全 文 ：杭白芷多糖的提取分离及其含量测定
王德才　李同德　高丽君
(泰山医学院药学院·泰安 271000)
摘　要　目的:从杭白芷中提取分离多糖并测定多糖含量。方法:经脱脂 、醇提后 , 用水提醇沉法提取多
糖 ,用苯酚-硫酸法测定杭白芷生药中多糖含量。结果:杭白芷中多糖含量为 15.38%, 平均回收率为99.
03%, RSD=1.56%(n=4)。结论:杭白芷中多糖含量较高 , 具有开发利用价值。
主题词　杭白芷多糖/分离和提纯　杭白芷/分析　多糖
　　杭白芷系伞形科植物 ,是常用中药白芷的品种之一 , 气
芳香 ,味辛苦 , 根入药 ,具有散风除湿 、通窍止痛 、消肿排脓之
功效。对白芷的现代研究多集中在其所含有的香豆素类和
挥发油上 ,具有解热镇痛 、抗菌消炎 、解痉平喘 、降低血压 、预
防肿瘤等药理作用[ 1 ～ 3] ,而对白芷中含量丰富的多糖却研究
甚少。本实验参考文献方法[ 4] , 提取分离杭白芷多糖并测定
其生药中多糖含量 ,以期为白芷多糖的进一步开发利用及其
多糖生物学活性研究奠定基础。
1　实验材料
1.1　药材　杭白芷购自安徽亳州药材市场 , 经本院生药学
教研室周红英教授鉴定为伞形科植物杭白芷 Angelica
dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.et Hook.f.var.formosana
(Boiss.)Shan etYuan的干燥根 ,粉碎成粗粉备用。
1.2　试剂与仪器　石油醚 、乙醇 、丙酮 、氯仿 、正丁醇 、浓硫
酸 、苯酚 、葡萄糖等均为国产分析纯。中药粉碎机 、RE-52A
旋转蒸发仪 、S-54 紫外可见分光光度计 、离心机 、干燥箱等
均为国产仪器设备。
2　方法与结果
2.1　杭白芷多糖的提取与精制　称取杭白芷粗粉 150g , 加 4
倍量石油醚回流脱脂 2 次 , 每次 2 小时;滤渣加 4 倍量 80%
乙醇回流提取 2 次 , 每次 2 小时。经脱脂 、醇提后的滤渣
60℃烘干 ,分别加 6 倍量 、5 倍量 、4 倍量蒸馏水在 95℃水浴
中浸提3 次 ,每次 2 小时 ,合并滤液 , 减压浓缩至200ml左右。
以每 100ml浓缩液加 20ml氯仿正丁醇(4:1)液 ,剧烈振荡 30
分钟 , 以 4000r/min 离心 15 分钟 ,去除下层氯仿及中层变性
蛋白 , 取上部水层再重复去蛋白操作 , 至无明显中层为止。
收集去蛋白后的上部水层 , 加无水乙醇至溶液含醇量达
80%,静止过夜 , 以 4000r/min 离心 15 分钟 , 收集沉淀物 , 再
依次用 95%乙醇 、无水乙醇 、乙醚 、丙酮洗涤各 2 次 ,得多糖
粗品。再以水-乙醇重结晶纯化 2 次 , 60℃烘干 , 得白色粉
末状精制杭白芷多糖 9.68g ,得率 6.45%。
2.2　标准曲线的制备
2.2.1　葡萄糖标准溶液的配制　精密称取 105℃干燥至恒
重的葡萄糖对照品 100mg ,加适量水溶解 ,转移至 100ml容量
瓶中 ,加蒸馏水至刻度 , 摇匀 , 配成 1mg/ml葡萄糖标准液备
用。
2.2.2　5%苯酚溶液的配制　取苯酚 100g , 加铝片 0.1g 和
碳酸氢钠 0.05g , 常压蒸馏 , 收集 182℃馏分 10g , 加蒸馏水
200ml溶解 ,置棕色瓶内放冰箱备用。
2.2.3　标准曲线的制作　分别吸取葡萄糖标准液 10 、20、
40、60 、80、100μl置于大试管中 , 各补加蒸馏水至 2.0ml , 葡萄
糖浓度分别为 5、10、20 、30、40、50μg/ml , 然后各加入 5%苯酚
溶液 1ml ,缓慢沿壁加浓硫酸 5ml , 混匀 , 放置 5 分钟后 , 再沸
水浴加热 15 分钟 ,流水冷却至室温 , 在波长 490nm 处测定吸
光度。以蒸馏水代替葡萄糖溶液作空白对照。结果表明 ,葡
萄糖浓度在 5～ 50μg ml范围内 ,吸光度与浓度具有良好的线
性关系。以吸光度(A)为纵坐标 , 浓度(C , μg ml)为横坐标 ,
绘制标准曲线 , 得回归方程:A=0.0128C -0.0404 , r=0.
9964。
2.3　换算因子的测定　精密称取干燥至恒重的精制杭白芷
多糖 20mg , 置 100ml容量瓶中加蒸馏水 ,定容至刻度 , 作为多
糖储备液。精密吸取多糖储备液 0.2ml , 3 份 , 按标准曲线制
作方法测定其吸光度。
经测定 , 3 份多糖储备液平均吸光度为 0.127 ,从回归方
程中求出多糖液中折合葡萄糖的浓度为 13.08μg/ml。按下
式计算换算因子:F=W/C·D
其中W为多糖的重量(μg), C为多糖液中折合葡萄糖的
浓度(μg/ml), D为稀释因素。测得F=1.5291。
2.4　杭白芷多糖含量的测定　精密称取杭白芷粉末 0.5g , 3
份 , 分别置圆底烧瓶中加 80%乙醇 150ml。回流提取2 小时 ,
趁热抽滤 , 滤渣用80%乙醇洗涤 3次。然后滤渣连同滤纸置
烧瓶中 , 加蒸馏水 150ml , 95℃水浴加热提取 2 小时 , 趁热抽
滤 ,用热水洗涤烧瓶和滤渣 ,洗液并入提取液中 , 待冷却后转
移于 250ml容量瓶中 , 补加蒸馏水定容至刻度 , 如此制作样
品溶液 3 份 ,置冰箱中备用。
精密吸取样品溶液 0.2ml , 按标准曲线制作方法测定其
吸光度。每份样品溶液重复操作 2 次 , 取平均吸光度 。3 份
样品溶液的平均吸光度分别为 0.216 、0.212 、0.223 , 平均 0.
217。从回归方程中求出样品溶液折合葡萄糖浓度为 20.
11μg/ml。按下式计算杭白芷中多糖的百分含量:
多糖含量(%)=C·D·F/W×100%
其中W为杭白芷样品的重量(μg), C为样品液中折合葡
·283·中国中医药科技 2008年 7 月第 15卷第 4 期 Jul.2008 Vol.15 No.4
萄糖的浓度(μg/ ml), D 为样品的稀释因素。计算杭白芷中
多糖含量为 15.38%。
2.5　回收率测定　采用加样回收法。取样品溶液 0.2ml , 4
份 ,分别加入葡萄糖标准液 10、20、40、60μl , 按标准曲线制作
方法测定其吸光度 ,根据葡萄糖的检出量 , 计算其回收率。
回收率(%)=(实验测值-供试品液多糖量)/葡萄糖加
入量×100%。测得平均回收率为 99.03%, RSD=1.56%(n
=4)。
2.6　稳定性试验　将供试品溶液完成显色后 , 每隔 0.5 小
时测吸光度(A)1 次 , 连测 5 次。结果表明 2 小时内稳定性
良好 ,以 A值计算 , RSD=1.27%(n=5)。
3　讨论　多糖是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的
天然高分子聚合物 ,是构成生命的分子基础之一 , 是自然界
含量最丰富的生物聚合物。人们陆续发现 ,多糖不仅作为广
谱免疫促进剂 ,具有免疫调节功能 , 还在抗肿瘤 、抗病毒 、抗
炎 、降血糖 、降血脂 、抗辐射等方面具有广泛的药理作用[ 5] 。
多糖的测定方法很多 ,本实验通过脱脂 , 再以 80%乙醇提取
以除去单糖 、寡聚糖 、苷类及生物碱等醇溶成分 ,再用水提醇
沉法分离多糖成分 , 并以苯酚-硫酸法测其含量。通过回收
率试验和稳定性试验可知 , 本法所测多糖含量 ,简便可靠 、重
现性好 、显色稳定 ,实验结果表明杭白芷中多糖含量丰富 ,达
15.38%。有资料表明 , 白芷多糖主要由鼠李糖 、阿拉伯糖 、
木糖 、甘露糖 、葡萄糖和半乳糖等单糖组成[ 6] ,但其理化性质
及药理学活性还有待于进一步研究。
　　参考文献
1　张富强 ,聂红 ,韦艺 ,等.白芷的化学与药理研究进展.南京中医
药大学学报(自然科学版), 2002, 18(3):190.
2　王德才 ,李珂 ,徐晓燕 ,等.杭白芷香豆素组分解热镇痛抗炎作用
的实验研究.中国中医药信息杂志 , 2005 ,12(11):36.
3　吴耕书 ,张荔彦.五加皮 、茜草 、白芷对毒激素-L 诱导的恶病质
样表现抑制作用的实验研究.中国中医药科技 , 1997, 4(1):13.
4　刘文生 ,薛霖莉 ,卫萍.潞党参多糖的提取及含量测定.安徽中
医学院学报 , 2005, 24(1):42.
5　邓小云 ,丁登峰 ,戴美红 ,等.植物多糖药理作用研究进展.中医
药导报 , 2006 ,12(9):86.
6　康学军 ,曲见松 ,顾忠泽.白芷多糖的分析.分析化学 , 2006 , 34
(4):533. (收稿:2007-07-17)
小承气汤药膜敷脐促进术后胃肠功能恢复的临床观察＊
王宽宇　张石军1■　孙晓龙　陈　静1
(黑龙江中医药大学附属第一医院·哈尔滨 150040　1 黑龙江中医药大学·哈尔滨 150040)
＊黑龙江省中医药管理局基金资助　No.ZHYYR08
■通讯作者
1　临床资料　60例患者全部来自 2007-01～ 2007-06我院普外二
科腹部术后住院病人。其中对照组 30例 ,男 14例 , 女 16例 ,年龄 19
～ 60岁。治疗组 30例 ,男 17例 ,女 13例 ,年龄 21～ 59岁。两组病例
一般资料统计学处理无显著差异(P>0.05),具有可比性。两组均为
腹部术后住院患者。
2　治疗方法　治疗组:术后即开始用药膜敷脐 , 每 8 小时换 1次。
对照组术后均给予常规治疗 ,于术后 6小时开始监听肠音 , 每小时监
听 1次 ,并记录肠鸣音恢复正常的时间 、患者第 1次排气 、排便的准
确时间。所有数据均用 SPSS14.0软件包处理。计数资料用χ2 检验 ,
计量资料用 F检验。
3　结果
3.1　疗效标准　参考 2000年国际公认的罗马Ⅱ标准。
3.2　临床疗效　治疗组 30例 ,治愈 9例 ,显效 14例 ,好转 6例 ,无效
1例 ,总有效率 96.67%。对照组 30例 ,治愈 1例 ,显效 9例 ,好转 11
例 ,无效 9例 ,总有效率 70.00%。两组比较 P<0.01。
3.3　两组间排气 、排便及肠鸣音恢复正常的时间比较　见表 1。
表 2 两组排气 、排便 、肠鸣音恢复时间的比较(x±s , h)
组别 n 第 1次　排气时间　
第 1次　
排便时间　
肠鸣音
恢复正常时间
治疗组 30 25.84±3.57＊＊ 35.35±6.13＊＊ 25.09±3.71＊＊
对照组 30 49.96±5.08 53.68±8.58 48.73±4.68
　　与对照组比较＊P<0.05, ＊＊P<0.01
4　讨论
腹部手术导致消化道功能紊乱的原因是多方面的 ,解剖关系的
改变 ,部分神经支配被阻断以及胃肠神经激素调节等紊乱是造成持
续性功能紊乱的主要原因。将小承气汤溶解于成膜材料(壳聚糖 、明
胶)溶液中用流延法制成膜制剂 ,药膜具有表面活性 ,黏附力强 ,使药
物易于穿透皮肤 ,使药效明显而持久 ,从而达到高效的目的。有研究
表明壳聚糖具有广谱抗菌活性[ 1] ,能促进人表皮细胞生长和局部免
疫调节作用[ 2] ,同时小承气汤[ 3] 具有促进肠蠕动 、抗炎 、改善肠壁血
液循环的作用,在抗病原体 、解热降温 、抑制血小板聚集 、改善凝血机
能 、清除自由基及减轻脏器组织病理损害等方面都有较显著的疗效。
腹部被称为人类第二大脑 , 加之神阙穴皮下组织少 ,皮肤敏感度高 ,
屏障功能差 ,血管分布特殊 ,血液循环好 ,渗透性强 ,药物经脐直接吸
收 ,而未经消化道 , 有效成分破坏较少 , 因此敷脐疗法更为方便 ,安
全 ,疗效更为显著。本研究表明小承气汤药膜敷脐能明显缩短肠鸣
音恢复正常的时间,加速排气排便 ,促进腹部术后胃肠功能的恢复。
　　参考文献
1　蒋玉燕 ,毕忆群 ,蒋建国 ,等.聚氨基葡萄糖体外抗菌活性.中国
抗生素杂志 , 1996, 21(1):54.
2 　Nishmura , Nishimura S , Seo H , et al.Macrophage act ivationwith
multiporous beads prepared from partially deacaly-lated chitin.Biomal
Mater Res , 1986 , 20(3):1357.
3　张文康 ,佘静.中医方剂现代研究.北京:学苑出版社 , 1997:146.
(修回:2008-04-28)
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