全 文 ：３１卷０１期
Ｖｏｌ．３１，Ｎｏ．０１
草　业　科　学
ＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ
８９－９４
０１／２０１４
ＤＯＩ：１０．１１８２９＼ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－０６２９．２０１３－０１５７
香蓼带芽茎段的组织培养和快速繁殖
刘晓东，刘 娇，何 淼
（东北林业大学园林学院，黑龙江 哈尔滨１５００４０）
摘要：以香蓼（Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｖｉｓｃｏｓｕｍ）带芽茎段为外植体，ＭＳ为基本培养基，研究了不同浓度的激素对腋芽诱导、
腋芽增殖和生根的影响，从而初步建立了香蓼组织培养快速繁殖体系。结果表明，诱导腋芽的最适宜培养基为
ＭＳ＋２．０ｍｇ·Ｌ－１６－ＢＡ＋０．１ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ，诱导率为８８．８９％；腋芽增殖的最适培养基为 ＭＳ＋２．０ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ＋０．３ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ＋０．５ｍｇ·Ｌ－１　ＫＴ，增殖倍数为５．１７；生根的最适培养基为１／２ＭＳ＋０．７ｍｇ·Ｌ－１
ＮＡＡ，生根率高达９８．８９％，移栽后植株生长良好，成活率较高，达９３．３３％。该结果为香蓼快繁和基因工程研究
提供了新的数据支持。
关键词：香蓼；组织培养；带芽茎段；快速繁殖
中图分类号：Ｑ９４３．１　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１００１－０６２９（２０１４）０１－００８９－０６＊
Ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｒａｐｉｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｖｉｓｃｏｓｕｍ
ｓｔｅｍｓ　ｓｔｅｍｓ　ｗｉｔｈ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ
ＬＩＵ　Ｘｉａｏ－ｄｏｎｇ，ＬＩＵ　Ｊｉａｏ，ＨＥ　Ｍｉａｏ
（Ｌａｎｄｓｃａｐｅ　Ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ　Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ　１５００４０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｔｈｅ　ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｒａｐｉｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｓｙｓｔｅｍ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｖｉｓｃｏｓｕｍ，ｔｈｅ
ｐｒｅｓｅｎｔ　ｓｔｕｄｙ　ｅｘｐｌｏｒｅｄ　ｔｈｅ　ｉｍｐａｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ｏｎ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ａｘｉｌ－
ｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｓｔｅｍｓ　ｗｉｔｈ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｏｆ　Ｐ．ｍ　ｖｉｓｃｏｓｕｍａｓ　ｅｘｐｌａｎｔ　ａｎｄ
ＭＳ　ａｓ　ｔｈｅ　ｂａｓｉｃ　ｍｅｄｉｕｍ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ＭＳ
ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　２．０ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ　ｐｕｒｉｎｅ　ａｎｄ　０．１ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ　ｗｈｉｃｈ　ｈａｄ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ
（８８．８９％）．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ＭＳ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　２．０ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ，
０．３ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　０．５ｍｇ·Ｌ－１　ＫＴ　ｗｈｉｃｈ　ｈａｄ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ｏｆ　ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ（５．１７）．
Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｒｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　１／２ＭＳ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　０．７ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ　ｗｈｉｃｈ　ｈａｄ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈ－
ｅｓｔ　ｒｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ（９８．８９％）．Ｐｌａｎｔｓ　ｇｒｅｗ　ｖｅｒｙ　ｗｅｌ　ａｆｔｅｒ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ　ｏｆ
９３．３３％．Ｔｈｉｓ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｓｕｐｐｌｉｅｄ　ｆａｖｏｒａｂｌｅ　ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　Ｐ．ｖｉｓｃｏｓｕｍｒａｐｉｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｅｎｇｉ－
ｎｅｅｒｉｎｇ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｖｉｓｃｏｓｕｍ；ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ；ｓｔｅｍｓ　ｗｉｔｈ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ；ｒａｐｉｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒ：ＨＥ　Ｍｉａｏ　Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｅｍｉａｏ＿ｘｕ＠１２６．ｃｏｍ
　　香蓼（Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｖｉｓｃｏｓｕｍ）为蓼科蓼属一年生
草本植物，在我国东北、台湾有野生分布，前苏联、朝
鲜、日本、印度也有分布［１］；集药用、观赏和经济价值
于一身，可治疗胃气痛、消化不良、风湿疼痛；全株具
有奇异的香味，陈淏子在《花镜》中记载“香蓼叶有香
气，形态极美”［２－３］。香蓼喜湿润，常成片生长，７－８
＊ 收稿日期：２０１３－０３－２９　　接受日期：２０１３－０６－１３
第一作者：刘晓东（１９６３－），男，辽宁沈阳人，教授，硕士，主要研究方向为园林植物引种栽培、养护管理和草坪建植。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｕ１９６３１６＠１６３．ｃｏｍ
通信作者：何淼（１９７５－），女（满族），辽宁本溪人，副教授，博士，研究方向为园林植物栽培和抗性育种。Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｅｍｉａｏ＿ｘｕ＠１２６．ｃｏｍ
ＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ（Ｖｏｌ．３１，Ｎｏ．０１） ０１／２０１４
月开花，小花持久、粉紫色、清新素雅，可作为观赏植
物应用。香蓼的开发利用价值很高，但其野生资源有
限，满足不了人们的需求。香蓼在野外利用种子繁
殖，但在人工培养条件下其种子萌发率不到１５％，所
以目前通过种子得到大量植株的方法行不通。因此，
研究香蓼组织培养的快繁体系，可短时间内提供大量
种苗，是保证香蓼工厂化生产的重要措施。
１　材料与方法
１．１　试验材料
将处于生长期的香蓼于２０１２年７月从黑龙江
省尚志市帽儿山（４５°２０′－４５°２０′Ｎ，１２７°３０′－１２７°
３４′Ｅ）引种成功后栽植于东北林业大学园林学院苗
圃内。
１．２　试验方法
１．２．１　无菌材料的获得及最佳消毒时间的筛选　
将采集的香蓼茎条，去除叶子后，剪成带节小段，用
适量的洗衣粉水浸泡１０ｍｉｎ，在自来水下冲洗１～２
ｈ后，置于超净工作台上，用７５％的乙醇溶液消毒
３０ｓ，再用无菌水冲洗后放入０．１％的升汞（ＨｇＣｌ２）
溶液中分别浸泡４、６、８、１０ｍｉｎ，期间不断摇晃，取
出后用无菌水冲洗５～６次，无菌滤纸吸干茎段表面
的水分，将其剪成长１～２ｃｍ的带芽茎段，接种到
ＭＳ培养基上［４－５］。每个处理３０个外植体，重复３
次。１０ｄ后分别统计不同消毒时间的污染率、死亡率
和存活率。本试验培养基ｐＨ值均调至５．８，经１２１
℃高压灭菌２０ｍｉｎ。培养室培养温度为（２５±２）℃，
光照强度为１　５００～２　０００ｌｘ，光照时间为１６ｈ·ｄ－１。
１．２．２　腋芽诱导培养基的筛选　将无菌带芽茎段
接种到 ＭＳ基本培养基中，附加不同浓度６－ＢＡ
（１．０、２．０和３．０ｍｇ·Ｌ－１）、ＮＡＡ（０．１、０．２和０．３
ｍｇ·Ｌ－１）进行腋芽诱导。采用Ｌ９（３４）的正交试验
设计，进行植物生长调节剂组合试验。２０ｄ后统计
香蓼带芽茎段的诱导率、出芽指数和生长状况。
１．２．３　腋芽增殖培养基的筛选　将初代培养得到
的腋芽接种到 ＭＳ基本培养基中，利用Ｌ９（３４）正交
试验设计研究不同浓度的６－ＢＡ（０、１．０和２．０
ｍｇ·Ｌ－１）、ＮＡＡ（０．１、０．２和０．３ｍｇ·Ｌ－１）和ＫＴ
（０、０．５和１．０ｍｇ·Ｌ－１）组合对腋芽增殖的影响。
２０ｄ换一次培养基，４０ｄ后统计腋芽的增殖倍数。
１．２．４　组培苗生根培养基的筛选　将高３ｃｍ左右
的植株，转接至１／２ＭＳ基本培养基上，加入不同浓
度的ＮＡＡ（０．５、０．７、１．０ｍｇ·Ｌ－１）、ＩＢＡ（０．５、０．７、
１．０ｍｇ·Ｌ－１）进行生根培养。１５ｄ后分别统计生
根率、生根数及苗生长状况。
１．２．５　组培苗的驯化和移栽　生根培养至１５ｄ
时，选取根系发达、生长健壮的无菌苗，去掉封口膜
放置２ｄ，取出后洗净根部培养基，于室温下放入水
中培养３ｄ，然后将小苗移栽到基质（草炭土∶蛭石
为１∶１）中，浸透水后放置在适宜的环境下培养，３０
ｄ后统计移栽成活率。
１．３　数据分析
出芽指数＝产生芽的外植体上芽数的平均数；
增殖倍数＝腋芽诱导出的丛生芽中长度大于
０．５ｃｍ的芽数／分化的总芽数。
数据采用Ｅｘｃｅｌ、ＳＰＳＳ　１９．０软件进行方差分析
及多重比较分析（Ｄｕｎｃａｎ’ｓ法）。
２　结果
２．１　不同消毒时间对香蓼外植体消毒效果的影响
随着消毒时间的延长，香蓼外植体死亡率逐渐
增加（表１），可见，０．１％ＨｇＣｌ２损伤了植物表面细
表１　不同消毒时间对外植体消毒效果的影响
Ｔａｂｌｅ　１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ｏｎ　ｅｘｐｌａｎｔｓ’ｓｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ
消毒时间
Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ／ｍｉｎ
接种外植体数
Ｎｏ．ｏｆ　ｅｘｐｌａｎｔｓ
污染率
Ｐｏｌｕｔｉｏｎ　ｒａｔｅ／％
死亡率
Ｄｅａｔｈ　ｒａｔｅ／％
存活率
Ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ／％
４　 ３０　 ３８．８９±２．９４ａ ３．３３±１．９３ｃ ５７．７８±４．８４ａ
６　 ３０　 １６．６７±６．９４ｂ １２．２２±２．９４ｂｃ　 ７１．１１±４．８４ａ
８　 ３０　 ６．６７±１．９３ｂｃ　 ２０．００±３．８５ｂ ７３．３３±５．０９ａ
１０　 ３０　 １．１１±１．１１ｃ ３２．２２±４．４５ａ ６６．６７±５．０９ａ
注：同列不同小写字母表示不同消毒时间间差异显著（Ｐ＜０．０５）。下表同。
Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｌｏｗｅｒ　ｃａｓｅ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｗｉｔｈｉｎ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｍｅａｎ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ａｍｏｎｇ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ａｔ　０．０５ｌｅｖｅｌ．Ｔｈｅ　ｓａｍｅ
ｂｅｌｏｗ．
０９
０１／２０１３ 草　业　科　学 （第３１卷０１期）
胞。各处理存活率差异不显著（Ｐ＞０．０５）。０．１％
ＨｇＣｌ２ 处理８ｍｉｎ，存活率最高，为７３．３３％。由此
得出，０．１％ＨｇＣｌ２ 处理８ｍｉｎ最适宜香蓼带芽茎段
的消毒。
２．２　不同浓度６－ＢＡ、ＮＡＡ组合对腋芽诱导的影响
将无菌的带芽茎段（图１Ａ）接种在腋芽诱导培
养基后发现，各处理均能诱导出腋芽。在培养７ｄ
后，茎段基部开始膨大出现绿色突起（图１Ｂ），腋芽
开始分化并逐渐长成幼芽（图１Ｃ）。方差分析与多
重比较结果表明，不同浓度６－ＢＡ和ＮＡＡ组合对香
蓼腋芽的诱导有明显影响。ＮＡＡ浓度为０．２、０．３
ｍｇ·Ｌ－１时，腋芽诱导率随６－ＢＡ浓度升高而增加，
最大值分别为８２．２２％、８０．００％；ＮＡＡ浓度为０．１
ｍｇ·Ｌ－１时，腋芽诱导率随６－ＢＡ浓度增加先升高
后下降，其最大值为８８．８９％（表２）。所以，最适宜
腋芽诱导的 ＮＡＡ浓度为０．１ｍｇ·Ｌ－１。６－ＢＡ浓
度为２．０ｍｇ·Ｌ－１时出芽指数均较高，其中处理Ａ５
出芽指数最高，为１．６５，但芽苗较细，而处理 Ａ８ 出
芽指数虽仅为１．３２，但其芽苗生长粗壮。因此，处
理Ａ８：ＭＳ＋２．０ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋０．１ｍｇ·Ｌ－１
ＮＡＡ是香蓼腋芽诱导的最适宜培养基。
２．３　不同浓度６－ＢＡ、ＮＡＡ和ＫＴ组合对腋芽增殖
的影响
将初代培养得到的０．５ｃｍ以上的腋芽接种至
增殖培养基后增殖速度较快，但是诱导的大多数丛
生芽处于矮化状态，仅１～２个小芽伸长（图１Ｄ）。
在更换培养基后，丛生芽的体积不断增大，小芽迅速
伸长。单独使用ＮＡＡ对腋芽增殖无效果；处理Ｂ６、
Ｂ８ 的增殖倍数（３．９７、３．３９）显著高于处理Ｂ２、Ｂ３
（１．８１、２．１４）（表３）。可知，６－ＢＡ较ＫＴ对香蓼腋芽
增殖更有效，更有利于芽的分化和生长。根据Ｒ值判
断，６－ＢＡ、ＮＡＡ、ＫＴ对腋芽增殖的作用为：６－ＢＡ＞
ＮＡＡ＞ＫＴ，经计算分析，得出处理 Ｂ９：ＭＳ＋２．０
ｍｇ·Ｌ－１６－ＢＡ＋０．３ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ＋０．５ｍｇ·Ｌ－１
ＫＴ是使腋芽增殖的最佳组合。且处理Ｂ９ 诱导出的
芽苗叶色浓绿，叶形正常，茎较粗壮。所以 ＭＳ＋２．０
ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋０．３ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ＋０．５ｍｇ·Ｌ－１
ＫＴ是香蓼腋芽增殖的最适宜培养基。
２．４　组培苗生根诱导及驯化、移栽
将经增殖培养长至３ｃｍ高的香蓼组培苗，接入
生根培养基进行试验。生根培养４ｄ后，基部分化
出根点，７ｄ后长出白色根，１５ｄ后统计结果。处理
Ｃ１～Ｃ６ 的生根率均在８０％以上（表４）；生根率、生
根数随ＮＡＡ浓度升高先增加后减小，随ＩＢＡ浓度
升高而减小。ＮＡＡ浓度为０．７ｍｇ·Ｌ－１时生根率、
生根数最高，分别为９８．８９％和３５条，显著高于其
它处理（Ｐ＜０．０５）。而且 ＮＡＡ为０．７ｍｇ·Ｌ－１诱
导出的根较长且须根多（图１Ｅ）。所以，１／２ ＭＳ＋
表２　不同浓度６－ＢＡ和ＮＡＡ组合对带芽茎段腋芽诱导的影响
Ｔａｂｌｅ　２　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　６－ＢＡ　ａｎｄ　ＮＡＡ　ｏｎ　ｓｔｅｍｓ　ｗｉｔｈ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｏｎ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
编号
Ｎｕｍｂｅｒ
植物生长调节剂
Ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ／ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ　 ＮＡＡ
接种外植体数
Ｎｏ．ｏｆ　ｅｘｐｌａｎｔｓ
诱导率
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ／％
出芽指数
Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ
ｂｕｄｓ　ｉｎｄｅｘ
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ
Ａ１ １．０　 ０．１　 ３０　 ７１．１１±２．２２ｄ １．２６±０．０７ｃ ＋ ＋
Ａ２ ２．０　 ０．２　 ３０　 ７５．５６±４．８４ｂｃｄ　 １．５３±０．０３ｂ ＋ ＋
Ａ３ ３．０　 ０．３　 ３０　 ８０．００±３．８５ａｂｃｄ　 １．４３±０．０２ｂ ＋ ＋ ＋
Ａ４ １．０　 ０．２　 ３０　 ７２．２２±２．９４ｃｄ　 １．１５±０．０１ｄ ＋ ＋
Ａ５ ２．０　 ０．３　 ３０　 ７３．３３±０．００ｂｃｄ　 １．６５±０．０４ａ ＋ ＋
Ａ６ ３．０　 ０．１　 ３０　 ８１．１１±１．１１ａｂｃ　 １．０１±０．０１ｅ ＋
Ａ７ １．０　 ０．３　 ３０　 ５８．８９±３．５４ｅ １．２６±０．０２ｃ ＋
Ａ８ ２．０　 ０．１　 ３０　 ８８．８９±２．９４ａ １．３２±０．０２ｃ ＋ ＋ ＋
Ａ９ ３．０　 ０．２　 ３０　 ８２．２２±１．１１ａｂ　 １．４５±０．０２ｂ ＋ ＋
注：“＋”表示腋芽长势一般；“＋ ＋”表示腋芽长势较好；“＋ ＋ ＋”表示腋芽长势很好。下表同。
Ｎｏｔｅ：“＋”ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ　ｔｈｅ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｎｏｒｍａｌ，“＋ ＋”ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ　ｔｈｅ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｂｅｔｔｅｒ，ａｎｄ“＋ ＋ ＋”ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ　ｔｈｅ　ａｘｉｌａ－
ｒｙ　ｂｕｄｓ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｂｅｓｔ．Ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｂｅｌｏｗ．
１９
ＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ（Ｖｏｌ．３１，Ｎｏ．０１） ０１／２０１４
表３　不同浓度６－ＢＡ、ＮＡＡ和ＫＴ组合对带芽茎段腋芽增殖的影响
Ｔａｂｌｅ　３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　６－ＢＡ，ＮＡＡ　ａｎｄ　ＫＴ　ｏｎ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｓｔｅｍｓ　ｗｉｔｈ　ｂｕｄｓ
编号
Ｎｕｍｂｅｒ
植物生长调节剂
Ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ／ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ　 ＮＡＡ　 ＫＴ
增殖倍数
Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ｍｕｌｔｉｐｌｅｓ
丛生芽生长状况
Ｃｌｕｓｔｅｒ　ｂｕｄｓ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｓｔａｔｕｓ
Ｂ１ ０　 ０．１　 ０　 ０．００±０．００ｈ
无丛生芽，有细弱根长出。Ｎｏ　ｃｌｕｓｔｅｒ　ｂｕｄｓ，ｇｒｏｗｉｎｇ
ｗｉｔｈ　ｔｈｉｎ　ｒｏｏｔ．
Ｂ２ ０　 ０．２　 ０．５　 １．８１±０．０３ｇ
分化极少芽点，芽苗翠绿，有根长出。Ｍｉｎｉｍｕｍ　ｂｕｄｓ
ｐｏｉｎｔｓ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，ｓｅｅｄｉｎｇ　ｇｒｅｅｎ　ｗｉｔｈ　ｒｏｏｔｓ．
Ｂ３ ０　 ０．３　 １．０　 ２．１４±０．０４ｆ
分化极少芽点，芽苗翠绿，有根长出。Ｍｉｎｉｍｕｍ　ｂｕｄｓ
ｐｏｉｎｔｓ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，ｓｅｅｄｉｎｇ　ｇｒｅｅｎ　ｗｉｔｈ　ｒｏｏｔｓ．
Ｂ４ １．０　 ０．１　 ０．５　 ２．７０±０．０３ｅ
分化几个芽点，小芽黄绿。Ｓｅｖｅｒａｌ　ｂｕｄｓ　ｐｏｉｎｔｓ　ｄｉｆｆｅｒ－
ｅｎｔｉａｔｉｏｎ，ｓｅｅｄｉｎｇ　ｇｒｅｅｎ　ａｎｄ　ｙｅｌｏｗ．
Ｂ５ １．０　 ０．２　 １．０　 ２．８４±０．２５ｅ
分化几个芽点，小芽黄绿。Ｓｅｖｅｒａｌ　ｂｕｄｓ　ｐｏｉｎｔｓ　ｄｉｆｆｅｒ－
ｅｎｔｉａｔｉｏｎ，ｓｅｅｄｉｎｇ　ｇｒｅｅｎ　ａｎｄ　ｙｅｌｏｗ．
Ｂ６ １．０　 ０．３　 ０　 ３．９７±０．０８ｄ
分化出一些小芽，小芽浅绿、细弱。Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｓｏｍｅ　ｏｆ　ｓｍａｌ　ｂｕｄｓ，ｓｅｅｄｉｎｇ　ｇｒｅｅｎ　ｂｕｔ　ｔｈｉｎ．
Ｂ７ ２．０　 ０．１　 １．０　 ４．５９±０．０５ｃ
分化出大量小芽，小芽翠绿、较粗壮。Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｐｌｅｎｔｙ　ｏｆ　ｓｍａｌ　ｂｕｄｓ，ｓｅｅｄｉｎｇ　ｇｒｅｅｎ　ａｎｄ　ｔｈｉｃｋ．
Ｂ８ ２．０　 ０．２　 ０　 ３．３９±０．１０ｂ
分化出大量小芽，小芽浅绿、细弱。Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｐｌｅｎｔｙ　ｏｆ　ｓｍａｌ　ｂｕｄｓ，ｓｅｅｄｉｎｇ　ｇｒｅｅｎ　ｂｕｔ　ｔｈｉｎ．
Ｂ９ ２．０　 ０．３　 ０．５　 ５．１７±０．１０ａ
分化出大量小芽，小芽浅绿、粗壮。Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｐｌｅｎｔｙ　ｏｆ　ｓｍａｌ　ｂｕｄｓ，ｓｅｅｄｉｎｇ　ｇｒｅｅｎ　ａｎｄ　ｔｈｉｃｋ．
ｋ１ ３．９５　 ７．２９　 ７．３６
ｋ２ ９．５０　 ８．０５　 ９．６５
ｋ３ １３．１７　 １１．２４　 ９．５７
极差Ｒ　 ９．２２　 ３．９５　 ２．２９
注：ｋ１～ｋ３为每因素每水平之和的平均值，极差Ｒ为最大与最小水平间距。
Ｎｏｔｅ：ｋ１～ｋ３ａｓ　ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｕｍ　ｏｆ　ｅａｃｈ　ｆａｃｔｏｒ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌ，Ｒａｓ　ｔｈｅ　ｍａｘｉｍｕｍ　ａｎｄ　ｍｉｎｉｍｕｍ　ｌｅｖｅｌ　ｓｐａｃｉｎｇ．
表４　组培苗生根诱导结果及移栽成活状况
Ｔａｂｌｅ　４　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｒｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｓｔａｔｅ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ
编号
Ｎｕｍｂｅｒ
植物生长调节剂
Ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ／ｍｇ·Ｌ－１
ＮＡＡ　 ＩＢＡ
生根率
Ｒｏｏｔｉｎｇ　ｒａｔｅ／％
生根数
Ｒｏｏｔ　ｎｕｍｂｅｒ
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ
Ｃ１ ０．５　 ０　 ８２．２２±１．１１ｃ １３．７±０．７ｄ ＋
Ｃ２ ０．７　 ０　 ９８．８９±１．１１ａ ３５．０±２．６ａ ＋ ＋ ＋
Ｃ３ １．０　 ０　 ８４．４４±１．１１ｃ １９．０±１．０ｃ ＋ ＋
Ｃ４ ０　 ０．５　 ９２．２２±２．２２ｂ １９．７±１．２ｃ ＋ ＋
Ｃ５ ０　 ０．７　 ８４．４４±２．９３ｃ １１．０±１．５ｄ ＋
Ｃ６ ０　 １．０　 ８０．００±１．９２ｃ ２７．７±１．２ｂ ＋ ＋
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０１／２０１３ 草　业　科　学 （第３１卷０１期）
图１　香蓼腋芽诱导、增殖、生根与移栽
Ｆｉｇ．１　Ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｒｏｏｔｉｎｇ　ａｎｄ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ　ｆｒｏｍＰｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｖｉｓｃｏｓｕｍ
注：Ａ图为带芽茎段无菌外植体，Ｂ图为茎段基部膨大处，Ｃ图为腋芽诱导，Ｄ图为腋芽增殖第２０天，Ｅ图为无菌苗的生根诱导，Ｆ图为移栽的
香蓼植株。
Ｎｏｔｅ：Ｔｈｅ　ｅｘｐｌａｎｔ　ｏｆ　ｓｔｅｍｓ　ｗｉｔｈ　ｂｕｄｓ（Ａ），ｓｗｅｌｉｎｇ　ａｔ　ｔｈｅ　ｂａｓｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｔｅｍｓ（Ｂ），ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ（Ｃ），ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｔ　２０ｔｈ
ｄａｙ（Ｄ），ｒｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｅｄ（Ｅ）ａｎｄ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ（Ｆ）．
０．７ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ 是香蓼最适宜的生根培养基。
香蓼无菌苗移栽成活率较高，在驯化、移栽后３０ｄ
（图１Ｆ），观察与统计得出其成活率达到９３．３３％，
且香蓼植株长势良好，叶色浓绿。
３　讨论与结论
迄今为止在组织培养方面，蓼属植物的外植体
多为种子、茎段、茎尖［６－１０］，较少有关于叶片、叶柄、
花梗、花器官等作为外植体的报道。由预试验得知
香蓼叶片、叶柄、花梗在接入含有激素６－ＢＡ 与
２，４－Ｄ不同浓度组合的 ＭＳ培养基中可产生愈伤组
织（图２Ａ－Ｃ），但是无芽体分化；产生的愈伤组织
转接入含有激素６－ＢＡ 与 ＮＡＡ 不同浓度组合的
ＭＳ培养基中，有幼根分化，但最终无芽体分化。王
吉凤等［１１］对芍药（Ｐａｅｏｎｉａ　ｌａｃｔｉｆｌｏｒａ）愈伤组织诱
导与分化的研究表明，２，４－Ｄ抑制芍药愈伤组织的
图２　叶片、叶柄和花梗分别诱导出的愈伤组织
Ｆｉｇ．２　Ｂｌａｄｅｓ，ｐｅｔｉｏｌｅｓ　ａｎｄ　ｐｅｄｉｃｅｌｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｌｕｓ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ
注：Ａ图为叶片诱导愈伤组织，Ｂ图为叶柄诱导愈伤组织，Ｃ图为花梗诱导愈伤组织。
Ｎｏｔｅ：Ｂｌａｄｅｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｌｕｓ（Ａ），ｐｅｔｉｏｌｅｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｌｕｓ（Ｂ），ｐｅｄｉｃｅｌｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｌｕｓ（Ｃ）．
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ＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ（Ｖｏｌ．３１，Ｎｏ．０１） ０１／２０１４
再分化；吕晋慧等［１２］研究表明不同组织受外植体所
处的生理状态、分化程度和外界条件，尤其是外源植
物生长调节剂和一些添加物的影响而表现出不同的
再生能力。因此，预试验所遇问题的原因，可能是
２，４－Ｄ对香蓼叶片愈伤组织分化芽体有抑制作用，也
可能是激素组合和浓度不适宜所致或其它待发现的
因素。香蓼愈伤组织再分化过程仍需进一步试验研
究。
　　本试验以香蓼的带芽茎段为外植体，初步建
立了组织培养再生体系。香蓼带芽茎段用０．１％
ＨｇＣｌ２ 溶液消毒最适宜时间为８ｍｉｎ。香蓼腋芽诱
导试验中，诱导腋芽的最适宜培养基为 ＭＳ＋２．０
ｍｇ·Ｌ－１６－ＢＡ＋０．１ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ ，诱导率最高，
为８８．８９％。ＮＡＡ浓度０．１ｍｇ·Ｌ－１时，腋芽诱
导率随６－ＢＡ浓度增加先升高后下降，可能是细胞
分裂素与生长素比值过高，抑制了香蓼腋芽的诱
导。这一问题还需进一步试验验证。香蓼腋芽增
殖试验中，腋芽增殖最适宜培养基为 ＭＳ＋２．０
ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ ＋０．３ ｍｇ· Ｌ－１　ＮＡＡ ＋０．５
ｍｇ·Ｌ－１　ＫＴ，增殖倍数最高，达５．１７。比较两种
细胞分裂素６－ＢＡ、ＫＴ对腋芽增殖的影响，结果发
现６－ＢＡ更有效，更有利于芽的分化和生长。这一
结果与薛建平等［１３］对安徽药菊（Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ
ｍｏｒｉｆｏｌｉｕｍ）花瓣组织培养的研究结果相同，而与
对芍药芽增殖［１４］的研究结果相反。本试验采用腋
芽增殖的方式建立组织培养快繁体系，对香蓼植
物进行扩繁。在东方蓼（Ｐ．ｏｒｉｅｎｔａｌｅ）组织培养研
究中，提出利用生根继代的方法进行扩繁，其苗增
殖速度较快，按每２５ｄ增殖４．２倍的速度，年增殖
率为４．２１４．６，且具有保持植物优良性状不变、简
便、经济等优点［１５］。由本试验可知香蓼生根较容
易，在１／２ＭＳ＋０．７ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ时，生根率高
达９８．８９％，生根数为３５条。实际生产中可尝试
采取此种方法。
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（责任编辑　王芳）
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