全 文 ：口服狼毒蛋煎剂对大鼠慢性毒性实验研究
孙志刚, 梁为民, 王东明
(山东烟台山医院泌尿外科,山东 烟台 264001)
摘 要 : 观察狼毒蛋煎剂对大鼠的慢性毒性。实验证明:狼毒蛋煎剂对动物体重无明显影响, 低剂量无明显毒副作用。
但随着剂量增加可升高血清 AST、ALT 水平, 停药后二者均显著降低, 其中 AST 恢复至正常水平。狼毒蛋煎剂低剂量组对各
器官无组织学损伤, 中、大剂量组有实验动物肝脏、睾丸出现少量实质细胞变性, 肾脏、肾上腺、肺组织、脑组织部分间质组织
损伤,其它脏器无病理组织学改变。停药 2周后损伤可恢复正常。
关 键 词: 口服狼毒蛋煎剂; 大鼠慢性毒性; 实验研究
中图分类号: R991 文献标识码: A 文章编号: 1009 - 5276( 2001) 06 - 0620 - 02
1 材料和方法
受试物 狼毒分别取 130、250、500g, 头晚洗
净,清水 2000ml浸泡, 次日分别煎至 1000ml, 捞出
药,打入鸡蛋 1 个煮熟, 配成生药浓度0. 13 g /ml、
0. 25g /ml、0. 5g /ml的狼毒蛋煎剂溶液。
实验动物 6~ 18周龄一级 Wistar大鼠, 雌雄
各半,体重 150~ 200g。
动物来源 烟台绿叶制药有限公司提供, 由山
东省天然药物工程技术研究中心实验动物中心培
育。动物合格证号: 鲁动质字 9803。
实验条件 实验室与饲养室由烟台绿叶制药有
限公司提供,室温 18~ 25 e ,湿度 40~ 60%, 过滤送
风,光照 14h,饲料由中国药品生物制品鉴定检验所
提供, 全部自由摄食及饮水,每日更换饮水瓶 1次。
每日 8B00~ 11B00给药。
实验对象选择说明 根据5中国新药研究的技
术要求6采用大鼠作为实验对象。实验系统标记程
序:大鼠每笼 5 只, 笼卡标明课题号、动物编号、组
别、性别以及剂量水平。
2 仪器设备及试剂
血液生化分析: Au600 型全自动生化分析仪
(Olympus、日本)。试剂: 胆固醇( TC ) : 北京利德曼
生化技术有限公司。总胆红素( TBIL) : 上海科华东
菱诊断用品有限公司。尿素氮( BUN) :上海长征康
仁医学科学有限公司。血糖( GLU) : 保定长城临床
试剂公司。总蛋白( TP)白蛋白( ALB) : 北京申生生
物工程高科技公司。谷丙转氨酶( ALT)、谷草转氨
酶( AS T)、碱性磷酸酶( ALP)、肌酐( Cr) : 上海申能
收稿日期: 2001 - 06 - 08。
作者简介: 孙志刚( 1952 - ) , 男,主任医师、院长。
生化技术有限公司。狼毒购于烟台药材站,经山东
中医药大学 药理教研室鉴定为大戟科植物狼毒大
戟。
剂理设计依据 中药狼毒蛋煎剂临床用量预计
为 0. 05g /kg( 60kg 成人每天用药 3g ) , 大鼠最大剂
量为临床用药量的 100倍。
给药途径的选择 狼毒蛋煎剂的临床给药途径
是口服,因此大鼠采用食蛋, 汤剂采用灌胃形式给
药。
给药周期和恢复期 按照5中药研究的技术要
求6和药物的慢性毒性实验资料,实验设计给药周期
为 3个月,恢复期为 2周。
3 实验方法
动物分组及给药 随机分为 4组: 空白对照组
( 10只) ,狼毒蛋煎剂低剂量组 1. 3g /kg 组( 30只)、
中剂量组 2. 5g /kg 组 ( 30 只)、大剂量组 5g /kg 组
( 30 只) , 每日食蛋、汤剂灌胃, 给药体积为 1ml/
100g,持续 3个月,处死一批实验动物, 停药 2周后
处死剩下动物,实验期间观察大鼠一般状况,每周测
一次体重,根据体重调整剂量。
观察指标 一般状况和体重: 每日观察记录一
般情况,每周称体重一次。
血液生化学检查项目 各组动物禁食 12h后予
10%水合氯醛麻醉, 心脏取血,进行下列检查:总蛋
白( TP)、白蛋白( ALB)、谷丙转氨酶( ALT)、谷草转
氨酶( AST)、碱性磷酸酶( ALP)、总胆固醇( TC)、总
胆红素 ( TBIL)、血糖 ( GLU)、尿素氮( BUN )、肌酐
( Cr)。
病理组织学检查(烟台山医院病理科协助) 分
别于给药 3个月时和停药 2 周时处死大鼠进行剖
620 中 医 药 学 刊 2001 年第 19卷
DOI：10.13193/j.archtcm.2001.06.91.sunzhg.053
检。
大体观察 各体腔有无出血、积液,以及各脏器
大体外观有无变化。病理组织学:取脑垂体、脑、甲
状腺、肺、胸腺、心、胰、肝、胃、脾、肾、肾上腺、睾丸、
前列腺等组织进行病理学观察。
4 结 果
一般情况及体重 各组大鼠进食活动有规律,
皮毛有光泽。在实验过程中体重无动态显著变化。
血液生化学指标 实验结果表明: 狼毒蛋煎剂
低剂量组无明显毒性,而中剂量组、大剂量组能够引
起ALT 升高( P < 0. 05) ,这种升高效应随剂量增
加而明显。大剂量组也能够引起 AST 升高( P <
0. 05) ,但停药 2周后这些指标显著降低(同组用药
3个月后及停药 2周后比较( P < 0. 05) , AST 恢复
到空白对照组水平, 大剂量组 ALT 尽管停药后有所
降低,但未完全降到正常水平。
病理观察 ¹ 大体观察:给药 3个月后空白对
照组、低、中剂量组各脏器无明显肉眼可见改变, 大
剂量组有 3只大鼠肝脏肉眼可见出血坏死灶, 停药
2周后各脏器无明显肉眼可见变化。
º镜下观察:空白对照组、狼毒蛋煎剂低剂量组
用药 3个月及停药 2周后脑垂体、脑、甲状腺、肺、胸
腺、心、胰、肝、胃、脾、肾、肾上腺、睾丸、前列腺等组
织病理检查未见异常。狼毒蛋煎剂中剂量组实验动
物病理表现为: 肝组织, 肝小叶结构尚好, 大部分肝
细胞索结构存在,部分肝细胞索结构消失,肝细胞排
列紊乱,见灶性假小叶形成, 部分肝细胞呈浊肿变
性,并见灶性肝细胞脂肪变性,未见明显坏死, 肝窦
扩张充血,汇管区小胆管周围见少量淋巴细胞浸润;
睾丸组织中少部分曲细精管呈退行性变, 仅见曲细
精管轮廓,各级精细胞结构不清,间质内见嗜伊红均
质物质沉积(考虑为水肿液) , 未见明显坏死; 肾脏组
织,肾皮质及髓质结构清晰,皮质肾小球结构尚好,
部分近曲小管上皮细胞呈轻度浊肿变性, 肾间质内
小血管轻度扩张、充血并出血, 小灶性淋巴细胞浸
润,肾盂移行上皮细胞轻度增生。肾上腺组织,部分
肾上腺皮质髓质、结构清晰,皮质各层结构清楚, 皮
质内血窦轻度扩张、充血, 髓质细胞未见著变; 部分
肾上腺皮质各层结构不清,呈弥漫性排列,未见明显
坏死灶。肺组织大部分肺泡腔内充满红细胞, 未见
明显水肿液,少许肺泡壁断裂,肺泡腔融合, 呈过度
充气改变,支气管周围见大量淋巴细胞浸润, 淋巴滤
泡形成,间质内血管扩张充血,血管壁增厚, 未见明
显坏死及纤维化, 病理意见为慢性支气管炎, 肺瘀
血、肺出血、部分肺组织代偿性过度充气。脑组织、
皮层各层结构尚清, 部分脑组织软脑膜下见灶性出
血,部分脑皮质细胞数略减少, 未见明显软化灶, 间
质内及蛛网膜下腔见灶性出血。大剂量组主要有以
下组织出现病理变化: 睾丸组织见一灶性间质细胞
增生并不典型增生;肾脏组织、肾皮质及髓质结构清
晰,皮质肾小球结构尚好,部分近曲肾小管上皮细胞
呈浊肿变性, 部分近曲肾小管自溶, 结构不清, 1处
肾表面被膜下见灶性上皮样细胞聚集, 细胞异形性
不明显,间质内小血管轻度扩张、充血, 并间质内出
血,见灶性弥漫性淋巴细胞浸润。肾盂上皮细胞轻
度增生,未见异形增生。肾上腺组织,部分肾上腺皮
质、髓质结构清晰,皮质各层结构清楚, 皮质内血窦
轻度扩张、充血, 髓质细胞未见著变; 部分肾上腺皮
质各层结构不清, 呈弥漫性排列, 未见明显坏死灶。
肺组织,大部分肺泡腔内充满红细胞、部分肺泡腔内
充满水肿液,支气管周围见大量淋巴细胞浸润, 淋巴
滤泡形成,间质内血管扩张充血, 血管壁增厚,并见
灶性弥漫性淋巴细胞浸润, 病理意见:急慢性支气管
炎、间质性肺炎肺瘀血、肺出血、肺水肿。肝组织,肝
小叶结构尚清晰, 大部分肝细胞索结构消失,肝细胞
排列紊乱,部分肝细胞呈浊肿变性,见一灶性肝细胞
退变、坏死, 肝窦扩张, 充血,汇管区小胆管周围见少
量淋巴细胞浸润。脑组织、皮层各层结构尚清, 部分
脑组织软脑膜下见灶性出血,部分脑皮质细胞数略
减少,未见明显软化灶,间质内及蛛网膜下腔见灶性
出血。其中一蛛网膜下腔见片状增生之单核细胞。
其它脏器无病理组织学改变。停药 2周后实验动物
病理学检查基本正常。
5 小 结
狼毒蛋煎剂对动物体重无明显影响, 低剂量无
明显毒副作用,但随着剂量增加,可升高血清 AST、
ALT 水平,停药后二者均显著降低,其中 AST 恢复
至正常水平。狼毒蛋煎剂低剂量无任何毒性,中、大
剂量组有实验动物肝脏、睾丸出现少量实质细胞变
性,肾脏、肾上腺、肺组织、脑组织部分间质组织损
伤。停药 2周后实验动物病理学检查基本正常。在
临床实践中应注意应用该药的毒性反应, 同时要密
切监视肝脏、睾丸、肾脏、肺脏等功能变化及定期进
行血液学监测。
参考文献:
112中药新药研究的技术要求1C2. 中华人民共和国中国药品
监督管理局. 2000.
122中药新药研究指南(内部资料) .
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20 0 1年 1 2月第 1 9卷第 6期
December 2001, Vol. 19, No. 6
中 医 药 学 刊
Study Journal of T raditional Chinese Medicine