全 文 ： HPLC 法测定瓜子金中细叶远志皂苷的含量
徐 宏 1，冯 果 1，李芙蓉 2
（1.贵阳中医学院；2.贵州康琦药械有限公司：贵阳 550002）
摘要：目的：建立瓜子金药材中细叶远志皂苷的含量测定方法。方法：采用瓜子金提取物碱水解方法制备总皂苷的次级
苷—细叶远志皂苷，采用高效液相色谱法测定细叶远志皂苷的含量。色谱条件为 Zorbax SB- C18 色谱柱（4.6×150
mm，5μm），Zorbax SB-C18 为预柱，流动相为甲醇：0.05%磷酸溶液（65:35），流速为 1.0 ml/min，柱温为 30℃，检
测波长 210 nm。结果：细叶远志皂苷在 0.247μg～5.357μg 范围内线性关系良好，回归方程为 y=347.850848x-
4.2439371（r=0.99991），平均回收率（n=6）为 97.09%，RSD=1.81%。瓜子金中含细叶远志皂苷含量为 0.8%～1.8%。
结论：方法简便、准确、稳定、重复性好，该方法可作为瓜子金药材及瓜子金复方制剂质量控制方法的依据。
关键词：瓜子金；远志；细叶远志皂苷；高效液相色谱法；含量测定
中图分类号：R284.1 文献标识码：B 文章编号：1005-5320（2017）01-0000-00

瓜子金(Polygala japonica Houtt.)为远志科远志属植物，又名瓜子草、辰砂草、锐草莲，主要
分布于我国南方各省，在贵州省各地均有分布，以其全草或地上部分入药，收载于《贵州省中药材、
民族药材质量标准》（2003 年版）。瓜子金主要用于治疗咽喉炎、扁桃体炎、口腔炎、白喉、小儿肺
炎、泌尿系结石、毒蛇咬伤、跌打损伤等。据文献报道，远志属植物中均含有远志皂苷成分，远志总
皂苷以碱水解均能转化为“细叶远志皂苷”[1]，而远志皂苷类成分具有安神益智、祛痰、抑菌等作用
[2] ,因此，测定“细叶远志皂苷”不仅能够反映总皂苷的含量，而且水解产物转化稳定，是控制远志及
远志属药用植物质量的较理想的指标[3]。本实验选择细叶远志皂苷作为瓜子金质量控制的指标性成分，
建立了 HPLC 法测定细叶远志皂苷的含量，同时对贵州四个不同产地瓜子金药材进行了含量测定，为瓜
子金药材的质量控制提供可行的方法和依据。
1 药材、仪器与试药
1.1 药材
样品为 2014 年夏季采集自贵州省贵阳花溪、贵阳永乐、铜仁德江及都匀沙包堡的药材，经贵阳中
医学院药学院孙庆文副教授鉴定为远志科植物瓜子金 Polygala japonica Houtt.的干燥全草。
1.2 仪器
Agilent1100 系列高效液相色谱仪（VWD 检测器，Agilent1100 化学工作站），AG135 型电子天
平，KQ5200E 型超声波清洗机，HH-S4 数显恒温水浴锅。
1.3 试药
细叶远志皂苷对照品购买于大连美仑生物技术有限公司，经 HPLC 峰面积归一化法计算纯度＞
98%。甲醇为色谱纯(天津市科密欧化学试剂开发中心)，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照品储备液
精密称取细叶远志皂苷 26.5 mg，置 50 ml 锥形瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，既得 0.53
mg/ml 的对照品储备液。
2.2 供试品溶液
精密称取瓜子金药材粉末(过 60 目筛)0.5 g，置 100 ml 具塞锥形瓶中，精密加入 70%甲醇 50
ml，称定重量，超声处理（200 W，频率 40kHz）1 h，放冷，再称定重量，用 70%甲醇补足减失的重
量，摇匀，滤过，精密量取续滤液 25 ml, 置圆底烧瓶中，蒸干，残渣加 10%氢氧化钠溶液 50 ml，加
热回流 2 h，放冷，用盐酸调节 pH 值为 4～5，用水饱和正丁醇振摇提取 3 次，每次 50 ml，合并正丁
醇液，回收溶剂至干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至 25 ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，溶液经
0.45μm 微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
2.3 色谱条件与系统适应性试验
网络出版时间：2016-10-13 14:13:24
网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1081.R.20161013.1413.110.html
色谱条件的选择参考 2015 版药典远志药材项下细叶远志皂苷含量测定方法，在色谱条件与系统适
用性试验中对色谱条件进行优化，最终确定色谱条件如下，色谱柱：Zorbax SB-C18（4.6×150 mm，
5μm），预柱：Zorbax SB-C18；流动相：甲醇: 0.05%磷酸溶液=65:35；流速为 1.0 ml/min；进样量为
4μl；柱温为 30℃；检测波长 λ=210 nm；采集时间 30 min。在此色谱条件下，细叶远志皂苷对照品
及 2014 年夏季采集自贵州省贵阳花溪的瓜子金样品色谱图中（图略），细叶远志皂苷的保留时间为
10.92 min,与相邻峰的分离度均大于 1.5。
2.4 线性范围考察
精密吸取上述对照品溶液 0.5、1、2、4、6、8、10μl 分别进样，于 210 nm 处测定细叶远志皂苷
的峰面积。以进样量（μg）为横坐标（x），以峰面积为纵坐标（y）计算回归方程，得细叶远志皂苷
的回归方程为 y=347.850848x-4.2439371，r=0.99991，线性范围为 0.247～5.357μg，表明细叶远志
皂苷在此范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系，结果见表 1。
表 1 标准曲线各点峰面积表
进样量（μl） 0.5 1 2 4 6 8 10
细叶远志皂苷(A) 81.7 179.4 356.8 751 1082.1 1443.1 1859.2

2.5 精密度试验
取“2.1”项下对照品溶液，连续进校 6 次，记录细叶远志皂苷的色谱峰面积值，RSD（n=6）为
1.59%，结果见表 2。
表 2 精密度试验结果
次 数 峰 面 积 均值 细叶远志皂苷 RSD(%)
1 750.6
2 776.9
3 745.3 754.2 1.59
4 758.4
5 752.8
6 742.2
2.6 重复性试验
精密称取贵州贵阳花溪瓜子金样品粉末 0.5g 共 6 份，分别按“2.2”项下方法平行制备供试品溶
液，按“2.3”项下方法测定，记录细叶远志皂苷的色谱峰面积值，计算细叶远志皂苷的含量，其平均
值为 11.59 mg/g，RSD 为 3.26%，结果见表 3。
表 3 重复性试验结果
次 数 细叶远志皂苷含量(mg/g) 平均含量(mg/g) RSD(%)
1 11.28
2 11.68
3 11.97 11.59 3.26
4 12.03
5 11.08
6 11.49
2.7 稳定性试验
取“2.6”项下已制备好的同一份瓜子金样品的供试品溶液，室温放置，在上述色谱条件下于 0，
4，8，12，16，24h 依法进行测定，计算 RSD%(n=6)为 2.38%，结果表明供试品溶液在 24 h 内稳定，结
果见表 4。
表 4 稳定性试验结果
时间(h) 细叶远志皂苷含量(mg/g) 平均含量(mg/g) RSD(%)
0 11.73
4 11.93
8 11.58 11.56 2.38
12 11.17
16 11.62
24 11.32
2.8 加样回收率试验
精密称取已知含量的 2014 年夏季采集自贵阳花溪的瓜子金药材粉末(过 60 目筛) 0.25 g（6
份），分别精密加入 0.53 mg/ml 的对照品溶液 5 ml。按“2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.3”
项下方法测定，计算回收率，结果平均回收率(n=6)为 97.09%，RSD 为 1.81%，结果见表 5。
表 5 加样回收率试验结果
称样量 样品中细叶远志 加入标准品的量 测定量 回收率 平均回收率 RSD
(g) 皂苷的含量(mg) (mg) (mg) (%) (%) (%)
0.2530 2.93 2.65 5.46 95.90
0.2520 2.92 2.65 5.43 95.20
0.2535 2.94 2.65 5.51 97.28 97.09 1.81
0.2519 2.92 2.65 5.56 99.66
0.2511 2.91 2.65 5.52 98.63
0.2506 2.90 2.65 5.43 95.86
2.9 样品测定
按“2.2”项下方法，每个样品平行制备 3 份供试品溶液。在上述色谱条件下，分别精密吸取供试
品溶液各 4μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，根据回归方程计算含量，既得。不同产地瓜子金药材
中细叶远志皂苷的含量测定结果见表 1。表 6 中不同产地样品均为 2014 年夏季采自贵州省，生长年限
不祥。测定结果表明贵阳永乐的药材中细叶远志皂苷的含量最高，都匀沙包堡的药材中细叶远志皂苷
的含量最低。
表 6 不同产地瓜子金药材中细叶远志皂苷含量测定结果（n=3）
产地 细叶远志皂苷平均含量（mg/g）
贵阳花溪 11.59
贵阳永乐 18.06
铜仁德江 13.42
都匀沙包堡 7.66
3 讨 论
本实验采用高效液相色谱法对瓜子金药材中细叶远志皂苷的含量测定，对其色谱条件进行了优
选，并进行了方法学考察。方法学研究表明：细叶远志皂苷在 0.247～5.357μg 呈良好的线性关系
（r=0.99991），重复性试验 RSD 为 3.26%，平均回收率为 97.09%，此方法简便易行、重现性好，回收
率高。这一方法的建立，可作为瓜子金药材及瓜子金复方制剂质量控制方法的参考依据。
瓜子金为远志科远志属植物，根据文献报道，远志属植物中均含有远志皂苷成分，此类成分具有
安神益智、祛痰、抑菌等作用[2]，但是远志皂苷类化合物极不稳定[4]，而现有研究表明，远志总皂苷以
碱水解均能转化为“细叶远志皂苷”[1] 。因此，该项目选择细叶远志皂苷作为指标性成分对瓜子金药
材进行质量控制。
四个不同产地的瓜子金药材中细叶远志皂苷的含量结果表明，四个不同产地的药材中所含的细叶
远志皂苷的含量差异较大，因本课题研究经费有限，目前只对四个产地的药材进行了含量测定，由于
样品量较少，较难制定贵州产瓜子金中“细叶远志皂苷”的含量标准，在今后的研究中将对这一问题
进行完善。


参考文献：
[1] 张培轩，段 瑞，黄 鹏.中国远志属药用植物资源及地理分布[J].基层中药杂志，2002，16（6）：42-43.
[2] 李 萍,闫 明,李平亚.远志属植物化学成分及生物活性研究进展[J],中国科技核心期刊，2004，3：56-60.
[3] Pelletier SW,Nakamura S,Soman R.Comstituents of Pllygala species:the structure of tenuifolin,a
prosaponin from P.senega and P［J］.tenuifo Tetrahedron,1971,27(19):417.
[4] Yoshikawa M,Murakami T,Matsuda H.Bioactive saponins and glucosides. Ⅱ .Senegae radix.(2):Chemical
tructures,hypoglyceric activity,and ethanol absorption inhibitory effect of E-senegasaponin c,Z-
senegasaponin c,and Z-senegins Ⅱ,Ⅲ,and Ⅳ.Chem Pharm Bull,1996,44(7):1305.


收稿日期：2016-04-11
基金项目：贵阳中医学院院内项目[2011]36 号
作者简介：徐 宏（1978-），女，副教授，中药学硕士，研究方向：质量控制研究。