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食用葛解酒作用及急性毒性初步研究



全 文 :* 基金项目:云南省应用基础研究面上项目(2010CD142)
作者简介:张晓南(1981 -),女,云南昆明人,工程师,硕士,主要研究方向:中药新药的研究与开发。
△通信作者:高丽,E - mail:gaoli0527@ aliyun. com
食用葛解酒作用及急性毒性初步研究*
张晓南1,陈 芬2,符德欢1,周培军1,高 丽1△
(1. 云南省药物研究所,云南 昆明 650111;2. 滇虹药业集团玉溪生物制药有限公司,云南 玉溪 653100)
摘要:目的 观察食用葛水提物的解酒作用,并对其进行毒性做出初步评价。方法 解酒作用:先灌胃给予小鼠药物,
40 min后,灌胃给酒,给酒后立即记录翻正反射消失的小鼠只数、潜伏期和持续时间,结果进行统计学处理,比较各组差异。急性
毒性:预实验一次性给药测定半数致死量基础上,灌胃给予最大浓度和最大体积食用葛水提物,测定最大给药量,观察小鼠死亡、
一般情况和重要脏器病理组织学变化并记录体重。结果 与空白对照组相比食用葛低、高剂量组出现翻正反射消失动物数减
少,低、中剂量组的醉酒潜伏时间延长,食用葛低、高剂量能明显缩短小鼠的醉后睡眠时间。食用葛水提物的最大给药量为
313. 88 g /kg,为成人用量的 193 倍。结论 结果表明,食用葛水提物具有一定的解酒醒酒作用,且无明显急性毒性反应,安全性较
高,临床用药安全范围大。
关键词:
中图分类号:R285 文献标志码:A 文章编号:1007 - 2349(2014)08 - 0069 - 03
酒精中毒俗称醉酒,是由于一次大量饮酒引起中枢神经
系统由兴奋到抑制状态。急性酒精中毒患者发病比较急,重
度中毒可使呼吸、心跳抑制而死亡,据《滇南本草》记载,葛根
具有“解中酒热毒”之功效,而此种葛根即为豆科植物食用葛
(Pueraria edulis Pampan)的根[1]。
药理研究表明:食用葛的同属药用植物葛根(Pueraria lo-
bata(Willd.)Ohwi)所含总黄酮 500mg /kg 能明显缩短乙醇引
起的小鼠睡眠时间,葛根总黄酮 500mg /kg,250mg /kg,125mg /
kg都能不同程度地延长乙醇睡眠潜伏时间,缩短睡眠时间,可
见葛根总黄酮具有“解酒毒”作用[2 ~ 3]。此外,大鼠饮用乙醇
后可使 ADH活性明显受到抑制,肝脏 GST 活性明显减低,葛
根水煎液加蔗糖制成 10%的口服液有提高肝脏 ADH 以及活
性的活性作用[4]。葛根黄酮具有提高乙醇性肝损伤的大鼠肝
组织中 GSH 含量的作用,还具有降低乙醇性损伤的大鼠的肝
组织甘油三脂(TG)含量的作用,表明葛根黄酮对乙醇性肝损
伤具有保护作用[5]。葛根解酒、醒酒、保肝等药理作用的研究
均有文献报道,但食用葛的相关作用的研究还是空白,本实验
正是针对这种情况,初步评价食用葛水提取物对急性酒精中
毒的预防和改善效果,并与葛根的解酒醒酒效果加以对比,用
第一手数据证实了食用葛的解酒功效。同时,为了提供更可
靠的理论依据,以开发食用葛这一宝贵的药食两用植物资源,
笔者还研究了食用葛水提物的急性毒性,对其安全性做出了
初步评价。
1 食用葛水提物的解酒作用
1. 1 实验材料 广能葛根口服液(云卫食证字[2007]第
530000 - 000012 号),昆明市添宝科技开发有限公司;蒸馏水;
实验用酒:红星二锅头酒,56 度,北京红星股份有限公司;SPF
级小鼠,体重 18 ~ 22 g,合格证号 SCXK -(军)- 2007 - 004。
1. 1. 1 食用葛水煎液 食用葛药材采自大理,经中国科学院
昆明植物研究所李恒研究员鉴定为食用葛(Pueraria edulis
Pampan)。取食用葛药材 800 g,以 8 倍量水煎煮 3 次,每次
90 min,滤液浓缩,干燥得干膏 101. 95 g,至干燥器中保存。使
用时加蒸馏水配制成所需浓度。食用葛低剂量组(2. 25 g 生
药 /kg),食用葛中剂量组(11. 25 g生药 /kg),食用葛高剂量组
(20. 25 g生药 /kg)。
1. 1. 2 葛根水煎液 葛根药材采自大理,经中国科学院昆明
植物研究所分类鉴定室陶德定副研究员鉴定为葛 Pueraria lo-
bata(Willd.)Ohwi。取葛根药材 800 g,以 8 倍量水煎煮 3 次,
每次 1. 5h,滤液浓缩,干燥得干膏 220 g,至干燥器中保存。使
用时加蒸馏水配制成所需浓度。葛根低剂量组(2. 25 g 生
药 /kg),葛根中剂量组(11. 25 g 生药 /kg),葛根高剂量组
(20. 25 g生药 /kg)。
1. 2 方法与结果
1. 2. 1 方法雄性小鼠 80 只,称重,编号,随机分为空白对照
组,阳性对照组,食用葛低、中、高剂量组,葛根低、中、高剂量
组,每组 10 只,实验前禁食 12h。实验组给予食用葛低、中、高
3 个剂量,葛根低、中、高三个剂量溶液灌胃给药,给药体积
20mL /kg体重;空白对照组给予等容积的蒸馏水灌胃;阳性组
给予葛根口服液灌胃,给药体积 9mL /kg体重。
给药 40min 钟后,所有小鼠灌胃给酒 (56% 酒精,
14 mL /kg)。给酒后立即记录翻正反射消失的小鼠只数、翻
正反射消失小鼠的潜伏期(乙醇灌胃后至翻正反射消失的时
间)和持续时间(从翻正发射消失至恢复的时间)。结果进行
统计学处理,比较各组差异。
1. 2. 2 结果 小鼠灌胃给酒(56%酒精,14mL /kg)后,空白
对照组 10 只小鼠陆续醉酒昏迷,肌肉松驰,角膜反射消失,翻
正反射消失。实验组小鼠在同等剂量酒精灌胃后,有部分小
鼠活动正常,反应灵敏,未出现翻正反射消失等醉酒表现;一
些小鼠在给酒后出现肌肉松驰,角膜反射消失,翻正反射消失
等醉酒状症,小鼠昏睡后一段时间相继苏醒,恢复翻正反射。
962014 年第 35 卷第 8 期 云 南 中 医 中 药 杂 志
DOI:10.16254/j.cnki.53-1120/r.2014.08.043
阳性对照组有 8 只小鼠活动正常,未出现翻正反射消失等醉
酒表现;另 2 只小鼠在酒精灌胃后出现肌肉松驰,角膜反射消
失,翻正反射消失等醉酒状症。记录醉酒小鼠翻正反射消失
时间及持续时间,统计结果见表 1。
表 1 食用葛与葛水煎液解酒实验结果
组别
动物数
(n)
醉酒数
(n)
醉酒潜伏期
(min)
睡眠时间
(min)
空白对照组 10 10 16. 3 ±12. 065 132. 2 ±31. 428
阳性对照组 10 2*** 38. 5 ±4. 949 112. 5 ±28. 991
食用葛低剂量组 10 5* 35. 4 ±13. 795* 89 ±37. 410*
食用葛中剂量组 10 7 40. 43 ±11. 998** 105. 28 ±20. 475
食用葛高剂量组 10 5* 27 ±11. 402 81. 4 ±16. 532**
葛根低剂量组 10 4* 43. 5 ±11. 958** 86. 5 ±28. 03*
葛根中剂量组 10 6 34. 8 ±23. 438* 91. 67 ±36. 451*
葛根高剂量组 10 5* 29. 4 ±18. 461 103. 4 ±27. 098
注:与空白组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01,***P < 0. 005
与空白对照组相比,阳性对照组小鼠出现翻正反射消失
动物数明显减少(P < 0. 005),食用葛低、高剂量组,葛根低、高
剂量组出现翻正反射消失动物数减少(P < 0. 05)。
在小鼠的醉酒潜伏期上,食用葛低剂量组和葛根中剂量
组与空白对照组相比,差异有显著性意义(P < 0. 05);食用葛
中剂量组和葛根低剂量组与空白对照组相比差异具有极显著
性(P < 0. 01)。表明食用葛低、中剂量和葛根低、中剂量时能
延长小鼠的醉酒潜伏时间。
在小鼠的醉酒后睡眠时间上,食用葛低剂量组、葛根低、
中剂量组与空白组相比,差异有显著性意义(P < 0. 05);食用
葛高剂量组与空白对照组相比差异具有极显著性(P < 0. 01)。
表明食用葛低、高剂量和葛根低、中剂量能明显缩短小鼠的醉
后睡眠时间。
“食用葛水煎液”的 3 个剂量组与“葛根水煎液”的 3 个剂
量组的解酒醒酒作用在统计学上无显著性差异。
2 食用葛水提物的急性毒性
2. 1 实验材料
2. 1. 1 药物 食用葛选用大理产药材,800 g食用葛药材以 8
倍量水煎煮 3 次,合并滤液浓缩至干膏,干膏为 109. 95 g,于
干燥器中备用。
2. 1. 2 动物 SPF级小鼠,雌雄各半,体重 20 g左右,合格证
号 SCXK -(军)- 2007 - 004。
2. 1. 3 主要器材 锥形瓶(50mL)、量筒(50mL)、注射器
(1mL)及针头,1. 0%苦味酸溶液。
2. 2 实验方法及结果
2. 2. 1 预实验 SPF级体重 18 ~ 22 g 小鼠 20 只,雌雄各半,
按体重和性别随机分为两组,每组 10 只。实验前禁食不禁水
12h。最大的给药浓度以生药量计为 313. 88 g /kg,给药体积为
0. 4mL /10 g。给药后即刻观察,持续 5h,主要观察动物饮食、
外观、行为、分泌物、排泄物、死亡情况及中毒反应症状及其起
始时间、严重程度、持续时间、是否可逆及恢复时间,体重变化
等,以后每天观察 2 次,连续 7 d,记录各组小鼠的死亡情况。
2. 2. 2 预实验结果 给药后,给药组所有小鼠均活动减少,
4h后恢复正常;1 只雄性小鼠竖毛,3 只雄性小鼠出现轻微腹
泻;有 1 只雌性小鼠竖毛,3 只雌性小鼠出现轻微腹泻;腹泻小
鼠大便为水样,颜色呈药液颜色,第 2 天观察恢复正常。因在
大剂量下,无动物死亡,难于测出 LD50,故观察最大给药量的
毒性反应。
2. 2. 3 最大给药量的测定方法 取体重 18 ~ 22 g 小鼠 40
只,根据雌雄、体重随机分成 2 组,每组 20 只,雌雄各半,为试
验组和空白对照组,分笼饲养。试验组给药剂量以生药量计
为 313. 88 g /kg,给药体积为 0. 4mL /10 g,空白对照组给予等
体积的生理盐水,给药当天持续观察 2h,之后每天观察两次,
主要观察行为活动、肌肉运动、植物神经系统反应、呼吸等;并
详细记录动物反应情况及称量动物体重,连续观察 14 d。第
14 天处死、解剖小鼠,肉眼观察其主要脏器的外观。
2. 2. 4 实验结果 见表 2。
表 1 -2 最大给药量结果
性别 试验组 空白对照组
动物数(只)
♂ 10 10
♀ 10 10
给药前体重(g) ♂ 20. 98 ± 0. 66 20. 77 ± 0. 64
♀ 19. 81 ± 1. 39 19. 69 ± 1. 07
给药后第 7 天 ♂ 28. 01 ± 1. 39 28. 47 ± 1. 02
体重(g) ♀ 24. 54 ± 1. 58 24. 73 ± 1. 11
给药后第 14 天 ♂ 28. 49 ± 0. 65 29. 38 ± 0. 93
体重(g) ♀ 24. 83 ± 1. 39 24. 89 ± 1. 04
异常表现
有个别动物出现眯眼,活动减
少,5h后恢复正常;给药组有
5 只雄性小鼠出现轻微腹泻,
给药组有 4 只雌性小鼠出现
轻微腹泻,第二天恢复正常。

死亡数 无 无
解剖有无异常 无 无
耐受倍数 193
食用葛水提物的最大给药量为 313. 88 g /kg,成人(50kg)
的用量为 10 ~ 15 g,取中间值 12. 5 g计算,食用葛的最大给药
量为成人用量的 193 倍。试验结果表明,该药材的临床用药
安全范围大。
3 小结与讨论
我国酒文化盛行,饮酒成风,再加上人们对饮酒造成的早
期损害常常忽视,所以乙醇性肝病的发病率极高。乙醇中毒
是 80%肝硬化的原因,对病毒性肝炎、肝癌等的发生、发展及
预后都有重要影响;我国现有酒民 3 亿多,乙醇性肝病的发病
率在 20%左右[5]。因此,研究和开发有效的解酒保肝药物的
是当今社会的迫切需要。
天然解酒药物的作用机制是通过抑制乙醇胃肠吸收和加
速代谢以降低机体血醇浓度,解除醉酒状态。从酒精在人体
代谢的机制来看,目前的解酒制品主要从以下几个方面发挥
作用∶ ①降低酒精在胃肠道的吸收速度和增加酒精在胃内的
代谢,②增强肝内 ADH 的活性,加快乙醇在肝脏内的氧化代
谢,③提高肝组织中超氧化物岐化酶(SOD)的活性和谷胱甘
肽过氧化物酶(GSH2PX)的活性,消除血浆与肝组织中的自由
基和脂质过氧化物对机体的损伤[6]。本项目的研究结果表明
07 云 南 中 医 中 药 杂 志 2014 年第 35 卷第 8 期
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“食用葛水煎液”在一定程度对小鼠急性酒精中毒有预防作
用,但其作用机理尚不明确,同时,主要有效成分也还没有针
对性的研究,这些都需要我们在未来的工作中进一步加强。
葛根类是中国传统医药学中最具代表性的天然解酒药物,食
用葛作为其中的一员,醒酒解酒疗效确切,且急性毒性低,作
为保健品或解酒药品开发必定前景广阔。
参考文献:
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中国医院药学杂志,2007,27(9):1280 ~ 1282.
[3]张恩户,赵勤,梁作峰,等 . 葛根总黄酮解酒作用的实验观察[J].
陕西中医学院学报,1995,18(3):38.
[4]张廼哲,符云峰,赵会军,等 . 葛根解酒毒的实验研究[J]. 中国医
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[6]李玉洁 . 我国天然解酒制品的研究进展[J]. 海峡药学,2008,20
(4):4 ~ 7.
(收稿日期:2014 - 06 - 30)
△通信作者:崔云竹,E - mail:cuiyunzhu@ 163. com
·文献综述·
从肝肾论治女性痤疮的现代研究进展
许经娟1,崔云竹2△
(1. 山东中医药大学基础医学院 2008级中医七年制,山东 济南 250014;2. 山东中医药大学附属医院,山东 济南 250011)
关键词:女性痤疮;肝肾;中医;综述
中图分类号:R758. 3 + 3 文献标志码:A 文章编号:1007 - 2349(2014)08 - 0071 - 02
痤疮是一种颜面、胸背等处毛囊与皮脂腺的慢性炎症性
皮肤病。其特点是皮损丘疹如刺,可挤出白色碎米样粉汁。
相当于中医的粉刺[1]。早在《诸病源候论》中就有本病症状
的描述:“面疱者,谓面上有风热气生疱,头如米大,赤如谷大,
白色者是。”西医认为痤疮的病因为青春期雄性激素分泌过
多,皮脂腺功能旺盛、毛囊口角质栓阻塞而使皮脂排出不畅、
继发感染等,治疗上主要以减少皮脂腺分泌,消除炎症性病
变,防止囊肿生成。常用激素、抗生素、粉刺溶解剂等药物进
行治疗,但其治疗效果较差且复发率高。中医治疗痤疮多从
肺、脾、胃辨证论治,但对部分患者疗效并不满意[2],尤其是对
女性患者[3]。徐灵胎《医学源流论》:“主治妇人…必先明冲
任之脉…此皆血之所从生,而胎之所由系,明于冲任之故,则
本源洞悉,而后所生之病,则千条万绪,以可知其所从起[4]。”
调和冲任法治疗女性痤疮是本着中医整体观念,以人体的阴
阳转化为特征,胞宫气血藏泻为特点,谨守病机,谨察阴阳所
在而调之,以平为期。
1 从肾论治
肾为先天之本,生命之源,肾藏精,肾中精气是机体生命
活动之本。《素问·上古天真论》曰:“女子七岁,肾气盛,齿
更发长;二七天癸至,任脉通,太冲脉盛,月事以时下,故有
子…七七任脉虚,太冲脉衰少,天癸竭,地道不通,故形坏而无
子也[5]。”形象地论述了女子的生长,发育,生殖,衰老的生理
变化过程,其变化主要取决于肾气的盛衰,肾为精血之脏,系
生命之根。女子月经来潮前后,由于气血盈亏变化巨大,加之
冲任精血阴中涵阳,冲任二脉的蓄溢易引起阴阳平衡的波动,
经脉失养,气血不和则影响冲任失调发为痤疮。[6 ~ 8]
1. 1 肾阴虚 肾阴对机体各个脏腑组织起滋养濡润作用,肾
阴不足,冲任失调,相火妄动,女子二七时肾之阴阳失调,阴虚
火旺,虚火上浮,火郁发为痤疮。此型皮疹多发于颊颏部,甚
至延及颈项,炎证性丘疹脓疱,丘疹点不大,连成片状分界不
明显,色暗红;伴有月经不调,经前症状加重,心烦易怒,夜寐
不宁,五心烦热,颧红,舌红少苔,或苔薄黄,脉细数或弦数。
治以滋阴降火。朱丹溪《格致余论》曰:“相火为病甚多情欲
常能煽动相火,相火亢盛则阴阳失调,痤疮遂生。赵广琼等[9]
用二至丸为基本方治疗女性痤疮,30 例患者经过 2 个月的治
疗,总有效率为 80%,其疗效显著强于对照组。金记平[10]用
知柏地黄汤加减治疗女性青春期后痤疮,46 例患者中痊愈 22
例,有效 17 例,无效 7 例,总有效率为 84. 7%,明显高于对照
组,且复发率低。
1. 2 肾阳虚 患者素体阳虚,自身不慎调摄,贪食饮冷,或既
往痤疮日久,医家过用寒凉,均可导致病情反复发作,迁延不
愈,致肺卫阳气耗损更甚,阳郁加重,卫阳不固,子盗母气,使
脾之阳气亦衰,久病及肾,又致肾之阳气虚弱。此证为结节囊
肿型痤疮,此型除局部皮损有热象外,整体表现以虚寒兼阳郁
为主,畏寒怕冷,四末不温,少汗,受凉后腹胀,大便溏泻,甚或
神疲乏力,少气懒言,嗜睡,舌淡胖边有齿痕,或舌质紫暗,脉
沉细。治宜温阳益气。李慧林[11]根据多年临床经验体会,运
用肾气丸加减治疗痤疮,方中附子、肉桂温阳,黄芪、人参、白
术、茯苓益气托里,当归、熟地黄、山茱萸滋阴养血,牡丹皮、川
芎、穿山甲活血化瘀散结,皂角刺、瓜蒌、泽泻化痰散结,取得
良好效果。王俊志等[12]运用二仙汤加减治疗青春期后冲任
不调型痤疮,治疗组治愈率为 45%,显效率为 30%,总有效率
为 92. 5%,而对照组总有效率仅为 70. 0%。
2 从肝论治
女性痤疮与心、肺、胃、肝、脾均有关,但以肝的影响最
大[13]。叶天士《临证指南医案》提出“女子以肝为先天”,肝主
172014 年第 35 卷第 8 期 云 南 中 医 中 药 杂 志