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Study on the dosage -time-toxicity relationship of hepatotoxicity induced by the decoction
of airpotato Yam Ｒhizome in mice
Zhao Lingang1，2，Liu Ｒuonan2，Shi Le2，Li Yue2，Xu Li2
(1 Jiangsu Province Hospital of TCM，Nanjing 210029;2 Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing 210046)
Objective:To observe the dosage -time-toxicity relationship of hepatotoxicity induced by the decoction of airpotato Yam Ｒhizom ．
Methods:the different dosages of the decoction of airpotato Yam Ｒhizom are given to mice for different times to detect the changes of weigh，
food consumption，liver coefficient，blood biochemical indices and pathological index． Ｒesults:Compared with the control group，all the de-
coction of airpotato Yam Ｒhizome of the treatment groups show some degree of pathological liver injury;and inhibit the mice＇s weight growth，
raise the liver weight and liver coefficient，which has a certain dose -time relationships． Compared with the control group，with the largest
dosage administration，the serum ALT and AST of 10th days and 20th days rise to different levels，and the serum TBIL of the 10 days rise，
all the serum biochemical index of 30th day have no significant increase． Conclusion:Taking the decoction of airpotato Yam Ｒhizome with the
clinical equal dosage and 10 times dosage continuously 30 days could lead to liver injury，but the serum biochemical index have no obvious
changes． The administration of 10times clinical equal dosage for 10 days，the serum ALT 、AST、TBIL rise． It needs to explore the time-tox-
icity relationship between the decoction of airpotato Yam Ｒhizome and the serum biochemical index．
Key words airpotato Yam Ｒhizome(黄药子);liver damage;mouse
基于 NMＲ的代谢组学对醋制甘遂减毒作用的研究
唐冰雯1，丁佳佳1，杨永霞2，宋粉云1*
(1广东药学院药科学院，广州 510006;2广东药学院基础学院，广州 510006)
摘 要 目的:在进一步明确甘遂毒性作用的基础上，从整体上阐明不同剂量醋制甘遂对大鼠的减毒作用。方法:应用核磁
共振技术( NMＲ) 和正交-偏最小二乘判别分析( OPLS-DA) 方法分析给予大鼠甘遂( 7． 875、15． 75g /kg) 和醋制甘遂水提取物( 7． 875、
15． 75g /kg) 后，大鼠尿液代谢物变化，并结合血浆生化分析和肝、肾组织病理切片 HE染色检测，明确醋制甘遂的减毒作用机制。结
果:OPLS-DA分析结果显示，甘遂组能够引起大鼠尿液中柠檬酸，琥珀酸，酮戊二酸、肌酸 /肌酐含量降低和牛磺酸、甜菜碱、TMAO
的含量增加。但 7． 875 g /kg醋制甘遂组中，仅引起柠檬酸和 α-酮戊二酸含量显著降低，而 15． 75 g /kg醋制甘遂组会导致琥珀酸，柠
檬酸和 α-酮戊二酸含量显著降低，牛磺酸，甜菜碱和 TMAO含量升高。结论:醋制甘遂的减毒作用具有剂量依赖性，是通过干预甘
遂毒性生物标志物和下调肝肾毒性传统指标来发挥其减毒作用。
关键词 甘遂;醋制甘遂;代谢组学;核磁共振(NMＲ)
甘遂，是大戟科大戟属植物甘遂 Euphorbia kansui T． N． Li- ou ex T． P． Wang 的干燥块根，有毒，具有泻水逐饮的功能［1］。
89 中药药理与临床 2013;29(4)
* 通讯作者
此外，甘遂还具有细胞毒作用、抗肿瘤作用［2，3］和抗白血病作
用［4］等生物活性。但是甘遂具有刺激肠道，损害心、肝、肾等脏
器［5，6］的毒性作用。针对甘遂的毒性作用，自古以来通过醋制
炮制的方法来降低其毒性。而现有研究仅从传统毒理学改变
的角度来阐述醋制甘遂的减毒作用［7，8］，并未能够系统的揭示
甘遂的减毒作用。代谢组学作为一门新的组学［9］，能够全面
监测机体代谢物的变化，更符合中药成分复杂，多靶点交叉作
用的特点。故本实验采用代谢组学的方法对甘遂和醋制甘遂
作用下大鼠尿液内源性代谢物进行分析，整体评价醋制甘遂的
减毒作用。
1 材料和方法
1． 1 实验药物 甘遂购自广东省广州市清平药材市场，并由
广东药学院中药学院刘基柱副教授鉴定，证实其为大戟科植物
甘遂(Euphorbia kansui T． N． Liou ex T． P． Wang)的干燥块根。
甘遂水提取液 甘遂生品 800 g，洗净，加水 4800 ml 煎煮
至沸腾后 30 min，过滤，残渣加水 3200 ml，煎煮至沸腾后 20
min，过滤，合并滤液，浓缩至 800 ml，则为生药浓度为 1 g /ml。
醋制甘遂水提取液 醋的用量为 30%，炮制温度 260℃，炮
制时间 9 min。取净甘遂 1000 g，用米醋拌匀，闷透 5 ～ 8 h，置锅
内，用文火炒至微干，取出晾干。醋制甘遂 1000 g，加水 6000 ml
煎煮至沸腾后 30 min，过滤，残渣加水 4000 ml，煎煮至沸腾后
20 min，过滤，残渣加水 2000 ml，煎煮至沸腾后 20 min 合并滤
液，浓缩至 1000 ml，则为生药浓度为 1 g /ml。
1． 2 动物 60 只 SD大鼠，雄性，体重为 200 ～ 250 g，购置广东
医学实验动物中心，动物许可证号:SGXK-(粤)2008-0002。
1． 3 试剂 NaN3(叠氮化钠)为国产分析纯;重水(D2O)和含
TSP的重水购自青岛腾龙科技有限公司。
1． 4 仪器 NMＲ:Bruker AVANCE III 500 MHz;自动生化分析
仪:购自美国 Beckman公司。
1． 5 方法 60 只雄性大鼠随机分为空白组(给予等剂量的纯
净水)，7． 875 g /kg 甘遂组，15． 75 g /kg 甘遂给药组，7． 875 g /kg
醋制甘遂组，15． 75 g /kg 醋制甘遂组 5 组，每组 12 只。大鼠自
由饮水、摄取食物。适应饲养 1 周后，分别收集各实验组大鼠给
药前 1 d，灌胃给药后 7 d、14 d，停药后恢复饲养 7 d 的 8 h 尿
液，滴加 0． 1 %的叠氮钠作为防腐剂。在灌胃给药 14 d和停药
后 7 d，收集各实验组大鼠血浆，并同时收集肝、肾组织。所有样
品均放置于-80℃的冰箱中保存，备用。
1． 5． 1 血浆生化分析 取给药 14 d后各实验组大鼠的血浆离
心(14000 g，10 min，4℃)后用 Beckman DXC 800 全自动生化分
析仪进行分析，测定的指标为葡萄糖(GLUC)，肌酐(Cr)，丙氨
酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮
(BUN)。
1． 5． 2 组织病理学检查 取肝、肾组织，生理盐水洗净表面血
污，滤纸吸干，取部分肝、肾组织用体积分数为 4%的甲醛固定、
组织修切、石蜡包埋、姬姆(HE)染色、酒精梯度脱水、透明、封片
和光学显微镜检查。
1． 5． 3 代谢组学数据采集 常温解冻后，精密吸取 400μl至离
心管中，加入 100 μl 磷酸缓冲液 (0． 2 mol /L Na2HPO4 /
NaH2PO4，pH7． 4)，离心(14000 g，10 min，4℃)，取上清液，加入
100 μl的含 TSP 的重水，转入 5 nm 核磁管。混匀，于 4℃冰箱
保存，备用。
尿液测定使用 Bruker AVANCE III 500 MHz 超低温探头核
磁共振仪，调用 Carr-Purcell -Mei boom-Gill(recycle delay-90°-(τ-
180°-τ)n-acquisition)脉冲序列。NMＲ测定相关参数如下:回波
时间 1ms，谱宽 10000 Hz，采样点数 64 k，采样时间 3． 27 s，叠加
次数 64 次，循环次数 64 次，控制温度在 298 K。自由感应衰减
信号经过 32 k傅立叶变换转为 NMＲ谱图。将图谱文件夹导入
MestＲeNova 2． 0，以 TSP 为化学位移参考峰的位置，设为 δ 0，校
正化学位移，对图谱进行相位校正和基线校正，并对所有的 1H
CPMG谱进行自动积分，积分区间 δ 0． 5 ～ 9． 2，积分间隔 0． 04
ppm。为了消除剩余水峰和尿素峰引起的影响，将积分区间 δ
4． 6 ～ 6． 2 的积分值设为零。所产生的所有积分数据进行归一
化处理，以 Excel文件格式保存，用于进行模拟识别分析。将归
一化后的数值导入 SIMCA-P + 12． 0 软件(Umetrics，Sweden)进
行 OPLS-DA的模式识别分析。
2 结果
2． 1 血浆生化分析 15． 75 g /kg醋制甘遂组、7． 875 g /kg甘遂
组、15． 75 g /kg甘遂组与空白组比较，GLUC显著降低，15． 75 g /
kg醋制甘遂组比 15． 75 g /kg甘遂组的 CLUC值升高的幅度小。
15． 75 g /kg醋制甘遂组、7． 875 g /kg甘遂组、15． 75 g /kg 甘遂组
与空白组比较，Cr值显著升高。15． 75 g /kg 甘遂组与空白组比
较，AST值显著升高。各实验组与空白组比较 ALT与 BUN变化
均不显著，但有升高的趋势。
表 1 给药 14d后，血浆生化指标的变化
醋制甘遂组
(7． 875 g /kg)
∶ 空白组
醋制甘遂组
(15． 75 g /kg)
∶ 空白组
甘遂组
(7． 875 g /kg)
∶ 空白组
甘遂组
(15． 75 g /kg)
∶ 空白组
GLUC ↓ ↓＊ ↓＊ ↓＊
Cr ↑ ↑＊ ↑＊ ↑＊
AST ↑ ↑ ↑ ↑＊
ALT ↑ ↑ － ↑
BUN ↑ ↑ ↑ ↑
* P ＜ 0． 05
2． 2 病理切片 在 7． 875 g /kg的甘遂和醋制甘遂组大鼠的肝
脏切片观察中，均可以观察到肝血窦肿胀，肝细胞萎缩的现象。
在 15． 75g /kg醋制甘遂组观察到轻微的水样变性，但是 15． 75g /
kg甘遂组中不仅出现了严重的水样变性外还可观察到肝细胞
坏死。另一方面，各实验组的肾脏病理切片分析显示:7． 875 g /
kg甘遂和醋制甘遂组并未引起肾髓质的明显变化，仅仅观察到
7． 875g /kg甘遂组引起肾皮质嗜酸性红细胞增多。虽然在甘遂
和醋制甘遂组都出现了血管扩张充血的现象，但是 15． 75 g /kg
甘遂组还引起了细胞脱落和管腔内蛋白管型的病理学改变，如
图 1。
99中药药理与临床 2013;29(4)
图 1 7． 875 g /kg 甘遂组，7． 875 g /kg 醋制甘遂组，15． 75 g /kg 甘遂组和 15． 75 g /kg 醋制甘遂组的肝、肾病理切片
A1:对照组肝脏切片中央静脉区; A2:对照组肝脏切片门管区; B1: 15． 75 g /kg 甘遂组中央静脉区; B2: 15． 75 g /kg 醋制甘遂组中央静脉区; B3: 15．
75 g /kg 甘遂组门管区; B4: 15． 75 g /kg 醋制甘遂组门管区; C1: 7． 875 甘遂组中央静脉区; C2: 7． 875 g /kg 醋制甘遂组中央静脉区; C3: 7． 875 g /kg
甘遂组门管区; C4: 7． 875 g /kg 醋制甘遂组门管区; D1:对照组肾脏切片肾髓质; D2:对照组肾脏切片肾皮质; E1: 15． 75 g /kg 甘遂组肾皮质; E2:
15． 75 g /kg 醋制甘遂组肾皮质; E3: 15． 75 g /kg 甘遂组肾髓质; E4: 15． 75 g /kg 醋制甘遂组肾髓质; F1: 7． 875 g /kg 甘遂组肾皮质; F2: 7． 875 g /kg 醋
制甘遂组肾皮质; F3: 7． 875 g /kg 醋制甘遂组肾髓质; F4: 7． 875 g /kg 醋制甘遂组肾髓质
2． 3 尿液中主要代谢物的 1H-NMＲ 归属 给药 14 d后，空白
组、甘遂 7． 875 g /kg和 15． 75 g /kg，醋制甘遂 7． 875 g /kg和 15．
75 g /kg组大鼠的尿液代谢物的 1H-NMＲ 图谱变化见图 2。通
过查阅相关文献［10 ～ 12］对尿液代谢物的 1H-NMＲ 图谱进行峰归
属，从图中可以观察到代谢物有三羧酸循环中间产物(α-酮戊
二酸，柠檬酸，琥珀酸)，葡萄糖，乳酸，氧化三甲胺，二甲胺、三
甲胺等胺类产物，乳酸，马尿酸，甲酸等有机酸。还可以观察到
实验组大鼠尿液中柠檬酸含量的下降，以及肌酸 /肌酐含量增
加，并且这些变化与给药剂量的增大成正比关系。为了进一步
具体的分析大鼠尿液中代谢物的变化情况，进行进一步的模式
识别分析。
001 中药药理与临床 2013;29(4)
图 2 大鼠尿液的 1H-NMＲ谱( δ 9． 2-0． 5)
A:空白组; B: 7． 875 g /kg甘遂组; C: 15． 75 g /kg甘遂组; D: 7． 875 g /kg醋制甘遂组; E: 15． 75 g /kg醋制甘遂组
1: 2-酮异戊酸; 2:乳酸; 3:丙氨酸; 4: 乙酸; 5: N-乙酰糖蛋白( NAG) ; 6:丙酮; 7:丙酮酸; 8:琥珀酸; 9: -酮戊二酸; 10:柠檬酸; 11: 二甲胺( DMA) ; 12:三甲
胺( DMG) ; 13:肌酸; 14:肌酐; 15:丙二酸; 16:氧化三甲胺( TMAO) ; 17:牛磺酸; 18:甜菜碱; 19:磷酸乙醇胺( PE) ; 20:马尿酸; 21:延胡索酸; 22:苯乙酰
甘氨酸( PAG) ; 23:苯丙氨酸; 24:甲酸( 化学位移区间 δ 0． 5 ～ 2． 0 和 δ 6． 2 ～ 9． 0 分别放大 8 倍和 6 倍)
2． 4 OPLS-DA分析 连续给药 14 d，空白组、7． 875 g /kg醋制
甘遂组、15． 75 g /kg醋制甘遂组、7． 875 g /kg甘遂组、15． 75 g /kg
甘遂组大鼠尿液 1H-NMＲ 谱积分数据进行 OPLS-DA 分析(图
3A)。结果显示空白组尿液代谢物与各给药组之间的分组差异
明显，说明空白组与给药组的尿液代谢表型存在显著差异。而
且，醋制甘遂组介于空白组与甘遂组之间，说明醋制甘遂组大
鼠的尿液代谢成分的差异小于甘遂组。无论是醋制甘遂组或
是甘遂组，分组差异随着给药剂量增加而增大，说明醋制甘遂
或甘遂引起大鼠尿液中内源性代谢物的变化存在剂量依赖性。
进一步结合 OPLS-DA分析的载荷图(图 3B)，发现对各实验组
分组差异具有显著贡献率的是减少的柠檬酸，琥珀酸，酮戊二
酸和肌酸 /肌酐，增加的牛磺酸，甜菜碱和 TMAO。为了进一步
的说明醋制甘遂与甘遂引起大鼠尿液代谢物变化的差异，将上
述尿液代谢物的积分值进行比较分析，结果如表 2。从表中可
以清晰的看到:与空白组相比，甘遂组能引起柠檬酸，琥珀酸，酮
戊二酸含量降低和甜菜碱、TMAO 的含量增加。此外，15． 75 g /
kg甘遂组还能引起肌酸 /肌酐的减少和牛磺酸的增加。但 7．
875 g /kg醋制甘遂组仅引起柠檬酸和 α-酮戊二酸含量显著降
低，15． 75 g /kg醋制甘遂组也只导致琥珀酸，柠檬酸和 α-酮戊
二酸含量显著降低，牛磺酸，TMAO和甜菜碱含量升高。进一步
说明大鼠尿液代谢物的变化与给予甘遂或醋制甘遂的剂量成
正相关的作用;而且，醋制甘遂能够在一定程度上减少甘遂对
机体的影响作用。
表 2 给药 14 d，7． 875 g /kg 醋制甘遂，15． 75 g /kg 醋制甘遂，7． 875 g /kg 甘
遂，15． 75 g /kg甘遂组大鼠尿液代谢物的变化
代谢物 位移
醋制甘遂组
(7． 875 g /kg)
∶ 空白组
醋制甘遂组
(15． 75 g /kg)
∶ 空白组
甘遂组
(7． 875 g /kg)
∶ 空白组
甘遂组
(15． 75 g /kg)
∶ 空白组
琥珀酸 2． 42(s) ↓ ↓＊ ↓＊ ↓＊
柠檬酸 2． 56(d)
2． 68(d)
↓＊ ↓＊ ↓＊ ↓＊
α-酮戊二酸 2． 45(t)
3． 02(t)
↓＊ ↓＊ ↓＊ ↓＊
肌酸 /肌肝 3． 94(s)
3． 06(s)
4． 06(s)
↓ ↓ ↓ ↓＊
牛磺酸 3． 26(t)
3． 42(t)
↑ ↑＊ ↑ ↑＊
TMAO/甜菜碱 3． 26(s) ↑ ↑＊ ↑＊ ↑＊
* P ＜ 0． 05
图 3 给药 14 d，空白组、7． 875 g /kg 醋制甘遂组、15． 75 g /kg 醋制甘遂
组、7． 875 g /kg甘遂组、15． 75 g /kg 甘遂组大鼠尿液 1H-NMＲ 谱积分数
据进行 PCA、PLS-DA和 OPLS-DA分析结果
A: OPLS-DA分析的得分图( Ｒ2 = 92． 6%，Q2 = 73． 7% ) ; B: OPLS-DA 分
析的载荷图。○ 为空白组;▲ 7． 875 g /kg醋制甘遂组;■ 15． 75 g /kg醋
制甘遂组组;● 7． 875 g /kg甘遂组;◆ 15． 75 g /kg甘遂组
3 讨论
根据我们的前期研究［13］，发现甘遂能够引起肝脏和肾脏的
损伤，并且会干扰机体内源性代谢途径。在本实验中，发现无论
是给予甘遂或是醋制甘遂均能引起大鼠尿液中的柠檬酸、α-酮
戊二酸和琥珀酸这些三羧酸循环的重要中间产物含量显著降
101中药药理与临床 2013;29(4)
低，暗示机体三羧酸循环受到了抑制，同时影响机体内的能量
代谢。再一次验证了甘遂对机体内源性代谢途径的影响，同时
提示醋制甘遂对机体的三羧酸循环也存在一定干扰作用。从
对肝脏和肾脏组织的病理切片分析可以看到甘遂甘遂和醋制
甘遂能够引起肝细胞萎缩和肝血窦扩张的病理现象，这种现象
是机体对于能量不足而产生的一种适应性反应。与代谢组学
分析方法得到的给予甘遂组大鼠生物样品中暗示的机体的能
量代谢受损的三羧酸循环中间产物出现不同程度降低的这一
结论具有一致性。
在给予甘遂组大鼠的尿液中，能够保持细胞的渗透压和防
止细胞受到损害的有机渗透物如 TMAO、甜菜碱的含量都出现
了明显的增加，与甘遂引起的肝细胞水样变性的病理表现一
致。另外，具有抗氧化作用、渗透调节作用，膜稳定作用，Ca2 +
离子通道调节作用和防止细胞凋亡作用的牛磺酸［14 ～ 16］，在给
予甘遂组大鼠尿液中显著升高。而尿液中的高含量牛磺酸长
期以来被认为是肝毒性引起的肝细胞坏死和脂肪变性的特征
性标志物［17，18］，这与肝脏组织切片观察到的给予甘遂组大鼠肝
脏组织出现的肝细胞核固缩、坏死的现象一致。再次验证了
TMAO、甜菜碱和牛磺酸可以作为甘遂毒性的生物标志物［13］;在
本实验中，低剂量的醋制甘遂组大鼠尿液的内源性代谢物中并
未出现这些甘遂毒性生物标志物的含量变化，且其引起肝脏病
理学改变较轻微，说明醋制甘遂可能是通过下调甘遂引起的机
体内有机渗透物水平这一途径来发挥其对肝脏的减毒作用。
给予甘遂组大鼠的尿液中肌酸 /肌酐含量的显著下降，说
明肾小球的过滤功能到一定的影响，提示甘遂导致肾功能的损
伤［19］。此外甘遂组大鼠尿液中的高浓度 TMAO 通常与肾髓质
的渗透压有关，被认为是药物引发的肾毒性的信号［20］。本实验
中，观察到给予甘遂组大鼠尿液中 TMAO 含量的显著升高可以
提示甘遂引起的肾毒性，结合肾脏病理学检查再次证实了甘遂
对肾脏的毒性作用。相比之下，醋制甘遂组大鼠并未引起尿液
中提示肾脏功能的肌酸 /肌酐，TMAO 等代谢物含量的显著变
化，且结合血浆生化分析结果和病理切片分析，醋制甘遂能够
在一定程度上缓解甘遂对肾脏的毒性作用，发挥减毒的功效。
综上，无论是从代谢组学分析内源性代谢物变化的角度还
是在传统毒理学方法的验证，醋制甘遂都能够对甘遂的毒性作
用起到一定程度的缓解作用。本研究在明确甘遂毒性的基础
上，全面、系统的分析了醋制甘遂的减毒作用，初步阐述醋制甘
遂的减毒机制，为传统中药炮制减毒作用评价提供新的方法和
思路。
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201 中药药理与临床 2013;29(4)
Study of the detoxification of Vinegar-processed Kansui based on NMＲ metabonomics
Tang Bingwen1，Ding Jiajia1，Yang Yongxia2，Song Fenyun1
(1 Department of Pharmacy，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006;
2 Department of Basic Course，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006)
Objective:the mechanistic details regarding the effects of Kansui on these primary target organs were further explored in this study．
Furthermore，the mechanism of reducing Kansui toxicity by different dosage vinegar-processing also investigated． Method:the urinary meta-
bonomic analyses of Kansui and vinegar-processing Kansui was used by NMＲ and OPLS-DA to study the mechanism of reducing Kansui toxic-
ity． Clinical biochemical and histopathological assessments were also performed． Ｒesults:decreased citrate，succinate，α-oxoglutarate and
creatine /creatinine，increased taurine，betaine /TMAO was observed in Kansui treated rats． However，the variations were only declined of
citrate and succinate in 7． 875 g /kg vinegar-processing Kansui treatment group． The 15． 75 g /kg vinegar-processing Kansui induced the lower
level of citrate，succinate and α-oxoglutarate，with higher level of taurine，betaine /TMAO． Conclusion:Detoxification of Kansui by vinegar
processing of Kansui was dose-dependent． It could be owing to the intervention of the biomarker of Kansui and down regulation of the tradi-
tional indicator of liver and kidney lesion．
Key words Kansiu(甘遂);vinegar processing of Kansui(醋制甘遂);metabonomics;NMＲ
甘肃岷归对去卵巢更年期模型大鼠雌性激素的影响
*
邓 毅1，张 明2，任鹏飞2，张艳萍3
(1甘肃省中药药理与毒理学重点实验室;2甘肃中医学院，兰州 730000;
3甘肃中医学院附属医院，兰州 730020)
摘 要 目的:观察甘肃道地药材岷归对去卵巢更年期模型大鼠雌性激素、子宫指数和肾上腺指数的影响。方法:采用雌性
大鼠卵巢摘除术法造模，以 Elisa法检测大鼠血清雌性激素雌二醇( E2 ) 、促卵泡激素( FSH) 、促黄体生成素( LH) 、泌乳素( PＲL) 及重
量法计算子宫指数、肾上腺指数。结果:岷归高剂量( 1． 35g /kg) 、岷归中剂量( 0． 90g /kg) 、岷归低剂量( 0． 45g /kg) 组均能改善卵巢
摘除后引起的大鼠血清 E2 含量下降水平，且作用强度与剂量呈正向相关趋势;岷归高、中剂量组能降低血清 FSH的浓度，岷归高中
低剂量均有提高血清 LH浓度的趋势，均能降低血清 PＲL的浓度，均能提高子宫、肾上腺指数。结论:甘肃岷归( 0． 90 ～ 1． 35g /kg /d)
对去卵巢更年期模型大鼠的 E2、FSH、PＲL、子宫和肾上腺指数具有较好的调节作用，提示岷归可改善因卵巢摘除后引起的大鼠下丘
脑-垂体-卵巢轴功能的异常，并减缓子宫、肾上腺功能的衰退。
关键词 当归;更年期大鼠;雌性激素
当归 Aaugellica sinensis(Oliv)Diels． 主产于甘肃省东南部
的岷县(秦州)［1］，自古以来被公认为当归之首，素有岷归 之
称，广泛用于多种原因引起的月经不调、经闭、痛经，故有妇科
调经要药之称［2］。本实验通过观察甘肃岷归对去卵巢更年期
模型大鼠雌性激素的影响，为岷归的临床用药提供实验依据。
1 材料与方法
1． 1 试验药物 当归 Aaugellica sinensis(Oliv)Diels． 于 2012
年 12 月采集于甘肃岷县，由甘肃中医学院中药鉴定学教研室杨
扶德教授鉴定为正品。当归水煎液制备:称取岷归高剂量
100g、中剂量 66． 6g、低剂量 33． 3g，分别加水 1500ml，浸泡
30min，煎煮 90min，过滤，药液保存，药渣加 1000ml 水再煎
60min，过滤，合并两次滤液，水浴浓缩至 1000ml，高、中、低组含
生药量分别为 100mg /ml、66mg /ml、33mg /ml，3 ～ 4℃冰箱保存备
用［3］。逍遥丸，批号:20111001，兰州佛慈制药股份有限公司，水
溶液制备:取逍遥丸 8 丸(相当于原药材 3g)，加生理盐水配制
成 50ml溶液，含原药材量为 60mg /ml。
1． 2 动物 SPF 级 Wistar 雌性大鼠 48 只，3 月龄，体重 180 ～
220g，由甘肃中医学院实验动物中心提供，动物许可证号
SCXK:2011-0001。
1． 3 试剂 雌二醇(批号 CK-E30594Ｒ)、促卵泡激素(批号
CK-E30608Ｒ)、促黄体生成素(批号 CK-E30597Ｒ)、泌乳素(批
号 CK-E30623Ｒ)均购于上海源叶生物科技有限公司。
1． 4 仪器 酶标仪(MODEL680，美国伯乐公司)、多道生理记
录仪(POＲEＲLAB 8 /30 ml870，PowerLab)。
1． 5 方法 将大鼠随机分成 6 组，每组 8 只，假手术组、更年期
大鼠模型组、岷归干预组(高、中、低剂量组)、阳性对照组(逍遥
丸组)。正常饲养一周后，模型组、岷归高、中、低剂量组和逍遥
丸组 5 组大鼠分别造模。造模方法参照文献［4］并加改进，具体
301中药药理与临床 2013;29(4)
* 本课题为甘肃省高等学校基本科研业务费项目，甘肃道地中药当归甘草品质综合考察与评价 编号为 2009-4