全 文 :收稿 2002-09-02 修定 2003-01-22
资助 国家科技部(2001DEA10009)、云南省科技厅(1999C0078M ,
2001C0058M 及 2001PY017)、国家自然科学基金(30170102)
课题。
* 通讯作者(Tel:0871-5223233 , E-mail:chunlinlong @hotmai l.
com)。
猫耳朵的组织培养
王 俐1 龙春林2 , *(1云南农业大学园林园艺学院 ,昆明 650201;2中国科学院昆明植物研究所 ,昆明 650204)
Tissue Culture of Boea hygrometrica
WANG Li
1 , LONG Chun-Lin2 , *(1College of Landscape Architecture &Horticulture , Y unnan Agricultural University , Kun-
ming 650201;2Kunming Institute of Botany , Chinese Academy of Sciences , Kunming 650204)
1 植物名称 猫耳朵(Boea hygrometrica),别名中
耳草 、牛耳草 、八宝茶 、石花子 、地膏药 、还魂草 。
2 材料类别 叶片 。
3 培养条件 诱导愈伤组织培养基:(1)MS +
6-BA 1.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.1;(2)
MS+6-BA 2.0+NAA 0.1;(3)MS +6-BA 3.0+
NAA 0.1。诱导芽培养基:(4)MS+6-BA 2.0;(5)
MS+6-BA 1.0+NAA 0.2;(6)MS +6-BA 2.0+
NAA 0.2;(7)MS+6-BA 3.0+NAA 0.2;(8)MS+
6-BA 4.0 +NAA 0.2 。生根培养基:(9)1/2MS;
(10)1/2MS+NAA 0.01;(11)1/2M S+NAA 0.02;
(12)1/2MS+NAA 0.05;(13)1/2MS+NAA 0.1;
(14)1/2MS +NAA 0.15 。以上培养基均添加 3%
蔗糖 、0.6%琼脂 , pH 5.8。培养温度(22+1)℃,在
芽分化和生根培养中每天光照 11 h ,光照度 1 500
lx 。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织的诱导 先用 75%酒精擦洗猫耳朵
叶背和叶面 ,再放入 0.1%的升汞溶液中浸泡8 ~ 10
min ,再用蒸溜水冲洗 4 ~ 5次 。然后切成 1 cm ×1
cm 大小的叶块 ,接种到诱导愈伤组织培养基(1)~
(3)上(1瓶 1块)。经实验对比得出 ,在诱导愈伤组
织培养基(1)~ (3)中 ,无论是 20 d或 50 d后的愈
伤组织诱导频率 ,都以培养基(2)最高。
4.2 芽的诱导 将 1 cm×1 cm 的愈伤组织块体
接种在诱导芽培养基(4)~ (8)中(1瓶 1块)。30 d
后 ,在未加 NAA 的培养基(4)中 ,形成丛芽少且芽
生长慢 。而 NAA 用量相同时 ,在一定范围内 ,随着
6-BA浓度的升高 ,出芽率不断上升 。当 6-BA 为 3.
0 mg·L-1时 ,出芽率最高且生长较好 ,但超出此浓
度出芽率下降。因此 ,以诱导芽培养基(7)最好。
4.3 根的诱导 将 4 cm 高的无根苗转入生根培
养基(9)~ (14)中 ,5 d后开始生根 ,20 d便可移栽。
20 d后试验结果表明 ,以生根培养基(13)的效果最
好 ,生根率为 100%。
4.4 无根苗瓶外生根和生根试管苗移栽 猫耳朵
诱导生根较容易 ,在没有激素的培养基中也能生
根。因此 ,我们把用作生根或增殖的无根苗 ,直接
移至瓶外 ,采取覆盖保温扦插进行生根 ,并与生根
苗进行对比(栽培基质为珍珠岩 ,苗高均为 5 cm)。
20 d后 ,粗 、细无根苗均已生根 ,粗壮的无根苗成活
率为 96%,细的无根苗成活率为 40%,有根试管苗
成活率达 100%。
5 意义与进展 猫耳朵是苦苣苔科旋蒴苣苔属多
年生草本植物 ,主要分布于西南 、华中以及山东至
甘肃等黄河流域省份。全草可药用 ,能治小儿疳
积 、食积 , 老年性支气管炎 , 中耳炎 ,跌打损伤等
症[ 1 ,2] 。除药用价值外 ,还具有叶片肥大 、花色艳
丽 、开花时间长等观赏价值 ,是值得开发利用的野
生植物 。本文结果对此物种的种质资源保存和利
用有一定的参考价值 。
参考文献
1 中国科学院植物研究所主编.中国高等植物图鉴(第四卷).北
京:科学出版社 , 1995
2 吴征镒主编.云南种子植物名录(下册).昆明:云南人民出版社,
1984
233植物生理学通讯 第 39 卷 第 3 期 , 2003 年 6 月
DOI :10.13592/j.cnki.ppj.2003.03.022