全 文 ：赤楠（Syzygium buxifolium Hook.et.Arn）系桃金
娘科蒲桃属灌木或小乔木植物，广泛分布于在我国
长江中下游以南省份，资源较为丰富，福建各地极
常见[1]。药用记载赤楠根、茎、叶具有健脾、平喘、利
湿等功效，根还可治烫火伤，叶可治手指疮[2]，临床
报道赤楠对消除肝病蜘蛛痣也有一定疗效[3]，是一
种待开发的药源植物。周法兴等[4]从其根茎中分离
鉴定出木栓酮、β-谷甾醇、乌苏酸、19-羟基乌苏酸、
doi：10.16104/j.issn.1673-1891.2016.04.004
赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位抗氧化活性的比较研究
陈景明1，黄晓冬2*，蔡建秀2，方小玲2，陈 玲2
（1.泉州幼儿师范高等专科学校，福建 泉州 362000；
2.泉州师范学院近海资源生物技术福建省高校重点实验室，福建 泉州 362000）
摘要：通过测定1，1-二苯基-2-苦基肼（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除率、还原力、金属离子对其抗氧化
活性的影响及总酚质量分数等比较赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位的抗氧化活性。结果表明：赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸
乙酯部位清除DPPH的EC50 为0.63、0.10 mg/mL；还原力的EC50分别为0.87、0.09 mg/mL。除Al3+、Fe3+外，K+、Na+、Mn2+、Mg2+、
Cu2+、Zn2+、Ca2+等金属离子对赤楠叶乙酸乙酯部位的DPPH清除作用为抑制作用；除Cu2+、Ca2+外，K+、Na+、Mn2+、Mg2+、Al3+、
Zn2+、Fe3+等金属离子对赤楠叶二氯甲烷部位的DPPH清除能力有促进作用。赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位的总酚质量
分数分别为9.23%与59.17%。可见，赤楠叶乙酸乙酯部位具有较强的抗氧化活性与总酚含量，但其抗氧化活性较易受金属离
子的拮抗作用。
关键词：赤楠叶；二氯甲烷部位；乙酸乙酯部位；抗氧化活性；总酚
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1673-1891（2016）04-0011-03
Comparative Study on Antioxidant Active of Dichloromethane Fraction and Ethyl
Acetate Fraction from Syzygium Buxifolium Leave
CHEN Jing-ming1，HUANG Xiao-dong2，CAI Jian-xiu2，FANG Xiao-ling2，CHEN Ling2
(1.Quanzhou Preschool Education College；2. Fujian Advanced Education Key Laboratory of Inshore Resources
Biotechnology, Quanzhou Normal University, Quanzhou, Fujian 362000, China)
Abstract: The antioxidant activity of dichloromethane fraction and ethyl acetate fraction of Syzygium buxifolium leaf
was compared by measuring of DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical scavenging capacity, reducing
power, effects of metal ions on antioxidant activity and total phenolic content. The results showed that the EC50
value of DPPH radical scavenging capacity by dichloromethane fraction and ethyl acetate fraction from Syzygium
buxifolium leaf was 0.63 mg/mL and 0.10 mg/mL, respectively. The reducing power EC50 value of dichloromethane
fraction and ethyl acetate fraction was 0.87mg/mL and 0.09 mg/mL, respectively. In addition to Al3+ and Fe3+, metal
ions including K+, Na+, Mn2+, Mg2+, Cu2+, Zn2+, Ca2+ had inhibitory effect to DPPH radical scavenging by ethyl acetate
fraction, while metal ions including K + ,Na + ,Mn2 + ,Mg2 + ,Al3 + ,Zn2 + ,Fe3 + had enhancement effect to DPPH radical
scavenging by dichloromethane fraction except Cu2 + ,Ca2 + .Total phenolic content of dichloromethane fraction and
ethyl acetate fraction was 9.23% and 59.17% , respectively. These results indicate that ethyl acetate fraction of
Syzygium buxifolium leaf has stronger antioxidant activity and higher total phenolic content, but its antioxidant
activity may be prone to antagonism of metal ions.
Keywords: Syzygium buxifolium leaf；dichloromethane fraction；ethyl acetate fraction；antioxidant activity；total
phenols
收稿日期：2016-06-24
基金项目：泉州市第二批科技项目(2013Z126)。
作者简介：陈景明（1966— ），男，福建泉州人，副教授，研究方向：资源动植物学。*为通信作者。
西昌学院学报·自然科学版
Journal of Xichang College·Natural Science Edition
第30卷第4期
2016年12月
Vol.30，NO.4
Dec.，2016
西昌学院学报·自然科学版 第30卷
齐墩果酸及胡萝卜甙等6种化学成分。黄晓冬等[5-9]的
研究发现赤楠叶提取物具有较强的抗菌活性，并富含
总黄酮。目前尚未见赤楠叶提取物抗氧化性能的研
究报道。本文以福建省惠安产赤楠叶为原料，对其醇
提取物的二氯甲烷萃取部位与乙酸乙酯萃取部位进
行体外抗氧化活性与总酚含量的比较，为赤楠叶提取
物作为天然抗氧化剂的研究提供参考。
1 材料与方法
1.1 赤楠叶提取物的制备
赤楠叶采自福建省惠安笔架山，去杂洗净后自
然阴干，粉碎成粉末，过孔径178 um（80目）筛，按料
液比 1:10（g/L）加入体积分数 75%乙醇浸泡 7 d/次，
浸泡 3次。抽滤并汇集浸提液，旋转蒸发仪真空旋
转浓缩至无醇味，再以石油醚充分萃取去除叶绿
素、脂类、蜡质等非极性成分，再以二氯甲烷、乙酸
乙酯依次萃取，获得相应的二氯甲烷部位（DCMF）
与乙酸乙酯部位(EAF)。
1.2 赤楠叶提取物抗氧化活性的体外检测
1.2.1 DPPH自由基清除能力的测定
参照陆占国等[10]的方法略加修改。在试管中分
别加入样液(以DMSO配制)0.2 mL、4.0 mL质量分
数为 6×10-5 mol/L的DPPH甲醇液，混匀，15 min后
于波长517 nm处测定吸光度A1；以等体积的DMSO
代替样液，测得吸光度 A0；以等体积的甲醇代替
DPPH甲醇液测得本底值A2。按下式计算样液对
DPPH自由基的清除率C%＝[A0-(A1-A2)]/A0 ×100%，
以2,6-二叔丁基对甲酚（BHT）、维生素C为阳性对
照，实验重复3次，结果以平均值±标准差（x-±s）表示。
1.2.2还原力测定
采用蔡建秀等[11]的测定方法。样液(以DMSO
配制)1.0 mL与 2.5 mL的 0.2 mol/L磷酸盐缓冲液
（pH6.6）混合，加入 1.0％铁氰化钾 2.5 mL，50 ℃恒
温水浴 20 min，冰浴冷却，再加入 2.5 mL 10％三氯
乙酸，离心10 min。离心后取上层清液2.5 mL，加入
2.5 mL H2O和 2.5 mL 0.1％FeCl3混合均匀，随即
700 nm波长测定吸光度，以吸光度对样液浓度作
图，拟合方程并求出吸光度为 0.500时所对应的样
品浓度，作为EC50。以维生素C为阳性对照，实验重
复3次，结果以平均值±标准差（x-±s）表示。
1.2.3金属离子对样品DPPH自由基清除能力影响
的测定
参照黄晓冬等[12]的方法。选取样品对DPPH自
由基清除率为50%时所对应的样液浓度进行实验，
在总体积为 5.0 mL的DPPH自由基清除反应体系
（0.2 mL样液+4.0 mL DPPH甲醇液+0.8 mL H2O）中
加入MnCl2、CuCl2、MgCl2、AlCl3、ZnCl2、KCl、NaCl、
CaCl2、FeCl3等金属盐，使体系中金属离子的质量体
积浓度为 1.0 mg/mL。摇匀混合 15 min后，于 517
nm波长测定吸光度，同时以甲醇代替DPPH甲醇液
测定体系本底值，以不加金属离子为空白对照，求
出DPPH自由基清除率并按下式计算影响率/%=(加
金属离子后的 DPPH自由基清除率－空白对照
DPPH清自由基除率）/空白对照DPPH自由基清除
率×100%，并以此评价金属离子对样品自由基清除
活性的影响。
1.3 总酚含量测定
总酚含量测定采用福林酚法，含量以等量没食
子酸（GAE）表示 [13]。在 1.0 mL样液中加入 1.5 mL
ddH2O，10倍稀释的福林酚试剂 0.5 mL，震荡，待反
应物充分混匀 1 min后，加入 1.0 mL20%碳酸钠溶
液，置 37℃暗处，使样品充分反应 30 min。然后在
波长为750 nm处测其吸光度，实验重复3次。
2 结果与分析
2.1 赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位抗氧化活
性的比较
2.1.1 DPPH自由基清除率的比较
DPPH自由基是一种人工合成的结构简单且稳
定的自由基，由于DPPH自由基清除法反应稳定、现
象明显、条件容易控制，因此已广泛应用于各种物
质的抗氧化活性评价和筛选。赤楠叶二氯甲烷部
位、乙酸乙酯部位对DPPH自由基的清除作用如图1
所示。由图1可知，赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯
部位对DPPH自由基的清除率均随样液浓度增加而
增大，具有明显的量效关系。经回归方程分析，计
算出赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位与BHT对
DPPH 自由基清除的半效应浓度EC50分别为 0.63，
0.10与 0.30 mg/mL。可见，赤楠叶乙酸乙酯部位的
DPPH自由基清除明显强于二氯甲烷部位与BHT，
差异具有显著统计学意义（P＜0.05）。
图1 DPPH清除能力比较
○ EAF
△ BHT
·· 12
第4期
2.1.2总还原力的比较
从氧化还原反应过程看，易被氧化的物质须加
入一些比它更易被氧化的化合物作为抗氧化剂发
挥抗氧化作用，还原能力越强的物质更易被氧化，
因而其抗氧化活性也越强。赤楠叶二氯甲烷部位、
乙酸乙酯部位的总还原力如图2所示。若以吸光度
为 0.500 时所对应的样品浓度作为EC50，测得赤楠
叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位与Vit C总还原力的
EC50分别为 0.87，0.09，0.91 mg/mL。赤楠叶乙酸乙
酯部位的总还原力显著强于二氯甲烷部位与Vit C
（P＜0.05）。
2.1.3金属离子对样品DPPH清除率影响的比较
分别考察不同金属离子对赤楠叶二氯甲烷部
位、乙酸乙酯部位DPPH清除率的影响，实验结果如
图3所示。
由图3可知，9种金属离子对赤楠叶二氯甲烷部
位、乙酸乙酯部位DPPH清除率的影响差异较大，
Al3 +、Fe3 +等金属离子对赤楠叶乙酸乙酯部位的
DPPH 自由基清除的影响率分别为 55.96%与
72.77%，表现为增效作用，但K+、Na+、Mn2 +、Mg2 +、
Cu2+、Zn2+、Ca2+等金属离子对赤楠叶乙酸乙酯部位
的 DPPH 自由基清除的影响率分别为 -1.80%、
13.31%、-1.00%、-1.70%、-10.51%、-80.98%、-2.80%，
均表现为抑制作用，其中以Zn2+的抑制作用最强。对
赤楠叶二氯甲烷部位DPPH自由基清除率的影响表
现为加入Cu2+、Ca2+等金属离子后，DPPH自由基清
除率分别由59.52%降为23.03%与55.57%，影响率分
别为-61.31%与-6.63%，呈现抑制作用，但K+、Na+、
Mn2+、Mg2+、Al3+、Zn2+、Fe3+等金属离子对二氯甲烷部
位DPPH自由基清除率的影响表现为增效作用，以
Fe3+的增效作用最强，影响率为30.02%。
2.2 赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位总酚质量
分数的比较
经福林酚法测定，赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸
乙酯部位总酚质量分数分别为（9.23 ± 0.33）%，
（59.17±1.02）%。显然，赤楠叶的酚类物质主要集中
在乙酸乙酯部位，这或许是乙酸乙酯部位抗氧化活
性能力较高的原因。
3 结语
机体中保持一定量的自由基有利于细胞分裂
与生长、解毒等，但是当自由基量积累过多时又会
导致细胞损伤、凋亡，诱发恶性肿瘤等。正常机体
内会通过产生抗氧化物酶来清除与修复过量的自
由基，使自由基代谢处于一种动态的平衡[14]，从外界
摄入一定量的抗氧化剂也能起到对体内自由基的
清除作用。这使得从植物中筛选出安全性、高效性
的抗氧化剂或自由基清除剂应用于食品保鲜保存、
药品、化妆品等成为研究的热点。本研究发现，赤
楠叶乙酸乙酯部位对DPPH有较强的清除作用以及
总还原力均明显强于二氯甲烷部位；K+、Na+、Mn2+、
Mg2+、Cu2+、Zn2+、Ca2+等金属离子对乙酸乙酯部位的
DPPH清除作用均表现为抑制作用，K+、Mg2+、Na+、
Mn2+、Al3+、Zn2+、Fe3+等对二氯甲烷部位的DPPH清
除能力有促进作用。这可能与赤楠叶乙酸乙酯部
位总酚物质含量较高有关。酚类物质由于具有酚
羟基表现出较高的还原力与自由基清除能力，但一
些酚类物质也易与金属离子螯合沉淀而可能影响
其生物活性。可见，在开发赤楠叶乙酸乙酯部位作
为抗氧化剂时应注意金属离子的不良影响，并注重
对其酚类物质的纯化、分离与活性追踪。
图2 二氯甲烷提取物与乙酸乙酯提取物总还原能力比较
图3 金属离子对赤楠叶DPPH自由基清除的影响
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陈景明，等：赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位抗氧化活性的比较研究 ·· 13
西昌学院学报·自然科学版 第30卷
由器完成，PE路由器发挥着边缘接入的作用，其具
体操作为：使用PE路由器，成立可连接CE设备类型
的VPN转发数据，并将这一转发数据表分别设置在
CE设备中，标记每一子接口地址，最终完成整个
VPN信息的传送过程。
3.2 IPSc VPN在信息安全中的使用
IPSc VPN技术主要用来保护计算机设备的 IP
地址，属于虚拟专用网络技术中常见的应用方式，其
使用范围较广，主要包括以下3种协议：一是端到端
形式的协议，可保护两个端口之间或者端点与端点的
信息安全保护；二是ESP形式的协议，在实际应用过
程中，其能够为用户提供同一时间段中完整数据，提
升信息资源的保密性，抗干扰性较强；三是网关到PC
协议，主要用来保护异地 IP、网关至其他类型 IP、两个
不同PC之间的信息传播。IPScc VPN技术分为隧道
和传输两种模式，在应用过程中，应注意两种模式之
间的差距，从而保障信息的安全性。
3.3 企业部门与远程分支中的使用
建立企业或者单位之间的区域网，可有效联
系部门和不同地域的分支，从而更好地实现信息
资源企业内部安全共享，如当前部分现代化企业
都借助远程会议来决定公司未来规划及其他事
宜。
3.4 企业网络与员工中的使用
企业内部网络与员工之间的联系通常被称作
访问式远程虚拟专用网络技术，该种方式能够密切
员工与企业、企业与企业之间的关系，且成本较低，
信息传播安全性较高，值得被现代化企业使用。
4 结语
综上所述，将虚拟专用网络技术应用在计算
机网络信息安全防范中，能够有效提升计算机安
全等级，保障信息传递过程的效率，在实际应用
过程中，用户可结合虚拟网络空间的特点，选择不
同类型的加密技术、身份认真安全技术、密钥安全
管理技术和隧道安全技术，确保计算机信息的安
全。随着人们对电脑等计算机设备依赖程度越来
越深，网络信息安全问题越发突出，在这种时代背
景下，相关企业应加大对信息安全的重视程度，不
断创新虚拟专用安全技术，引进先进信息安全保护
设备，综合考虑市场变化、技术发展特点，更好地服
务于用户。
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