全 文 ：IL-6含量则明显减轻(均 p<0.01)。表明血府逐瘀汤可
能通过抑制 TNF-α、IL-1和 IL-6的产生或释放而减轻
RIRI,或通过其所具有的抗缺氧和镇痛 , 增强 SOD活性 , 清
除自由基 , 改善血液流变性 , 减轻微循环障碍 , 改善组织或
器官的血液循环的作用 [ 1 , 8]减轻 RIRI而使 TNF-a、IL-1
和 IL-6产生减少。
血府逐瘀汤出自清代医家王清任《医林改错》, 为祖国
医学活血化瘀之名方。中国医学科学院药物研究所认为
局部缺血是中医瘀血的现代病理学概念之一 , 并通过药理
实验研究支持了这一概念 [ 9] 。中医理论认为瘀血既是一
种病理性产物 , 又可成为新的致病因素 , 所以对于瘀血证
的治疗 , 活血化瘀为其最基本治则。 血府逐瘀汤可能从调
整全身血液循环功能着手 , 流通血脉 , 祛除瘀滞 , 改善局部
病灶瘀滞情况 , 从而改善 RIRI大鼠肾功能。
本实验结果表明 ,血府逐瘀汤具有防治 RIRI的作用 ,
其对 TNF-α、IL-1和 IL-6等细胞因子的调控可能是重
要的机制之一。其它作用机制尚待进一步研究。
参考文献
[ 1] 　吴启富 ,杜美华 ,等 .血府逐瘀汤的作用机理研究 [ J] .中国
医药学报, 1990, (4):28.
[ 2] 　FadyChamoun, MelissaBurne, MichaelO Donnel, etal.Patho-
physiogicroleofselectinsandtheirligandsinischemiareperfu-
sioninjury[J].FrontBiosci, 2000, 5(1):E103-E109.
[ 3] 　AzumaH, NadeauK, TakadaM, eta1.CelharandmolecularPr
- edictorsofchronicrenaldysfunctionafterinitialischemia
reperfusioninjuryofasinglekidney[J] .Transplatation, 1997, 64
(2):190-197.
[ 4] 　DaemenMA, vandeVenMW, HeinemanE, etal.Involvementof
enDoge-nousinterleukin-10 andtumornecrosisfactor-al-
phainrenalische-mia-reperfusioninjury[ J].Transplanta-
tion, 1999, 67(6):792-800.
[ 5] 　MahmudulHaq, JamesNorman, SabinaR.Saba, eta1.RoleofIL
-linRenalIschemiaReperfusionInjury[ J] .JamSocNephrol,
1998, 9:614- 619.
[ 6] 　HeemannU, SzaboA, HamarP, eta1.LipopolysaccharidePre-
treat-mentprotectsfromrenalischemia/reperfusionin.iury:
Possiblecon-nectiontoaninterleukin-6-dependentpath-
way[ J] .AmJPathol, 2000, 156(1):287-293.
[ 7] 　EgidoJ, Gomez-chiariM, OritizA, eta1.Roleoftumorne-
crosisfactor-ainthepathogenesisofglomerulardisease[ J] .
KidneyInt, 1993, 43(suppl39):S59.
[ 8] 　沃兴德 ,丁志山 ,康文英.血府逐瘀汤对缺血再灌注损伤大鼠
心肌细胞的保护作用研究 [ J] .浙江中医学院学报 , 2003, 27
(1):50-52.
[ 9] 　中国医学科学院药物研究所活血化瘀治则研究组.研究活血
化瘀药物联系中西医药理的初步尝试 [ J].新医药学杂志 ,
1976, (2):33.
收稿日期:2007-01-11
加味二味拔毒散的皮肤毒性实验研究
王　畅　指导老师:杜　军
(贵阳中医学院 2004级硕士研究生 , 贵州贵阳　550002)
　　内容提要:目的:对加味二味拔毒散进行动物实验研究 ,包括皮肤急性毒性实验 、皮肤刺激性实验和过敏皮肤性实验 ,
以了解其安全性。方法:将不同剂量的加味二味拔毒散用于动物背部正常和破损去毛区皮肤 ,观察其是否产生急性毒性;
采用致敏与激发接触加味二味拔毒散 ,观察动物过敏情况。结果:加味二味拔毒散未产生急性毒性 , 皮肤刺激反应 , 反复
致敏后使用 , 也无皮肤与全身过敏反应。结论:加味二味拔毒散是较安全的局部外用制剂。
关键词:加味二味拔毒散;皮肤急性毒性;皮肤刺激性;皮肤过敏反应
　　中图分类号:R289.5　文献标识码:B　文章编号:1002-1108(2007)03-0059-02
　　加味二味拔毒散(雄黄 、明矾 、冰片 , 芦荟)是在古方二
味拔毒散(雄黄 、明矾等份)的基础上加冰片 、芦荟两味中
药而成。二味拔毒散外用早在 《医宗金鉴 》(外科心法要
诀)中就有记载 , 大量文献表明二味拔毒散外用治疗带状
疱疹 , 疗效甚佳。 此外 , 还可治疗婴儿湿疹 、接触性皮炎 、
毛囊炎 、流行性腮腺炎及疖等疾病。 为了解其在外用给药
过程中的安全性 , 本研究进行了动物急性毒性 、皮肤刺激
与过敏试验 , 现将有关实验资料报告如下。
1　实验材料
1.1　动物与制剂　加味二味拔毒散及赋形剂(本实验室
提供);2, 4-二肖基氯苯(中国医药公司北京分公司提供 ,
将其配成 1%的致敏浓度和 0.1%激发浓度);硫化钠(临
用前配成 8%浓度);豚鼠 , 体重 400 ±50g,清洁级 , ♀♂各
半;健康白兔 ,体重 2.0±0.2kg, 清洁级 , ♀♂各半 ,由贵阳
医学院实验动物中心提供。生产许可证:SCXK2002 -
0001。
·59·
第 29卷　第 3期
2007年 5月　 　　　　　　　　　　　　
贵阳中医学院学报
JGCTCM 　　　　　　　　　　　
No.3　Vol.29
May　2007
DOI :10.16588/j.cnki.issn1002-1108.2007.03.034
1.2　制备工艺　二味拔毒散(雄黄 ,白矾等份各 60g)加冰
片 60g, 雄黄 、白矾 、冰片共研细末 , 过 80目筛 , 再掺入新鲜
芦荟汁 120g调成糊状备用(比例 1∶1∶1∶2)。使用时用
蒸馏水配制成不同的浓度。
2　实验方法 [ 1、2]
2.1　皮肤急性毒性实验
2.1.1　动物及皮肤准备　豚鼠 50只 , 体重 400±50g,清洁
级 , ♀♂各半 ,实验前 24h用 8%硫化钠将豚鼠背部脊柱两
侧毛脱去 [ 3] , 脱毛面积为 40cm2左右。破损皮肤组用 75%
乙醇消毒皮肤 , 用消毒针头在去毛范围内做 “#” , 字状划
痕 , 以皮肤渗血为度。
2.1.2　分组　豚鼠随机分为 5组 , 每组 10只 ,其中 1组为
阴性对照组(涂赋形剂), 4组为试验组 , 即加味二味拔毒散
完整皮肤高 、低剂量组 ,破损皮肤高 、低剂量组。
2.1.3　给药方法与观察　阴性对照组与加味二味拔毒散
高剂量组(完整皮肤与破损皮肤组)各涂试药 4g,低剂量组
(完整皮肤与破损皮肤组)各涂试药 2g,用油纸及两层纱布
覆盖 , 并用无刺激的胶布封固定四周及固定中间部位封闭
接触 24h,防止脱落和豚鼠舔食受试药物。给药 24h后 , 使
用温水清除残存受试药物。去除药物后 1h、 24h、 48h、72h
至 14d,记录豚鼠饮食 、皮肤毛发 、眼和粘膜的变化 、呼吸 、
中枢神经系统 、四肢活动等有否中毒表现 , 若遇动物死亡 ,
应及时进行大体解剖 ,必要时进行病理学检查。观察期每
3d称重 1次 , 至观察结束。
2.2　皮肤刺激性试验
2.2.1　动物及皮肤准备 　健康白兔 8只 , 体重 2.0 ±
0.2kg, 清洁级 , 早占各半 , 背部脊柱两侧脱毛 , 面积为
150cm2 , 余同 2.1.1。
2.2.2　分组随机分为 2组 ,即完整皮肤组和破损皮肤组 ,
每组 4只。
2.2.3　给药方法与观察　实验采用同体左右自身对比。
左侧去毛区涂加味二味拔毒散 1g, 右侧涂赋形剂作为对
照 , 用消毒纱布和胶布固定 ,给药 24h后 , 用温水去除残留
药物 , 去除药物后 1h、 24h、 48h、72h肉眼观察 ,记录涂抹处
有无红斑和水肿等情况 ,并评判 、记录各组的分值 [ 2] 。
2.3　皮肤过敏试验
2.3.1　动物及皮肤准备　同 2.1.1, 背部脊柱两侧脱毛 ,
去毛面积每侧约 3cm×3cm。
2.3.2　分组　随机分为 3组 , 每组 10只 ,第 1组为加味二
味拔毒散 , 第 2组为阴性组(赋形剂), 第 3组给阳性致敏
物(1%, 2, 4-二硝基氯苯)。
2.3.2　致敏接触　取加味二味拔毒散 0.1g涂于豚鼠左侧
脱毛区 , 用 1层油纸及 2层消毒纱布覆盖 ,以胶布固定 , 持
续 6h, 第 7d和第 14d以同样方法各重复 1次 ,共 3次 ,阴性
与阳性组方法同上。
2.3.3　激发接触　于末次给受试物致敏后 14d, 将加味二
味拔毒散 0.1g、赋形剂 0.1g、0.1%2, 4二硝肖基氯苯 0.1g
分别涂于相应动物的右侧脱毛区 , 6h后去除受试物 , 即刻
观察 , 然后于 24、48、72h再次观察皮肤过敏反应情况 , 按皮
肤过敏反应评分标准 [ 4]:轻度红斑为 1分 、中度红斑为 2
分 、重度红斑为 3分 、水肿性红斑为 4分 、轻度水肿为 1分 、
中度水肿为 2分 、重度水肿为 3分给予评分 ,同时观察动物
是否有哮喘 、站立不稳等全身性过敏反应。按公式计算致
敏反应发生率:致敏反应发生率 =有过敏反应动物数 /动
物总数 ×100%。
3　实验结果
3.1　急性毒性试验结果表明 , 加味二味拔毒散小剂量
(2g/40cm2)和大剂量(4gd40cm2)外用时对完整皮肤和破
损皮肤的豚鼠的饮食 、皮毛光泽 、呼吸和体重等无任何影
响 , 先后观察 7d,未见中枢神经系统有异常表现 ,无一豚鼠
死亡 , 均未出现任何急性毒性反应 , 表明加味二味拔毒散
大 、小剂量均未产生急性毒性反应。
3.2　皮肤刺激性试验结果表明 ,加味二味拔毒散与赋形剂
对完整皮肤及损伤皮肤的平均反应分值无明显差异 , 均低
于 0.5,表明两者对正常皮肤及破损皮肤均无刺激性 , 定为
无刺激反应 3.3皮肤过敏试验结果表明 , 阳性对照组动物
在激发给药 6h后 , 有轻度和中度红斑出现 ,但无水肿形成 ,
72h后红斑消失 ,其致敏率为 80%, 而加味二味拔毒散及赋
形剂组在激发用药后 , 均无红斑与水肿形成 , 致敏率为零 ,
表明加味二味拔毒散不产生致敏作用。结果(见附表 1)。
　表 1加味二味拔毒散对豚鼠皮肤过敏反应的影响
组别 动物数
平均反应分值
6 24 48 72(h)
致敏率
(%)
加味二味拔毒散组 10 0 0 0 0 0
阴性组 10 0 0 0 0 0
阳性致敏物组 10 1.8 1.5 0.8 0 80
4　结论
加味二味拔毒散对家兔完整 、破损皮肤均无急性皮肤
毒性反应 , 无刺激反应 ,也未产生皮肤过敏反应 , 动物实验
说明加味二味拔毒散是安全的局部外用制剂。
参考文献
[ 1] 　谢秀琼 .中药新制剂开发与应用 [ M].第 2版 .北京:人民
卫生出版社 , 2000:565-566.
[ 2] 　盛国荣 ,谢勇 .肤康涂膜剂急性毒性与过敏性试验的研究
[ J] .海峡药学.2004, 16(2):34-36.
[ 3] 　邹移海 ,徐志伟 ,苏钢强.实验动物学 [ M] .第 1版.北京:
科学出版社 , 2004:181-182.
[ 4] 　中华人民共和国卫生部药政局 ,编.新药临床前研究指导原
则汇编(药学 、药理学 、毒理学)[M] , 1994:207.
·60· 　　　　　　　　　　　　　　　　　　贵阳中医学院学报　　　　　　　　　　　　　　　　第 29卷