全 文 ：研究论文
甘遂炮制前后各部位刺激性和泻下作用研究
耿婷1 , 黄海燕1 , 丁安伟1 , 2＊ , 张丽1 (1.南京中医药大学 , 南京　210046;2.江苏省方剂研究重点实验室 , 南京　
210046)
摘要:目的　比较生甘遂和醋甘遂各极性部位的刺激性和泻下作用。方法　以家兔皮肤刺激和眼刺激的评分标准为
依据 , 观察各受试物组的刺激性。以黑色炭末为指示剂 , 以正常小鼠首次排黑便时间和数量为指标 , 观察各受试物
组的泻下作用。结果　与对照组相比 , 生品乙酸乙酯部位和二萜部位具有明显刺激性 , 醋制后刺激性显著下降 , 生
品石油醚部位有轻度刺激 , 醋制后稍有下降 , 正丁醇部位刺激性不明显。甘遂各部位组均能缩短小鼠第一次排黑便
时间 , 使排黑便粒数增加。其中生品石油醚和二萜部位 , 与对照组相比具有极显著性差异 (P <0.01), 生品乙酸
乙酯部位与对照组相比具有显著性差异 (P<0.05), 醋制后各组作用皆有所降低。结论　甘遂的刺激性成分主要
集中在乙酸乙酯和二萜部位 , 泻下成分主要集中在石油醚和二萜部位 , 炮制后作用均显著下降。
关键词:甘遂;醋甘遂;极性部位;刺激性;泻下作用
中图分类号:R961　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1672-2981 (2008)04-0385-04
Irritation and diarrhea effect of different polar parts
of euphorbia kansui T.and vinegar-preparing euphorbia kansui T.
GENG T ing 1 , HUANG H ai-yan1 , DING An-w ei1 , 2＊ , ZH ANG Li1 (1.Nan jing Uni versity o f T rad itional Chinese
Medicine , Nan jing 210046;2.J iangsu Key Laboratory f or Traditional Chinese Medicine Formulae Research ,
Nanjing 210046)
Abstract:Objective　 I n o rde r to compare the irritation and dia rrhea effect o f diffe rent polar parts of euphorbia kansui
T. and v inegar-prepa ring euphorbia kansui T.Methods　Acco rding to the marking criteria o f skin irritation and eye ir-
rita tion , w e obse rved the ir ritation of all test g roups.Taking black carbon pow de r as the indicato r , time and quantity
of black defecate as the index , we investiga ted the diarrhea effect of all test g roups.Results　Compared with the con-
trol g roup , the ethy l acetate e xtr act and diterpenoid ext ract o f euphorbia kansui T.had obv ious ir rita tion , but the ir ri-
ta tion of vinegar-preparing euphorbia kansui T.decreased rapidly.The petro l ex tract of euphorbia kansui T.had light
ir rita tion and the ir ritation of v inegar-prepa ring euphorbia kansui T.decreased a little.The n-butanol par t had no ap-
parent irritation.All of the po la r pa rts could sho rten the time o f first exhaust.Especially the diterpenoid ex tract and
pet rol e xt ract had significant difference(P<0.01)when compared w ith the contro l g roup , and the e thy l ace ta te ex tract
had significant diffe rence(P<0.05).Af te r being pro ce ssed , the effect decreased.Conclusion　The stimulating com-
ponents o f euphorbia kansui T. are mainly in e thy l ace ta te ex tract and diterpenoid extr act and the purga tive components
in pet rol ex tract and diterpeno id ex tract.The effect decrea sed rapidly after being pro ce ssed.
Key words:euphorbia kansui T.;vinegar-preparing euphorbia kansui T.;polar par ts;ir rita tion;diar rhea effec t
　　甘遂为大戟科植物甘遂 (euphorbia kansui T.N.liou ex
T.P.wang)的干燥块根[1] , 始载于 《神农本草经》 , 列为
下品[ 2] 。甘遂味苦 , 性寒 , 有毒 , 归肺 、 肾 、 大肠经。具有
泻水逐饮 、 破积通便之功效 , 常用于水肿胀满 、 胸腹积水 、
痰饮积聚 、 气逆喘咳 、 二便不利等症[ 3] 。甘遂主要成分为巨
大戟二萜醇型化合物和三萜类化合物 , 还含有少量的假白榄
酮型化合物 、 甾体类化合物等[4 , 5] 。其中 , 巨大戟二萜醇型
化合物具有较强的皮肤刺激性[ 6] 。
中药材的有效部位是有效成分的组合 , 是指能够代表或
部分代表原来中药材疗效的多种组分的混合物。有效部位的
　　基金项目:江苏省中医药管理局中医药科学技术研究专项课题 (H05075)。
作者简介:耿婷 , 女 , 硕士研究生 , 主要从事中药炮制与复方研究 , Tel:13770616624 , E-mail:yilin ger110@126.com　　＊通讯作者:
丁安伟 , 男 , 教授 , 博士生导师 , 主要从事中药炮制与复方研究 , Tel:(025)85811523 , E-mail:awding105@163.com
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中南药学 2008年 8月第 6卷第 4期　Cent ral S outh Ph armacy.Augu st 2008 , Vol.6 No.4
筛选 , 多根据化合物结构 “相似相溶” 的原理 , 采用极性由
强到弱的不同溶剂系统提取。各提取物经过活性测试确定其
有效的 , 称为有效部位。本实验分别将生甘遂 、 醋甘遂醇提
浸膏用不同溶剂萃取 , 得其石油醚部位 、 乙酸乙酯部位 、 正
丁醇部位和二萜部位 , 并对各极性部位进行刺激性和泻下作
用试验 , 找出其药效部位 , 为探讨甘遂炮制机制提供科学依
据。
1　仪器与材料
1.1　动物
昆明种小鼠 , 体重 18 ～ 22 g , 生产许可证 SCXK (苏)
2001-0003 , 使用许可证为 SYXK (苏) 2001-0010。新西兰
种家兔 , 体重 2.0～ 3.0 kg , 均由南京中医药大学实验动物
中心提供 , 雌雄各半 , 健康 , 无眼疾和皮肤疾病 , 实验前随
机分组。
1.2　药材
甘遂药材购自安徽省亳州市药材总公司 , 经本院中药鉴
定教研室吴启南教授鉴定为大戟科大戟属植物甘遂 (eu-
phorbia kansui T.N.liou ex T.P.wang)的干燥块根。
醋甘遂:按中国药典 2005 版项下炮制方法制备得到。
生甘遂醇提物:取生甘遂粉末 , 5 倍量乙醇加热回流提
取 3 次 , 2 h·次-1 , 抽滤 , 合并 3 次滤液 , 50 ℃减压浓缩
得其浸膏。
醋甘遂醇提物:取醋甘遂粉末同法制得。
甘遂和醋甘遂各极性部位:分别将生甘遂和醋甘遂醇提
浸膏 , 加水溶解 , 依次用石油醚 、 乙酸乙酯 、 正丁醇少量多
次萃取至无色后 , 减压回收溶剂 , 得其石油醚部位 、 乙酸乙
酯部位和正丁醇部位。另取生甘遂 、 醋甘遂醇提浸膏 , 用
80%乙醇溶解 , 石油醚萃取 , 滤液弃去 , 药渣用乙酸乙酯萃
取至无色 , 减压回收溶剂 , 得其二萜部位。
分别取甘遂和醋甘遂各极性部位浸膏 , 加蒸馏水研磨 ,
配成 20%浓度的水溶液 , 供刺激性实验用。 另取上述各部
位浸膏加蒸馏水配成 30 和 15 mg ·m L-1高 (Ⅰ)、 低 (Ⅱ)
2 个浓度 (均含炭末 0.1 g ·mL -1)的混悬液 , 供泻下实验
用。
1.3　仪器与试剂
电子天平 AY220 (SH IMADZU)、 打粉机 (荣聪铁工
厂)、 红外线数字温控仪 、 剪刀 、 刮胡刀 、 量尺 、 保鲜膜 、
胶布 、 小鼠灌胃针头 、 1 mL 注射器 、 天平 、 滤纸 、 计时器 、
眼科镊。
10%芒硝溶液 (含炭末 0.1 g ·mL-1)由药学院实验中
心制备 、 炭末生理盐水混悬液 (自制)、 20%浓度淀粉混悬
液 (自制)、 苦味酸 、 生理盐水 、 其他相关试剂均为分析纯。
2　方法
2.1　甘遂和醋甘遂各极性部位的完整皮肤刺激性实验
选用健康的试验家兔 12 只 , 适应环境 3 d , 于给药前
24 h 采用物理方法脱毛 , 分笼饲养。 在背部两侧 , 先用手
术剪刀剪毛 , 再用刮胡刀贴着家兔的表皮刮毛。以不损伤表
皮为准 , 去毛范围各约 3 cm ×3 cm , 无毛区左右对称。一
侧取受试药物 1 m L , 分别涂在 3 cm×3 cm 面积的完整皮肤
上 , 然后用两层纱布 , 一层保鲜膜覆盖 , 胶布固定 , 另一侧
用 0.9% NaCl做阴性对照。贴敷 4 h 后用温水除去残留受
试物及赋形剂 , 在除去受试物后的 1、 24、 48 h 观察受试部
位皮肤反应 , 进行评分。评分标准[ 7]分为无刺激性 (0～ 0.4
分)、 轻度刺激 (0.4 ～ 1.9 分)、 中度刺激 (2.0 ～ 5.9 分)
和强刺激性 (6.0 ～ 8.0 分)4 个等级。 积分值= (∑ 1 +
∑2)/合计动物数 (∑ 1 为家兔皮肤红斑积分 , ∑2 为水肿
积分)。
2.2　生甘遂和醋甘遂各极性部位的兔眼刺激性实验
取健康家兔 , 于实验前 24 h 用放大镜对每只动物的双
眼进行检查。若有眼刺激 、 眼损伤或角膜损伤的动物不可
用。 此实验共设 8 组 , 分别为生甘遂及醋甘遂的石油醚部
位 、 乙酸乙酯部位 、 正丁醇部位和二萜部位。每组用 2 只
兔眼 , 分别给 20%浓度的生甘遂和醋甘遂各极性部位的水
溶液 。实验时轻轻拉开兔的下眼睑 , 使其离开眼球 , 将各
组溶液用不带针头的 1 mL 注射器滴入眼睑内。 左右眼分
别滴受试物和 20%浓度的淀粉混悬液 , 每只眼滴入 2 滴 ,
约 0.1 mL , 给受试物后使兔眼被动轻轻闭合 5 s , 以防受
试液流出 , 2 min 后用 20 mL 生理盐水冲洗干净。 1 h 后观
察眼角膜混浊程度 、 结膜充血程度 、 水肿程度及分泌物的
量 、 虹膜是否出现出血 、 肉眼可见坏死及对光有无反应
等[ 8] , 并进行评分。评分标准分为无刺激性 (0 ～ 3 分)、
轻度刺激 (4 ～ 8 分)、 中度刺激 (9 ～ 12 分)和强刺激性
(13 ～ 16 分)4 个等级。每侧受试动物眼刺激反应总积分
=每只动物的眼角膜+虹膜+结膜的刺激反应分值之和。
受试物对眼刺激性积分=全部受试动物刺激反应积分的总
和/受试动物总数[ 9] 。
2.3　生甘遂和醋甘遂各极性部位对正常小鼠排便时间和数
量的影响
取禁食 10 h 体重相近的小鼠 108 只 (腹泻者剔除)随
机分为 18 组 , 苦味酸标记。 第一组灌胃生理盐水作阴性对
照 , 第二组灌胃 10%芒硝溶液作为阳性对照 , 其他各组分
别灌服各受试药液 , 以上各组给药容量均为 0.2 m L · 10
g -1 。给药后将小鼠分别置于铺有白色滤纸的烧杯内 , 观察
小鼠排黑粪的时间 、 粪便性状和数量 , 以及粪便沾染肛门情
况。连续观察 6 h , 实验中禁食。小鼠的排便分 3种:成形 、
稀软便 、 稀水便 , 各取平均值进行比较。
3　结果
3.1　生甘遂和醋甘遂各极性部位对家兔完整皮肤有刺激性
涂抹生品乙酸乙酯部位及生品二萜部位家兔的完整皮肤
红斑明显可见 , 并且皮肤隆起 , 轮廓清楚 , 属中度刺激;涂
抹生品石油醚部位及醋品乙酸乙酯部位家兔的完整皮肤红斑
勉强可见 , 水肿勉强可见 , 属轻度刺激;涂抹醋品石油醚部
位 、 生品正丁醇部位 、 醋品正丁醇部位 、 醋品二萜部位家兔
的完整皮肤无红斑 , 无水肿 , 结果见表 1。
3.2　甘遂和醋甘遂各极性部位对家兔眼睛有刺激性
涂抹生品乙酸乙酯部位和生品二萜部位的家兔眼睛有明
显中度刺激;涂抹生品石油醚部位和醋品乙酸乙酯部位的家
兔眼睛有轻度刺激;涂抹醋品石油醚部位 、 生品正丁醇部
位 、 醋品正丁醇部位 、 醋品二萜部位的家兔眼刺激较小。结
果见表 1 , 兔眼滴加受试药物后代表性照片见图 1。
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C ent ral S outh Ph arm acy.August 2008 , Vol.6 No.4　中南药学 2008年 8月第 6卷第 4期
图 1　甘遂和醋甘遂各极性部位的眼刺激性照片
Fig 1　Eye i rrit at ion of di ff erent polar part s of euphorbia kansui T.
and Vinegar-preparin g euphorbia kansu i T.
A.空白对照 (b lan k group);B.生品石油醚部位 (pet rol ex t ract
of kan sui);C.醋品石油醚部位 (pet rol ex t ract of vinegar-preparing
kan sui);D.生品乙酸乙酯部位 (ethyl acetate ex t ract of k ansui);
E.醋品乙酸乙酯部位 (ethyl acetate ext ract of vinegar-p reparing);
F.生品正丁醇部位 (n-butanol ext ract of kan sui);G.醋品正丁醇
部位 (n-bu tanol ex t ract of vinegar-preparing kansui);H.生品二萜
部位 (di terpen oid ext ract of kansui);I.醋品二萜部位 (diterpenoid
ext ract of vinegar-preparing kansui)
3.3　生甘遂和醋甘遂各极性部位对正常小鼠排便时间和数
量有影响
与对照组比较 , 各极性部位组均能缩短小鼠排黑便时
间 , 使 6 h 内排黑便粒数增加。其中生品石油醚部位和生品
二萜部位具有极显著性差异(P<0.01), 生品乙酸乙酯部位
表 1　皮肤刺激和眼刺激评分结果
Tab 1　Marking of skin irritation and eye irritation
组别
(g rou p)
皮肤刺激积分
(skin irrit ation)
眼刺激积分
(eye irri tati on)
对照组 0 0
生品石油醚 2 6
醋品石油醚 1 4.5
生品乙酸乙酯 5 8.5
醋品乙酸乙酯 1.5 5
生品正丁醇 0.5 3.5
醋品正丁醇 0 3.5
生品二萜 6 10.5
醋品二萜 1 3.5
具有显著性差异 (P <0.05), 正丁醇部位对其影响较小。
与生品相比较 , 醋制后各部位组作用皆有所降低 , 并以石油
醚部位作用减弱最为显著 , 结果见表 2。
4　讨论
甘遂作为峻下逐水药 , 在临床上有着广泛的应用 , 亦有
中医用来治疗晚期食道癌 、 乳腺癌等恶性肿瘤以及哮喘 、 慢
性支气管炎等症[ 10] 。但是由于其对黏膜 、 皮肤和胃肠道强
烈的刺激性和毒性 , 安全性难以保证。通过炮制 , 能明显
降低毒性和刺激性 , 缓和泻下作用。 由以上实验可以看出 ,
甘遂的刺激性成分主要集中在乙酸乙酯部位和二萜部位 ,
醋制后刺激性下降明显 , 特别是二萜部位 , 下降达 4 ～ 5
倍。 泻下成分主要集中在石油醚部位和二萜部位 , 醋制后
作用明显减弱 , 尤以石油醚部位最为显著。
目前 , 对甘遂刺激性和泻下作用的研究多集中在其醇
提物和水提物的比较 , 本实验首次采用甘遂各极性部位进
行比较 , 下一步研究应在药效和毒理跟踪下 , 重点围绕各
部位所含成分进行全面展开 , 找出甘遂刺激性和泻下作用
的药效物质。
表 2　生甘遂和醋甘遂各极性部位对正常小鼠排黑便时间和数量的影响 (x±s , n=6)
Tab 2　Effect of different polar parts of kansui and vinegar-preparingkansui on time and quantity of black defecate(x±s, n=6)
组别
(g rou p)
开始排黑便时间 (t ime to start
black defecate)/min
6 h内排黑便数 (qu an tity of black
defecate w ithin 6 h)/粒
黑便性状
(shape of b lan k defecate)
生理盐水 130.9±31.9 23.8±3.31 成 形
10%芒硝溶液 106.4±34.7 31.2±4.45 稀水便
甘遂石油醚部位Ⅰ 91.0±21.1 25.9±2.99＊＊ 稀水便
甘遂石油醚部位Ⅱ 96.6±33.9 29.9±2.98＊＊ 稀水便
醋甘遂石油醚部位Ⅰ 120.9±41.9 25.1±3.12 稀软便
醋甘遂石油醚部位Ⅱ 117.3±27.9 24.9±3.87 稀软便
甘遂乙酸乙酯部位Ⅰ 110.2±33.98 29.9±2.98＊ 稀水便
甘遂乙酸乙酯部位Ⅱ 115.3±29.9 26.9±2.96＊ 稀软便
醋甘遂乙酸乙酯部位Ⅰ 99.89±33.12 19.98±1.22 稀软便
醋甘遂乙酸乙酯部位Ⅱ 105.1±33.6 26.9±2.87 成 形
甘遂正丁醇部位Ⅰ 106.99±39.0 31.8±3.98 成 形
甘遂正丁醇部位Ⅱ 106.1±29.9 30.4±2.99 成 形
醋甘遂正丁醇部位Ⅰ 118.2±31.3 27.3±3.01 成 形
醋甘遂正丁醇部位Ⅱ 115.6±38.2 27.9±1.98 成 形
甘遂二萜部位Ⅰ 94.1±23.1 33.1±3.90＊＊ 稀水便
甘遂二萜部位Ⅱ 96.7±28.9 29.9±2.99＊＊ 稀水便
醋甘遂二萜部位Ⅰ 100.9±23.1 31.98±7.13＊ 稀软便
醋甘遂二萜部位Ⅱ 103.8±33.6 26.7±3.43 稀软便
　　注:与生理盐水组比较:＊P<0.05 , ＊＊P<0.01。
　　note:vs n orm al saline g rou p , ＊P<0.05 , ＊＊P<0.01.
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(收稿日期:2008-01-10;修回日期:2008-03-11)
补阳还五汤及有效组分生物碱和苷对大鼠血小板
聚集及血小板环核苷酸的影响
江劲波1 , 杨静2 , 邓常青3＊ (1.湖南中医药大学第一附属医院 , 长沙 410007;2.中国中医科学院西苑医院 , 北京
100091;3.湖南中医药大学病理生理实验室 , 长沙 410007)
摘要:目的　探讨补阳还五汤及其有效组分生物碱和苷抗血小板聚集机制。方法　大鼠分别给予补阳还五汤原方 、 生
物碱 、 苷和噻氯匹定 , 进行 ADP诱导的血小板聚集实验。取聚集前 、 后的血小板提取 cAMP、 cGMP , 采用放免法检
测血小板 cAMP、 cGMP。结果　各组血小板聚集比较 , 生物碱组 、 苷组和噻氯匹定组血小板聚集强度与空白组相比
显著降低 (P<0.01)。原方组血小板聚集强度与空白组相比显著降低 (P<0.05)。血小板聚集后 cAMP 含量降低 (P
<0.01), 而原方 、 生物碱 、 苷和噻氯匹定均可抑制 ADP 诱导的血小板 cAMP下降 (P<0.05 , P<0.01)。血小板聚
集后 cGMP含量降低 (P<0.01), 原方 、 生物碱 、 苷和噻氯匹定也可抑制聚集后血小板 cGMP下降 (P<0.05 , P<
0.01)。结论　生物碱 、 苷 、 原方和噻氯匹定可抑制 ADP诱导的大鼠血小板聚集 , 各药可抑制血小板聚集后血小板内
cAMP、 cGMP的下降 , 提示其抗血小板聚集作用是通过抑制聚集后血小板内环核苷酸降低而实现的。
关键词:补阳还五汤;有效组分;小板聚集;磷酸腺苷;磷酸鸟苷
中图分类号:R961　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1672-2981 (2008)04-0388-04
Effect of Buyang huanwu decoction and its active fraction
alkaloid and glycoside on platelet aggregation and cyclic nucleotide in rats
JIANG Jing-bo 1 , YANG Jing 2 , DENG Chang-qing 3＊ (1.First A f f i liated Hospital o f H unan University o f T radi-
tional Chinese Medicine , Changsha 410007;2.X iyuan Hospital , Chinese Academy of Traditional Chinese Medi-
cine , Bei jing 100091;3.Laboratory o f Pathophy siology of Hunan University of T raditional Chinese Medicine ,
Changsha 410007)
Abstract:Objective　 To explore the effect of Buyang H uanw u Decoction (BHD) and its active fraction alkaloid and
glyco side ex tracted f rom BHD on platelet ag gregation and its mechanism in rats.Methods　The rats we re administered
with BH D , alkalo id , glycoside , and ticlopidine re spectively and platelet ag gr egation w as induced by ADP.The levels
of cyclic adenosine monophospha te(cAMP)and cyclic guano sine monophospha te(cGMP)in the pla telet in rats befo re
and after plate let ag gregation w ere measured by radioimmunoassay.Results　Po tency of platelet ag g regation of BHD ,
alkalo id , g ly coside , ticlopidine g r oups was markedly low er than tha t o f the contro l g roup(P<0.05 , P<0.01).The
　　基金项目:教育部科学技术研究重点项目 (No.204100);湖南省教育厅重点项目 (No.03A033)。
作者简介:江劲波 , 男 , 副教授 , 主要从事中医药防治血液病的研究 , Tel:(0731) 5600449 , E-mail:J JB5890@163.com 　　＊通讯
作者:邓常青 , 男 , 教授 , 主要从事血栓病基础研究 , Tel:(0731) 5381123 , E-mail:dchan gq@sohu.com
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C ent ral S outh Ph arm acy.August 2008 , Vol.6 No.4　中南药学 2008年 8月第 6卷第 4期