全 文 ：［收稿日期］ 20120827(013)
［基金项目］ 新疆中医民族医青年科技人才专项课题(2009ZMY17)
［第一作者］ 厉彦翔，硕士研究生，从事抗炎免疫药理研究，Tel:0991-4362421，E-mail:lyx091@ 126. com
［通讯作者］ * 阿斯亚·拜山伯，博士，教授，从事哈萨克医药开发研究，Tel:0991-4362421，E-mail:asiyamen@ yahoo． cn． com
新疆鼠李提取物对大鼠酒精性肝病的作用
厉彦翔1，杨珊2，阿斯亚·拜山伯1*
( 1. 西安交通大学医学院，西安 710061; 2. 新疆医科大学第二附属医院，乌鲁木齐 830054)
［摘要］ 目的:探讨新疆鼠李提取物对酒精性肝病大鼠的作用。方法:采用酒精灌胃法建立大鼠酒精性肝病动物模型，
每天 1 次，连续 10 周。造模成功后，阳性对照组按照 100 mg·kg －1剂量给予益肝灵，新疆鼠李提取物低、中、高剂量组分别按照
0. 9，1. 8，3. 6 g·kg －1口服给药。给药 4 周后，分别测定各组血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、甘油三酯
(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和肝组织丙二醛(MDA)、总超氧化物歧
化酶(T-SOD)、一氧化氮(NO)、还原型谷胱甘肽(GSH) ，并观察肝脏组织病理学改变。结果:与模型组比较，新疆鼠李提取物
组血清中 ALT，AST活性和 TG，TC，LDL-C含量较模型组显著降低(P ＜ 0. 01)。肝组织中 MDA，NO含量较模型组显著降低
(P ＜ 0. 05) ，大剂量组 T-SOD活性较模型组显著升高(P ＜ 0. 05) ，肝组织病理改变明显好转。结论:新疆鼠李提取物通过增强
机体清除自由基、抗脂质过氧化作用的能力改善脂质过氧化反应对肝脏的损伤和保护肝细胞的结构和功能，发挥对酒精性肝
病的治疗作用。
［关键词］ 酒精性肝病;新疆鼠李提取物;氧化应激;脂质过氧化物;自由基;抗脂质过氧化
［中图分类号］ R285. 5 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)09-0245-04
［doi］ 10． 11653 /syfj2013090245
Protective Effect of Rhamnus Songorica Extract
on Rats with Alcoholic Liver Disease
LI Yan-xiang1，YANG Shan2，ASIYA Baishanbo1*
(1. Xian Jiaotong University College of Medical，Xian 710061，China;
2. Second Affiliated Hospital，Xinjiang Medical University，Wulumuqi 830054，China)
［Abstract］ Objective:To observe the therapeutic effects of Rhamnus Songorica extract (RSE)in rats
with alcoholic liver disease． Method:A rat model of alcoholic liver disease was established by intragastric infusion
of alcohol，once a day continuously for 10 weeks． Positive control group was given yiganling at 100 mg·kg －1 and
the low，middle，high dose RSE groups were given RSE at 0. 9，1. 8，3. 6 g·kg －1，respectively after 10 weeks．
The levels of alanine aminotransferase (ALT) ，aspartate aminotransferase (AST) ，triglyceride (TG) ，total
cholesterol (TC) ，low density lipoprotein cholesterol (LDL-C) ，high density lipoprotein cholesterol (HDL-C)in
serum，maleic dialdehyde (MDA) ，total superoxide dismutase (T-SOD) ，nitric oxide (NO) ，reduced glutathione
(GSH)in liver tissue and the evaluation of the histopathological changes of liver in rats were detected after 4 weeks
treatment． Result:Compared with the rats in model group，RSE significantly decreased the levels of ALT，AST，
TG，TC，and LDL-C in serum as well as MDA and NO in liver tissue． The T-SOD conten was obviously increased
in liver tissue． The hepatic pathological changes were milder in the RSE groups than in the model group．
Conclusion:RSE has obviously therapeutic effects on alcoholic liver disease in rat． The mechanisms may be
relative to reducing lipid peroxide and protecting the structure of hepatocyte via enhancing the abilities of the free
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radical scavenging and antilipoperoxidant activities．
［Key words］ alcoholic liver disease;rhamnus songorica extract;oxidative stress;lipid peroxide;free
radial;antilipoperoxidant
新疆鼠李系鼠李科植物，产自新疆伊犁山
区［1］。资源丰富，为哈萨克医长期应用的民间哈医
药材，哈语译名“包尔胡尔特”。民间用药经验及本
项目前期研究基础均显示其对酒精性肝病(ALD)
有一定的治疗效果，但目前尚未见报道。本研究通
过建立大鼠酒精性肝病动物模型，研究新疆鼠李提
取物对酒精性肝病的作用，为其进一步开发和明确
其作用机制提供实验依据。
1 材料
1. 1 动物 110 只清洁级雌性 Wistar 大鼠，体质量
(210 ± 20)g，新疆医科大学医学实验动物中心提
供，生产许可证号 SCXK(新)2003-0001。
1. 2 试剂与药物 丙氨酸转氨酶(ALT，批号
20110614)、天 冬 氨 酸 转 氨 酶 (AST， 批 号
20110613)、一氧化氮(NO，批号 20110610)、丙二
醛(MDA，批号 20110613)、还原型谷胱甘肽(GSH，
批号 20110504)、总超氧化物歧化酶(T-SOD，批号
20110613)、考马斯亮蓝蛋白定量(批号 20110613)
测试试剂盒购于南京建成生物工程研究所，甘油三
酯(TG，批号 20111103)、总胆固醇(TC，批号
20111103)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C，批号
20110801)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C，批号
20111103)测试试剂盒购于北京北化康泰临床试剂
有限公司，二锅头酒(北京颐和八星酒业有限公司，
批号 20100828)。新疆鼠李的干燥块茎粉碎过 80
目筛，备用;新疆鼠李提取物(Rhamnus Songorica
extract，RSE)自制，出膏率为 5. 31%，含总黄酮
1. 10%;益肝灵(辽宁天龙药业有限公司，批号
20100502)。
1. 3 仪器 S22PC可见分光光度计(上海棱光技术
有限公司) ，Spectra MAX 190 型生物发光光度计(美
国 Molecular Devices) ，CO2 培养箱(日本 Sanyo
Electric) ;primo star生物显微镜(德国 Zeiss)。
2 方法
2. 1 分组及造模 大鼠 110 只随机分为正常对照
组、阳性对照组、模型组及 RSE 低、中、高剂量组，其
中正常对照组 10 只，其余每组 20 只。造模方法参
照张永昕［2］、马丽［3］等的方法，模型组及各给药组
第 1 ～ 2 周 10 mL·kg －1，30%白酒 ig，3 ～ 4 周 10 mL·
kg －1，40%白酒 ig，从第 5 周开始按照 10 mL·kg －1，
50%白酒 ig至第 10 周，每天分 2 次服。
2. 2 模型检测及给药 给酒 10 周后每组随机抽检
动物造模是否成功，检查病理及检测血清 ALT，
AST，造模成功后开始给药。模型组及各给药组每
日继续给予 50%白酒 ig，阳性对照组给予益肝灵
100 mg·kg －1，RSE 低、中、高剂量组分别按照 0. 9，
1. 8，3. 6 g·kg －1剂量 ig给药，用药剂量以小鼠前期
研究基础按动物体表面积换算。给药共 4 周。
2. 3 血清生化指标的检测 末次给药后禁食 12 h
处死动物，腹主动脉真空无菌采血，分离血清，测定
血清 ALT，AST，TG，TC，LDL-C，HDL-C含量。
2. 4 肝组织抗氧化指标的检测 用冰生理盐水制
备肝组织匀浆，取上清，检测 NO，SOD，MDA，GSH
水平。
2. 5 病理检测 取肝脏右叶距边缘 1 cm组织块固
定，常规 HE染色，光镜下观察其病理改变。
2. 6 统计学处理 采用 SPSS 18. 0 统计软件，计量
资料用 珋x ± s 表示，多组间比较用方差分析，两两比
较用 Dunnett-t检验，P ＜ 0. 05 为差异有显著性。
3 结果
3. 1 大鼠 ALD 模型造模检测 大鼠乙醇 ig10 周
后，造模组大鼠血清 ALT 和 AST 显著升高，与正常
对照组比较差异有统计学意义(P ＜ 0. 01)。组织病
理学检查结果表明:灌酒 10 周 80%(16 /20)大鼠发
生肝脂肪变性，可见大小不等脂肪滴散在，30%
(6 /20)大鼠出现肝细胞脂肪变性并伴有不同程度
炎细胞浸润，少数伴随纤维增生，表现出酒精性肝炎
的病理变化［4］。经富有经验的病理科医师诊断，病
理符合酒精性肝病的病理诊断标准［5-6］(图 1)。
A．脂滴散在;B．纤维组织增生
图 1 造模大鼠肝脏组织病理形态学改变(HE染色，× 400)
3. 2 一般状态 模型组大鼠给酒 ig 7 周后，出现
嗜睡、活动减少、精神状态变差，鼠毛杂乱无光泽，进
食量减少，体质量增长缓慢。10 周后，以上症状加
重。给药 2 周后各给药组动物体质量快速增长，并
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呈剂量相关性，给药组给药 4 周后以上症状明显
好转。
3. 3 RSE对 ALD大鼠血清生化指标的影响 给药
2 周后 RSE中剂量组和高剂量组 ALT，AST 与模型
组比较差异显著(P ＜ 0. 01) ;给药 4 周后，阳性对照
组及各 RSE 组血清 ALT，AST 均显著降低，与模型
组比较差异显著(P ＜ 0. 01)。给药 4 周后阳性药物
组及各 RSE给药组 TG，TC，LDL-C，HDL-C均有显
著变化，与模型组比较差异有统计学意义(P ＜
0. 01) ，高剂量组 TG，TC，HDL-C 与正常组大鼠比
较无显著性差异(表 1，2)。
3. 4 RSE对 ALD大鼠肝组织 T-SOD，MDA，NO和
GSH的影响 各 RSE组 T-SOD水平均有提高，其中
高剂量组与模型组比较差异显著(P ＜ 0. 05) ;各
RSE组可显著性降低 MDA含量(P ＜ 0. 01) ;各 RSE
组 GSH含量均有不同程度下降，但与模型组无显著
差异;各 RSE组 NO水平均显著下降，与模型组比较
差异显著(P ＜ 0. 05) (表 3)。
表 1 RSE对 ALD大鼠血清 ALT和 AST的影响(珋x ± s) U·L －1
组别
剂量
/ g·kg －1·d －1
给药 2 周(n = 6) 给药 4 周(n = 8)
ALT AST ALT AST
对照 － 33． 19 ± 5． 49 101． 36 ± 4． 56 31． 70 ± 4． 41 98． 97 ± 5． 71
模型 － 56． 70 ± 6． 104) 189． 03 ± 17． 904) 74． 97 ± 21． 614) 194． 75 ± 14． 054)
RSE 0． 9 51． 22 ± 1． 524) 178． 34 ± 12． 464) 42． 86 ± 4． 382) 147． 19 ± 11． 042，4)
1． 8 47． 87 ± 3． 922，4) 149． 74 ± 22． 152，4) 34． 82 ± 8． 722) 110． 06 ± 7． 762)
3． 6 42． 97 ± 2． 852，4) 137． 93 ± 14． 092，4) 29． 26 ± 2． 262) 104． 69 ± 8． 592)
益肝灵 0． 1 47． 17 ± 3． 522，4) 143． 53 ± 18． 072，4) 28． 46 ± 3． 882) 106． 71 ± 7． 912)
注:与模型组比较1)P ＜ 0. 05，2)P ＜ 0. 01;与对照组比较3)P ＜ 0. 05，4)P ＜ 0. 01(表 2 ～ 3 同)。
表 2 RSE对 ALD大鼠血脂变化的影响(珋x ± s) mmol·L －1
剂量 / g·kg －1·d －1 n TG TC LDL-C HDL-C
对照 － 9 0. 49 ± 0. 06 2. 20 ± 0. 14 3. 17 ± 0. 21 1. 42 ± 0. 09
模型 － 9 1. 13 ± 0. 104) 3. 10 ± 0. 164) 5. 19 ± 0. 234) 1. 33 ± 0. 08
RSE 0. 9 12 0. 69 ± 0. 092，4) 2. 64 ± 0. 162，4) 3. 48 ± 0. 202，3) 2. 01 ± 0. 122，4)
1. 8 8 0. 67 ± 0. 082，4) 2. 52 ± 0. 172，4) 3. 28 ± 0. 182) 1. 74 ± 0. 112，4)
3. 6 11 0. 55 ± 0. 032) 2. 29 ± 0. 132) 3. 58 ± 0. 262，4) 1. 54 ± 0. 102)
益肝灵 0. 1 10 0. 52 ± 0. 062) 2. 31 ± 0. 162) 3. 31 ± 0. 332) 1. 99 ± 0. 122，4)
表 3 RSE对 ALD大鼠肝组织 T-SOD，MDA，NO，GSH的影响(珋x ± s，n = 6)
组别 剂量 / g·kg －1·d －1 T-SOD /U·mg －1 MDA /nmol·mg －1 NO /μmol·g － 1 GSH /mg·g － 1
对照 － 198． 55 ± 6． 30 1． 26 ± 0． 18 2． 61 ± 0． 24 1． 29 ± 0． 11
模型 － 94． 31 ± 66． 854) 2． 91 ± 0． 344) 4． 62 ± 0． 324) 1． 98 ± 0． 363)
RSE 0． 9 106． 02 ± 20． 834) 2． 51 ± 0． 232，4) 4． 13 ± 0． 161，4) 1． 70 ± 0． 56
1． 8 114． 34 ± 8． 474) 2． 20 ± 0． 162，4) 3． 73 ± 0． 252，4) 1． 96 ± 0． 433)
3． 6 143． 80 ± 18． 451，3) 1． 99 ± 0． 162，4) 3． 41 ± 0． 202，4) 1． 57 ± 0． 35
益肝灵 0． 1 134． 01 ± 16． 814) 2． 27 ± 0． 112，4) 3． 87 ± 0． 372，4) 1． 42 ± 0． 17
3. 5 病理学变化 模型组全部大鼠发生肝脂肪变
性，肝细胞病变以中重度脂肪变性为主，50%大鼠出
现酒精性肝炎的病理表现，大鼠肝组织出现不同程
度空泡变性，部分区域可见肝细胞点状或灶状坏死，
炎性细胞浸润;各给药组脂肪变均有不同程度的减
轻，散在脂滴减少，炎细胞浸润及纤维增生程度均有
显著改善。其中 RSE高剂量组几乎无空泡变，仍存
在个别灶性坏死或炎细胞浸润。正常对照组未见异
常(图 2)。
4 讨论
笔者参考国人的饮酒习惯，采用单纯白酒梯度
浓度、分次灌胃的方式，酒精灌胃 10 周后观察到以
酒精性脂肪肝表现为主并伴有不同程度的炎性细胞
浸润和点状坏死，灌胃 14 周后观察到了酒精性脂肪
肝和酒精性肝炎同时存在的大鼠酒精性肝病模型。
酒精性肝病的发生机制较复杂，目前其发生机
制尚未完全阐明［7］。近年来国内外学者对酒精性
肝病的发生机制进行了大量研究，认为乙醇及其代
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厉彦翔，等:新疆鼠李提取物对大鼠酒精性肝病的作用
A． 正常对照组;B． 模型组;C． 益肝灵组;D． RSE 0. 9 g·kg －1组;
E． RSE 1. 8 g·kg －1组;F． RSE 3. 6 g·kg －1组
图 2 RSE对 ALD大鼠肝脏组织病理学
改变的影响(HE染色，× 400)
谢产物的直接毒性作用及所造成的机体代谢紊乱，
过氧化反应、自由基形成和氧利用障碍、线粒体损伤
均可引起肝损伤［8］。其中氧化应激发挥着重要作
用，氧化应激被认为不仅是 ALD 的原因，而且是
ALD的结果［9］。肝功能异常、代谢紊乱及结构破坏
等最终导致酒精肝损伤，在形态学上主要表现为肝
细胞脂肪样变、空泡样及肿胀，点状坏死及炎细胞浸
润等，血清 AST和 ALT升高［10-12］。在本实验中模型
组也观察到了此种病理变化。
实验结果显示，ALD 大鼠给予 RSE 后，血清中
ALT，AST活性和 TG，TC，LDL-C 含量显著降低;
肝组织中 T-SOD 活性显著升高，MDA，NO 含量明
显降低;肝组织病理改变明显好转，提示 RSE 有抗
氧化作用，提高 SOD活性，清除自由基，防止肝细胞
脂质过氧化，其保肝作用机制可能与水飞蓟素
相似［13-14］。
实验结果表明，RSE 各组大鼠血清 ALT，AST
及血脂水平的改变具有明显的剂量-反应相关性，肝
脏组织病理的损伤改善与 RSE 各剂量呈现显著的
剂量依赖性。因此在一定的剂量范围内，增加 RSE
剂量可以增强其对大鼠 ALD 的治疗效果。RSE 对
大鼠酒精性肝病具有一定的治疗作用。
综上，新疆鼠李提取物通过增强机体清除自由
基、抗脂质过氧化作用的能力，从而改善脂质过氧化
反应对肝脏的损伤和保护肝细胞的结构和功能，发
挥对酒精性肝病的治疗作用。另外，近年研究表明，
肝细胞的凋亡程度与 ALD 的发生发展密切相关，
ALD中肝细胞的凋亡机制的研究可能成为 ALD 防
治新的突破［15-16］。
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［责任编辑 李玉洁］
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