全 文 ：书2013 年 8 月 1 日 第 8 期
No． 8 1 August 2013
中 医 学 报
CHINA JOUＲNAL OF CHINESE MEDICINE
第 28 卷 总第 183 期
Vol． 28 Serial No． 183
［22］李笑萍，王维亭，喻培先，等． DDPH对大鼠弥漫性不完全性脑缺
血的保护作用［J］．中国药理学通报，2001，17(3) :345 － 347．
［23］程晓，张小莉，白明，等．活血化瘀法、清热解毒法对脑缺血的防
治特点及分析［J］．中医学报，2012，27(5) :615 － 619．
［24］Nakamura，T．，Suzuki，H．，Wada，Y．，et al． Fucoidan induces nitric
oxide producition via p38 mitogen-activated protein kinase and NF-
kapa B-dependent signaling pathways through macrophage scavenger
receptors［J］． Biophys Biophys Ｒes Commun，2006，343(1) :286 －
294．
［25］Anctil，M．，Poulain，I．，Pelletie，C． ． Nitric oxide modulates peristal-
tic muscle activity associated with fluid circulation in the sea pansy
Ｒenilla koellikeri［J］． J Exp Biol，2005，208(10) :2005 － 2017．
［26］高唱，王景周，王琳，等．葛根素对局灶性脑缺血 /再灌流大鼠神
经细胞凋亡的作用［J］．中国急救医学，2003，23(1) :1．
［27］俸军林，李浩，蒋静子，等．青藤碱对脑缺血再灌注损伤大鼠环氧
化酶-2 表达和血脑屏障通透性的影响［J］． 时珍国医国药，
2010，21(4) :806 － 808．
［28］韩坚．中药抗脑缺血细胞凋亡治疗的研究进展［J］．中国社区医
师:医学专业，2010，12(25) :16．
［29］刘青青，郭虹，王少峡，等． 脑缺血损伤机制的研究进展［J］． 中
华中医药学刊，2012，30(6) :1228 － 1230．
收稿日期:2013 － 02 － 07
作者简介:李瑞奇( 1987 － ) ，女，河南漯河人，硕士研究生，研
究方向: 中药药理。
通信作者:苗明三，男，教授，医学博士，主要从事中药药理教
学与研究。Email: miaomingsan@ 163． com
编辑: 纪彬
曲轴海金沙与小叶海金沙中总黄酮的含量测定*
Content Determination of Flavone in Lygodium Flexuosum and Lygodium Scandens
吕锡亮 Lü Xiliang1，姬生国 Ji Shengguo2
1．河南省职工医院，河南 郑州 450002
Workers Hospital of Henan Province，Zhengzhou Henan China 450002
2．广东药学院，广东 广州 510006
Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou Guangdong China 510006
摘要:目的: 建立测定曲轴海金沙和小叶海金沙中总黄酮的含量方法。方法: 采用紫外-可见分光光度法，在 510 nm 的波长处
测定吸光度，计算出供试品溶液中总黄酮的含量。结果: 曲轴海金沙和小叶海金沙在 6． 0 ～ 37 g·L －1 ( r = 0． 999 6) 范围内吸
收值与其浓度呈良好的线性关系。曲轴海金沙总黄酮的含量为 10． 57%，ＲSD 为 0． 49% ; 小叶海金沙为 6． 58%，ＲSD 为
0. 72%。结论: 采用紫外-可见分光光度法能够对曲轴海金沙和小叶海金沙中总黄酮的含量进行测定，方法快速、灵敏度高、重
现性好。
文献引用:吕锡亮，姬生国．曲轴海金沙与小叶海金沙中总黄酮的含量测定［J］．中医学报，2013，28( 8) : 1187 － 1189．
Abstract: Objective: To determine the content of flavone in Lygodium flexuosum and Lygodium scandens by UV． Methods: UV was be
used to measure absorbance in the wavelength of 510nm and to compute the content of the flavone． Ｒesults: Concentration of flavone
within 6． 0 － 37 g·L －1 appears the favorable linear relationship． The content of flavone in L． flexuosum was 10． 57% ; in L． scandens
was 6． 58% ． Conclusion: The UV was the simple and accurate method to determine the content of flavone in L． flexuosum and L． scan-
dens． The established method is quick，sensitive and well repeated．
Ｒeference citation: Lü Xiliang，Ji Shengguo． Content Determination of Flavone in Lygodium Flexuosum and Lygodium Scandens［J］．
China Journal of Chinese Medicine，2013，28( 8) : 1187 － 1189．
关键词:曲轴海金沙;小叶海金沙;总黄酮;紫外-可见分光光度法
Key words: lygodium flexuosum; lygodium scandens; flavone; UV
中图分类号 CLC number:Ｒ284． 2 文献标志码 Document code:A 文章编号 Article ID:1674 －8999(2013)08 －1187 －03
海金沙为常用中药，以海金沙科植物海金沙的孢子入
药，有清利湿热、通淋止痛之功效。海金沙属植物在我国南
* 基金项目:广东省科技计划项目( 编号: 2009B030801044)
方常见的有三种，除海金沙外尚有曲轴海金沙和小叶海金
沙，这两种植物虽不能以海金沙入药，但有一定的药用价值。
曲轴海金沙收载于《广州植物志》《广西药植名录》《云南中
草药选》。主要分布在广东、海南、广西、云南、贵州等地。具
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DOI:10.16368/j.issn.1674-8999.2013.08.058
书2013 年 8 月 1 日 第 8 期
No． 8 1 August 2013
中 医 学 报
CHINA JOUＲNAL OF CHINESE MEDICINE
第 28 卷 总第 183 期
Vol． 28 Serial No． 183
有清热解毒、利尿消肿的功效。用于治疗肝炎、肾炎、腮腺炎
等［1］。小叶海金沙分布于福建、台湾、广东、湖南、广西、云南
南部等广大地区［2］。具有清热解毒、止血通淋、舒筋活络的
功效，主治泌尿系统感染、肝炎、肾炎等病症［1，3］。这两种植
物中主要含有黄酮类化学成分，笔者利用紫外-可见分光光
度法对两者中含有的总黄酮含量进行了测定，旨在为建立其
质量评价体系提供依据。
1 仪器与试药
DYG-9143B-2 电烘箱(上海福玛实验设备有限公司) ;手
提式高速中药粉碎机 DFT-200(温岭市林大机械有限公司) ;
HK3300H超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司) ;HC-
CP-11B5 架盘药物天平(北京市宣武区天平厂) ;WD-9403C
型紫外分析仪(北京六一仪器厂) ;UV-1800 型紫外分光光度
计(北京瑞利分析仪器公司)。芦丁对照品(购自中国药品
生物制品检定所)试验所用试剂除流动相为色谱纯外其余均
为分析纯。
试验样品采自广州市番禺区大学城，经广东药学院中药
学院姬生国教授鉴定为曲轴海金沙［Lygodium flexuosum
(L．)Sw．］和小叶海金沙［Lygodium scandens(Linn．)Sw．］。
试验材料于烘箱中 40 ℃干燥，粉碎，过 20 目筛，保存于干燥
器中备用。
2 方法与结果
2． 1 紫外光谱吸收
2． 1． 1 供试品溶液的制备 称取曲轴海金沙与小叶海金沙
样品粉末各 0． 2 g，置于 2 个锥形瓶中，各加甲醇 10 mL浸泡
过夜，滤过，取滤液 1 mL 转移至 5 mL 容量瓶中，定容，作为
供试品溶液［4］。
2． 1． 2 紫外光谱鉴定 参照《中国药典》(2010 版一部附录
VA)紫外可见分光光度法试验，以甲醇为空白对照，比色池
厚度 1 cm，狭缝 2 nm，在 250 ～ 400 nm范围内进行波长扫描。
对曲轴海金沙和小叶海金沙甲醇液在 250 ～ 400 nm 范围内
进行波长扫描，发现曲轴海金沙在 284 nm、340 nm处有最大
吸收峰，小叶海金沙在 346 nm 处有一个最大吸收峰。而广
西产的曲轴海金沙的最大吸收峰为 284 nm、323 nm，小叶海
金沙为 291 nm、322 nm［4］。可能是由于产地的不同而导致的
差异，可作为二者的特征鉴别。
2． 2 供试品溶液的制备［5］
准确称取曲轴海金沙与小叶海金沙样品粉末各 0． 5 g，
置于圆底烧瓶中，加石油醚 60 mL，加热回流 1 h，挥干石油
醚。残渣加 70%乙醇 50 mL回流提取 2 次，各 1 h，收集提取
液并抽滤，滤液转移至 100 mL容量瓶，定容，备用。
2． 3 对照品溶液的制备［5］
精密称取经 120 ℃减压干燥至恒质量得芦丁对照品
0． 030 8 g，用 60%乙醇定容于 100 mL容量瓶中，摇匀，即得。
2． 4 标准曲线的制备
精密量取上述芦丁对照品溶液 0 mg、0． 5 mg、1． 0 mg、
1. 5 mg、2． 0 mg、2． 5 mg、3． 0 mg 分别置于 25 mL 容量瓶中，
用 30%的乙醇补充至 10 mL，加入 0． 75 mL 5%的 NaNO2 溶
液并摇匀，6 min后加入 0． 75 mL 10% Al(NO3)3，摇匀，6 min
后加入 10 mL 1 mol·L －1的 NaOH 溶液，摇匀，用 30%的乙
醇溶液定容，摇匀，放置 10 min，采用分光光度法在 510 nm
处比色测定吸收度，以第一管中的溶液为空白调零。以浓度
为横坐标，吸光度为纵坐标做标准曲线。总黄酮在 6． 0 ～
37. 0 mg·L －1范围内呈良好线性关系。回归方程为 Y =
12. 786X + 0． 006 4，Ｒ = 0． 999 6。
2． 5 稳定性试验
精密量取上述供试品溶液 2 mL，按标准曲线项下测定，
显色 10 min后，每隔 15 min测定其吸收度。90 min内 6 次测
定所得曲轴海金沙吸收度值的 ＲSD 值为 1． 98 %，小叶海金
沙为 2． 79%。结果表明总黄酮在 60 min 内基本稳定，见表
1、表 2。
表 1 曲轴海金沙稳定性测定结果
编号 时间(t /min) 吸收度 平均值 ＲSD(/%)
1 15 0． 554
2 30 0． 545
3 45 0． 540
0． 538 1． 98
4 60 0． 536
5 75 0． 529
6 90 0． 525
表 2 小叶海金沙稳定性测定结果
编号 时间(t /min) 吸收度 平均值 ＲSD(/%)
1 15 0． 349
2 30 0． 344
3 45 0． 338
0． 325 2． 79
4 60 0． 332
5 75 0． 328
6 90 0． 325
2． 6 样品精密度试验
精密量取曲轴海金沙供试品溶液 2． 0 mL，照标准曲线项
下方法，重复测定 6 次，考察仪器的精密度。结果 ＲSD 为
0. 15%，表明仪器精密度好，见表 3。
2． 7 重现性试验
取同一批号曲轴海金沙和小叶海金沙样品各 6 份，精密
称定，分别按供试品溶液制备方法制成供试品溶液，再按标
准曲线项下的方法，分别测定吸收度，计算测定结果。ＲSD
分别为 0． 49%和 0． 77%，表明二者重现性均较好，见表 4、表
5。
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表 3 精密度测定结果
编号 吸收度 平均值 ＲSD(/%)
1 0． 550
2 0． 551
3 0． 550
0． 551 0． 15
4 0． 552
5 0． 550
6 0． 551
表 4 曲轴海金沙重现性测定结果
编号 吸收度
含量
(ρ / g·L － 1)
总黄酮含量
(/%)
平均值
(/%)
ＲSD
(/%)
1 0． 545 0． 042 1 10． 53
2 0． 549 0． 042 4 10． 61
3 0． 55 0． 042 5 10． 63
10． 57 0． 49
4 0． 548 0． 042 3 10． 59
5 0． 543 0． 042 0 10． 50
6 0． 546 0． 042 2 10． 55
表 5 小叶海金沙重现性测定结果 (珋x ± s)
编号 吸收度 含量(ρ / g·L － 1)总黄酮含量(/%) 平均值(/%) ＲSD(/%)
1 0． 342 0． 026 2 6． 56
2 0． 347 0． 026 6 6． 65
3 0． 345 0． 026 5 6． 62
6． 58 0． 77
4 0． 340 0． 026 1 6． 52
5 0． 343 0． 026 3 6． 58
6 0． 341 0． 026 2 6． 54
2． 8 回收率试验
称取已知含量的曲轴海金沙和小叶海金沙样品各 6 份，
每份约 0． 5g，精密称定，分别加芦丁对照品适量，按供试品制
备方法制成供试品溶液，再按标准曲线项下的方法，测定吸
收度，结果具有良好的回收率。ＲSD 分别为 1． 07% 和
1. 05%，结果表明具有良好的回收率，见表 6、表 7。
表 6 曲轴海金沙回收率测定结果
编号
精粉量
(m / g)
含量
(m /mg)
加入量
(m /mg)
测得量
(m /mg)
回收率
(/%)
平均值
(/%)
ＲSD
(/%)
1 0． 500 4 52． 89 42． 25 93． 45 96． 0
2 0． 501 1 52． 97 52． 31 103． 55 96． 7
3 0． 500 6 52． 91 52． 85 104． 34 97． 3
97． 2 1． 07
4 0． 500 7 52． 92 52． 84 105． 06 98． 7
5 0． 501 0 52． 96 63． 42 115． 24 98． 2
6 0． 500 6 52． 91 63． 45 114． 14 96． 5
2． 9 样品含量测定
通过对试验样品曲轴海金沙和小叶海金沙总黄酮含量
的测定(n = 6) ，发现曲轴海金沙总黄酮的含量为 10． 57%，
ＲSD为 0． 49%;小叶海金沙为 6． 58%，ＲSD 为 0． 72%，均高
于海金沙的 4． 212%［4］。
表 7 小叶海金沙回收率测定结果
编号
精粉量
(m / g)
含量
(m /mg)
加入量
(m /mg)
测得量
(m /mg)
回收率
(/%)
平均值
(/%)
ＲSD
(/%)
1 0． 500 3 32． 92 26． 23 58． 68 98． 2
2 0． 500 7 32． 94 26． 29 58． 60 97． 6
3 0． 500 8 32． 95 32． 58 63． 37 99． 5
98． 1 1． 05
4 0． 500 4 32． 93 32． 61 64． 66 97． 3
5 0． 501 0 32． 97 39． 38 71． 00 99． 1
6 0． 501 2 32． 98 39． 34 71． 10 96． 9
3 讨论
海金沙作为重要的中药，临床应用较为普遍。我国南方
有煲汤和服用凉茶的习惯，而海金沙这种植物在煲汤和煮凉
茶时常用的植物，普通老百姓不容易把海金沙与小叶海金沙
及曲轴海金沙区分开，这样就会有一些人把这两种植物当作
海金沙使用，为了进一步了解这两种植物和海金沙中化学成
分的差异，笔者采用紫外-可见分光光度法对其总黄酮的含
量进行了测定。结果表明，这两种植物中总黄酮的含量均高
于海金沙，故建议日常使用时，可减少剂量较为妥当。
参考文献:
［1］国家中医药管理局中华本草编委会．中华本草［M］．上海:上海科
学技术出版社，1999:90 － 96．
［2］Freeman，T． P．，Goolsby，J． A．，Ozman，S． K．，et al． An ultra structur-
al study of the relationship between the mite Floracarus perrepae Kni-
hinicki ＆ Boczek(Acariformes:Eriophyidae)and the fern Lygodium
microphyllum(Lygodiaceae) ［J］． Australian Journal of Entomology，
2005，44(1) :57 － 61．
［3］赵能武，张敬杰，赵俊华，等．黔产木贼科等 4 类药用植物的资源
研究［J］．时珍国医国药，2008，19(12) :100．
［4］饶伟文，叶小强． 三种海金沙的比较鉴别［J］． 中药材，1991，14
(1) :27 － 28．
［5］蔡建秀，吴文珊，吴凌云，等． 22 种药用蕨类植物的总黄酮含量研
究［J］．福建师范大学学报:自然科学版，2000，16(4) :63 － 66．
收稿日期:2013 － 04 － 18
作者简介:吕锡亮( 1967 － ) ，男，河南信阳人，医学学士，副主
任药师，主要从事临床药学研究。
通信作者:姬生国( 1967 － ) ，男，教授，医学博士，从事中药资
源、中药质量标准及中药新药研究。Email: shengguo_ji@ ya-
hoo． cn
编辑: 魏丹丹
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