全 文 ：＊山东省教育厅科研基金资助项目 No.J04E07
白花丹参茎叶水提物对小鼠缺氧模型的保护作用＊
高允生　齐永秀　李　珂　张继国　马　健　朱玉云
(泰山医学院药学院·泰安 271000)
摘　要　目的:观察白花丹参茎叶水提物对小鼠缺氧模型的保护作用。方法:分别采用异丙肾上腺素 、亚
硝酸钠 、小鼠断头和失血性休克等方法制备缺氧模型 , 观察白花丹参茎叶水提物对缺氧小鼠耗氧量 、存活
时间 、心脏搏动时间和张口呼吸时间的影响 。结果:灌胃给予白花丹参茎叶水提物(20 ～ 30)g/ kg , 能明显
延长断头鼠头的张口呼吸时间 ,缩短亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间和失血性休克小鼠的心脏搏动时间 , 对
异丙肾上腺素所致心肌缺氧小鼠的耗氧量和存活时间无明显影响。结论:白花丹参茎叶水提物对断头小
鼠的脑缺氧具有保护作用。
主题词　缺氧/中医药疗法　@白花丹参茎叶水提物/治疗应用　小鼠
　　白花丹参(Salvia miltiorrhiza bge.f .alba)为唇形科植物丹
参(Salvia miltiorrhiza bge)的白花变型 , 主要分布于山东境内
泰山山脉及其周边地区 ,属珍稀濒危药用植物[ 1] 。丹参古今
皆以根部入药 ,味苦 , 性微寒 ,具有活血化瘀 、通经止痛 、清热
安神等功效[ 2] 。现代药理研究证明 ,丹参能改善心脏功能和
血液流变性 ,调节前列环素/血栓素 A2(PGI2/TXA2)平衡和脂
质代谢 ,广泛用于心脑血管疾病的防治[ 3] , 并可提高机体的
免疫功能[ 4] ,具有抗肿瘤免疫作用[ 5] 。白花丹参除具有丹参
的作用和用途外 , 对治疗血栓闭塞性脉管炎具有独特疗
效[ 1] 。为综合开发利用丹参药物资源 , 笔者对白花丹参根茎
叶中 13 种微量元素进行了分析比较 , 发现各部位均含有丰
富的微量元素[ 6] 。初步药理研究证明 , 白花丹参茎叶水提物
能明显增强小鼠的耐缺氧能力[ 7] 。本文进一步观察了白花
丹参茎叶水提物对小鼠缺氧模型耐缺氧能力的影响。
1　实验材料
1.1　药品　白花丹参茎叶(stem and leaves of salvia miltiorrhiza
bge.f.alba , LSMA),于 2002年 11 月采自泰山东麓 ,制备成不
同浓度(按生药含量计算)水提物供实验用;0.5g·L-1盐酸异
丙肾上腺素注射液(ISO , 上海禾丰制药有限公司 , 批号
030201);亚硝酸 钠(NaNO2 , 长春 市化学试 剂厂 , 批号
9303010);9.0g·L-1氯化钠注射液(NS , 山东华信制药有限公
司 ,批号:04012703)。
1.2　实验动物　昆明种小鼠 , 体重 22 ～ 24g , 由泰山医学院
实验动物中心提供。
1.3　仪器　小动物耐缺氧与耗氧量动态变化同步测定装
置 ,泰山医学院药学院制备[ 8] 。
2　方法与结果
2.1　对异丙肾上腺素致小鼠心肌耗氧量增加的影响[ 8]
取禁食 12 小时小鼠 60 只 , ♀、♂各半 ,按性别和体重随
机分为 5组。其中第 1 ～ 3 组分别灌胃给予(ig)白花丹参茎
叶水提物 10、20 和 30g·kg-1 , 每天 1次 , 连续给药 3天;第 4、5
组分别同法给予等容量氯化钠注射液。末次给药后 25 分
钟 , 第 1～ 4 组腹腔注射(ip)盐酸异丙肾上腺素注射液 20mg·
kg-1 , 第 5组同法注射等容量氯化钠注射液。观察小鼠耗氧
量动态变化和缺氧存活时间。
照文献方法安装小鼠耗氧量动态变化测定装置[ 9] , 调整
液面至定量管“ 0”刻度。小鼠 ip 后 15分钟 , 打开测定装置的
广口瓶通气管弹簧夹和瓶塞 , 将小鼠放入广口瓶内 , 塞好瓶
塞 , 关闭通气管 ,使装置密闭。立刻记录实验开始时间 , 密切
观察小鼠反应。此时小鼠吸入O2 ,呼出 CO2 , CO2被钠石灰吸
收 , 装置内气体压力降低 , 定量管内液面上升。每隔 5分钟 ,
分别观察和记录定量管内液面上升高度 , 作为小鼠耗氧量 ,
直至小鼠死亡。记录各鼠从装置密闭至呼吸停止的时间 , 即
为小鼠缺氧存活时间。实验结果采用 t 检验作统计学处理 ,
见表 1。
表 1 白花丹参茎叶水提物对异丙肾上腺素增加小鼠心肌
耗氧量的影响( x ±s)
组别 剂量 n
耗氧量(ml)　　
　 5min 　10min 　死亡时
存活时间
　 (min)
NS+NS - 12 8.88±0.93 14.41±0.83 17.75±0.92 16.25±2.05
ISO+NS - 12 9.60±1.25 14.46±1.25　(n=9) 15.59±1.35
＊＊
12.08±1.98＊＊＊
ISO+LSMA 10g·kg-1 12 9.64±0.78 14.99±0.79　(n=10) 15.63±1.00 11.17±1.47
ISO+LSMA 20g·kg-1 12 9.33±1.59 14.85±1.06　(n=10) 15.65±1.07 11.75±1.91
ISO+LSMA 30g·kg-1 12 9.02±1.01 14.45±0.46　(n=10) 15.62±1.02 11.75±2.18
　　与NS+NS组比较 ＊＊P<0.01 , ＊＊＊P <0.001
2.2　对脑缺血小鼠呼吸次数与呼吸时间的影响[ 9]
取禁食 12 小时小鼠 42 只 , ♀、♂各半 ,按性别和体重随
机分为 3 组 ,分别单剂量灌胃给予(ig)白花丹参茎叶水提物
20g·kg-1、30g·kg-1和等容量生理盐水。给药后 40 分钟 , 用
大剪刀在耳下部快速断头 ,观察全脑停止供血后小鼠张口呼
吸次数和呼吸维持时间 ,采用 t 检验作统计学处理。结果见
表 2。
·171·中国中医药科技 2006 年 5月第 13 卷第 3 期 May.2006 Vol.13 No.3
表 2 白花丹参茎叶水提物对脑缺血小鼠呼吸次数与呼吸
时间的影响( x ±s)
组别 剂量 n
呼吸维持
时间(s)
呼吸时间
延长率(%) 呼吸次数
呼吸次数
变化率(%)
NS 20ml·kg-1 14 18.43±2.90 - 11.21±3.14 -
LSMA 20g·kg-1 14 19.00±4.10 3.09 9.86±3.39 -12.04
LSMA 30g·kg-1 14 22.14±4.00＊＊ 20.14 12.71±3.56 13.38
　　与NS 组比较＊＊P<0.01
2.3　对失血性休克小鼠心搏时间的影响[ 10]
取禁食 12 小时小鼠 30 只 , ♀、♂各半 ,按性别和体重随
机分为 3 组 ,分别单剂量灌胃给予(ig)白花丹参茎叶水提物
20g·kg-1、30g·kg -1和等容量生理盐水。给药后 40 分钟 , 迅
速断头并打开胸腔 ,暴露心脏 , 以心室停跳为指标 , 观察小鼠
心脏搏动时间并进行 t检验。结果见表 3。
表 3 白花丹参茎叶水提物对失血性休克小鼠心搏
时间的影响( x ±s)
组别 剂量 n 心脏搏动时间　　(s)
心搏时间
变化率(%)
NS 30ml·kg -1 10 11.00±2.08
LSMA 20g·kg -1 10 10.05±1.71 -8.64
LSMA 30g·kg -1 10 9.14±1.63＊ -16.91
　　与 NS组比较＊P <0.05
2.4　对亚硝酸钠中毒小鼠存活时间与存活率的影响[ 11]
取禁食 12 小时小鼠 30 只 , ♀、♂各半 ,按性别和体重随
机分为 3 组 ,分别单剂量灌胃给予(ig)白花丹参茎叶水提物
20g·kg-1、30g·kg-1和等容量生理盐水。 给药后 40 分钟 , 3组
小鼠均腹腔注射亚硝酸钠 400mg·kg-1 ,观察小鼠存活时间和
10 分钟存活率 ,分别采用 t 检验和χ2 检验(确切概率法)作
统计学处理。
结果与模型组比较 , 两个给药剂量组小鼠存活时间和
10min存活率的差异均有统计学意义(见表 4)。
表 4 白花丹参茎叶水提物对亚硝酸钠中毒小鼠存活时间
与存活率的影响( x ±s)
组别 剂量 n
存活时间
　(min)
存活期
变化率(%)
10min
存活鼠(只)
10min
存活率(%)
NS 20ml·kg-1 10 13.64±1.96 - 10 100.0
LSMA 20g·kg-1 10 11.20±2.35＊＊ -17.89 6 60.0＊
LSMA 30g·kg-1 10 10.30±1.06＊＊＊ -24.49 3 30.0＊＊
　　与NS 组比较＊P<0.05 , ＊＊P<0.01 , ＊＊＊P<0.001
3　讨论
缺氧对机体是一种劣性刺激 , 影响机体的氧化供能 , 最
终导致心脑等重要器官缺氧 , 引起氧供应能力不足而死亡。
笔者对白花丹参茎叶水提物的初步药理研究证明 , 用 30g/kg
和 40g/kg 单剂量灌胃给药能明显增强小鼠耐缺氧能力 ,明显
降低小鼠常压缺氧实验前 10 分钟的耗氧量 , 延长小鼠缺氧
存活时间 ,提高小鼠在缺氧 20 分钟和25 分钟时的存活率[ 8] 。
提示白花丹参茎叶水提物对缺氧小鼠的心脑功能可能具有
保护作用。 本文分别采用异丙肾上腺素 、亚硝酸钠 、小鼠断
头和失血性休克等因素所致动物缺氧模型 , 进一步观察了白
花丹参茎叶水提物抗缺氧特点。
在断头实验中 ,脑供血中断后 , 脑内残余的血和营养物
质仍可使脑功能维持一定时间 ,表现为离体鼠头有规律地张
口呼吸。白花丹参茎叶水提物在 30g·kg-1剂量时能明显延
长脑缺血小鼠的呼吸维持时间 ,表明其对断头脑缺氧具有保
护作用。
抗异丙肾上腺素致心肌耗氧量增加实验表明 , 白花丹参
茎叶水提物在(10～ 30)g·kg-1剂量时 , 对异丙肾上腺素引起
的小鼠耗氧量和存活时间的变化无明显影响。 急性失血性
休克实验证明 , 白花丹参茎叶水提物能缩短小鼠的心搏时
间。两项实验研究结果均提示白花丹参茎叶对心肌缺氧无
明显保护作用。
在亚硝酸钠中毒致小鼠组织缺氧实验中 ,白花丹参茎叶
水提物明显缩短小鼠存活时间 ,并具有剂量依赖性。表明白
花丹参茎叶水提物对该组织缺氧模型无保护作用。
上述研究结果表明 ,白花丹参茎叶水提物对小鼠断头所
致脑缺血缺氧具有明显保护作用 ,而对异丙肾上腺素和失血
性休克所致心肌缺血缺氧无保护作用 , 对亚硝酸钠中毒所致
组织缺氧亦无保护作用。提示白花丹参茎叶水提物增强小
鼠耐缺氧能力的主要作用机制与保护缺血脑功能有关。对
于白花丹参茎叶水提物使失血性克小鼠心搏时间缩短和亚
硝酸钠中毒小鼠存活时间缩短的作用机制 , 其有何病理和生
理意义 ,目前尚不清楚 , 有待进一步探讨。
白花丹参属濒危药用植物 ,中医认为其对治疗血栓闭塞
性脉管炎具有独特疗效[ 3] 。由于丹参自古以根入药 , 茎叶被
作为废弃物。白花丹参茎叶水提物对小鼠脑缺氧的保护作
用 , 为其资源的综合开发利用提供了实验依据 , 也有利于这
一珍稀药物资源的保护和可持续利用 , 其药理作用和作用机
制值得进一步研究。
　　参考文献
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(收稿:2005-03-11)
·172· 中国中医药科技 2006年 5 月第 13 卷第 3期 May.2006 Vol.13 No.3