全 文 ：少 (P ＜ 0. 05)和跨骑次数增加 (P ＜ 0. 01)均有
统计学差异，跨骑动物百分比也明显提高，酒炙品
组与盐炙品组和生品组之间进行比较，结果显示酒
炙组在跨骑次数的增加上与生品组和盐炙品组有统
计学差异且更优 (酒炙品组与生品组比较 P ＜
0. 05，酒炙品组与盐炙品组比较 P ＜ 0. 05)。综上
所述，韭菜子在用于治疗肾阳虚时应用酒炙品。
3. 2 韭菜子生品组能显著提高氢化可的松造模后
小鼠的交配能力，说明韭菜子本身具有壮阳补肾的
功效。模型组小鼠采用氢化可的松造模后，与正常
组比较，小鼠的跨骑潜伏时间显著延长，跨骑次数
显著减少，说明小鼠经氢化可的松造肾阳虚模型后
能显著降低小鼠交配能力，从肾主生殖的方面再次
验证氢化可的松造肾阳虚模型的适用性。韭菜子生
品组与盐炙组比较，跨骑潜伏时间和跨骑次数没有
统计学差异，从传统中药炮制理论方面盐制入肾以
及缓和药物燥性和古书记载韭菜子在临床应用中存
在燥性，说明韭菜子盐炙可能主要作用是降低其燥
性而非增强其补肾壮阳之功效，本课题组也将对韭
菜子盐炙降低其燥性做进一步研究。韭菜子酒炙品
在跨骑次数增加上优于生品与盐制品，与传统酒炙
理论相符，也进一步验证了传统炮制理论中认为酒
炙壮阳，同时也说明酒炙才是增强韭菜子补肾壮阳
的主要原因，本课题也将对酒炙韭菜子的化学物质
基础以及酒炙增强其补肾壮阳作用的机理做进一步
研究。
参考文献:
［1］ 中国植物志编辑委员会． 中国植物志:第 14 卷［M］． 北京:
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海中医药大学学报，2008，22(2) :73.
有毒中药甘遂醋炙工艺研究
石典花1， 张姗姗2， 孙立立1*
(1． 山东省中医药研究院，山东 济南 250014;2． 山东中医药大学，山东 济南 250014)
收稿日期:2011-09-13
基金项目:2008 年中医药行业科研专项“中药麸制及有毒中药炮制技术与原理研究”(200807039)
作者简介:石典花，女，助理研究员，主要从事中药炮制研究。Tel: (0531)82949829
* 通信作者:孙立立，女，研究员，主要从事中药炮制研究。Tel: (0531)82949829
摘要:目的 优选醋甘遂最佳炮制工艺。方法 以毒效部位特征峰峰面积之和及外观性状为指标，采用 L9 (3
4)正
交试验，对加醋量、炒制温度、炒制时间三因素进行考察。结果 优选的最佳醋炙工艺为加醋量 30%，230℃炒制 30
min。结论 该研究可为醋甘遂的炮制和饮片的质量控制提供科学依据。
关键词:甘遂;醋炙;正交试验;毒效部位
中图分类号:R283 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2012)07-1324-05
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第 34 卷 第 7 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
July 2012
Vol. 34 No. 7
Stir-fried Kansui Radix with vinegar
SHI Dian-hua1， ZHANG Shan-shan2， SUN Li-li1
(1. Shandong Academy of Chinese Medicine，Jinan 250014，China;2. Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Jinan 250014，China )
KEY WORDS:Kansui Radix;stir-frying with vinegar;orthogonal test;the toxic and effective part
甘遂为大戟科植物甘遂 Euphorbia kansui T． N．
Lion ex T． P． Wang． 的干燥块根［1］，别名主田、
猫儿眼、苦泽、陵泽、甘藁、陵藁、九头狮子草
等［2］。主要产于陕西、山西、河南、山东、宁夏
等地，以陕西产者质量最佳。甘遂属有毒中药，始
载于《神农本草经》，列为下品。2010 年版中国药
典一部载甘遂具有泻水逐饮，消肿散结的功效。用
于水肿胀满，胸腹积水，痰饮积聚，气逆咳喘，二
便不利，风痰癫痫，痈肿疮毒等［1］。现代研究表
明，甘遂化学成分具有抗肿瘤、抗生育、抗病毒、
调节免疫系统等活性［3］。临床常用于治疗晚期食
道癌、乳腺癌等恶性肿瘤以及慢性支气管炎哮喘
等症［4］。
目前甘遂的炮制多以醋炙为主，但全国炮制工
艺很不统一［5-10］，更无具体的量化参数，只是单纯
依靠老药工炮制经验，或单纯依靠化学成分为指标
优选工艺参数［11-12］，导致醋甘遂的质量参差不齐，
进而影响了临床疗效。本研究在传统制法的基础
上，采用 L9 (3
4)正交试验法，优选最佳醋炙工
艺，为醋甘遂的炮制和饮片的质量控制提供科学
依据。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 Waters 2695 高效液相色谱仪，Waters
2996 DAD 检测器;瑞士 METTLER XS205 DU10 －5
电子天平 (梅特勒-托利多仪器上海有限公司) ;
红外温度仪 ST80 (北京雷泰光电技术有限公司) ;
数显电子恒温水浴锅 (金坛市晶玻实验仪器厂) ;
电炒药机 (哈尔滨市测电器厂) ;MILLI—Q 超纯
水纯化系统;RE—2000 旋转蒸发仪 (上海亚荣生
化仪器厂) ;索氏提取器等。
1. 2 试药 乙腈为色谱纯;乙酸乙酯、石油醚等
均为分析纯;龙门米醋 (北京王致和味滋康食品
有限公司，生产日期 201001272) ;甘遂药材由安
徽亳州沪谯中药饮片厂提供，产地为陕西。
2 方法与结果
2. 1 醋炙工艺的正交设计 在前期研究工作基础
上，确定了甘遂醋炙的主要影响因素为加醋量、炒
制时间、炒制温度，采用 L9 (3
4)正交设计法，
以外观质量和内在质量作为评价指标，采用加权法
进行评分，对试验结果进行分析。
2. 1. 1 外观质量评分依据和标准 中药饮片的外
观性状评价是中医药宝贵经验的总结，能较直观的
反映出饮片的质量好坏，因此将其作为正交试验的
评价指标之一。依据炮制专家的传统经验制定醋甘
遂的评分标准:根据样品的表面颜色、断面颜色、
着色是否均匀、焦斑数量及有无醋焦香气等对醋甘
遂进行传统质量评分，质量最好的为 100 分。
2. 1. 2 内在质量评价指标及标准 甘遂是有毒中
药，经醋炙后可降低其毒性，缓和其峻泻之性，经
前期急性毒性试验和药效实验研究表明，甘遂醋炙
前后的毒效部位均是石油醚部位，因此采用 HPLC
梯度洗脱法对此部位进行测定，选择其中 15 个特
征峰峰面积之和作为优选甘遂最佳醋炙工艺的指标
之一。
2. 1. 3 正交试验因素、水平设计 见表 1。
表 1 甘遂醋炙因素、水平
Tab. 1 Fators and levels of stir-fried Kansui Radix
with vinegar
水平
A
加醋量 /%
B
炒制温度 /℃
C
炒制时间 /min
1 20 230 40
2 30 180 30
3 40 280 20
2. 2 毒效部位 HPLC特征图谱研究
2. 2. 1 色谱条件 Diamonsil-C8 (250 mm × 4. 6
mm，5 μm)色谱柱;柱温30 ℃;流动相为乙腈-
0. 2%磷酸 (梯度洗脱，见表 2) ;体积流量 1 mL /
min;检测波长 203 nm。
2. 2. 2 供试品溶液的制备 取醋甘遂粉末 (过四
号筛)约 10 g，精密称定，置索氏提取器中，精
密加入石油醚 90 mL，加热回流提取 8 h，提取液
减压回收，残渣用体积比为1 ∶ 1的石油醚和乙酸乙
酯混合溶剂溶解，并转移至 10 mL量瓶中，加混合
溶剂至刻度，摇匀，用 0. 45 μm 微孔滤膜滤过，
即得。
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第 34 卷 第 7 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
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Vol. 34 No. 7
表 2 梯度洗脱条件
Tab. 2 Conditions of gradient elution
时间 /min A乙腈 /% B 0. 2%磷酸 /%
0 40 60
30 60 40
40 70 30
70 80 20
90 97 3
100 97 3
110 100 0
2. 2. 3 方法学考察
精密度试验 取醋甘遂 (正交 4 号样品)供
试品溶液 10 μL，连续进样 6 次，分别对其中 15
个特征色谱峰保留时间和峰面积进行统计。结果，
15 个特征峰的保留时间和峰面积基本一致，RSD
均小于 3%，表明精密度良好。
稳定性试验 取醋甘遂 (正交 4 号样品)供
试品溶液 10 μL，分别于 0、2、4、8、12、24 h测
定，分别对其中 15 个特征色谱峰保留时间和峰面
积进行统计。结果，15 个特征峰的保留时间和峰
面积基本一致，RSD均小于 3%，表明 24h 内测定
结果稳定。
重复性试验 取醋甘遂 (正交 4 号样品)粉
末 6 份 (过四号筛) ，照供试品溶液的方法制备，
依次测定，分别对其中 15 个特征峰保留时间和峰
面积进行统计。结果，15 个特征峰的保留时间和
峰面积的 RSD均小于 3%，表明重复性良好。
2. 2. 4 测定法 分别精密吸取供试品溶液各 10
μL，注入液相色谱仪，测定，即得。测定图谱及
特征峰标识见图 1。
图 1 醋甘遂毒效部位 HPLC特征图谱
Fig. 1 HPLC characteristic chromatography of the
toxic and effective part in stir-fried Kansui
Radix with vinegar
2. 3 试验方法与结果
2. 3. 1 正交试验样品的制备 取大小均一的净甘
遂各 100 g，共取 9 份，按正交试验设计方案进行
实验，加入不同比例的醋拌匀，闷润，待醋吸干，
置预热至一定温度的电炒药锅中，不断翻炒，以红
外线测温仪测量控制锅底温度，炒制相应时间，取
出，放凉，再精密称取各醋炙品质量，计算各炮制
品得率。以上述确定的测定方法和评分标准，对不
同条件下制备的醋甘遂进行传统质量评分，对内在
质量进行测定。
2. 3. 2 外观质量评分 正交 1 ～ 9 号醋甘遂，一次
性送给一位炮制专家进行评定，9 份样品逐个打
分，共请了 3 位专家评审，每个样品的平均值作为
外观质量的得分。
2. 3. 3 内在质量评价指标的测定 照 2. 2 项方法
进行测定，结果见表 3。
表 3 样品得率及特征峰面积之和测定结果
Tab. 3 Yield of samples and the sum of the characteristic
peaks area
样品名称 得率 /% 特征峰面积之和 与生品峰面积之比
正交 1 90. 4 822 653 42 1. 20
正交 2 98. 0 720 555 92 1. 05
正交 3 90. 7 729 671 70 1. 07
正交 4 93. 6 628 336 75 0. 92
正交 5 108. 0 923 513 95 1. 35
正交 6 87. 4 663 586 36 0. 97
正交 7 104. 5 560 110 24 0. 82
正交 8 104. 8 647 825 89 0. 95
正交 9 91. 4 545 173 07 0. 80
生品 － 684 723 46 －
2. 3. 4 内在质量得分 根据与生品换算后各供试
品特征峰峰面积之和与甘遂生品特征峰峰面积之和
的比值 (结果见表 3)并综合考虑毒性和药效的关
系，认为，比例段在 0. 80 ～ 0. 95 者为佳，其中规
定比例为 0. 9 为 100 分，0. 80 ～ 0. 95 比例段每增
加或减少 0. 01 减 2 分，其他比例段每增加 0. 01 减
1 分，具体见表 4。
表 4 得分表
Tab. 4 The table of score
比例段 得分
0. 80 ～ 0. 85 80 ～ 90
0. 85 ～ 0. 90 90 ～ 100
0. 90 ～ 0. 95 100 ～ 90
0. 95 ～ 1. 05 90 ～ 80
1. 05 ～ 1. 15 80 ～ 70
1. 15 ～ 1. 35 70 ～ 50
2. 3. 5 综合质量评分 外观质量和甘遂毒效部位
对醋甘遂有着同等重要的意义，因此两者的加权系
数均为 0. 5，综合评分以下式计算:
综合质量评分 =外观质量得分 × 0. 5 +毒效部
位特征峰面积得分 × 0. 5
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中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
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Vol. 34 No. 7
各种条件下醋甘遂综合评分结果见表 5。方差 分析见表 6。
表 5 L9 (3
4)正交试验结果及直观分析表
Tab. 5 Results of L9 (3
4)orthogonal test and visual analysis
实验号
A
加醋量 /%
B
炒制温度 /℃
C
炒制时间 /min 传统得分
毒效部位特征
峰面积得分
综合质量
评分
1 1 1 1 85 65 75
2 1 2 2 65 80 72. 5
3 1 3 3 75 78 76. 5
4 2 1 2 100 96 98
5 2 2 3 70 50 60
6 2 3 1 55 88 71. 5
7 3 1 3 90 84 87
8 3 2 1 60 90 75
9 3 3 2 50 80 65
综合评分
k1 74. 667 86. 667 73. 833
k2 76. 500 69. 167 78. 500
k3 75. 667 71. 000 74. 500
R 1. 833 17. 500 4. 667
表 6 方差分析
Tab. 6 Variance analysis
因 素 SS V F比 P
A 5. 056 2 1. 000
B 555. 056 2 109. 782 ＜ 0. 01
C 38. 222 2 7. 560
误差 5. 056 2
F1 － 0. 01 (2，2) = 99. 0
2. 3. 6 试验结果分析
直观分析 由表 5 的极差 (R)可以看出，在
该正交试验设定的因素、水平条件下，对综合评分
影响大小的因素进行分析，依次为 B ＞ C ＞ A，即 B
因素影响最大，其次为 C 因素，A 因素影响最小;
对 A因素有 k2 ＞ k3 ＞ k1，对 B 因素有 k1 ＞ k3 ＞ k2，
对 C因素有 k2 ＞ k3 ＞ k1。因此，对综合质量评分而
言，最佳炮制工艺条件为 A2B1C2。
方差分析 由表 6 可以看出，以 A 因素项为
误差，B因素的 P ＜ 0. 01，表明 B 因素对醋甘遂质
量有极显著性影响。
2. 3. 7 甘遂最佳醋炙工艺的确定 由上述试验结
果可以得到，甘遂最佳醋炙工艺条件应为 A2B1C2，
即:取净甘遂适量，加入 30%的醋，闷润，待醋
吸干，置预热至230 ℃电炒药锅内，炒制30 min，
取出，晾凉。
2. 3. 8 醋甘遂最佳炮制工艺验证试验 为考察正
交试验的合理性和可重复性，用同一电炒药锅和同
一批甘遂，进行了验证试验。取净甘遂 3 份，每份
1 kg，加入 0. 3 kg的醋，闷润，待醋吸干，置预热
至230 ℃电炒药锅内，炒制30 min，取出，晾凉，
再精密称取各醋炙品质量，计算各炮制品得率。考
察醋甘遂的外观质量，并进行醋甘遂毒效部位特征
图谱测定。3 批工艺验证试验的主要数据见表 7。
表 7 甘遂醋炙工艺验证试验结果
Tab. 7 Results of validation test of the technology of Kansui Radix stir-fried with vinegar
批次 加入量 /kg 炮制品量 /kg 得率 /% 传统质量 毒效部位特征峰面积
1 1. 0 0. 938 93. 8 表面黄色至棕黄色，偶有焦斑，微有醋焦香气 62 900 751
2 1. 0 0. 940 94. 0 表面黄色至棕黄色，偶有焦斑，微有醋焦香气 63 057 182
3 1. 0 0. 936 93. 6 表面黄色至棕黄色，偶有焦斑，微有醋焦香气 62 741 230
3 批验证试验结果表明，醋甘遂的得率约为
94%，醋炙后甘遂外观性状与传统外观性状评价保
持一致，醋甘遂毒效部位特征峰面积之和基本一
致，说明正交试验确定的工艺稳定，可重复性强。
3 小结与讨论
本实验依据甘遂醋炙减毒增效原理，根据前期
研究确定的甘遂毒效部位的 HPLC特征指纹图谱分
析条件，对此部位进行测定，并以此为指标，结合
醋甘遂的传统外观质量，采用综合质量评分法，对
醋甘遂的炮制工艺进行优选，这种方法较单纯采用
甘遂中某一成分为指标来优选甘遂醋制工艺的方法
更加科学，合理，更能够客观的反映各个因素水平
对醋甘遂质量的影响。
实验结果表明甘遂最佳醋炙工艺为:取净甘遂
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第 34 卷 第 7 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
July 2012
Vol. 34 No. 7
适量，加入相当于药材量 30%的醋，闷润，待醋
吸干，置预热至230 ℃电炒药锅内，炒制 30 min，
取出，晾凉。经 3 批验证实验表明该工艺稳定，可
重复性强，优选出的醋甘遂最佳炮制工艺，明确了
加醋量、炒制温度和炒制时间等炮制参数，可为规
范醋甘遂生产，有效控制醋甘遂质量提供理论
依据。
参考文献:
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5 种地锦药材中总黄酮及 3 个酚酸类成分测定研究
李 慧， 许 亮， 徐保利， 管慧洁， 何 华， 王 冰*
(辽宁中医药大学，辽宁 大连 116600)
收稿日期:2011-11-18
基金项目:辽宁省教育厅项目 (2009A496) ;辽宁中医药大学青年药学人才基金课题 (YXRC0920)
作者简介:李 慧 (1987—) ，女 (满族) ，硕士生。
* 通信作者:王 冰，教授，博士生导师，研究方向:药用植物资源与鉴定。Tel: (0411)87586004 ，yzbwang@ lnutcm. edu． cn
摘要:目的 建立地锦草药材真伪鉴别标准。方法 采用高效液相色谱法及紫外-可见分光光度法对其酚酸类成分及总
黄酮进行测定，并用 spss软件对数据进行聚类分析。结果 建立了地锦草药材 3 个酚酸类成分 (没食子酸、槲皮素、
山柰素)的测定方法，使用聚类分析基本可以将其分为四类。结论 初步将地锦草药材的两个正品来源和其他 3 种地
锦类植物相互区分开。为地锦类植物的质量评价和开发药材资源，鉴定药用植物真伪提供了技术支持和科学依据。
关键词:地锦草;聚类分析
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2012)07-1328-05
Determination of total flavone and three phenolic acids in five kinds of Euphorbi-
ae humifusae Herba
LI Hui， XU Liang， XU Bao-li， GUAN Hui-jie， HE Hua， WANG Bing*
(Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Dalian 116600，China)
KEY WORDS:Euphorbiae humifusae Herba;cluster analysis
地锦草为大戟科植物地锦 Euphorbia humifusa
Willd． 或斑地锦 Euphorbia maculata L． 的干燥全
草。具有清热解毒、凉血止血、利湿退黄的功效。
常用于治疗痢疾、肠炎、咳血、便血、崩漏、疮疥
痈肿，湿热黄疸等［1］。药理研究表明地锦草的抗
菌抗炎作用明显，止血作用效果好，有很强的清除
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2012 年 7 月
第 34 卷 第 7 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
July 2012
Vol. 34 No. 7