全 文 ：·论 著·
六月雪不同组分提取物的抗菌解热作用研究
王红爱，黄位耀，张云，张霞
作者单位:510317 广州市，广东省第二人民医院药学部
【摘 要】 目的 研究六月雪不同组分提取物的抗菌解热作用。方法 制备六月雪不同组分提取物，采用平皿
法进行体外抑菌实验，并进行体内抗菌实验。考察六月雪不同组分提取物对干酵母所致大鼠发热以及内毒素所致家
兔发热的解热作用。结果 六月雪提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、绿脓杆菌、肠炎球菌都有一定的抑
制作用。水提取物各剂量组对绿脓杆菌所致的感染均可产生明显的对抗作用。六月雪水提取物对干酵母所致大鼠发
热、内毒素所致家兔发热的解热作用最强。结论 六月雪水提取物的抗菌解热活性最强。
【关键词】 六月雪;提取物;抗菌;解热
【中图分类号】 R 285 【文献标识码】 A 【文章编号】 1674 － 3296(2011)10B － 0003 － 03
Study on the effect of antisepsis and relieve fever of different components of Liuyuexue extractive WANG Hong-ai，
HUANG Wei-yao，ZHANG Yun，et al． Department of Pharmacy of Guangdong，The Second People s Hospital of Guangdong，
Guangzhou，Guangdong 510317，China
【Abstract】 Objective To study on the effect of antisepsis and relieve fever of different components of Liuyuexue ex-
tractive．Methods Prepared the different components of Liuyuexue extractive，used the plate method in vitro antibacterial test，
and in vivo antimicrobial tests． And studied antipyretic effect of different components of Liuyuexue extractive on dry yeast-in-
duced fever and endotoxin-induced fever in rabbits． Results The different extractive from Liuyuexue had a certain inhibiting
effect on escherichia coli，staphylococcus aureus，bacillus subtilis，pseudomonas aeruginosa，bacterial enteritis． Each dose group
of water extractive had a a certain inhibiting effect on infections caused by pseudomonas aeruginosa． And water extractive had a
a certain inhibiting effect on dry yeast-induced fever and endotoxin-induced fever in rabbits． Conclusion The antibacterial ac-
tivity of the water extractive from Liuyuexue is most powerful．
【Key words】 Liuyuexue;Extractive;Antisepsis;Relieve fever
六月雪为茜草科植物白马骨、六月雪的全株，具有清热利
湿、消肿止痛的作用［1，2］。六月雪用于退热，仅限于古代本草
的记载，现代临床上未见报道。但民间用大剂量煎水服治疗不
明原因的高热或高热用药无效者，效果卓著［3，4］。研究六月雪
的解热作用，明确解热的组分所在，从而印证六月雪的退热效
果，对于开发六月雪的新用途、推广民间经验、治疗发热病症，
具有积极的临床意义。现报道如下。
1 材料与仪器
1． 1 动物 昆明种小鼠，体质量 18 ～ 22g;健康 Wistar 大鼠，
体质量 180 ～ 220g，雌雄各半;新西兰兔，体质量 1． 5 ～ 1． 8kg，
雌雄各半。均由广东药学院中药学院动物实验室提供。
1． 2 材料 琼脂粉(广州海洋生物有限公司) ;大肠杆菌、金
黄色葡萄球菌、枯草杆菌、绿脓杆菌、肠炎球菌(广东药学院中
药学院实验中心提供) ;化学试剂均为分析纯。六月雪药材均
购自广州致信中药饮片有限公司。
1． 3 仪器 YXQ-LS-SOS1 型立式压力蒸汽灭菌器(上海博迅
实业有限公司医疗设备厂) ;DHP2000 型电热恒温培养箱(天津
市华北实验有限公司) ;水平层流净化工作台(苏州洁净技术研
究所制造)。RE-52AA型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器)。
1． 4 统计学方法 采用 SPSS 14． 0 软件进行数据处理。计量
资料以 珋x ± s表示，组间比较采用 t 检验，P ＜ 0. 05 为差异有统
计学意义。
2 方法与结果
2． 1 营养琼脂培养基制备 按 2010 年版《中国药典(一部)》
规定比例加入适量琼脂，调节其 pH 使灭菌后 pH 为(7． 2 ±
0. 2) ，在 115℃灭菌 30min，无菌操作倒入平板，培养过夜，无菌
生长，备用。
2． 2 菌液制备 取试管若干，装入融化的培养基灭菌后摆成斜
面。在无菌条件下用划线法将供试菌种移接入相应的斜面培养
基上，每个菌种活化多支，放入培养箱中，37℃下培养18 ～ 24h取
出，置 4℃冰箱中冷藏。取出活化好的菌种，无菌操作，用适量
的灭菌生理盐水洗入己灭菌的干净试管中，根据试验的需要采
用比浊法配制成含菌数为 107 ～108cfu /ml的菌悬液，备用。
2． 3 供试液的制备
2． 3． 1 醇提物制备:精确称取六月雪置圆底烧瓶中。用 7 倍
量 70%乙醇冷凝回流提取 2h，过滤，收集滤液。置旋转蒸发仪
中进行浓缩，温度控制在 50℃左右，浓缩至约 150ml 时将提取
物移至蒸发皿，置水浴上继续蒸发至膏状，再置干燥箱中，干燥
至恒重，加蒸馏水溶解(必要时加增溶剂) ，制备成每毫升含 5g
生药的药液，备用。
2． 3． 2 水提物制备:精确称取六月雪置圆底烧瓶中。用 7 倍
量水冷凝回流提取 2 次，每次 1． 5h，过滤，收集滤液。置旋转
蒸发仪中进行浓缩，温度控制在 50℃左右，浓缩至约 150ml 时
将提取物移至蒸发皿，置水浴上继续蒸发至膏状，再置干燥箱
中，干燥至恒重，加蒸馏水溶解(必要时加增溶剂) ，制备成每
毫升含 5g生药的药液，备用。
·3·临床合理用药 2011 年 10 月第 4 卷第 10B期 Chin J of Clinical Rational Drug Use，September 2011，Vol. 4 No. 10B
DOI:10.15887/j.cnki.13-1389/r.2011.20.018
2． 3． 3 挥发油的提取:用超临界 CO2 萃取装置将六月雪中的
提取挥发油，加等量吐温 － 80，使其溶解，加蒸馏水稀释成每毫
升含 5g生药的乳浊液，备用。
2． 4 体外抑菌实验 将营养琼脂培养基加热融化，加入 12ml
培养基于无菌平皿中迅速混匀、冷却，制备 8 个不同浓度的六
月雪供试液的营养琼脂平板。精密吸取上述六月雪提取物置
无菌平皿中，制备成浓度分别为 0． 2、0. 1、0． 05、0． 025、0． 0125、
0． 0063、0． 0032、0． 0016g /ml 的生药平板培养基。用接种环分
别蘸取已培养好的各实验菌液，划线接种于每个含药平板的不
同区域，培养好后取出，观察不同细菌在不同浓度的药物平板
上的生长情况。使细菌不生长的最低浓度即为药物对该菌的
最低抑菌浓度(MIC)。结果见表 1、表 2。
表 1 六月雪不同成分体外抑菌实验结果
浓度
(g /ml)
醇提物
A B C D E
水提物
A B C D E
挥发油
A B C D E
0． 2 － － － － － － － － － － － － － － －
0． 1 － － － － － － － － － － － － － + －
0． 05 + － － － － － － － － － － + － － +
0． 025 － + － + － － － － － － － + － － +
0． 0125 + + － + － － － － － － － + － + +
0． 0063 + + + + + + + + + + + + + + +
0． 0032 + + + + + + + + + + + + + + +
0． 0016 + + + + + + + + + + + + + + +
注:A:大肠杆菌;B:金黄色葡萄球菌;C:枯草杆菌;D:绿脓杆菌;
E:肠炎球菌。“ +”表示细菌生长，“ －”表示细菌不生长
表 2 六月雪不同成分体外 MIC (g /ml)
提取物 大肠杆菌
金黄色葡
萄球菌
枯草杆菌 绿脓杆菌 肠炎球菌
醇提物 0． 025 0． 1 0． 0125 0． 1 0． 0125
水提物 0． 0125 0． 0125 0． 0125 0． 0125 0． 0125
挥发油 0． 0125 0． 1 0． 0125 0． 025 0． 1
2． 5 体内抗菌实验 由“2． 4”的体外抑菌实验中试验中，水
提取物的抑菌效果最好，所以进行水提取物的体内抗菌实验研
究，进一步验证水提取物的抑菌效果。
2． 5． 1 菌液的制备:将绿脓杆菌接种培养好后，以10倍顺序
稀释为 10 －1、10 －2、10 －3、……10 －8等不同浓度菌液，再加入
5%胃膜素悬液，配成浓度为 10 －2、10 －3、10 －4、……10 －9的细菌
悬液备用。将不同浓度的菌悬液分别腹腔注射小鼠，每浓度组
3 ～ 5 只，每只 0． 5ml。选用引起小鼠 80% ～ 100%死亡的菌液
浓度进行药物防治实验。结果显示，细菌悬液浓度是 10 －4时
引起的小鼠病死率较高，符合实验的要求。
2． 5． 2 体内抗菌作用:实验小鼠随机分组，设给药治疗组和不
给药对照组。以细菌悬液浓度是 10 －4的菌液给小鼠腹腔注射
造成感染。治疗组腹腔注射六月雪水提取物 3 个浓度，分别是
0． 0125、0． 025、0． 05g /kg，对照组注射等体积的生理盐水。观
察并统计 4d内各组动物病死率。实验结果表明，对绿脓杆菌
所致的感染，六月雪水提取物各剂量组均可产生明显的对抗作
用，可降低动物的病死率。治疗组中、大剂量亚组病死率低于
对照组，差异有统计学意义(P ＜ 0． 05)。见表 3。
表 3 六月雪水提取物对抗绿脓杆菌实验结果
组别 剂量(g /kg) 例数 死亡数 病死率(%)
治疗组 0． 0125 16 2 12． 5
0． 025 16 0 0*
0． 05 16 0 0*
对照组 0 16 6 37． 5
注:与对照组比较，* P ＜ 0． 05
2． 6 六月雪不同组分解热作用研究
2． 6． 1 六月雪不同组分对干酵母所致大鼠发热的解热作用:
将合格大鼠随机分成 6 个组，每组 12 只。分别为挥发油组、水
提液组、醇提液组、模型对照组、空白对照组和阳性对照组。空
白对照组用生理盐水，阳性对照组用阿司匹林。将各组大鼠分
别灌服相应的六月雪各提取物 10g /kg，同体积生理盐水，阿司
匹林 100mg /kg，给药后立即于大鼠背部皮下注入 20%酵母混
悬液 10ml /kg，然后于 0． 5、1、2、4、6、8、10、12h 各测大鼠体温 1
次。结果显示，六月雪水提取液对抗干酵母所致大鼠发热的解
热作用明显，与阳性对照组无显著差异(P ＞ 0． 05) ，与空白对
照组比较差异有统计学意义(P ＜ 0． 05)。见表 4。
表 4 六月雪不同组分对干酵母所致大鼠发热的解热作用结果 (珋x ± s，℃)
时间(h) 挥发油组 水提液组 醇提液组 模型对照组 空白对照组 阳性对照组
0． 5 1． 74 ± 0． 67 2． 24 ± 0． 37* 1． 52 ± 0． 67 0． 04 ± 0． 17 0． 24 ± 0． 66 1． 94 ± 0． 17
1 2． 04 ± 0． 27 3． 14 ± 0． 32* 2． 22 ± 0． 24 0． 04 ± 0． 27 0． 23 ± 0． 26 2． 24 ± 0． 27
2 2． 14 ± 0． 67 3． 24 ± 0． 21* 2． 52 ± 0． 61 0． 01 ± 0． 47 0． 14 ± 0． 56 2． 44 ± 0． 37
4 2． 24 ± 0． 23 3． 23 ± 0． 17* 2． 24 ± 0． 32 0． 04 ± 0． 17 0． 21 ± 0． 24 2． 34 ± 0． 12
6 2． 47 ± 0． 69 3． 24 ± 0． 07* 2． 52 ± 0． 63 0． 14 ± 0． 15 0． 20 ± 0． 62 2． 94 ± 0． 35
8 2． 74 ± 0． 62 3． 34 ± 0． 31* 2． 55 ± 0． 62 0． 04 ± 0． 47 0． 24 ± 0． 27 2． 94 ± 0． 12
10 2． 75 ± 0． 63 3． 24 ± 0． 37* 2． 52 ± 0． 65 0． 04 ± 0． 77 0． 26 ± 0． 46 2． 94 ± 0． 47
12 2． 74 ± 0． 61 3． 24 ± 0． 44* 2． 52 ± 0． 67 0． 14 ± 0． 37 0． 24 ± 0． 36 2． 94 ± 0． 27
注:与空白对照组比较，* P ＜ 0． 05
2． 6． 2 六月雪不同组分对内毒素所致家兔发热的解热作用:
将体温合格的新西兰大白兔，按基础体温随机分为 6 组，分别
为挥发油组、水提液组、醇提液组、模型对照组、空白对照组和
阳性对照组，每组 6 只。空白对照组用生理盐水，阳性对照组
用阿司匹林。将各组家兔分别灌服相应的的六月雪各提取物
10g /kg、体积生理盐水、阿司匹林 100mg /kg，于给药后 1h，每只
家兔均从耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素 250ng /kg(1ml /kg) ，
并于 1、2、3、4、6h各测体温 1 次。以药前 2 ～ 3 次体温平均值
为基数，计算各测定时间家兔体温的变化。结果显示，六月雪
水提取液对抗内毒素所致家兔发热的解热作用明显，与阳性对
照组比较无显著差异(P ＞ 0． 05) ，与空白对照组比较差异有统
计学意义(P ＜ 0． 05)。见表 5。
表 5 六月雪不同组分对内毒素所致大鼠发热的解热作用结果 (珋x ± s，℃)
时间(h) 挥发油组 水提液组 醇提液组 模型对照组 空白对照组 阳性对照组
1 0． 77 ± 0． 61 2． 44 ± 0． 17* 0． 82 ± 0． 38 0． 06 ± 0． 07 0． 11 ± 0． 26 1． 94 ± 0． 31
2 1． 24 ± 0． 33 3． 24 ± 0． 35* 1． 42 ± 0． 47 0． 05 ± 0． 17 0． 13 ± 0． 16 2． 74 ± 0． 23
3 1． 04 ± 0． 21 3． 24 ± 0． 41* 1． 52 ± 0． 71 0． 04 ± 0． 31 0． 14 ± 0． 23 2． 74 ± 0． 25
4 1． 22 ± 0． 41 3． 43 ± 0． 25* 1． 24 ± 0． 42 0． 05 ± 0． 51 0． 11 ± 0． 25 2． 94 ± 0． 25
6 1． 47 ± 0． 25 3． 44 ± 0． 17* 1． 72 ± 0． 61 0． 14 ± 0． 45 0． 10 ± 0． 12 2． 94 ± 0． 35
注:与空白对照组比较，* P ＜ 0． 05
·4· 临床合理用药 2011 年 10 月第 4 卷第 10B期 Chin J of Clinical Rational Drug Use，September 2011，Vol. 4 No. 10B
3 讨 论
固体培养基连续稀释法可同时测定大批菌株的 MIC，且不
受药物颜色及混浊度的影响，适合于中药制剂体外抗菌活性测
定。本实验提取所得的药液为颜色较深的中药制剂，若采用试
管法则会因溶液颜色深而导致观察结果不准确，若采用滤纸片
法则会因中学药扩散慢、抑菌作用弱而无法得到准确的抑菌质
量浓度。为避免这此缺陷，本实验采用平板法。平板法稳定，
比较适合于中药抑菌浓度的测定。
本结果显示，六月雪提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、
枯草杆菌、绿脓杆菌、肠炎球菌都有一定的抑制作用。六月雪
水提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的抑制作用均优于醇提
取物、挥发油提取物，且在药物质量浓度相同时，六月雪水提取
物对上述 5 种细菌的抑制作用最强，醇提取物与挥发油提取物
的抑菌作用相似。在体内抑菌试验中，六月雪水提取物各剂量
组对绿脓杆菌所致的感染均可产生明显的对抗作用，可降低动
物的病死率。治疗组中、大剂量亚组病死率与对照组相比差异
有统计学意义(P ＜ 0． 05)。六月雪不同组分解热作用研究中，
发现六月雪水提取物对干酵母所致大鼠发热、内毒素所致家兔
发热的解热作用最强。由六月雪提取物的体外抑菌、体内抗菌
与对干酵母所致大鼠发热、内毒素所致家兔发热的解热作用研
究中，发现六月雪的提取物作用最强，可推断六月雪水提取物
的活性最强，这对开发六月雪新药制剂具有重要的参考意义。
参考文献
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(收稿日期:2011 － 08 － 29)
·经验交流·
体检过程存在的护理纠纷原因分析与对策
罗聪
作者单位:255300 山东省淄博市，中国人民解放军第一四八医
院体检中心
【关键词】 体检;纠纷原因;对策
【中图分类号】 R 192． 6 【文献标识码】 B 【文章编号】 1674 － 3296(2011)10B － 0005 － 01
随着生活质量的不断提高，健康体检越来越受到人们的重
视，在健康体检工作飞速发展的今天，医院对护理人员的要求
也越来越高，本院体检中心通过对发生纠纷的原因进行分析，
并制定有效的对策。
1 常见纠纷的原因分析
1． 1 体检者缺乏对体检流程的了解 大部分初次体检者，对
体检流程缺乏了解，对体检前的注意事项不清楚，这就要求护
理人员给予引导和耐心的讲解，由于受年龄、阅历和生活视野
所限，每个体检者的理解也不一样。如果正值团体体检和个人
体检高峰时，部分护理人员在工作繁忙的情况下，往往不能微
笑服务，有时甚至会表现出冷淡、急躁、厌烦情绪，对体检者提
出的问题解答不耐心、不及时、不详尽，少数体检者也因问题未
能得到及时和满意的解释，极易发生纠纷。
1． 2 等待体检时间长 尽管我院体检中心近年来通过一系列
的建设，硬件设施有了质的提高，体检环境宽敞、整洁、明亮，但
由于短时间内体检人员的增多，候检者活动范围相对不足，造
成候检时间过长，空腹检查的体检人员希望得到关注和照顾，
尽快做检查，而护士往往不能满足所有人的要求，或未能兼顾
到先来后到，加之体检者等待时间长，心情烦躁，也会诱发各种
纠纷的发生。
1． 3 检查结果 由于各种主、客观因素的影响，导致检查结果
差异，如休息、喝酒等，会影响少数体检者肝功能检查的结果，
如果对体检者的解释不能令其心悦诚服，极易导致纠纷发生。
2 防范对策
2． 1 注重体检过程中的细节 在介绍体检流程，交待有关注
意事项，针对不同层次的体检者提出的问题，要用通俗易懂的
语言，耐心细致地回答;当遇到专科性很强的问题时，及时与相
应的医师联系，直接提供便捷的体检服务，处理协调好每个临
时性事件，减少由于语言不慎、服务态度不够热情、解释问题缺
乏耐心而引发的体检者的不满。
2． 2 加强与体检者的沟通 在体检者流量大的情况下，难免
有一些抱怨的体检者，会指责医师或护士，此时护士应时刻注
意调整和控制自我的心态，做到纠缠不怒、悲喜有节，认真倾听
其诉说，合理疏导其不良情绪，尽量满足他们的要求。当不能
满足体检者的要求时，应及时耐心地说明原因，以取得理解、配
合，减少纠纷的发生。
2． 3 树立以人为本的服务理念 医院倡导的人性化服务已成
为医院竞争的主要手段，健康体检过程中的人文关怀是医院文
明和建设的一个重要标志。护理人员在体检过程中应树立
“以人为本”的服务理念，营造人性化服务氛围，尊重、关心、体
贴体检人员，主动热情、平等服务于每位体检人员。
2． 4 优化体检工作流程 当有团体和个人体检同时进行时，
护士应主动做好解释工作，灵活安排，分流疏导体检人员，保证
体检环节有序进行，缩短体检者排队和等待时间，缓解体检人
员焦急、烦躁心理，这样既给体检者创造一个良好的环境和愉
悦的心情，又提高了工作效率，避免了纠纷的发生。
(收稿日期:2011 － 08 － 14)
·5·临床合理用药 2011 年 10 月第 4 卷第 10B期 Chin J of Clinical Rational Drug Use，September 2011，Vol. 4 No. 10B