全 文 ：表 4 加样回收率试验结果
取样量 / g 样品含量 /mg 对照品加入量 /mg 测得总量 /mg 回收率 /% 平均值 /% RSD /%
0． 408 1 1． 289 1． 50 2． 785 99． 73
0． 409 7 1． 294 1． 50 2． 789 99． 67
0． 410 2 1． 296 1． 50 2． 807 100． 73
0． 413 7 1． 307 1． 50 2． 811 100． 27
0． 414 1 1． 308 1． 50 2． 806 99． 87
0． 419 1 1． 324 1． 50 2． 810 99． 07
0． 426 5 1． 347 1． 50 2． 838 99． 40
0． 429 1 1． 355 1． 50 2． 851 99． 73
0． 425 4 1． 344 1． 50 2． 858 100． 93
99． 93 0． 60
表 5 样品测定结果
批号 含量 /(mg·g －1) 平均值 /(mg·g －1) RSD /%
3． 13
20111207 3． 14 3． 15 0． 74
3． 17
3． 13
20111103 3． 16 3． 15 0． 74
3． 17
3． 14
20111015 3． 15 3． 16 0． 75
3． 20
取 3 批样品，每批 3 份，葛根素的质量分数为
3． 12 ～ 3． 19 mg /g，考虑到葛根素的转移率，规定本
品每克含葛根以葛根素(C21 H20 O9)计，不得少于
3． 00 mg。
3 小 结
本研究参照 2010 版《中华人民共和国药典》一
部药材标准中葛根素含量测定方法进行检测，用
HPLC 法测定升麻葛根颗粒中葛根素的含量，灵敏
度高，样品预处理简单，有效成分分离良好，且其他
成分无干扰，可控制该产品的质量。
参考文献:
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中医药出版社，1999．
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京:中国医药科技出版社，2010．
* 基金项目:郑州市科技攻关项目———升麻葛根颗粒的质
量标准研究(编号 083SGYS33264)
收稿日期:2012 － 05 － 14;修回日期:2012 － 06 － 11
(编辑 陶 珠)
文章编号:1001 － 6910(2012)08 － 0069 － 03 ·药学研究·
高效液相色谱法测定地锦草片中槲皮素的含量
王海波，宋汉敏，李振国
(河南省食品药品检验所，河南 郑州 450003)
摘要 目的:建立地锦草片中槲皮素的高效液相色谱含量测
定方法。方法:色谱柱 Phenomenex Luna C18 (4． 6 mm ×
250 mm，5 μm)，柱温 35 ℃，流动相为甲醇 － 1 g /L磷酸溶液
(50∶ 50)，流速 1． 0 mL /min，检测波长 360 nm。结果:槲皮素
的线性范围为 44． 8 ～ 448． 0 ng，加样回收率为 99． 2%(n =
6)。结论:本方法简便、准确，可用于地锦草片中槲皮素的含
量测定和产品质量控制。
关键词:地锦草片 /药效学;槲皮素 /药效学;高效液相色谱
法;含量测定
中图分类号:R284． 1 文献标志码:B
doi:10． 3969 / j． issn． 1001-6910． 2012． 08． 034
地锦草片收载于中华人民共和国卫生部药品标
准《中药成方制剂》第十册中，是由地锦草提取制成
的单方制剂［1］。地锦草主要含黄酮类成分［2 － 3］，有
抑菌、止血等作用［4 － 5］，用于治疗痢疾、肠炎［6］、咳
血、尿血、便血、崩漏、痈肿疮疔等。本研究建立了地
锦草片中槲皮素的高效液相色谱含量测定方法。
1 药品、试剂与仪器
地锦草片，由石家庄乐仁堂制药有限责任公司
(批号 060302，060305)、河北安国药业集团有限公
司(批号 066303)提供。槲皮素对照品，购自中国食
·96·中医研究 2012 年 8 月 第 25 卷 第 8 期 TCM Res． August 2012 Vol． 25 No． 8
品药品检定研究院，批号 110721 － 201014。甲醇为
色谱纯，德国 Merck 公司产品;水为超纯水，临用新
制;其他试剂为分析纯。Waters 2695 高效液相色谱
仪、2487 紫外检测器，均为美国 Waters 公司产品;
Phenomenex Luna C18(4． 6 mm ×250 mm，5 μm)色谱
柱，广州菲罗门科学仪器有限公司产品;Milli － Q
Advantage A10 型超纯水机，默克密理博公司产品。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件
色谱柱 Phenomenex Luna C18 (4． 6 mm ×
250 mm，5 μm) ;以甲醇 － 1 g /L 磷酸溶液(50 ∶ 50)
为流动相;柱温 35 ℃;检测波长为 360 nm;进样量
10 μL。理论板数按槲皮素计算应不低于 2000，色
谱图见图 1。
A．对照品;B．样品;1．槲皮素
图 1 地锦草片 HPLC图
2． 2 对照品溶液的制备
精密称取槲皮素对照品约 10 mg，置 50 mL量瓶
中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀;精密量取5 mL，
置 50 mL 量瓶中，加 800 g /L 甲醇稀释至刻度，摇
匀，即得。
2． 3 供试品溶液的制备
取本品 20 片，除去糖衣，精密称定，研细，过 3 号
筛;取 1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入
800 g /L 甲醇 25 mL，密塞，称定质量;加热回流 1 h，
放冷，再称定重量;用 800 g /L 甲醇补足减失的重
量，摇匀，滤过;精密量取续滤液 10 mL，加入盐酸
1 mL，置水浴中回流 1 h，取出，迅速冷却，转移至
25 mL量瓶;加 800 g /L 甲醇至刻度，摇匀，滤过，取
续滤液，即得。
2． 4 线性关系考察
分别 吸 取 精 密 取 槲 皮 素 对 照 品 溶 液
(22． 4 mg /L)2，5，8，10，15，20 μL，注入液相色谱仪，
测定峰面积。以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，
计算回归方程为 Y = 4 477X － 67 655(r = 0． 999 6)。
结果表明，槲皮素在 44． 8 ～ 448． 0 ng 范围内线性关
系良好。
2． 5 精密度试验
精密吸取对照品溶液 10 μL，重复进样 6 次，测
定峰面积。结果:槲皮素峰面积的 RSD 为 1． 0%
(n = 6)。结果表明，仪器精密度良好。
2． 6 稳定性试验
精密吸取供试品溶液 10 μL，每 2 h 进样 1 次，
共进样 6 次，测定峰面积。结果:槲皮素峰面积的
RSD为 1． 6%(n = 6)。结果表明，10 h 内测定结果
稳定。
2． 7 重复性试验
取同一样品，按 2． 3 项下方法制备 6 份供试品
溶液并测定。结果:槲皮素含量的 RSD 为 1． 9%
(n = 6)。结果表明，该方法重复性良好。
2． 8 回收率试验
取同一批号已知含量供试品(批号为 060302，
槲皮素含量为 0． 5294 mg /g) ，除去糖衣，精密称定，
研细，取约 0． 5 g，精密称定，分别精密加入槲皮素对
·07· 中医研究 2012 年 8 月 第 25 卷 第 8 期 TCM Res． August 2012 Vol． 25 No． 8
照品溶液(10． 75 mg /L)25 mL，按照 2． 3 项下方法制
备加样回收供试品溶液，测定槲皮素含量，并计算加
样回收率。结果:平均回收率为 99． 2%，RSD 为
0． 9%(n = 6)。结果表明，该方法准确性较好。见
表 1。
表 1 槲皮素回收率试验表
取样量 / g 样品含量 /μg 加入对照品量 /μg 测得总量 /μg 回收率 /%
0． 499 0 264． 17 268． 75 531． 50 99． 46
0． 503 6 266． 61 268． 75 530． 60 98． 23
0． 504 0 266． 82 268． 75 534． 60 99． 64
0． 488 5 258． 61 268． 75 526． 70 99． 75
0． 470 2 248． 92 268． 75 512． 30 97． 99
0． 485 1 256． 81 268． 75 526． 40 100． 31
2． 9 样品测定
按 2． 3 项下方法制备样品溶液，测定 3 批地锦
草片中槲皮素的含量，测定结果见表 2。
表 2 不同批次样品中槲皮素的含量
批号 槲皮素含量 /(mg·片 － 1)
060302 0． 17
060305 0． 17
066303 0． 18
3 讨 论
地锦草中主要含黄酮类成分，考察了 700 g /L
乙醇、800 g /L甲醇、甲醇等溶剂，结果 800 g /L 甲醇
提取效率较高，且后续处理方便，因此采用 800 g /L
甲醇作为提取溶剂;对比了超声法与回流法两种提
取方法，结果二者无显著差异;比较了不同加酸量、
水解时间，根据试验结果，选用加酸 1 mL，加热水解
1 h来制备供试品溶液。
结合参考文献，实验中考察了乙腈 － 磷酸 －
水［7］、甲醇 －磷酸 －水［8 － 9］、甲醇 －冰醋酸 －水等流
动相系统，结果表明本研究所采用流动相峰形、分离
度均较好。
本研究建立了地锦草片中槲皮素的含量测定方
法，该方法便捷、准确、重复性好，可以有效控制该药
品质量。
参考文献:
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生部药品标准:中药成方制剂:第十册［S］． 1995:51
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收稿日期:2012 － 04 － 04
(编辑 陶 珠)
文章编号:1001 － 6910(2012)08 － 0071 － 04 ·药学研究·
高效液相色谱法测定老年咳喘片中淫羊藿苷、补骨脂素和
异补骨脂素的含量
王晓燕
(河南省食品药品检验所，河南 郑州 450003)
摘要 目的:建立老年咳喘片中淫羊藿苷、补骨脂素和异补
骨脂素含量测定方法。方法:采用高效液相色谱(HPLC)
法，HypersIL C18柱，流动相为乙腈 － 1 g /L磷酸(30 ∶ 70)，体
积流量 1． 0 mL /min，柱温 40 ℃，检测波长为 246 及 270 nm。
结果:该方法的线性范围为:淫羊藿苷 0． 398 4 ～ 2． 656 0 μg，
r = 0． 999 7;补骨脂素 0． 109 8 ～ 0． 732 0 μg，r = 0． 999 7;异补
骨脂素 0． 113 4 ～ 0． 756 0 μg，r = 0． 999 8。平均回收率为:淫
羊藿苷 98． 38%，RSD 为 2． 05%;补骨脂素99． 18%，RSD 为
1． 68%;异补骨脂素 98． 73%，RSD 为 1． 95%。结论:本方法
简便可行，重现性好，可用于该制剂的质量控制。
关键词:老年咳喘片 /药效学;高效液相法;淫羊藿苷;补骨脂
素;异补骨脂素;含量测定
中图分类号:R284． 1 文献标志码:B
doi:10． 3969 / j． issn． 1001-6910． 2012． 08． 035
老年咳喘片是由黄芪、白术、防风、甘草、黄精、
淫羊藿、补骨脂等 7 味中药组成，具有滋阴壮阳、扶
正固本、提高免疫能力、促进病体康复的功效，用于
·17·中医研究 2012 年 8 月 第 25 卷 第 8 期 TCM Res． August 2012 Vol． 25 No． 8