全 文 ：植物生理学通讯
19 0 8年第 4期
葡 萄 按 (二 ua e,。 , , u s b o , , , o `d e s 一 S m . ) 试 管 育 苗
包慈华 庄茂长 马以风 刘静芙
(上海市园林科学研究所 )
王凯基 张不方 倪德祥
复旦大学生物系
葡萄按 ( E . bot yr Ol’ d es S m . )是世界著
名的速生树种之一 , 我国广东 、 四川等省均
有栽培。 乔木 , 树高 12 ~ 24 米 , 木材红棕 色 ,
硬性 、 强韧而耐久 , 纹理交错而略粗 , 宜供
建筑 、 枕木 、 车厢等用材 , 其枝 叶 含精 油
0
。
1%
。
由于葡萄按是异花授粉植物 , 用种子繁
殖 , 其后代性状容易分离 。 用一般的无性繁
殖方法 , 因出根困难而无法大量繁育苗木 。
所以 , 采用组织培养的方法 , 是繁育苗木的
一个有效措施。
国际上 , 1 9 6 9年A n e j a 等用柠檬按木
质瘤通过组织培养获得小植株④ 。 1 9 7 6年
F o r s s a r d等用美丽按的茎节作外植 体 , 每
年能大量繁殖苗木⑥ 。 1 9 7 8年 G . L a kc h m i
iS at 用柠檬按的下胚轴及子叶作为外植体 ,
诱导完整小植株也已获得成功⑥ 。
我们于 1 9 7 8年 n 月开始 , 对若干种按树
进行了组织培养 , 1 9 7 9年 1 月首先在冈尼按
的离体茎上诱导形成了芽③ 。 本文报导葡萄
按嫩茎段诱导试管苗 , 并进行初步的讨论和
分析 。
材料和方法
供试材料 : 上海植物园由四川引种的葡
萄按 , 以具有 3~ 4对真叶的实生苗茎段作为
外植体 , 试验材料先在水中冲洗 , 洗衣粉刷
洗 , 再用清水冲洗 , 然后在无菌室内用 70 %
酒精进行表面消毒 1 分钟 , 移入 10 ~ 15 %漂
白粉过滤液消毒 20 分钟 , 最后用无菌水冲洗
4 ~ 5 次。
切取 O。 5~ 1 厘米长的嫩茎段 , 接 种于
固体培养基上 。 基本培养基为M S和 W h it e
并分别附加几种植物激素 。 附加 成 份 主 要
有 : N A A .0 01 一 2 毫克 /升 , K T o . 5毫克 /
升 、 Z T 0 . 5毫克 / 升 、 2 , 4 一 D 0 . 25 毫克 /升 、
B A 0
.
2 5二 1 0毫克 /升 、 1A A 0 . 25 毫克 /升 、
I B A 0
.
2 5一 1 0毫克 / 升 、 C M 1 0% 。 不同激
素组合共有 30 多种 , 每种培养基组合每次平
均接种 15 瓶 , 每瓶接种外植体 2 ~ 4 段 , 培
养基 p H 值调到 5 . 8~ 6 . 5 , 高压消毒于 15 磅 /
时 “ , 20 分钟 , 培养室温度为 2 5士 2 ℃ , 日光
灯照光 9 一 1 0小时 / 天 , 光 照 强 度 为 1 0 0 0
L u x
。
结果与讨论
一 、 愈伤组织的诱导 .
材料接种三周之后 , 在不同种培养基上
都可诱导发生发育程度不同的愈伤组织 , 发
生的部位只限于外植体的两端切 口处 , 愈伤
组织呈颗粒状 , 质地 比较致密 ( 见照片 ) ,
和油橄榄嫩茎段诱导过程所发生 的 现 象 相
同@ , 愈伤组织很快长大成块 ( 见照片 2 ) ,
其色泽多种多样 , 有粉红 、 红 、 黄白 、 黄 、
黄绿 、 褐 、 黑褐等 。
各种激素组合对愈伤组织的诱导作用明
显 ( 图 1 ) 。 从图 1 可见 ,基本培养基为M S ,
培养基中不加细胞分裂素 , 生长素 I B A 的浓
度在 0 . 25 一 10 毫克 / 升范围内 , 愈伤组织的
生长量随浓度的加大而增高 。 而在细胞分裂
素 B A 的单独作用下 ,其浓度从 0 . 5到 10 毫克 /
升 的 范 围 内 , 愈伤组织的生长量与浓度成
负相关 。 在 IB A 与 B A的组合试验中 , 当 B A
在低浓度 ( 0 . 5毫克 / 升 ) 情况下 , 随生长素
DOI : 10. 13592 /j . cnki . ppj . 1980. 04. 009
ǎ珑 \灿尽训率州矫园墓御
IB A的浓摩升高 , 愈伤组织生长
量 一也随之 增多 。 但是 , 当B A 的
浓度逐渐增高时 , 愈伤组织的生
长量反而下降 。
基本培 养基 ( M S ) 和 细胞
分裂素浓度 ( · 0 。 5毫克 / 升 )相同
时 ,而用同样浓度 ( 0 . 25 毫克 /升 ) .
的不同种类生 一民素诱导愈伤组织
的发生 , 结果见表 1 。
从表 1可见到 2 , 4 一 D 的作用
最大 , 工B A 次之 , N A A 和工A A
较差 , 若在 相同的 基本培 养 基
(M S ) , 并固定生长素 I B A ( 0 。 2 5
表 1 不同植物激素对诱导愈伤组织生长量的影响
M S + I B A 0
.
2 5
.
4一 D
M S + B A 0
.
5
I A A I B A N 人 A 2 . 4一
( 0
.
2 5 ) ( 0
.
2 5) ( 0
.
2 5 ) (0
.
2
5 8 2
.
5 8 8了. 5 6 6 2 . 5
一丽一丁;-jr -
( 0
·
5 ) ! ( o
· 。 )
10 3 D
.
0
( 0
.
5 )
4 3 7
.
5
注 : 愈伤组织生 一长量 , 指地协愈伤组织平均值 , 各种激素的浓度单位为 : 毫克 / 升 .
毫克 / 升 ) 情况下 , 用不同种类的细胞分裂
素 , 其结果玉米素 ( Z T )效果最好 , B A 与 K T
较差 。
二 、 芽和根的诱导
从外植体上诱导产生的愈伤组织块 , 进
行芽和根的发生试验 , 在M S + B A 0 . 5毫克
/ 升 + N A A 0 . 1毫克 / 升的培养基上有芽的
分化 , 但频率不高 ,而在M S + B A O . 5毫克 /
升 + IB A O . 25 毫克 / 升的培养基上 , 可 以大
量诱导出芽 ( 照片 3 ) 。 值得注意的一个现
象是 , 当将伸长的苗 一切下转移到发根培养基
上之后 , 将其愈伤组织仍转移到原来的培养
基 ( 新鲜配制 ) 上 , 经一个星期的培养 , 又
会分化出许多新芽 ( 照片 4 ) 。 对于未分化
的愈伤组织经切割之后作这样的处理 , 也会
促进其芽的分化 。 在约一平方厘米的愈伤组
织块的表面 , 平均每块能诱出 30 个芽体 。 大
约经二个月左右时间可培养成苗 。 其繁殖系
数为 7 . 3 x i o “ 。
当苗长至 2 一 3 厘米时 , 转入发根的培
养基中 , 以W hi et 基本培养基效果较好 , 而
在 M S基本培养基上则不能长根 , 附加 成份
以 I B A O . 2一 1毫克 /升加腺 嘿吟 40 毫 克 / 升
加蔗糟 2 %及 I B A O . 25 毫克 / 升加蔗糖 4 %
的两种组合较好 , 能诱导生根 , 形成完整植
株 ( 照片 5 ) 。 生长素 I B A的 浓 度 偏 高为
宜 , 这与 F o r s s a r d ( 1 9 7 8 ) 的结果相似⑦ 。
至于糖浓度对根形成作用的问题 , 有待进一
步探 讨 。
诱导发根是木本植物组织培养繁殖育苗
木的关键问题 。 采用先诱导形成芽 , 然后诱
导发根 。 这种技术 已在红杉组织培养中得到
应用@ 。 葡萄按的试管育苗过程中 , 再次证
明了这一点 。 从生产实践的需要考虑 , 如果
同时诱导芽和根的形成 , 简化操作过程 , 是
值得进一 步研究的问题 。 .
试管里培育成的完整植株 , 已 移 入盆
栽 , 生长 良好 ( 照片 6 ) , 移栽 成 活 率 达
7 3 %
。 至于移栽后的试管苗的生长发育等的
详细情况 , 有待进一步的总结 。
参 考 文 献
( 1 )三几凯华等 , 1 9 7 9 : 植物学报 , 2 1
( 2 )
:
1 2 7一 1 3 5
( 2 ) 包慈华等 , 1 9 79 : 不泛l学通报 , 2 4
( 7 ) : 3 2 1一 3 2 3
( 3 ) 庄茂长等 , 1 9了9 : 按树科技动态 ,
2 : 8一 9
( 4 ) A
n e ja
.
5
. ,
A t a l
.
G
.
K
. ,
1 9 7 9
:
C u r r e n t S e i e n C e ( I
n d i a )
,
3 8 : 6 9
( 5 ) G
.
L
a k s h m i S i t
a , 1 9 7 9 : P la : I t
S
e i
.
L
e t t
.
1 4 ( 1 )
: 6 3一 6 8
( 6 ) F o r s s a r d R
.
A
.
e t a l
. ,
19 7 6
:
P
r o e
.
In t e r n a t
.
P l a n t P r o P a g a -
t o r , 5 S o e
.
2 6 : 3 7 3一 37 8
( 7 ) F
o r s s a r d
,
R A
.
19了8 : P r o e e e d in g s
o f t h e C h i n a 一 A u s t r a l玉a P la n t
T i s s u e C u l t u r e S y m p o s i u m
〔本文 19 7 9年 n 月 12 日收到〕
照片 : 1 一 6 ( 复 日大学生物系傅文瑜摄 )
、圣于”叫 卜 .卜门卜 ., 闷卜 二 , 卜美国著名教授圣彼得罗应邀来华讲学
、峥 .~ ~ ~ ~ 峥 ·~ ~ ~ ·和~ · , ·~ , . 和啼 .~ · , ” , . , .冲 .’ , · 妇卜 ,叫卜 . . , ·吟 ” , ·尹
. 美国印第安那大学植物学著 名教授圣彼得罗 ( S a n iP e t r o , 一译桑 皮 特 罗 ) 应上海
植生所邀请来华讲学 。 自 5 月 6 日至 31 日先后在广州 、 杭州 、 上海及北京参观访问及作学术
报告。 报告内容为生物太阳能利用 、 光合作用进展及其它专长的有关光系统 I 的电子传递研
究新成果 。 通过一系列参观访问及讲学讨论 , 对提高我们的研究工作及学 术 水 平 有一定帮
助 。 ( 沈允钢 )
3 7