全 文 ：— 14 — 现代中药研究与实践2013年第27卷第5期Chin Med J Res Prac,2013 Sept.Vol.27 No.5
新疆 种植地锦草药材中鞣质的含量测定
买买提江·阿布都瓦克 1、2，古丽扎曼 .阿布都拉 3，凯赛尔·阿不都克热木 1，
玉素甫·艾合买提 1，木叶赛尔·吐尔逊 1，董竞成 *2
（1. 新疆维吾尔医学专科学校，新疆 和田 848000 ；2. 复旦大学附属华山医院中西医结合肺、炎症和肿
瘤研究室，复旦大学中西医结合研究所，上海 200040 ； 3. 新疆和田县人民医院，新疆 和田 848000)
摘　要：目的　建立新疆种植地锦草药材中鞣质的含量测定方法。方法　采用磷钼钨酸 -干酪素法显色 ,
分光光度法在 760nm 处测定。结果　10 批地锦草药材中鞣质的含量为 0.151%~0.249%。结论　此方法操作
简便、准确性好 , 可以作为地锦草中鞣质含量测定方法。
关键词：新疆地锦草；鞣质；磷钼钨酸 -干酪素法；含量测定
中图分类号：R927.2 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2013)05-0014-03
Determination of Tannins in Xinjiang Planting Euphorbia humifusae Herbs
Muhammadjan Abduwaki1-2, Gulzaman Abdulla3,Kaysar Abdukerem1, Yusup Ahmad1,Muyassar
Tursun1,DONG Jing-cheng2
(1. Xinjiang uygur medical school, Hotan 848000,China. 2. Laboratory of Lung, Infl ammation and
Cancers, Huashan Hospital, Fudan University; Institute of Integrated Chinese and WesternMedicine, Fudan
University, Shanghai 200040,China. 3. Xinjiang Hotan County peoples hospital, Hotan 848000,China)
Abstract: objective To establish a content determination method of tannins in xinjiang planting Euphorbia
humifusae Herbs. Methods Using phosphomolybdic acid - Casein chromogenic method and measured at 760nm.
Results Content of tannins was in the range of 0.151% ~ 0.249% in 10 batches of Euphorbia humifusae Herbs.
Conclusion This method was simple, good accuracy and could be used as content determination method of
tannins in Euphorbia humifusae Herbs.
Key words: xinjiang planting Euphorbia humifusae herbs; tannins; phosphorus molybdenum tungsten acid -
casein method; content determination.
收稿日期：2013-05-27
作者简介：买买提江.阿布都瓦克（1975-），男（维吾尔族），硕
士学位，主要从事维药饮片与制剂的药效物质基础研究；
E-mail：muhammatjan76@163.com
*通讯作者：董竞成（1959-），男，教授，博士研究生导师，主要从事
中西医结合呼吸病学、肾本质与老年病研究工作； E-mail：
jcdong2004@126.com
地锦草为大戟科大戟属地锦Euphorbia humifusa
Wild. 的干燥全草。地锦草是一种常用中药材 , 也是
一种维吾尔药材 , 在 2010 年版《中国药典》( 一部 )
和《维吾尔药志》（下册）均有记载。地锦草具有清
热解毒、凉血止血等功效，主要用于治疗各种皮肤
病、瘙痒、痢疾、肠炎、咳血、吐血、便血、崩漏、
外伤出血、湿热黄疸、乳汁不通、痈肿疔疮及跌打肿
痛等疾病 [1-3]。地锦草的凉血止血作用与其中含有的
鞣质有关 [4-5]。
近年来研究发现 , 鞣质具有与蛋白质结合发生沉
淀、与金属离子络合和抗氧化的性质 , 能凝固微生物
体内原生质和对酶发生作用,抑制细菌和病毒的生长,
表现出抑菌、抗病毒、抗肿瘤和抗癌变的药理活性 [6]。
其含量测定方法有皮粉法、干酪素法、络合滴定法[7-8]、
磷钼钨酸 -干酪素法 [9-10]。本研究参照 2010 年版《中
国药典》( 一部 ) 附录Ⅹ B 鞣质含量测定方法 , 对新
疆地锦草中鞣质的含量进行测定。
1　仪器与试药
TU-1901 紫外可见分光光度计 ( 北京普析通用仪
器有限公司 ); TN-100B 型扭力天平（上海第二天平
厂制造）；METTER AE240 电子天平（瑞士）；H.S.G-
IC-2 型电热恒温水浴锅（上海仪表供销公司）；KQ-
500DA 超声波发生器 ( 昆山超声仪器有限公司 ); 机械
粉碎机。
DOI:10.13728/j.1673-6427.2013.05.009
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没食子酸对照品 (批号 110831-200302, 中国药品
生物制品检定所 ) ；地锦草药材采自新疆和田地区和
田县，墨玉县，洛浦县等药材基地并经江西中医学院
中药鉴定教研室赖学文教授鉴定为地锦草Euphorbia
humifusa Willd.。
钨酸钠、钼酸钠、盐酸、磷酸、硫酸锂、溴、碳
酸钠等试剂均为分析纯；干咯素，蒸馏水。
2　方法与结果
2.1　溶液的制备
2.1.1　对照品溶液的制备　　精密称取没食子酸对
照品 50 毫克，置 100mL 棕色量瓶中，加水溶解并稀
释至刻度，精密量取 5mL，置 50mL 棕色量瓶中，用
水稀释至刻度，摇匀，即得（每 1mL 中含没食子酸
0.05mg)。
2.1.2　磷钼钨酸试液的制备　　称取钨酸钠 100g、
钼酸钠 25g, 加水 700mL 使溶解 , 加入盐酸 100mL、
磷酸 50mL, 加 热回流 10h, 放 冷 , 再称取硫酸锂
150g、水 50 mL、溴 0.2 mL, 煮沸 15 min, 除去残留的溴 ,
冷却 , 加水稀释到 1000mL, 过滤 , 收集滤液即得。
2.1.3　供试品溶液的制备　　精密称定药材粉末 1.0
克，置 250mL 棕色量瓶中，加水 150mL，放置过夜，
超声处理 10 分钟，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，
放置（使固体物沉淀），滤过，弃去初滤液 50mL, 精
密量取续滤液 20mL, 置 100mL 棕色量瓶中，用水稀
释至刻度，摇匀，即得。
2.2　标准曲线的制备
精 密 量 取 对 照 品 溶 液 0.5mL,1.0mL,2.0m
L,3.0mL,4.0mL,5.0mL, 分 别 置 25mL 棕 色 量 瓶
中，各加入磷钼钨酸试液 1mL， 再分别加水
11.5mL,11mL,10mL,9mL,8mL,7mL, 用 29%碳酸钠溶液
稀释至刻度，摇匀，放置 30 分钟以相应的试剂为空
白，照紫外 -可见分光光度法，在 760nm 的波长处
测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，
绘制标准曲线（见图 1）。回归分析得其线性关系：
Y＝ 1.1 557X +0.0264，r ＝ 0.999。
图 1： 没食子酸标准曲线
Fig. 1 Gallic acid standard curve
2.3　测定方法
2.3.1　总酚测定方法　　精密量取 2mL 供试品溶液 ,
置于 25mL 棕色量瓶中 , 各加入磷钼钨酸试液 1mL,
再分别加入水 10mL, 用 29%碳酸钠溶液稀释至刻度 ,
摇匀 , 常温放置 30min, 同时以相应试剂为空白 , 在
760 nm 处测定吸光度。计算总酚含量。
2.3.2　不被吸附酚测定方法　　　精密量取 25mL 供
试品溶液,加至盛0.6g干酪素的100mL具塞锥形瓶中,
密塞 , 置 30℃水浴中保温 1h, 时时振摇 , 取出 , 放冷 ,
摇匀 , 滤过 , 弃初滤液 , 精密移取 2mL 续滤液于 25mL
棕色容量瓶中 , 各加入磷钼钨酸试液 1mL, 再分别加
入水 10mL, 用 29%碳酸钠溶液稀释至刻度 , 摇匀 , 常
温放置 30 min, 同时以相应的试剂为空白 , 在 760nm
处测定吸光度。计算不被吸收酚含量。
2.4　精密度试验
按照“2.1.3”项下方法制备新疆墨玉县供试品
溶液 , 精密量取 2 mL, 按照“2.3”项下方法显色 , 于
760 nm 波长处连续测定 6次，RSD 为 0.22％ ，结果
表明本方法精密度良好。
2.5　稳定性试验
按照“2.1.3”项下方法制备新疆墨玉县供试品
溶液 , 精密量取 2 mL, 按照“2.3”项下方法显色后在
760 nm 波长处测定，在 30min 内吸收度上升较大，
在 5~120min 内吸收度RSD=1.53％，30~120min 内吸
收度RSD=0.49％ ，故选择在 30~120min 内测定。
2.6　重复性试验
按照“2.1.3”项下方法制备 6份新疆墨玉县供试
品溶液 , 精密量取 2mL, 分别按照“2.3”项下方法显
色测定 , 计算鞣质含量。重复性结果表明样品中鞣质
平均含量为 17.33％ ，RSD 为 2.91％ 。结果表明 , 此
方法重复性良好。
2.7　加样回收率试验
精密称取已知鞣质含量的新疆墨玉县地锦草药
材 6份各 10g, 精密称定，分别加入没食子酸对照品
溶液 (4.901g.L )10mL，按照“2.1.3”项下方法制备 ,
在“2.3”项条件下显色并测定吸光度 ,计算鞣质含量。
得平均回收率为 96.38％，RSD=2.96％。
2.8　样品鞣质含量测定
精密称取 10 个不同批次的新疆种植地锦草药
材，照“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，在“2.3”
项条件下显色测定吸光度 , 并计算鞣质含量。结果见
表 1。
— 16 — 现代中药研究与实践2013年第27卷第5期Chin Med J Res Prac,2013 Sept.Vol.27 No.5
表 1 ： 十批地锦草药材中鞣质含量测定结果 (%，n=3)
Tab. 1 Assay results of tannins in 10 batches of samples (%，n=3)
产 地 总酚含量 不被吸附酚含量 鞣质含
和田县 1 0.480 0.248 0.232
和田县 2 0.437 0.231 0.206
和田县 3 0.505 0.256 0.249
墨玉县 1 0.345 0.194 0.151
墨玉县 2 0.314 0.142 0.172
墨玉县 3 0.342 0.176 0.166
墨玉县 4 0.452 0.270 0.182
洛浦县 1 0.348 0.154 0.194
洛浦县 2 0.424 0.232 0.192
洛浦县 3 0.374 0.137 0.237
3　结论
地锦草为中医与其他民族医常用的药材 , 目前国
内外地锦草化学成分、药理作用研究较多 , 但是研究
得还不够深入。本研究参照 2010 年版《中国药典》(一
部 ) 附录Ⅹ B 鞣质含量测定方法 , 首次测定新疆种植
地锦草中的鞣质含量。本实验测定新疆种植地锦草中
的鞣质含量为 0.151%~0.249%。此方法操作简便、准
确性好 , 为制定该药材质量标准、饮片标准与其质量
控制等方面提供科学依据。
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HPLC测定不同产地白及药材中 1，4- 二 [4-（葡萄糖氧）
苄基 ] -2- 异丁基苹果酸酯的含量
黄良永 1，毛闪闪 2，陈　黎 1*
（1. 湖北省医药学院附属太和医院，湖北 十堰 442000 ；2. 湖北医药学院药学院，湖北 十堰 442000）
摘　要：目的　建立测定不同产地白及药材中 1，4- 二 [4-（葡萄糖氧）苄基 ] -2- 异丁基苹果酸酯含
量的 HPLC 方法；对其含量采用均数法进行聚类分析。方法　采用 HPLC 法，以Waters SunFire C18(4.6
mm ×250 mm，5μm) 为色谱柱，Diamonsil C18 保护柱，以乙腈和水为流动相，梯度洗脱，流速为 1
mL·min-1，检测波长 270 nm，柱温为 30℃，测定不同产地白及中 1，4- 二 [4-（葡萄糖氧）苄基 ] -2-
异丁基苹果酸酯的含量；对产地和 1，4- 二 [4-（葡萄糖氧）苄基 ] -2- 异丁基苹果酸酯含量之间的关系
用系统聚类分析法分析。结果　测定 17 批不同产地的白及药材，1，4- 二 [4-（葡萄糖氧）苄基 ] -2- 异
丁基苹果酸酯的含量差别明显；系统组内平均联接聚类分析结果显示，含量高低有明显的地域性。结论　
本文建立的含量测定方法简便、准确、重复性好，可用于控制白及药材的质量。
关键词：白及；1，4-二 [4-（葡萄糖氧）苄基 ] -2- 异丁基苹果酸酯；含量测定；HPLC；聚类分析
中图分类号：R927.2 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2013)05-0016-04
收稿日期：2013-07-16
作者简介：黄良永（1966年-），男，学士，主任药师，主要从事
药物分析和新药开发工作；Te l：07 1 9 - 8 8 0 1 1 0 3，E－
mail:huangly66@163.com
*通讯作者：陈黎（1975年-），女，硕士，主任药师，主要从事天然
药化学和中药资源调查研究；Tel：0719-8801157，E－
mail:chenli0201@sina.com