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芒柄花素联合MK2206对不同亚型乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响



全 文 :实验研究/论著
芒柄花素联合 MK2206对不同亚型乳腺癌细胞
增殖和凋亡的影响
盛佳钰 陈红风
上海中医药大学附属龙华医院乳腺科,上海200032
【摘要】 目的 体外观察芒柄花素联合 Akt抑制剂 MK2206对不同分子亚型人乳腺癌 MCF-7、BT-474、SK-BR-3和
MDA-MB-231细胞株增殖和凋亡的影响。方法 MTT法检测芒柄花素单独或联合 MK2206对4种不同分子亚型乳腺癌
细胞增殖的抑制作用。流式细胞术分析单独用药及联合用药对乳腺癌细胞生长凋亡的影响。实时荧光定量PCR法检测
实验组中凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达。蛋白质印迹法检测磷酸化 Akt(phosphorate-Akt,p-Akt)和总Akt(total-Akt,
t-Akt)蛋白表达。结果 芒柄花素和 MK2206均能抑制4种乳腺癌细胞的生长,呈剂量依赖性。选择80μmol/L芒柄花素
和20nmol/L MK2206单独和联合处理4种细胞。联合用药后的抑制率高于单用药组,其中BT-474及 MDA-MB-231细胞
的联合用药组产生了协同作用,Q>1.15。两种药物均可诱导4种细胞凋亡,两药联用可使 BT-474、SK-BR-3和
MDA-MB-231细胞凋亡率显著增加,P<0.01。实时荧光定量PCR与蛋白质印迹法检测结果发现,单独用药能上调Bax及
下调Bcl-2基因表达水平,并下调p-Akt蛋白表达水平,其中BT-474、SK-BR-3和 MDA-MB-231细胞的联合用药组效果更
显著,P<0.01。结论 MK2206联合芒柄花素可抑制4种不同亚型乳腺癌细胞的增殖,诱导凋亡,联合用药效果更显著,
4种细胞效果有差异,其机制可能与抑制Akt磷酸化从而阻断PI3K/Akt信号转导途径有关。
【关键词】 芒柄花素;MK2206;乳腺肿瘤;增殖;凋亡;磷酸化Akt
中华肿瘤防治杂志,2015,22(13):998-1003
Effects of Formononetin combined with Akt inhibitor MK2206on proliferation
and apoptosis on different subtypes of breast cancer cel lines
SHENG Jia-yu,CHEN Hong-feng
Department of Breast Surgery,Longhua Hospital,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,
Shanghai 200032,P.R.China
[ABSTRACT] OBJECTIVE To investigate the efects of Formononetin combined with Akt inhibitor(MK2206)on the prolifera-
tion and apoptosis of diferent subtypes of human breast cancer cel lines MCF-7,BT-474,SK-BR-3and MDA-MB-231.METHODS 
MTT assay was used to evaluate the inhibition rate of cel growth after treatment of Formononetin and MK2206alone or combination
at various concentrations.Cel apoptosis rate,cel Bcl-2/bax mRNA expression,and phosphorate-Akt(p-Akt)/total Akt(T-Akt)
protein of breast cancer cels were detected by flow cytometry,RT-PCR and Western Blot,respectively.RESULTS The growth of
four diferent subtypes of human breast cancer cels was inhibited in dose-dependent manners after treated with Formononetin,
MK2206alone and combination.Four cel lines were treated with formononetin at the concentration of 80μmol/L and MK2206at
20nmol/L alone and in combination.Inhibition rate of combination group was higher than that of single drug group.Combination
treatment on BT-47and MDA-MB-231showed synergistic efect,Q>1.15.Both of the two drugs induced four cel lines apoptosis.
Combination treatment increased apoptosis rate of BT-474,SK-BR-3and MDA-MB-231.RT-PCR and Western blot results showed
single drug treatment raised the expression of Bax mRNA,reduced Bcl-2mRNA and p-Akt protein expressions.Combined treatment
was observed stronger efect on BT-474,SK-BR-3and MDA-MB-231cel lines(P<0.01).CONCLUSIONS Formononetin and
MK2206can inhibit proliferation and induce apoptosis on four diferent subtypes of human breast cancer cel lines.These efects may
be related to the down-regulation of p-AKT expression and the block of PI3K-Akt signaling pathway.
[KEYWORDS] formononetin;MK2206;breast neoplasms;cel proliferation;apoptosis;phosphor-Akt
Chin J Cancer Prev Treat,2015,22(13):998-1003
【基金项目】  国家自然科学基金(81373647)
【第一作者简介】 盛佳钰,女,江苏海门人,博士,主治医师,主要从事乳腺肿瘤基础与临床的研究工作。
Tel:86-21-64385700 E-mail:shengjiayu@gmail.com
【通讯作者简介】 陈红风,女,浙江余姚人,主任医师,教授,博士生导师,主要从事乳腺肿瘤基础与临床的研究工作。
Tel:86-21-64385700 E-mail:chhfluk@126.com
·899· 盛佳钰,等 芒柄花素联合 MK2206对不同亚型乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响
DOI:10.16073/j.cnki.cjcpt.2015.13.002
【中图分类号】 R737.9   【文献标识码】 A   【文章编号】 1673-5269(2015)13-0998-06
  研究发现,70%的乳腺癌患者中存在磷脂酰肌醇
3-激酶(phosphatidylinositol-3kinase,PI3K)/蛋白激酶B
(protein kinase B,PKB)信号转导通路位点的突变,其中
Akt位点被认为是治疗乳腺癌的重要分子靶点[1]。乳
腺癌是一种在分子水平上高度异质性的肿瘤,雌激素受
体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone re-
ceptor,PR)和人类表皮生长因子受体2(human epider-
mal growth factor receptor 2,HER-2)是目前判断乳腺癌
患者预后并指导治疗重要的分子标志。根据其表达情
况,可将乳腺癌分为不同的亚型,本研究人乳腺癌细胞
MCF-7、BT-474、SK-BR-3和 MDA-MB-231,分别属于
Luminal A型、Luminal B型、HER-2过表达型和Basal-
like型。本研究以上述肿瘤细胞作为研究对象,探讨了
MK2206与芒柄花素联合作用对不同分子亚型乳腺癌
细胞增殖和凋亡的影响,并分析两者是否具有协同作用
及相关分子机制。
1 材料与方法
1.1 细胞与药品
人乳腺癌细胞株 MCF-7、BT-474、SK-BR-3及
MDA-MB-231 均 购 自 中 国 科 学 院 上 海 细 胞 库。
MK2206购自美国 Seleck Chemicals公司 (批号:
S107806),相对分子质量480.39,化学分子式为 C25
H21N5O·2HCl,纯度为99%,用二甲基亚砜(DMSO)
溶解并配置成10μmol/L储存液,置于-20℃冰箱中
保存。化学成分标准品芒柄花素(Formononetin)购自
中国药品生物制品检定所(批号:111703-200603),相
对分子质量268.27,化学分子式为C16H12O4,纯度为
98%,用DMSO溶解并配置成0.1mol/L储存液,置
于-20℃冰箱中保存。
1.2 主要试剂与仪器
DMEM高糖、L-15及RPMI1640液体培养液、胎牛
血清、胰酶、磷酸盐缓冲液(phospate bufered saline,
PBS)均为Gibco公司产品,四甲基氮唑蓝(methylthia-
zolyl tetrazolium,MTT)及DMSO均购自上海生工生物
有限公司,AnnexinⅤ/碘化丙啶(propidium iodide,PI)
试剂盒购自美国BD Pharmingen公司,Trizol提取试剂
盒、反转录试剂盒和实时荧光定量PCR试剂盒购自日
本TaKaRa公司,实时荧光定量PCR所用引物均由宝
生物工程(大连)有限公司合成,抗磷酸化Akt(phospho-
rate-Akt,p-Akt)、总 Akt(total-Akt,t-Akt)、内参GAP-
DH(均为抗兔单克隆抗体)及其相应的二抗均购自美国
Cel Signaling公司。HERAcel型CO2 培养箱购自美国
Thermo公司,5427R型低温高速离心机购自德国Ep-
pendorf公司,Synergy H1型酶标仪购自美国Biotek公
司,FACSAria型流式细胞仪购自美国BD公司,Rotor-
Gene 6000型Real-time PCR仪购自美国Corbett公司,
PowerPac型基础电泳仪购自美国Bio-rad公司,G:BOX
型化学发光/荧光凝胶成像系统购自Syngene公司。
1.3 细胞培养
MCF-7细胞用含10%胎牛血清及0.01mg/mL
牛胰岛素的DMEM 高糖培养基培养,BT-474及SK-
BR-3细胞用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基培
养,MDA-MB-231细胞用含10%胎牛血清的L15培
养基培养,所有培养基中均加入100U/L青霉素和
10mg/mL链霉素。置于37℃、5% CO2 的恒温培养
箱中培养,次日观察细胞贴壁情况并换液。贴壁生长
良好的乳腺癌细胞经0.25%胰蛋白酶消化,选用对数
生长期细胞进行实验。
1.4 细胞活力检测
取对数生长期的各亚型乳腺癌细胞,调整细胞密度
为5×104 mL-1,接种于96孔培养板中,200μL/孔。置
37℃、5%CO2 的恒温培养箱中培养。待细胞贴壁生
长后,更换相应的无血清培养液使细胞饥饿培养24h
后,再换为各组含药物的完全培养液继续培养。
MK2206组分别按5、10、20、40和80nmol/L浓度梯
度给 药;芒 柄 花 素 组 分 别 按 10、20、40、80 和
160μmol/L浓度梯度给药;联合用药组选取 MK2206
及芒柄花素抑制率 低 于 IC50 的 浓 度 进 行 组 合,
MK2206+ 芒 柄 花 素 浓 度 分 别 为 10 nmol/L+
40μmol/L、20nmol/L+40μmol/L和20nmol/L+
80μmol/L。每组均设3个复孔,并设置调零孔(只含
相应培养液,无细胞)和对照孔(只含细胞、培养液)。
待单一药物以及联合药物组作用24h后,每孔加入
MTT(5mg/mL)15μL/孔,继续培养4h,小心吸弃培
养液和 MTT 溶液,加入 DMSO 150μL/孔,振荡
10min使充分溶解显色。用全波长酶标仪测定吸光度
值(A490),按下式计算细胞生长抑制率。
生长抑制率(%)=(1-
药物组A490
对照组A490
)×100%
实验重复3次,按金正均法[2]的概率和法计算 Q
值,并判断两药的协同作用。
Q(%)= Ea+bEa+Eb-Ea×Eb
×100%
其中Ea+b为联合处理组的抑制率,Ea、Eb 分别为
a药和b药单独处理的抑制率。若 Q 值在0.85~
1.15为两药合用单纯相加;若 Q>1.15为有协同作
用;若Q<0.85表示两药合用有拮抗作用。
·999·中华肿瘤防治杂志2015年7月第22卷第13期  CHIN J CANCER PREV TREAT,July 2015,Vol.22 No.13
1.5 细胞凋亡检测
选取Q>1.15即 MK2206 20nmol/L,芒柄花素
80μmol/L单用或联合24h作为药物实验组。收集
各组药物处理后细胞,1 500r/min离心5min(r=
10cm),弃上清,PBS洗涤2遍。再次1 500r/min离
心5min后收集细胞,缓慢加入预冷的70%乙醇溶
液,1 500r/min离心5min(r=10cm)后,PBS洗涤
2遍,收集细胞,加入10μL AnnexinⅤ-FITC避光染
色30min,然后上流式细胞仪检测细胞凋亡率。
1.6 凋亡相关基因表达检测
采用 Trizol法提取各实验组总 RNA(MK2206
20nmol/L,芒柄花素 80μmol/L,MK2206+芒柄花
素),分光光度法测定其纯度及浓度。用反转录试剂盒
将各组细胞总RNA反转录,生成cDNA,进一步用Bcl-2
及Bax引物及内参GAPDH引物扩增(表1)。PCR结果
由Rotor-Gene 6软件分析,确定各反应样本的Ct值,采
用相对定量的2-ΔΔCt法计算目的基因的相对表达量,分
析各样本之间Bcl-2及Bax基因的表达差异。
表1 实时荧光定量PCR所用引物及相关参数
基因 引物序列
产物大小
(bp)
Bcl-2
上游 5′-AACATCGCCCTGTGGATGAC-3′
下游 5′-AGAGTCTTCAGAGACAGCCAGGAG-3′
146
Bax
上游 5′-AGATGTGGTCTATAATGCGTTTTCC-3′
下游 5′-CAGAAGGCACTAATCAAGTCAAGGT-3′
118
GAPDH
上游 5′-GCACCGTCAAGGCTGAGAAC-3′
下游 5′-TGGTGAAGACGCCAGTGGA-3′
138
1.7 Akt磷酸化相关蛋白表达检测
提取各实验组蛋白(MK2206 20nmol/L,芒柄花素
80μmol/L,MK2206+芒柄花素)并定量样本后,将等量
的蛋白样品(30μg)加入聚丙烯酰胺凝胶,常规电泳、转
膜。用含5%脱脂牛奶的TBST封闭硝酸纤维素膜,室
温60min,分别加入1∶8 000稀释的T-Akt、p-Akt抗
体及1∶5 000稀释的 GAPDH(内参照)抗体。置于
4℃摇床过夜,用含0.05% Tween20的PBS(PBST)洗
3次,5min/次,加入1∶8 000稀释的二抗室温培育1h,
PBST洗涤3次,加入化学底物发光液结合显影、定影和
扫描。用Photoshop Image J软件分析各条带灰度值。
以目的条带灰度值/GAPDH条带灰度值的比值表示目
的条带的相对表达量。
相对灰度值=
目的蛋白灰度值
GAPDH灰度值
1.8 统计学方法
所有实验均平行重复3次,数据以x-±s表示。应
用SPSS 16.0软件,同一药物不同浓度组采用参数检验
和非参数检验同时进行分析,结果结论一致,故采用参
数法中的单因素方差分析进行检验;多组间的两两比较
采用Bonferroni方法检验;流式凋亡、PCR及蛋白质印
迹法检测结果采用析因设计。检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 单独及联合用药对不同亚型乳腺癌细胞的作用
图1示,MK2206和芒柄花素对4种乳腺癌细胞
体外有明显的抑制作用,并且抑制率呈剂量依赖关系。
表2~表4示,不同浓度的芒柄花素或 MK2206单用
对不同细胞增殖抑制效果不同,其中80μmol/L芒柄
花素和20nmol/L MK2206单独使用可显著抑制4种
细胞增殖,MCF-7细胞 MK2206组P<0.05,余各组
P值均<0.01。该组浓度下两药联合抑制作用显著增
加,MCF-7细胞P<0.05,余各组P值均<0.01。采
用金正均法计算显示,BT-474和 MDA-MB-231细胞
的 MK2206(20nmol/L)+芒柄花素(80μmol/L)组
Q>1.15,表明80μmol/L的芒柄花素及20nmol/L
的 MK2206联合应用对BT-474及 MDA-MB-231细
胞增殖抑制率具有显著的协同作用。
注:A.MK2206;B.芒柄花素
图1  MTT法检测不同浓度MK2206及芒柄花素对
不同亚型乳腺癌细胞的增殖抑制率的影响
·0001· 盛佳钰,等 芒柄花素联合 MK2206对不同亚型乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响
表2 40μmol/L芒柄花素联合10nmol/L MK2206对不同亚型乳腺癌细胞的增殖抑制作用
组别
MCF-7
抑制率(%) P值
BT-474
抑制率(%) P值
SK-BR-3
抑制率(%) P值
MDA-MB-231
抑制率(%) P值
芒柄花素组(40μmol/L) 26.47±0.69 <0.01  6.13±3.74 <0.01  22.18±2.03 >0.05  17.52±2.45 <0.05
MK2206组(10nmol/L) 36.29±1.72 >0.05  39.43±1.53 >0.05  29.25±1.44 >0.05  23.75±2.95 <0.05
联合用药组 39.42±2.06  41.33±1.41  33.95±1.86  32.48±3.67
表3 40μmol/L芒柄花素联合20nmol/L MK2206对不同亚型乳腺癌细胞的增殖抑制作用
组别
MCF-7
抑制率(%) P值
BT-474
抑制率(%) P值
SK-BR-3
抑制率(%) P值
MDA-MB-231
抑制率(%) P值
芒柄花素组(40μmol/L) 26.47±0.69 <0.01  6.13±3.74 <0.01  22.18±2.03 <0.01  17.52±2.45 <0.01
MK2206组(20nmol/L) 49.63±2.27 <0.01  48.75±2.35 >0.05  43.82±1.53 <0.01  32.63±1.92 <0.01
联合用药组 52.99±1.33  53.15±2.43  56.27±2.26  47.69±1.25
表4 80μmol/L芒柄花素联合20nmol/L MK2206对不同亚型乳腺癌细胞的增殖抑制作用
组别
MCF-7
抑制率(%) P值
BT-474
抑制率(%) P值
SK-BR-3
抑制率(%) P值
MDA-MB-231
抑制率(%) P值
芒柄花素组(80μmol/L) 33.30±2.41 <0.01  14.82±2.02 <0.01  34.72±1.19 <0.01  23.29±1.78 <0.01
MK2206组(20nmol/L) 49.63±2.27 <0.05  48.75±2.35 <0.01  43.82±1.53 <0.01  32.63±1.92 <0.01
联合用药组 58.12±2.17  63.91±2.87  65.51±2.67  58.89±1.33
2.2 MK2206对不同亚型乳腺癌细胞凋亡的作用
图2示,各组细胞作用24h后,MCF-7细胞的芒
柄花素组凋亡率为(4.46±0.52)%,BT-474为(4.1±
0.60)%,SK-BR-3为(4.55±0.44)%,MDA-MB-231
为(3.37±0.70)%;MK2206 组分别为 (8.33±
0.66)%、(7.69±0.60)%、(5.81±0.73)%和(5.81±
0.60)%;联合用药组分别为 (12.48±0.60)%、
(13.32±0.70)%、(13.97±0.70)% 和(19.30±
0.52)%。细胞凋亡率均较对照组增加,两药单用主效
应可显著促进4种细胞凋亡,P<0.01;芒柄花素和
MK2206交互作用对BT474、SK-BR-3及 MDA-MB-231
细胞凋亡率影响差异有统计学意义,P<0.01。表明
两种药物合用具有协同促进上述3种细胞凋亡的
作用。
2.3 Bax和Bcl-2基因表达
图3示,与对照组相比,4种细胞用药组的Bax
mRNA表达水平均增高,Bcl-2mRNA 表达水平降
低。两药单用主效应可提高4种细胞Bax mRNA表
达水平,P<0.01;并降低 Bcl-2mRNA 表达水平,
MCF-7细胞芒柄花素组P<0.05,余各组P 值均<
0.01。两药交互作用对BT474和 MDA-MB-231细胞
的Bax mRNA 表达水平差异有统计学意义,P<
0.01;BT474、SK-BR-3和 MDA-MB-231细胞的Bcl-2
mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.01),具有
显著协同作用。
图2 FCM法检测芒柄花素联合MK2206对不同亚型
乳腺癌细胞凋亡的影响
2.4 p-Akt和t-Akt蛋白表达
蛋白质印迹法检测结果显示,与对照组相比,给药
组t-Akt蛋白表达变化不明显,而p-Akt蛋白表达均有
所下降。MCF-7、BT-474、SK-BR-3和 MDA-MB-231细
胞芒柄花素组p-Akt蛋白表达量分别为0.91±0.02、
·1001·中华肿瘤防治杂志2015年7月第22卷第13期  CHIN J CANCER PREV TREAT,July 2015,Vol.22 No.13
0.69±0.03、0.87±0.01和1.00±0.02;MK2206组
分别为0.68±0.03、0.55±0.04、0.69±0.03和
0.77±0.02;联合用药组分别为0.62±0.02、0.28±
0.05、0.47±0.04和0.45±0.03。两药单用主效应可
显著降低4种细胞p-Akt蛋白表达,P<0.01;芒柄花
素和 MK2206交互作用对SK-BR-3和 MDA-MB-231
细胞p-Akt蛋白表达影响极其显著,P<0.01。图4
示,两种药物合用具有协同降低上述两种细胞p-Akt
蛋白表达的作用。
注:A.Bax基因表达;B.Bcl-2基因表达
图3 时实荧光定量PCR法检测芒柄花素联合MK2206
对不同亚型乳腺癌细胞凋亡相关基因表达的影响
图4 蛋白质印迹法检测芒柄花素联合MK2206对不同亚型
乳腺癌细胞的p-Akt和t-Akt蛋白表达的影响
3 讨论
PI3K/Akt信号通路是继Ras通路以来发现的另
一个与肿瘤发生密切相关的信号通路[3]。而 Akt是
已知的唯一与恶性转化相关的PI3K下游靶点,它通
过与下游效应分子结合,影响其下游的多种效应分子
如Bcl-2和Bcl-X1等而发挥抗凋亡作用,最终导致在
肿瘤细胞凋亡抑制,肿瘤发生[4-5]。MK2206是一种新
型的高效、高选择性 Akt抑制剂,能通过破坏PDK1
依赖的Akt的磷酸化位点,对多种肿瘤细胞表现出抗
肿瘤活性,并已通过实体瘤患者的一期临床实验[6-9]。
针对单靶点分子靶向药物治疗实体瘤的客观有效率偏
低,易引起药物单个接触点的突变,导致耐药[10]。近
年来将分子靶向药物与其他抗肿瘤药物进行联合应
用,成为了肿瘤研究的新方向[11]。芒柄花素是黄芪、
鸡血藤等中药中含有的异黄酮类化合物,本课题组前
期研究证实芒柄花素具有一定的抗肿瘤作用,对不同
亚型乳腺癌细胞均具有抑制作用,而该作用的产生与
其下调乳腺癌细胞Akt磷酸化的水平密切相关[12-13]。
因此,本次实验将芒柄花素与 MK2206联合应用于乳
·2001· 盛佳钰,等 芒柄花素联合 MK2206对不同亚型乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响
腺癌细胞,探讨联合用药对不同亚型乳腺癌细胞增殖、
凋亡的影响。
   本研究结果显示,MK2206联合芒柄花素与两药
单独处理相比较,对乳腺癌细胞的增殖抑制作用更为
明显,这种抑制作用表现为良好的剂量依赖性,且金正
均[2]法 显 示,BT-474 及 MDA-MB-231 细 胞 的
MK2206(20nmol/L)+芒柄花素(80μmol/L)联合用
药组Q>1.15,表现出协同增效作用。流式细胞术检
测结 果 显 示,MK2206(20nmol/L)及 芒 柄 花 素
(80μmol/L)能提高不同分子亚型乳腺癌细胞的凋亡
率,BT-474、SK-BR-3和 MDA-MB-231细胞的联合给
药组是具有显著的协同作用。提示芒柄花素联合
MK2206作用于乳腺癌细胞,能够更好地发挥两者的
协同作用,起到抑制增殖、诱导凋亡的作用。
Bcl-2是Akt下游效应分子中公认的抑制凋亡的
原癌基因,在肿瘤的发生发展中发挥抗凋亡作用[14]。
为了探讨芒柄花素联合 MK2206治疗乳腺癌的分子
机制,本研究采用实时荧光定量PCR检测凋亡相关基
因的变化。结果显示,两药单独处理组均能引起Bcl-2
基因的上调及Bax基因的下调,而联合处理组此调节
作用更显著。蛋白质印迹法检测 MK2206及芒柄花
素作用后乳腺癌细胞的t-Akt和p-Akt蛋白表达变
化,结果显示,4种细胞t-Akt蛋白表达水平无明显改
变,说明非磷酸化 Akt不具有生物学活性。但是,给
药后4种乳腺癌细胞的p-Akt蛋白表达均有所下降,
联合用药组蛋白表达较单独用药组低。
上述研究结果提示,4种不同亚型乳腺癌细胞均
存在PI3K/AKT信号通路的异常活化,芒柄花素可以
通过抑制 Akt的磷酸化来促进 MK2206对该通路的
抑制作用。不同亚型乳腺癌细胞对芒柄花素及
MK2206的作用不尽相同,其中三阴性 MDA-MB-231
细胞和 HER-2过表达型的SK-BR-3细胞疗效更显
著,符合PI3K/Akt通路与乳腺癌分子亚型中基底细
胞样、HER-2亚型密切相关的文献表述[15]。此外,芒
柄花素及 MK2206对三阴性乳腺癌细胞BT-474也表
现出较好的抑制效果,说明芒柄花素抗肿瘤的内在机
制很复杂,而Bcl-2及Bax可能只是其中的一个方面。
本研究证明芒柄花素和 MK2206能通过降低 Akt磷
酸化水平阻断PI3K/Akt通路,引起Bcl-2及Bax基
因变化,从而起到抗肿瘤的作用,但是否存在其他凋亡
途径,仍需要进一步探讨。
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收稿日期:2015-03-27 修回日期:2015-05-17
(编辑:杨靖)
·3001·中华肿瘤防治杂志2015年7月第22卷第13期  CHIN J CANCER PREV TREAT,July 2015,Vol.22 No.13