全 文 ：第 20 卷　第 3 期 内蒙古大学学报(自然科学版) Vol.20　No.3
2005年 6 月 Journal of Inner Mongolia University fo r Nationalities Jun.2005
微波协助萃取地锦草中总黄酮
杨利青1 ,张一力2 ,徐　宁1
(1.内蒙古民族大学化学学院 ,内蒙古通辽　028043;2.西安工业学院医院 ,陕西 西安　710032)
摘　要:采用微波辅照诱导萃取法萃取地锦草中的总黄酮 ,将试剂微量化后 , 通过对提取条件的研究得出较佳
的工艺条件为:提取溶剂为 70%的乙醇 ,固液比为(g/ ml)1∶10 , 微波功率为 800 W , 辅照时间50 s , 提取次数为
3次.
关键词:地锦草;微波协助萃取;总黄酮
中图分类号:O658.2　　文献标识码:A　　文章编号:1671-0185(2005)03-0261-03
Microwave Assisted Extraction of Total Flavonoids
from Mongolian Medicine Herba Euphorbaia Humifuse
YANG Li-qing1 ,ZHANG Yi-li2 ,XU Ning1
(1.College of Chemistry , Inner Mongolia University fo r the Nationalities , Tongliao 028043 , China;
2.Hospital o f Xian Institute of Technology , Xian 710032 , China)
Abstract:Microw ave assisted ext raction of total Flavonoids f rom Mongolian Medicine Herba
Euphorbiae Hum ifusae was studied and the reagens used in this w ork are litt le quant ization.The
result of quantitative analysis of total Flavonoids indicates that under the condition of 70% alco-
hol , the ratio of solid to liquid is 1∶10 ,microw ave power w as 800 W and the solution w as treated
50 s by microwave and it w as ex tracted three times.
Key words:Herba Euphorbiae Hum ifusae ;Microw ave assisted ex traction;Total f lavonoids
　　地锦草(Herba Euphorbiae Hum if usae)又名红筋草 、铺地锦 、奶仔草 、血见愁 ,其蒙古名为玛拉干·札拉
—乌布斯 、乌兰·乌塔素—乌布斯 、毕日达萨金 、特尔根札拉 ,系大戟科双子叶一年生草本植物 ,生于田野 、
路边 、菜园边或庭院屋角.全草入药 ,具有凉血止血 、清热止痢 、通乳汁等功效 ,用于治疗痢疾 、外伤出血 、乳
汁不足等病症 ,是蒙药的常用药之一〔1〕.地锦草主要含槲角素甙及素〔2〕、山素甙及素 、地锦草素的黄酮类
化合物〔3〕 ,其煎剂 、醇提取液及地锦草素均有抗菌止血等作用.
目前 ,地锦草总黄酮一般采用热浸取法 ,能耗大 ,时间长.微波萃取是利用微波能来提高萃取效率的一
种新技术 ,应用范围从环境分析一直扩展到食品 、化工 、农业 、天然产物等领域.本实验的目的在于探索将
试剂微量化后利用微波协助萃取地锦草中的总黄酮的最佳提取条件.
1　材料与仪器
地锦草:购于通辽市中药店(由内蒙古民族大学附属医院蒙药制剂室鉴定);其他化学试剂均为 AR
级;微波炉(日本 ,声宝 ,输出功率 500 ～ 900 W ,2 450 Hz),754分光光度计(上海三分厂),微型化学制备仪
收稿日期:2004-12-16
作者简介:杨利青(1978-),女 ,内蒙古察右中旗人 ,在读硕士研究生 ,主要研究天然产物化学.
DOI :10.14045/j.cnki.15-1220.2005.03.005
(南京十四中学玻璃仪器厂).
2　实验方法
2.1　实验条件的选择
2.1.1　最大吸收波长及稳定性考察〔4〕
精密量取芦丁对照品液和样品液各 5.0 m l分别置于 25 ml容量瓶中 ,加水至 6.0 ml ,加 5%亚硝酸钠
试液 1.0 m l ,放置 6 min ,加 10%硝酸铝试液 1.0 ml ,放置 6 min ,加 10%氢氧化钠试液 10.0 ml ,加水至刻
度 ,摇匀 ,放置 15 min后 ,以相应试剂做空白 ,于 754分光光度计上进行全波长扫描 ,最大吸收波长为 500
nm ,同时在 500 nm 波长处进行时间扫描.结果见表 1 ,显示 150 min内基本稳定.
表 1　放置时间对吸光度的影响
Table 1　The influence of placed time in absorbtion
放置时间(min) 5 10 15 20 25 30 45 60 100 150
对照品液(AR) 0.057 0.057 0.056 0.056 0.056 0.057 0.056 0.056 0.056 0.057
供试液(AR) 0.228 0.227 0.225 0.223 0.223 0.221 0.220 0.217 0.213 0.206
2.1.2　标准曲线的制备〔5〕
精密称取在 120 ℃减压干燥至恒重的芦丁对照品 10.9 mg ,加甲醇溶解 ,转入 50 ml容量瓶中 ,摇匀 ,
即得对照品液(0.218 mg/ml).精密吸取该液 0.0 ml 、1.0 ml 、2.0 ml 、3.0 ml 、4.0 ml 、5.0 ml、6.0 ml ,分别
置于 25 ml容量瓶中 ,加水至6 ml ,加 5%亚硝酸钠试液1.0 ml ,放置 6 min ,加 10%硝酸铝试液 1.0 ml ,放
置 6 min ,加10%氢氧化钠试液 10.0 ml ,加水至刻度 ,摇匀 ,放置 15 min后 ,以相应试剂做空白 ,于 500 nm
处测定吸光度 ,以浓度(C)与吸光度(A)进行直线回归 ,得回归方程.
表 2　芦丁对照品浓度与吸光度
Table 2　Compare article density and absorbtion of Rutin
浓度(mg/ l) 0.218 0.436 0.654 0.872 0.190 1.308
吸光度(A) 0.046 0.089 0.142 0.185 0.235 0.248
2.1.3　样品液总黄酮含量的测定
(1)称取 50 g 药材 ,粗碎;
(2)物料与萃取介质混合 ,装入 100 ml梨形烧瓶中 ,置于微波炉中接受微波辅照;
(3)用微型玻璃钉漏斗过滤分离残渣得提取物;
(4)减压蒸馏 ,蒸去溶剂乙醇;
(5)用甲醇溶解 ,定容至 50 ml;
(6)精密吸取总黄酮甲醇溶液 1.0 ml ,置于 25 ml容量瓶中 ,按标准曲线制备方法测吸光度 ,计算含
量.
2.1.4　对照实验
取地锦草粗粉 2.0 g ,在简易索氏提取器内〔5〕用 70%乙醇 90 ml连续回流 3.5小时 ,然后分离残渣得
提取物 ,用上述标准曲线法定容后 ,测定吸光度 ,计算黄酮含量为 3.24%.
3　结果与讨论
为了优化黄酮的提取工艺 ,固定乙醇提取液的浓度为 70%,设计了 L9(34)正交实验组合表.用 754分
光光度计在黄酮的最大吸收波长 500 nm 处测定吸光度作为考察对象 ,对物料配比(A)、微波辅照时间
(B)、微波功率(C)、提取次数(D)等因素(见表 3)进行了研究 ,结果见表 4.较佳的工艺条件为:提取溶剂为
70%的乙醇 ,固液比为(g/ml)1∶10 ,微波功率为 800 W ,辅照时间为 50 s ,提取次数为 3次.
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表 3　因素水平表
Table 3　Table of factor and level
因素 A 固液比(mg/ ml) B 辅照时间(s) C 微波功率(w) D 提取次数
1 1∶10 30 700 1
2 1∶15 40 800 2
3 1∶20 50 900 3
表 4　正交试验设计及结果分析
Table 4　Orthogonality experiment design and analysis of result
因素 A B C D 总黄酮含量(%)
1 1 1 1 1 3.10
2 1 2 2 2 5.31
3 1 3 3 3 6.05
4 2 1 2 3 5.65
5 2 2 3 1 4.04
6 2 3 1 2 4.29
7 3 1 3 2 4.37
8 3 2 1 3 4.56
9 3 3 2 1 4.06
Ⅰ 4.82 4.37 3.98 3.73
Ⅱ 4.66 4.64 5.01 4.66
Ⅲ 4.33 4.80 4.82 5.42
R 0.79 0.43 1.13 1.69
另外 ,本实验与传统方法的黄酮得率 ,试剂用量 ,实验耗时情况比较如表 5.
表 5　本实验与传统实验结果比较
Table 5　Comparison between experimental method given in this paper and traditional method
比较项目 黄酮得率 试剂用量(地锦草/乙醇) 实验耗时
微波协助萃取(本实验) 6.05% 1.0 g/ 10.0 ml 50 s
直接加热回流(传统) 3.24% 2.0 g/ 90.0 ml 3.5 h
从实验结果表明 ,微波辅照萃取法对地锦草总黄酮提取的最佳条件是 A1、B3 、C2 、D3.按此方案提取地
锦草总黄酮的得率比传统实验的热浸提法及文献报道〔4〕的得率都要高 ,比文献报道“蒙药地锦黄酮提取
工艺研究”〔4〕、“大孔树脂吸附法富集地锦草总黄酮的工艺研究”〔6〕和常规热浸提法的耗时都短 ,且用量
少 ,降低生产成本 ,简便易行.
参　考　文　献
〔1〕蒙医学编辑委员会主编.中国医学百科全书(蒙医学)〔M〕.上海:上海科学技术出版社 , 1992.192.
〔2〕YoshiakiA , KeitaK , TsutomaH , e t al.Fournew HydrocyzableTanninsandanAcy lated Flavonol Gly coside from Euphorbiamac-
ulata〔J〕.CanJ Chem , 1997 , 75(6):727.
〔3〕柳润辉 , 王汉波 ,孔令义.地锦草化学成分的研究〔J〕.中草药 , 2001 , 32(2):107.
〔4〕巴根那 , 赵贤芳 ,白玉霞 , 等.蒙药地锦黄酮提取工艺研究〔J〕.时珍国医国药 , 1999 , 10(4):252.
〔5〕周宁怀 , 王德琳.微型有机化学实验〔M〕.北京:科学出版社 , 1999.
〔6〕张纪兴 , 李　坚 ,程国华.大孔树脂吸附法富集地锦草总黄酮的工艺研究〔J〕.中药材 , 2002 , 25(2):123.
〔责任编辑　郑　瑛〕
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