全 文 ：第 20卷 第 2 期
19 9年 6 月
热 带 作
C H IN E SE J O U R N A L
物 学 报
O F T R OPI CA L C OR PS
V o l
.
20 N o
.
2
Jnu
.
19 9
应用 R A P D 技术分析变叶木品种间遗传关系
彭世清 ` 徐碧玉 2 张玄兵 “ 郑学勤
(l 中国热 带农业科学院热 带作物生热拉术 国家重点 实验室 海 口 75 1 01 ;
2华南热 带农业 大学农学院园艺系 海南据州 75 173 7 )
摘要 采用随机扩增多态 D N (A R Ap D )技术分析 7 个变叶木 (` 。山加 , V~ 洲 , )品种间的遗
传关系 。 用 巧 个单引物共扩增出 85 个 D N A片段 , 其中清晰可辨 、 重复的片段有 64 个 , 占总数
的 75 . 3 % 。 7 个 品种特有的 R A P D 标记被检测出 ,这些标记可作为区别不同品种的重要性状 。
关键词 变叶木 R A P D 标记 遗传关系
中图法分类号 5 67 8 . 1 Q 78 9
变叶木 ( co d诚 u m v ar ic gat u m v ar . p ict u m ) 是 自然界中叶色 、 叶形 、 叶斑变化最多的热
带观叶植物 , 其中以叶形变化最 明显川 , 被广泛用于园林景观 、 艺术插花及庭院丛植等方面 。
目前绝大多数栽培品种是 由杂交育种而成的园艺品种 , 根据叶形的变化可分为复叶型变叶
木 、 长叶型变叶木 、 角叶型变叶木 、 戟叶型变叶木 、 螺旋叶型变叶木 、阔 叶型变叶木以及细叶
型变叶木 7 种类型 1 。 这 7 种类型的变叶木品种间的亲缘关系至今还不清楚 。
RA PD ( aR do m Am
p h ife d oP ly m
o rp hi 。 D N A s ) 技术作为核酸多态性检测的一种手段 , 已
广泛应用于许多植物种质分类鉴定中12间 。 本研究的目的是利用 RA P D 技术 , 鉴定变叶木品
种间的亲缘关系 , 以便为杂交育种中的亲本选择等方面提供科学的依据 。
1 材料与方法
1
.
1 材料
7 个变叶木品种均采 自华南热带农业大学园艺系苗圃 , 其名称及序号见表
表 1 试验材料名称
品种名 复叶变叶木
f 叩 p e dn 比砚“山 unI
长叶变叶木
不四功娜助`
南叶变叶木
不c oe n以二
戟叶变叶木
厂白 b at 。
螺旋叶变叶木
厂c山 P。
阔叶变叶木
不P如孙州2姗
细叶变叶木
不aet 成。 : ,
1
.
2 方法
1
.
2
.
1 DN A提取 参照文献【7] 中植物总 D N A 提取方法 n 进行 。 DN A浓度利用紫外分光光
度计测定 ( l · o n = 5 0 m g / L D N A ) , 然后将 n N ^ 浓度稀释为 5 0 n g / , L 。
1
.
.2 2 引物 采用美国 O pe or n eT ch n ol o ig se 公司生产的 F 、 G 及 P 组引物 (购 自北京多元
合众公司 ) 。
收稿 日期: 19 98 一 06 一 12
2 期 彭世清等 :应用 RA P D 技术分析变叶木品种间遗传关系
它的引物也可 以扩增出各品种特有的片段 , 但不能用一个引物将这些品种区分开来 。 因此 ,
采用 RA P D 分析植物品种间的遗传关系时 , 必须使用一定数量的引物进行 CP R 反应 , 以便
使分析结果更客观 。
2
.
2 扩增产物的特异性
在不 同引物的扩增产物中 , 仅个别种或品种在某一片段处有条带出现 , 这种其它种或
品种所不具备的条带可作为该种或品种的特殊标记 。 品种的特有遗传标记已作为重要的分
子性状用于作物品种的鉴定 .12 6 】。 变叶木品种特有的遗传标记被检出 (表 2 ) , 这些品种特有
标记能够作为区别于其它 品种的性状 。
表 2 变叶木品种特有 R A I, D 标记 * ’
品 种
编 号
引 物
F o l一 5X() F02 一 12X() F05
一 8 5 0 F 10一 7X() F 10一 l以X) G02 一例洲) P o l一 9 5 0 P0 5一 5 2 0 P肠一 16砚洲〕 P1 5一 4 X() P 1 6一以刃
-
~
叫
-
`
~ `
-
一叫
-一 `-
. . ~ ~一一一~ ,一 .一一 ~ . . 门一 门-一~ 月~ . 一 ~ ~ .-一一目`- ~ - .1 一6 +7 + +. 遗传标记命名根据扩增引物代号加上 D N A 片段大小 (娜 ) ; 编号 1一 7 与表 1 中的一致2 . 3 变叶木品种间的相似系数及遗传分析根据 RA P D 遗传标记 , 按照相似系数二 (2 M叮 /M X+ M y x) 10 % ( M , : 表示种 x 和 y 共有片段总和 ; M: : 表示品种 X 片段总和 ; M :y 表示种 y 片段总和 ) 周计算出变叶木品种间的相似系数 (表 3 ) , 最低的是复叶变叶木和阔叶变叶木间 , 为 7 .0 9 % , 说明它们的亲缘关系较远 ; 最高的是角叶变叶木和细叶变叶木间 , 为 89 . 1 % , 说明它们 间的亲缘关系很近 。表 3 用 R A P D 标记计算出变叶木品种间的相似系数 * 单位 : %编 号
1 1X()
8 3
.
4
,且,山
8568 2
.
1
7 9
.
2
1o
76
.
7
8 3
.
9
8 1
.
3
76
.
9
1o
86
.
6
7 0
.
9 79
.
8 8 1
.
2 8 8
.
5
1o
8 6
.
9
7 7 4
.
6 7 7
.
9 8 9
.
1 7 9
.
2 8 3
.
8 8 5
.
6 1X()
* 表中编号 1~ 7 与表 1 中一致
0 7热 带 作 物 学 报 2 0卷
参 考 文 献
l北京林业大学园艺系花卉组教研室 .花卉学 .北京 :中国林业出版社 , 19 9 0 . 35 6 ~ 361
2 梁红健 ,刘敏 ,钟志宇 ,等 .中国部分兰花品种 RAp D 分析 . 园艺学报 . 19 9 6 , 23 ( 4 ) : 365 一 370
3 惠东成 ,庄炳昌 .陈受宜 . R A P D 重建的大豆属植物亲缘关系 .遗传学报 , 19 9 6 , 23 ( 6 ) : 460 一 46 8
4 冯丽春 ,杨光伟 ,余茂德 , 等 .利用 R A p D 对桑属植物种间亲缘关系的研究 . 中国农业科学 , 1 9 7 , 30 ( 1 ) : 52 一 56
5 陈新礴 ,赵样云 .应用 R A p D 技术评价丁香品种间遗传关系 . 园艺学报 , 19 9 5 . 2 ( 2 ) : 171 一 176
6 Y a n g .X Ou
l r 0 6 , C
.
Id e nt 近atC ion an d e l幽透。时 j o n Of o d e叮 e d t i~ 讯 th R A卫D m az k e o
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H 0 rt s c i e cne 19 9 3
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2 8 (4 )
: 3 33一 3 3 4
7 傅荣昭 ,孙勇如 ,贾士荣 . 植物遗传转化技术手册 .北京 : 中国科技出版社 , 1 9 4 . 140 一 142
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