物的生物活性研究尚不多见 ,仅见文献 [ 2] 对棉花黄萎病菌 V 43-1和棉
花枯萎病菌等 4种植物病原菌的抑菌活性研究 ,该研究表明鄂尔多斯半日花的粗提物中含有对某些植物病
原菌较强的抑菌活性物质 ,不同溶剂粗提物对不同的植物病原菌的抑菌活性存在差异.本文测定了该植物的
不同溶剂粗提物对番茄镰刀茎病菌(Fusarium sp.)和黄瓜黑星病菌(Cladosporium cucurerinun)等 7种植
物病原菌的抑菌活性 ,结果表明其对测试菌种多表现出较好的抑菌活性 ,这进一步为该植物含有较广谱的抑
菌活性物质提供了证据.
1　材料和方法
1.1　材料
鄂尔多斯半日花采自内蒙古乌海市 ,于 2006年 6-7月全株采收 ,阴干后用粉碎机粉碎 ,过 20目筛 ,备
用.粗提溶剂为石油醚 、二氯甲烷 、乙酸乙酯 、丙酮 、甲醇(均为分析纯 ,天津化学试剂六厂三分厂生产)和水.
供试菌种为番茄镰刀茎病菌(Fusarium sp.)、稻曲病菌(Ust i lag inoidea virens)、棉花黄萎病菌 V 991
(Vertici l lium dah liae.V 991)、黄瓜黑星病菌(Cladosporium cucurerinun)、芦笋茎枯病菌(Phomopasis as-
paragi)、葡萄炭疽病菌(Colletotrichum ampelinun)、苹果黑星病菌(Venturia inaequal is),除棉花黄萎病菌
V 991由中国农业大学提供外 ,其余菌种由天津植物保护研究所提供.菌种均使用马铃薯培养基(PDA)培养.
1.2　实验方法
1.2.1　植物活性成分提取　有机溶剂粗提物的提取采用冷浸法:称取植物粉末 ,分别浸泡于石油醚 、二氯甲
烷 、乙酸乙酯 、丙酮和甲醇中(料液比为 200 g/500mL).一周后将过滤所得的溶液用旋转蒸发仪蒸馏浓缩 ,得
油状或膏状物质 ,用相应的有机溶剂溶解 ,配制成浓度 100 g/L 的粗提物.水煮粗提物的提取为蒸煮法 ,配制
浓度同上.
1.2.3　抑菌活性测定及统计分析　采用生长速率法[ 3] :在无菌条件下 ,取 0.4mL 粗提物 ,均匀涂布在 PDA
平板上 ,静置 ,待溶剂挥发干 ,扣上直径为 4mm 的菌饼 ,每皿 3个作为重复.以相应的粗提溶剂处理作为对
照.25 ℃下培养 48 h ,用十字交叉法测量菌落大小 ,计算抑菌率 ,公式为
　　　　生长量=菌落平均直径-菌饼直径 ,
　第 1 期 杨　静 等:鄂尔多斯半日花粗提物对七种植物病原菌的抑菌性 　　　
　　　　抑菌率=[(对照生长量-处理生长量)/对照生长量] ×100%.
所有数据均使用 Excel和 SPSS 13.0统计软件进行处理分析.
2　结果与分析
2.1　6种粗提物对 5种植物病原菌的抑菌活性
测定 6种粗提物对 5种供试菌的抑菌率 ,并分别比较每种粗提物对不同病原菌抑菌率的差异 ,见表 1.
表 1　不同粗提物对 5种菌的抑菌活性
Tab.1 The fungistasis of the different ex tracts on five kinds o f fungi
粗提物种类　
番茄镰刀茎病菌 稻曲病菌 棉花黄萎病菌 V 991 黄瓜黑星病菌 芦笋茎枯病菌
处理生长量/mm 抑菌率% 处理生长量/mm 抑菌率/ % 处理生长量/mm 抑菌率/ % 处理生长量/mm 抑菌率/ % 处理生长量/mm 抑菌率%
石油醚 11.8 40.9±5.8a 8.8 26.4±6.1a 1.1 41.0±6.3a 5.3 33.3±3.6a 2.5 40.5±0.0a
二氯甲烷 15.8 17.0±1.8c 9.8 0.0±4.4d 1.4 65.3±5.4b 1.3 85.2±1.4a 2.6 54.5±6.3b
乙酸乙酯 0.0 100.0±0.0a 2.3 80.1±10.1b 0.0 100.0±0.0a 0.0 100.0±0.0a 2.3 15.3±12.3c
丙酮 14.7 24.1±3.1a 10.5 0.0±7.2a 1.2 39.1±20.5a 6.3 13.6±9.1a 2.6 6.2±13.1a
甲醇 11.0 14.3±4.5bc 7.5 38.4±2.4a 1.2 0.0±0.0c 4.7 46.2±7.6a 1.9 29.1±8.2ab
水 4.3 76.8±1.8b 2.0 84.0±2.3b 0.0 100.0±0.0a 0.0 100.0±0.0a 1.6 21.0±10.9c
　　注　相同字母者表示同一行在 P=0.05 水平差异不显著(SNK 法)
由表 1可知 ,石油醚和丙酮粗提物对 5种菌的抑菌率之间均表现为差异不显著 ,二者的抑菌率较低 ,在
41%以下.乙酸乙酯 、水 、二氯甲烷和甲醇粗提物对 5种菌的抑菌率之间均存在差异 ,有的种类之间存在显著
性差异.乙酸乙酯粗提物对番茄镰刀茎病菌 、棉花黄萎病菌 V 991和黄瓜黑星病菌的抑菌率均达 100.0%,表
现出很强的抑菌活性 ,对稻曲病菌的抑菌率也很高 ,为 80.1%,但对芦笋茎枯病菌的抑菌率很低 ,仅为
15.3%.水煮粗提物对棉花黄萎病菌 V 991 、黄瓜黑星病菌表现出强烈的抑菌活性 ,抑菌率均达 100.0%,对番
茄镰刀茎病菌和稻曲病菌分别为 76.8%和 84.0%,抑菌活性也较高 ,但对芦笋茎枯病菌的抑菌率仅为
21.0%.二氯甲烷粗提物对黄瓜黑星病菌的抑菌率达 85.2%,对棉花黄萎病菌 V 991和芦笋茎枯病菌的抑菌
率为65.3%和 54.5%,对稻曲病菌则没有抑菌活性.甲醇粗提物对稻曲病菌 、黄瓜黑星病菌和芦笋茎枯病菌
的抑菌率之间差异不显著 ,为 29.1%～ 46.2%,对番茄镰刀茎病菌的抑菌率为 14.3%,对棉花黄萎病菌 V 991
没有抑菌活性.
表 2　不同粗提物平均抑菌率及差异比较
　Tab.2 The average of g row th inhibition rates of the different
ex tracts and the diffe rence comparison betw een them
粗提物种类 平均抑菌率/ % P=0.05 P=0.01
石油醚 36.42±6.48 ab AB
二氯甲烷 44.40±35.09 ab AB
乙酸乙酯 79.08±36.68 a A
丙酮 16.60±15.45 b B
甲醇 25.60±18.60 b AB
水 76.36±32.56 a A
2.2　不同粗提物抑菌活性的差异性分析
根据表 1数据分析粗提物种类和供试菌种类
型对抑菌率的总体影响 , 结果为粗提物种类的
F=5.581 , P =0.002 <0.01 , 菌种类型的 F =
2.020 , P=0.130 >0.05.这说明 6 种粗提物和
5种菌种对抑菌率的总体影响不同 ,粗提物种类
对抑菌率的总体影响极显著 ,而菌种类型对抑菌
率的总体影响不显著 ,但从表 1中可以看出 ,同一
粗提物在某些菌种之间的抑菌率差异是显著的.
由于粗提物种类对抑菌率有极显著影响 ,所
以进一步计算出每种粗提物对 5个菌种抑菌率的
平均值 ,并对不同粗提物的平均抑菌率进行 SN K多重比较 ,结果如表 2所示.
由表 2可知 ,在 P=0.05显著水平上 ,不同溶剂粗提物中 ,乙酸乙酯与水之间 、丙酮与甲醇之间无明显
差异 ,但前二者与后两者之间差异显著 ,与石油醚和二氯甲烷之间的差异不显著.在 P =0.01显著水平上 ,
乙酸乙酯与水之间也无明显差异 ,二者与石油醚 、二氯甲烷和甲醇三者间的差异也不显著 ,但与丙酮之间差
异极显著.总体来看 ,丙酮粗提物的总体抑菌活性最差 ,乙酸乙酯和水煮粗提物的总体抑菌活性最强.
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　　　 内蒙古师范大学学报(自然科学汉文版) 第 38 卷　
2.3　乙酸乙酯粗提物对葡萄炭疽病菌和苹果黑星病菌的抑菌活性
表 3　乙酸乙酯粗提物对葡萄炭疽病菌和苹果黑星病菌的抑菌率
　　　Tab.3 The fungistasis of the ex tract by Ethyl ace ta te on
Colletotrichum ampelinun and Venturia inaequalis
供试菌种 处理生长量/mm 对照生长/mm 抑菌率/ %
葡萄炭疽病菌 1.58 7.16 77.93
苹果黑星病菌 0.63 9.25 93.30
　　根据以上对 5 种供试菌的测定结果 ,
6种粗提物中的 5种有机溶剂粗提物中以乙
酸乙酯粗提物的总体抑菌活性最强 ,因此进
一步测定乙酸乙酯粗提物对葡萄炭疽病菌和
苹果黑星病菌的抑菌率 ,结果见表 3.由表 3
可知 ,其抑菌率分别为 77.93%和 93.30%,
说明乙酸乙酯粗提物中含有较广谱的抑菌活性较强的物质.
3　结论与讨论
在 6种溶剂粗提物中 ,乙酸乙酯和水煮粗提物对多数供试菌的抑菌活性强于其他溶剂粗提物 ,且对稻曲
病菌 、棉花黄萎病菌 V 991 、黄瓜黑星病菌和芦笋茎枯病菌的作用效果基本一致.根据文献 [ 2] ,乙酸乙酯和水
煮粗提物对棉花枯萎病菌 、棉花黄萎病菌 V 43-1 、梨黑斑病菌 、扩展青霉的抑菌效果也很强 ,可见对于多数植
物病原菌 ,半日花抑菌活性物质的粗提溶剂以乙酸乙酯和水为首选 ,并且这两种粗提物可能含有相似的抑菌
活性物质 ,从中可进行进一步的活性成分分离和结构鉴定.
石油醚粗提物也含有抑菌活性物质 ,而且对 5种供试菌的抑菌率无明显差异 ,文献 [ 2] 的研究也发现该
粗提物对其中的 2种菌存在类似效果 ,即对扩展青霉和梨黑斑病菌的抑菌率分别为 38.2%和 26.1%.这说
明石油醚粗提物含有对大多数菌种有效的抑菌成分 ,但抑菌率较低.其原因可能有两种:一是在 100 g/L 的
浓度下 ,粗提物中的有效成分含量很低 ,表现出较差的抑菌活性 ,若将该有效成分提纯 ,有可能会获得广谱性
较好的抑菌物质;二是这种有效成分可能具有广谱的抑菌性 ,但抑菌活性很低.
二氯甲烷和甲醇粗提物对 5个菌种的抑菌率之间差异显著 ,前者对黄瓜黑星病菌的抑菌活性显著强于
对其他菌种 ,后者对稻曲病菌 、黄瓜黑星病菌及芦笋茎枯病菌的抑菌活性明显强于其他 2种菌种.丙酮粗提
物是抑菌性最差的粗提物.6种粗提物对芦笋茎枯病菌的抑菌活性普遍偏低.
参考文献:
[ 1] 　傅立国.中国植物红皮书———稀有濒危植物 [ M] .北京:科学出版社 , 1992:218-219.
[ 2] 　田蕾 ,杨静 ,刘强 ,等.鄂尔多斯半日花对 4 种植物病原菌的抑菌性 [ J] .天津师范大学学报:自然科学版, 2007(1):32-38.
[ 3] 　陈年春.农药生物测定 [ M] .北京:北京农业大学出版社 , 1991:76-78.
Antifungal Activities of Ex tracts from Helianthemum
ordosicum on Seven Kinds of Plant Pathogenic Bacterium
YANG Jing , TIAN Lei , LIU Qiang , GAO Wen-fang
(Col lege of Chemistry and Li f e Sciences , Tianjin Normal University , T ianj in 300387 , China)
Abstract:To study the protection of Helianthemum ordosicum and its use value , the antifungal activi-
ties of six dif ferent kinds of ex tracts f rom Helianthemum ordosicum , which concentration is 100 g/L , on
Fusarium sp., Ustilaginoidea virens , Verticil lium dahliae.V 991 ,Cladosporium cucurerinun , Phomopasis as-
paragi ol le to trichum ampelinun ,Venturia inaequalis are studied.The results show that the ex tract by E thyl
acetate has the st rongest ef fect on all five species of fungi , and the highest rate o f inhibition , that achieve
100% on Fusarium sp.,Verticillium dahliae.V 991 and Cladospo rium cucurerinun , and 80.1% on Ustilagi-
noidea virens.Also , the fungistasis of ext ract by w ater is relatively st rong ,while the fung istasis o f six kinds
of ex t racts are all low on Phomopasis asparagi.
Key words:Helianthemum ordosicum ;ex t racts;fungistasis bioactivity 【责任编辑 金淑兰】
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