全 文 ：地锦草提取物对小鼠镇痛作用的实验研究
梁生林1， 李庆耀1， 钟卫华2， 颜峰光1， 李正红*
(1．井冈山大学医学院药理学教研室，江西 吉安 343000;2．井冈山大学附属医院功能科，江西 吉安 343000)
收稿日期:2010-05-05
基金项目:吉安市科技局重点科技计划项目(吉市科计字［2009］40)
作者简介:梁生林(1962—)，男，教授，从事中草药药理研究。Tel:18970600965，E-mail:slliang1962@ yahoo． com． cn
* 井冈山大学医学院 06 级药学本科班
摘要:目的 探讨地锦草提取物的镇痛作用。方法 采用热板法和醋酸扭体法致痛，观察大、小剂量的地锦草水提物和
醇提物灌胃给药的镇痛作用。结果 大剂量地锦草醇提物对小鼠热板法和醋酸扭体法致痛有非常显著的镇痛作用，与
生理盐水对照组比较和自身给药前比较有非常显著性差异(P ＜ 0． 01);大剂量地锦草水提物对小鼠热板法和醋酸扭体
法致痛有显著的镇痛作用，与生理盐水对照组比较和自身给药前比较有显著性差异(P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05);小剂量地
锦草提取物的镇痛作用与生理盐水对照组比较和自身给药前比较有显著性差异(P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05)。结论 地锦草
提取物具有镇痛作用。
关键词:地锦草;水提物和醇提物;灌胃;镇痛;实验研究
中图分类号:R285． 5 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2011)05-0880-03
地锦草为大戟科一年生草本植物地锦 Euphorbia humifu-
sa Wild的干燥全草。全国各地均有分布，尤以长江流域及
南方各省为多，我国江西分布尤多。主要功效为清热解毒、
凉血止血［1-2］。课题组在前期研究中发现，地锦草煎剂腹腔
注射对小鼠热板法致痛有镇痛作用［3］，但地锦草提取物灌胃
给药是否有镇痛作用，水提物和醇提物镇痛作用是否有差
异，尚未见报道。本研究探讨地锦草水提物和醇提物灌胃对
小鼠热板法和化学刺激法致痛的镇痛作用，旨在为地锦草进
一步开发和临床应用提供实验依据。
1 材料
HSS-1B型恒温浴槽(成都仪器厂生产);FA160 电子天
平(上海天平仪器厂);地锦草 2009 年 9 月采于江西吉安;吗
啡注射液(沈阳第一制药厂，批号:080701-2，规格:1 mL /10
mg);36%醋酸(上海松江佘山化工厂);昆明种小鼠(体质量
18 ～ 22 g，雌雄兼备，由南昌大学实验动物中心提供)。
2 方法
2． 1 药物配制
2． 1． 1 地锦草水提物的制备 取切段成 2 ～ 4 cm的干燥地
锦草 45 g，用蒸馏水浸泡 30 min，加 10 倍量蒸馏水(第 1 次
多加 2 倍量)用文火煎煮 3 次，每次 0． 5 h，合并 3 次煎出液，
静置去渣，浓缩为 100 mL，即浓度为 45 %(0． 45 g 生药 /
mL)备用，以此作为大剂量组的给药浓度，再配制小剂量组
的给药浓度 15 %(0． 15 g生药 /mL)。
2． 1． 2 地锦草醇提物的制备 用回流提取法，将 45 g 干燥
地锦草适度粉碎，用体积分数为 80%乙醇浸泡 24 h，水浴中
加热回流，放冷过滤，第 1 次回流 1 h，第 2 及第 3 次各约 0． 5
h，回收乙醇，浓缩成浸膏状，贮存备用。用蒸馏水配成所需
浓度，即大剂量组的给药浓度 45 %(0． 45 g生药 /mL)，小剂
量组的给药浓度 15 %(0． 15 g生药 /mL)。
2． 1． 3 溶液配制 吗啡溶液 ∶ 用蒸馏水配成 0． 1 %浓度。
醋酸溶液:用蒸馏水配成 0． 6 %浓度。
2． 2 地锦草提取物热板法［4-5］镇痛实验
2． 2． 1 筛选实验动物 将小鼠置于镇痛槽内，以舔后爪出
现时间作为痛阈的指标。当出现舔后爪时，立即记录时间
(即痛阈值)，然后取出小鼠。用此法筛选出痛阈值在 5 ～ 30
s的雌性小鼠 84 只供实验用。
2． 2． 2 动物分组与正常痛阈测定 将筛选好的 84 只小鼠，
按随机数字表法分为 6 组，每组 14 只:①组为生理盐水对照
组;②组为 0． 1 %吗啡溶液组;③组为地锦草水提物大剂量
组(质量分数为 45 %);④组为地锦草水提物小剂量组(质
量分数为 15 %);⑤组为地锦草醇提物大剂量组(质量分数
为 45 %);⑥组为地锦草醇提物小剂量组(质量分数为 15
%)。将每只小鼠正常痛阈值各测 2 次，每次间隔 5 min，取
其平均值为给药前正常痛阈值。
2． 2． 3 给药 ①组生理盐水;②组 0． 1 %吗啡溶液;③组
45 %地锦草水提物;④组 15 %地锦草水提物;⑤组 45 %地
锦草醇提物;⑥组 15 %地锦草醇提物。小鼠均灌胃给药，灌
胃量均为 0． 1 mL /10 g，连续灌胃 5 d，每天 1 次。末次给药
后 30、45、60、90 min各测小鼠痛阈值，如果用药后放入镇痛
槽内 60 s仍无反应，即将小鼠取出，其痛阈值按 60 s计算。
2． 3 地锦草提取物醋酸扭体法［4-5］镇痛实验
取昆明小鼠 84 只，雌雄各半，随机分为 6 组:生理盐水
对照组、盐酸吗啡组、地锦草水提物大剂量组、地锦草水提物
小剂量组、地锦草醇提物大剂量组、地锦草醇提物小剂量组。
小鼠均灌胃给药，灌胃量均为 0． 1 mL /10 g，连续灌胃 5 d，
每天 1 次。末次给药 30 min 后，各鼠均腹腔注射 0． 6 %醋
088
2011 年 5 月
第 33 卷 第 5 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
May 2011
Vol． 33 No． 5
酸 0． 1 mL /10 g(醋酸溶液临用前配制)。观察并记录 20
min内各组出现的扭体反应(腹部内凹、伸展后肢、臀部抬
高)次数。
2． 4 统计学分析
应用 SPSS 11． 0 统计软件进行统计学处理。其结果以
珋x ± s表示，统计学处理采用 t检验。
3 结果
3． 1 地锦草提取物对热板法所致小鼠疼痛的影响
给药前各组痛阈值比较无显著性差异(P ＞ 0． 05);
0． 1%吗啡溶液组、45%地锦草水提物组和醇提物组给药后
与生理盐水对照组比较有显著性差异(P ＜ 0． 01，P ＜
0． 05);15%地锦草水提物组给药后 30、45、60 min 与生理盐
水对照组比较有显著性差异(P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05);15%地锦
草醇提物组，给药后 30 min 与生理盐水对照组比较有非常
显著性差异(P ＜ 0． 01)。
与自身给药前比较，生理盐水对照组无显著性差异(P
＞ 0． 05);0． 1%吗啡溶液组、45 %地锦草水提物组、15 %地
锦草水提物组、45 %地锦草醇提物组给药后与给药前比较
均有显著性差异(P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05);15 %地锦草醇提物
组，给药后 30、45 min 与给药前比较有显著性差异(P ＜
0． 01，P ＜ 0． 05)。结果见表 1。
表 1 地锦草提取物对热板法所致小鼠疼痛的影响 (珔x ± s，n =14)
组别 给药前痛阈值 / s
给药后痛阈值 / s
30 min 45 min 60 min 90 min
生理盐水对照组 11． 14 ± 3． 19 10． 16 ± 2． 89 11． 4 ± 4． 01 11． 21 ± 2． 98 12． 21 ± 3． 23
0． 1 %吗啡溶液组 10． 95 ± 2． 52 18． 49 ± 5． 65＊△ 19． 52 ± 4． 40＊△ 21． 19 ± 5． 19＊△ 19． 33 ± 5． 91＊△
45 %地锦草水提物组 12． 26 ± 4． 59 20． 02 ± 7． 82＊△ 21． 51 ± 8． 49＊△ 20． 67 ± 6． 32＊△ 17． 89 ± 6． 37＊＊△△
15 %地锦草水提物组 10． 06 ± 2． 80 14． 98 ± 4． 54＊△ 14． 54 ± 3． 81＊＊△ 15． 08 ± 6． 22＊＊△ 14． 12 ± 4． 81△△
45 %地锦草醇提物组 12． 62 ± 3． 37 26． 18 ± 6． 03＊△ 26． 16 ± 5． 51＊△ 26． 50 ± 6． 31＊△ 29． 81 ± 6． 41＊△
15 %地锦草醇提物组 10． 9 ± 3． 32 15． 38 ± 4． 23＊△ 13． 98 ± 3． 98△△ 11． 87 ± 3． 78 10． 59 ± 3． 24
注:与生理盐水对照组比较，* P ＜ 0． 01，＊＊P ＜ 0． 05;与自身药前痛阈比较，△P ＜ 0． 01，△△P ＜ 0． 05。
3． 2 地锦草提取物对醋酸扭体法所致小鼠疼痛的影响
0． 1 %吗啡溶液组与生理盐水对照组比较有非常显著
性差异(P ＜ 0． 01);45%、15%地锦草水提物和醇提物组与
生理盐水对照组比较均有显著性差异(P ＜ 0． 01，P ＜
0． 05)。结果见表 2。
表 2 地锦草提取物对醋酸扭体法所致小鼠疼痛的影响
(珔x ± s，n =14)
组别 扭体反应数 /次
生理盐水对照组 44． 14 ± 20． 25
0． 1 %吗啡溶液组 1． 36 ± 3． 47*
45 %地锦草水提物组 21． 71 ± 16． 2*
15 %地锦草水提物组 30 ± 12． 47＊＊
45 %地锦草醇提物组 21． 14 ± 17． 38*
15 %地锦草醇提物组 25 ± 21． 09＊＊
注:与生理盐水对照组比较，* P ＜ 0． 01，＊＊P ＜ 0． 05。
4 讨论
地锦草具有清热解毒、止血活血、利湿退黄等功效，现代
药理研究表明地锦草具有抗菌［6］、抗病毒、抗真菌［7］、止
血［6］、抗氧化［8-12］、保肝［13-14］、保肾［9］等作用。民间及临床广
泛用于上呼吸道感染，急慢性咽喉炎，急性扁桃体炎，气管
炎，肺炎，急性肠胃炎，小儿腹泻，细菌性痢疾，病毒性肝炎，
肾盂肾炎，咳血、尿血、便血，外伤所致出血、瘀血、肿痛，各种
体癣等。
本实验研究表明，大剂量地锦草水提物和醇提物可显著
提高热板法所致的小鼠痛阈值和减少醋酸扭体法所致的小
鼠扭体次数，与生理盐水对照组比较和自身给药前比较有显
著差异，醇提物镇痛作用好于水提物，为其综合开发利用提
供了实验依据。其镇痛有效成份及机制有待进一步研究。
参考文献:
［1］ 中国医学百科全书编辑委员会． 中国医学百科全书·蒙医学
［M］． 上海:上海科学技术出版社，1992:120．
［2］ 马清均，王淑玲． 常用中药现代研究与临床［M］． 天津:天津
科技翻译出版公司，1995:320．
［3］ 梁生林，温定文，肖红铃，等． 地锦草煎剂对小鼠的镇痛作用
［J］． 中国医院药学杂志，2009，29(23):1993-1995．
［4］ 陈 奇． 中药药理研究方法学［M］． 2 版． 北京:人民卫生出
版社，2006:366-368．
［5］ 龚纯贵，张国庆，王希营． 仙鹤草提取物镇痛抗炎试验的实
验研究［J］． 药学实践杂志，2006，24(6):339-341．
［6］ 褚小兰，廖万玉，楼兰英，等． 地锦类中草药的药理作用研究
［J］． 时珍国医国药，2001，12(3):193-194．
［7］ 古力娜 ·达吾提，尤丽吐孜，艾则孜·亚森，等． 维药地锦
草软膏的体外抗真菌及其对豚鼠皮肤真菌感染的治疗作用研
究［J］． 中药药理与临床，2007，23(5):178-180．
［8］ 阿不都热依木，阿不都艾尼，哈木拉提，等． 五种维吾尔药的
清除羟自由基及抗 DNA 损伤作用研究［J］． 中草药，2001，
32(3):236-238．
［9］ 张振涛，吴仁奇，张 威，等． 地锦草抗氧化作用及对肾缺血
再灌注损伤保护作用的实验研究［J］． 中国中医药科技，
1999，6(1):30-31．
［10］ 余集凯，萨仁高娃，霍万学． 地锦草提取物对小鼠肝组织
GSH-PX和 CAT活性的影响［J］． 内蒙古民族大学学报:自然
科学版，2005，20(2):191-193．
［11］ 赵宗孝，好斯巴特，汤文莉，等． 五种中药材清除自由基作
用的实验研究［J］． 时珍国医国药，2004，15(2):71-72．
［12］ 曹瑞珍，魏永春，张国文，等． 地锦草总黄酮对 D-半乳糖衰
老模型小鼠抗氧化作用研究［J］． 卫生研究，2007，36(3):
188
2011 年 5 月
第 33 卷 第 5 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
May 2011
Vol． 33 No． 5
387．
［13］ 饶光宇，陈秀芬． 地锦草保肝作用研究［J］． 中药药理与临
床，1996，12(2):24-25．
［14］ 曹瑞珍，魏永春，强 欣，等． 地锦草总黄酮预防四氯化碳
所致急性肝损伤的实验研究［J］． 时珍国医国药，2007，18
(1):85-86．
粗根荨麻提取物对环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下保护作用的实验
观察
李仲昆1， 尹为民2， 王崇静1， 王 珩1， 任晓明1， 李 静1， 蒋立虹1*
(1．昆明市延安医院，云南 昆明 650051;2．云南省第一人民医院 云南 昆明 650032)
收稿日期:2010-05-16
基金项目:云南省科技计划上项目(2008ZC147M)
作者简介:李仲昆(1967—)，女，主任药师，长期从事临床药学研究工作。Tel:(0871)3211154，E-mail:yayylzk66@ yahoo． com． cn
* 通信作者:蒋立虹，主任医师。Tel:(0871)3211001
摘要:目的 研究粗根荨麻提取物对环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下保护作用。方法 通过测定小鼠血清溶血素、小鼠
IL-2、IFN-γ、CD3、CD4、CD8 的水平，研究粗根荨麻提取物的免疫调节作用。结果 粗根荨麻提取物可提高小鼠血清溶血
素、小鼠 IL-2、IFN-γ、CD3、CD4、CD8 的水平。结论 粗根荨麻提取物具有增强机体免疫功能的作用。
关键词:粗根荨麻;免疫功能;小鼠
中图分类号:R 284． 1 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2011)05-0882-03
荨麻属植物在我国已有近千年的药用历史，国外从古罗
马时期就开始药用，德国已经开发出治疗风湿、前列腺炎的
产品，国外对大荨麻和异株荨麻进行了较系统的研究，发现
其可以用来治疗前列腺增生、风湿性关节炎、过敏性鼻炎、高
血压、心脏病、糖尿病，此外还具有抗病毒及免疫调节活
性［1-3］。而我国目前尚无产品。研究论文都停留在抗炎方
面，而对免疫调节方面的研究报道很少。本试验用环磷酰胺
制备小鼠免疫功能低下的模型，然后给与口服粗根荨麻提取
物，通过测定小鼠血清溶血素、白细胞介素 2(IL-2)、γ-干扰
素(IFN-γ)、T淋巴亚群 CD3、CD4、CD8 的量，观察粗根荨麻
的免疫调节作用。现报道如下。
1 材料
1． 1 动物
ICR雄性小鼠 120 只，购自昆明医学院动物科，合格证
号 SCXK(滇)2010-0008，体质量(20 ± 2)g。
1． 2 药物及主要试剂
1． 2． 1 受试物 粗根荨麻 Urtica Macrorrhiza Hand-Mazz:采
自云南宾川鸡足山，由昆明植物所李锡文教授鉴定。
水提物的制备方法:将干燥后的粗根荨麻粉碎后，经过
2次水提取，合并提取液，干燥后即得，一般可以得到 10%的
干燥品，即 1 g相当于 10 g生药。
粗多糖的制备方法:将干燥的水提物 25 g，加水 70 mL
溶解，加 95%乙醇 350 mL，搅拌，倾去上层液体。沉淀加水
50 mL溶解，加 95%乙醇 250 mL，搅拌，倾去上层液体，沉淀
干燥后即得。可得 9 g粗多糖，即 1 g相当于 28 g生药。
精制多糖的制备方法:将干燥的水提物 25 g，加水 70
mL溶解，加 95%乙醇 350 mL，搅拌，倾去上层液体。沉淀加
水 50 mL溶解，加 95%乙醇 250 mL，搅拌，倾去上层液体，此
操作再重复 2 次，沉淀干燥后即得。可得 6． 5 g精制多糖，即
1 g相当于 38 g生药。
1． 2． 2 主要试剂 注射用环磷酰胺(江苏恒瑞医药股份有
限公司，09080521)。补体:抽取 4 只豚鼠心脏血，雌雄各半，
分离新鲜血清，混合后备用，临用时生理盐水稀释 1 ∶ 10。鸡
红细胞(5% CRBC)，取新鲜鸡血，除去纤维蛋白，用生理盐
水制备为 5%CRBC悬液备用。IL-2、IFN-γ试剂盒，购于昆明
晶美公司。流式试剂 Mouse CD3E PE-CY5，mouse CD4
FITC，mouse CD8-PE ，为 BD公司试剂。
1． 3 主要仪器
紫外分光光度计(日本岛津 UV-2401-PC)。酶标仪(美
国 Bio-RAD680)。流式细胞仪(美国 BD公司)
2 方法
2． 1 粗根荨麻对免疫低下小鼠血清溶血素的影响
2． 1． 1 模型制备［4］ ICR 雄性小鼠 60 只，随机分为 5 组:
对照组，模型组，粗根荨麻 A(水提物)、B(粗多糖)、C(精制
多糖)组。实验开始后，粗根荨麻 A、B、C 组灌服药物，共给
药 7 d，给药剂量为 0． 5 g /kg。对照组、模型组每天灌服水
0． 3mL。对照组、模型组、粗根荨麻 A、B、C 组第 1 天腹腔注
射 5%CRBC悬液 0． 4mL，模型组、粗根荨麻 A、B、C组在第 2
天腹腔注射环磷酰胺 100 mg /kg。第 8 天按照 2． 1． 2 项下进
行测定。
288
2011 年 5 月
第 33 卷 第 5 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
May 2011
Vol． 33 No． 5