全 文 ：2011 年 7 月 第 13 卷 第 7 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Jul. 2011 Vol. 13 No. 7
质 量
△［基金项目］ 国家科技支撑计划———常见与重要药品安全标准研究(2006BAI14B01) ，国家科技重大专项———中药质量标准
研究和信息化体系建设平台(2009ZX093008-004)
［通讯作者］ * 肖新月，E-mail:xiaoxy@ sina. com;* 马双成，E-mail:mashuangcheng@ yahoo. com
生甘遂与制甘遂中的二萜类成分
甘遂大戟萜酯 D的含量研究
△
程显隆1，肖新月1* ，邹秦文2，刘薇1，石岩1，魏锋1，马双成1* ，林瑞超1
(1. 中国食品药品检定研究院，北京 100050;
2. 北京联馨药业有限公司，北京 102628)
［摘要］ 目的:建立甘遂中甘遂大戟萜酯 D的含量测定方法，并比较生甘遂和醋甘遂中甘遂大戟萜酯 D的含
量差异。方法:样品以甲醇为提取溶剂，超声处理后，以 HPLC 法分析。采用菲罗门 lunar C18色谱柱(250 mm ×
4. 6 mm，5 μm)色谱柱分离，柱温 40 ℃，以乙腈 －水(70∶30)为流动相，流速 1. 0 mL·min －1;检测波长 235 nm。
结果:甘遂大戟萜酯 D线性范围分别为 0. 216 ～ 8. 64 μg(r = 0. 999 9) ，平均加样回收率为 103. 5 %(n = 9) ;44 批次
甘遂中，甘遂大戟萜酯 D的含量为 0. 008 % ～0. 036 %。结论:该方法准确、可靠，具有良好的重复性和稳定性，
可用于甘遂大戟萜酯 D的定量分析。
［关键词］ 甘遂;醋甘遂;甘遂大戟萜酯 D;高效液相色谱法
甘遂始载于《神农本草经》，列为下品。《中国
药 典》 2010 年 版 收 载 的 甘 遂 为 大 戟 科
(Euphobiaceae)大 戟 属 (Euphorbia)植 物 甘 遂
Euphorbia kansui T. N. Liou ex T. P. Wang 的干燥块
根;具有泻水逐饮，消肿散结的功能，用于水肿
胀满，胸腹积水，痰饮积聚，气逆咳喘，二便不
利，风痰癫痫，痈肿疮毒［1］。现代研究表明，甘
遂化学成分还具有抗肿瘤、抗生育、抗病毒、调
节免疫系统等活性［2］。但其毒性较强，临床使用
剂量十分有限，过量则引起腹痛、腹泻，严重时
会出现剧烈呕吐、血压下降、脱水和呼吸衰竭等
症状。甘遂的化学成分研究表明，其主要有效成
分为二萜酯类成分，且活性多样，尤其是巨大戟
萜醇(ingenol)型二萜酯类有显著的抗癌、抗病毒
活性等［3-5］。因此以二萜类成分为指标来控制甘遂
的质量是十分有意义的。
1 仪器、样品与试药
1. 1 仪器
岛津 2010 型高效液相色谱仪。
1. 2 样品与试药
对照品甘遂大戟萜酯 D(Kansuiphorin D)为实
验室自制，经1H-NMR 和13 C-NMR 波谱法鉴别其结
构，HPLC归一化法测定其纯度为 98. 1 %。乙腈为
色谱纯，甲醇、醋酸乙酯等均为分析纯，纯净水为
Milli-Q纯水。共收集了 44 批生、制甘遂样品，样
品收集信息见表 1。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件
采用菲罗门 lunar C18色谱柱(250 mm × 4. 6 mm，
5 μm) ，柱温 40 ℃;流动相为乙腈 －水(70∶30) ，流
速 1. 0 mL·min －1;检测波长 235 nm;进样量10 μL。
Kansuiphorin D的分离度为 2. 8，理论塔板数为 9 000。
2. 2 对照品溶液的制备
精密称取对照品 Kansuiphorin D 5 mg，置 25 mL
量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，即得每 1 mL含
Kansuiphorin D 0. 2 mg 的混合溶液。色谱图见图
1 A。
2. 3 供试品溶液的制备
取本品粉末(过四号筛)2 g，精密称定，置具
塞锥形瓶中，精密加入甲醇 25 mL，密塞，称定重
量，超声处理(功率 250 W，频率 50 kHz)30 min，
放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，
滤过，即得。色谱图见图 1 B。
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DOI:10.13313/j.issn.1673-4890.2011.07.015
2011 年 7 月 第 13 卷 第 7 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Jul. 2011 Vol. 13 No. 7
表 1 样品来源
编号 规格 生产单位 产地
1 生甘遂 中国药材集团公司北京华邈中药工程
技术开发公司
山西
2 炙甘遂 中国药材集团公司北京华邈中药工程
技术开发公司
山西
3 生甘遂 浙江中医药大学饮片厂 陕西汉中
4 醋制甘遂 浙江中医药大学饮片厂 陕西汉中
5 生甘遂 浙江中医药大学饮片厂 甘肃
6 醋制甘遂 浙江中医药大学饮片厂 甘肃
7 生甘遂 浙江中医药大学饮片厂 陕西
8 醋制甘遂 浙江中医药大学饮片厂 陕西
9 生甘遂 安徽井泉集团中药饮片有限公司 不详
10 制甘遂 安徽井泉集团中药饮片有限公司 不详
11 生甘遂 河南省弘景中药饮片有限公司 陕西
12 制甘遂 河南省弘景中药饮片有限公司 陕西
13 生甘遂 湖南三湘中药饮片有限公司 河北
14 制甘遂 湖南三湘中药饮片有限公司 河北
15 生甘遂 南京正草堂药业有限公司 不详
16 醋制甘遂 南京正草堂药业有限公司 陕西
17 生甘遂 四川省中药材公司中药分公司 不详
18 醋制甘遂 四川省中药饮片有限责任公司 河南
19 生甘遂 苏州市天灵中药饮片有限公司 陕西
20 制甘遂 苏州市天灵中药饮片有限公司 陕西
21 生甘遂 药都集团茗都中药饮片有限公司 山西
22 醋制甘遂 药都集团茗都中药饮片有限公司 山西
23 生甘遂 甘肃省中医院 山西
24 醋炒甘遂 甘肃省中医院 山西
25 醋炙甘遂 甘肃省中医院 山西
26 醋蒸甘遂 甘肃省中医院 山西
27 生甘遂 安徽省亳州市 不详
28 生甘遂 安徽省亳州市 不详
29 生甘遂 安徽省亳州市双华中药饮片厂(购自
新疆华安中药饮片有限责任公司)
陕西
30 生甘遂 广东一方制药有限公司 陕西
31 生甘遂 广东一方制药有限公司 山西
32 家种生甘遂 广东一方制药有限公司 江苏
33 野生生甘遂 广东一方制药有限公司 江苏
34 醋制甘遂 山西省药品检验所 山西
35 醋制家种甘遂 山西省药品检验所 山西
36 制甘遂 邵阳药材二站中心药店责任有限公司 不详
37 醋制甘遂 辽宁省营口市中医院 不详
38 生甘遂 中国药材集团公司北京华邈中药工程
技术开发公司
山西
39 醋制甘遂 南京中医药大学 四川
40 生甘遂 南京中医药大学 四川
41 醋制甘遂 南京中医药大学 湖北
42 生甘遂 南京中医药大学 湖北
43 醋制甘遂 南京中医药大学 安徽
44 生甘遂 南京中医药大学 安徽
图 1 甘遂大戟萜酯 D对照品(A)和
生甘遂样品 1(B)HPLC图
2. 4 线性关系的考察
按上述色谱条件，分别精密吸取上述对照品溶
液 1，5，10，20，30，40 μL，注入液相色谱仪，
测得峰面积。以峰面积值 Y 为纵坐标，进样量 X 为
横坐标，绘制标准曲线，计算 Kansuiphorin D。得回
归方程为 Y = 15 926 894. 803 0X + 1 121. 360 9，r =
0. 999 9，结果表明，Kansuiphorin D 进样量在
0. 216 ～ 8. 64 μg与峰面积呈良好的线性关系。
2. 5 精密度试验
取同一对照品溶液，按上述色谱条件连续进样
6 次，测定峰面积，结果 Kansuiphorin D色谱峰面积
的 RSD =0. 62 %。
2. 6 稳定性试验
取 1 号样品的供试品溶液，按上述色谱条件分
别于 0， 2， 4， 6， 8， 16 h 进 样 测 定，结 果
Kansuiphorin D色谱峰面积的 RSD =0. 52 %。
2. 7 重复性试验
取 1 号样品 6 份，精密称定，按 2. 3 项下方法
制备供试品溶液，按上述色谱条件进样测定含量，
结果 Kansuiphorin D 的含量平均值为 0. 020 %，
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RSD =1. 05 %。
2. 8 加样回收率试验
取已知含量的 1 号样品按 1 g的 50 %，100 %，
150 % 3 个质量等级称样 9 份，每个质量等级各 3
份。分别加浓度为 0. 2 mg·mL －1的 3 组对照品甲醇
溶液 25 mL，按供试品溶液制备方法处理得供试液，
按上述色谱条件测定，计算回收率，结果见表 2。
表 2 Kansuiphorin D加样回收率试验
编号 称样量 / g 样品中
含量 /mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收
率 /%
RSD /%
1 0. 5053 0. 1028 0. 3106 103. 4 104. 7 2. 5
2 0. 507 0. 1031 0. 3102 103. 0
3 0. 5054 0. 1028 0. 3192 107. 7
4 1. 0066 0. 2047 0. 4215 107. 9 104. 9 2. 5
5 1. 0065 0. 2047 0. 4112 102. 7
6 1. 0067 0. 2048 0. 4139 104. 0
7 1. 5055 0. 3062 0. 5052 99. 0 100. 8 2. 2
8 1. 5059 0. 3063 0. 5139 103. 3
9 1. 504 0. 3059 0. 5072 100. 1
注:Kansuiphorin D对照品加入量均为 0. 201 mg
2. 9 样品测定
取 44 批甘遂样品，按 2. 3 项下方法制备供试品
溶液，按上述色谱条件进样测定(每个样品取样 2
份，每份进样 2 次，总计 n = 4)。以外标法计算，
按干燥品计，Kansuiphorin D的含量结果见表 3。
表 3 44 批甘遂样品中 Kansuiphorin D含量测定
/%
编号 含量 RSD 编号 含量 RSD
1 0. 020 0. 9 23 0. 029 0. 6
2 0. 016 0. 1 24 0. 030 1. 0
3 0. 019 0. 5 25 0. 010 1. 7
4 0. 016 0. 3 26 0. 027 1. 0
5 - - 27 0. 022 1. 8
6 - - 28 0. 026 0. 7
7 0. 026 1. 2 29 0. 031 1. 0
8 0. 034 0. 7 30 0. 017 1. 9
9 0. 021 1. 5 31 0. 010 2. 2
10 0. 022 2. 7 32 - -
11 0. 015 0. 2 33 0. 014 1. 8
12 0. 016 0. 7 34 0. 027 0. 3
13 0. 036 1. 9 35 - -
14 0. 031 2. 5 36 0. 035 4. 1
15 - - 37 0. 003 6. 1
16 0. 023 4. 0 38 0. 022 1. 5
17 0. 023 0. 2 39 0. 035 0. 3
18 0. 009 0. 5 40 0. 036 0. 3
19 0. 015 1. 0 41 0. 031 3. 2
20 0. 023 1. 0 42 0. 033 0. 1
21 0. 013 0. 5 43 0. 028 0. 5
22 0. 015 2. 1 44 0. 025 1. 0
注:n = 4
3 讨论
3. 1 流动相的选择
分别采用甲醇 －水(70∶30)、甲醇 － 0. 03%甲酸
溶液(70 ∶30)、乙腈 －水(70 ∶30)为流动相进行试
验。结果在甲醇 －水(70∶30)、甲醇 － 0. 03%甲酸溶
液(70∶30)流动相系统中，待测成分与其他化学成
分的色谱峰基线处难以完全分离;最终选用乙腈 －
水(70∶30)为流动相，获得满意的分离效果。
3. 2 检测波长的选择
Kansuiphorin D 结构的紫外光谱最大吸收在
235 nm，故选择 235 nm作为紫外检测波长。其紫外
光谱图见图 2。
图 2 对照品 DAD光谱图
3. 3 柱温的考察
考察了柱温为 25，30，40 ℃时被检测成分的分
离效果，结果二萜均可达到很好的分离效果，R≥
1. 5。本实验采用 40 ℃柱温。
3. 4 提取溶剂和提取方法的比较
分别以甲醇、醋酸乙酯为提取溶剂制得不同样
品，结果表明，甲醇提取效率稍高，并且杂质干扰
少，故采用甲醇作为溶剂来处理样品。同时考察甲
醇超声提取和加热回流提取，结果发现两种提取方
法样品含量无显著变化，故采用甲醇超声提取的
方法。
3. 5 提取时间的选择
考察了 20，30，40 min 的提取效果，测定含
量。最后确定以 40 min进行超声处理(功率 250 W，
频率 50 kHz)。
3. 6 提取溶剂量的考察
本实验考察了 2g 样品分别加醋酸乙酯 25，50，
100 mL进行提取，结果发现 3 种溶剂量对提取效率
无显著差异，考察到为了提高检测信号，降低基线
对测定的影响，采用 2 g 样品加甲醇 25 mL 的方法
进行提取。
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本研究建立甘遂的含量测定方法是选取了甘遂
中的毒性成分巨大戟二萜醇类成分为含量测定指标，
能够体现中药质量控制的安全性原则，所建立的方
法专属性强，分离度好，可有效用于甘遂的质量控
制。收集的 44 份样品中有 23 份为生甘遂，21 份
为醋甘遂，其中有 5 个样品不含待测成分，故只
对 39 个样品进行了含量分析。39 批样品中
Kansuiphorin D的含量范围为 0. 008 % ～ 0. 036 %。
实测样品中，生甘遂与制甘遂中 Kansuiphorin D 的
含量结果，从整体上看，没有显著差异。其中 39、
41、43 号样品分别是由 40、42、44 号样品炮制而
成。样品在炮制前后 Kansuiphorin D 的含量没有显
著变化。
参考文献
［1］国家药典委员会 . 中国药典［S］. 一部 . 北京:中国医药
科技出版社，2010:81-82.
［2］郭晓庄 . 有毒中草药大辞典［M］. 天津:天津科技翻译出
版公司，1992:739.
［3］史海明，闵知大，屠鹏飞，等 . 中国大戟属植物中二萜成
分的化学及生物活性［J］. 化学进展，2008，20(2-3) :
375-385.
［4］宿树兰，段金廒，丁安伟 . 大戟二萜醇酯类成分及其毒效
关系研究进展［J］. 世界科学技术———中医药现代化，
2007，9(4) :67-73.
［5］修彦凤，曹艳华，张永太 . 甘遂的药理作用研究进展［J］.
上海中医杂志，2008，42(4) :79-81.
(收稿日期 2011-04-02)
Determination of Kansuiphorin D in Kansui Radix and its Processed Products
CHENG Xian-long1，XIAO Xin-yue1，ZOU Qin-wen2，LIU Wei1，
SHI Yan1，WEI Feng1，MA Shuang-cheng1，LIN Rui-chao1
(1. National Institute for the Control of Phamaceutical and Biological Products，Beijing 100050，China;
2. Beijin Lianxin Pharmaceutic Co. ，Ltd，Beijing 102628，China)
［Abstract］ Objective:To develop an HPLC method for determination of Kansuiphorin D in Kansui Radix
and to compare the differences of the contents of euphol and tirucallol in Kansui Radix and its processed product
(processed with vinegar)by HPLC. Methods:The sample was extracted by methanol. HPLC analysis was performed
on an lunar C18 column，column temperature was 40 ℃. The mobile phase was the system of acetonitrile-water(70∶30)
. The flow rate was 1. 0 mL·min －1 and UV detection was set at 235 nm. Results:Determined the contents of
Kansuiphorin D of 44 samples by HPLC. Conclusion:The methad was simple，rapid and accurate with good
productivity，which can be used to determine of Kansuiphorin D in Kansui Radix and its processed product.
［Key words］ Kansui Radix;Processed product (processed with vinegar) ;Kansuiphorin D;
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
HPLC
(上接第 8 页)
对含羚羊角的中成药进行科学筛选论证，确定重点保
护品种，逐步过渡到“定生产品种、定生产厂家、定使
用数量”的管理方式。
4. 5 继续强化保护和利用管理工作
严格遵守濒危野生动植物种国际贸易公约
(CITES)组织的有关规定，加强贯彻落实保护濒危物
种的有关法律、法规，严格执行国家对药用濒危物种
实施的宏观控制资源消耗总量、定点定量使用、专用
标识管理措施。加强市场流通监督检查，规范生产经
营维护活动，维护市场流通秩序。
4. 6 设立药用濒危野生动物保护开发基金
中国中药协会正在积极组织中药企业，同时呼吁
国际野生动物保护界和传统中医药界共同发起设立
药用濒危野生动物保护开发基金，以保护开发基金的
方式形成药用野生动物保护和利用的国际合力，并使
相关工作长效化、规范化、制度化。
加强国际间合作，建立高效、密切、畅通的赛加羚
羊保护国际合作机制，开展养殖驯化的国际技术交
流。从适合赛加羚羊种群生存和发展的角度，与赛加
羚羊分布国建立密切的长期合作关系。一方面从资
金、信息等方面支持资源分布国对赛加羚羊的保护工
作，另一方面，以经济一体化的模式，建立国际羚羊驯
养和种源基地，积极从基地引种、输入赛加羚羊资源，
并适时进行资源的野外放归工作，逐渐恢复野外赛加
羚羊资源。目前，应加快解决影响赛加羚羊正常迁徙
的边境“铁丝网”阻碍羚羊通道的问题，为赛加羚羊
提供一个良好的野生迁徙环境。
(本文是中国中药协会 2010年 9月 27 ～29日在乌鲁木齐召
开的“赛加羚羊保护与可持续利用国际研讨会”上的发言。)
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