全 文 ：第３　６卷，第３期　 　　　　　　　　　　　光 谱 学 与 光 谱 分 析 Ｖｏｌ．３６，Ｎｏ．３，ｐｐ８９６－９０２
２　０　１　６年３月　　　　　　　　　　　 　Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ　ａｎｄ　Ｓｐｅｃｔｒａｌ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　 Ｍａｒｃｈ，２０１６ 　
Ｓｐｅｃｔｒａｌ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｈｕｍａｎ　Ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ
Ｇ－Ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ａｎｄ　Ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ，ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ　Ｌｉｇｎａｎ
Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ　Ｉｎｔｅｒａｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　Ｇ－Ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ＤＮＡ
ＬＩＵ　Ｔｉｎｇ－ｔｉｎｇ１，ＺＨＯＵ　Ｓｈｕａｎｇ１，ＪＩＡ　Ｑｉａｎ－ｌａｎ１，ＷＡＮＧ　Ｗｅｎ－ｓｈｕ１，２＊，
ＹＡＮ　Ｘｉａｏ－ｑｉａｎ１，ＺＨＡＮＧ　Ｗｅｎ－ｈａｏ３，ＷＡＮＧ　Ｓｈｕａｉ－ｑｉ　１，ＪＩＡＯ　Ｙｕ－ｇｕｏ１
１．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍｉｎｚｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００８１，Ｃｈｉｎａ　　　　　　　　　　　　
２．Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ａｎｄ　Ｈｅａｌｔｈ，Ｍｉｎｚｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００８１，Ｃｈｉｎａ
３．Ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ　Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｔｓｉｎｇｈｕａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００８４，Ｃｈｉｎａ
Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｈｕｍａｎ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｉｓ　ａ　ｆｏｕｒ－ｓｔｒａｎｄｅｄ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｆｏｌｄｅｄ　ｂｙ　ｇｕａｎｉｎｅｓ（Ｇ）ｖｉａ　Ｈｏｏｇｓｔｅｅｎ
ｈｙｄｒｏｇｅｎ　ｂｏｎｄｉｎｇ．Ｔｈｅ　ｌｉｇａｎｄｓ　ｗｈｉｃｈ　ｓｔａｂｉｌｉｚｅ　ｔｈｅ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ａｒｅ　ｏｆｔｅｎ　ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ａｎｄ　ｍａｙ　ｂｅ－
ｃｏｍｅ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｇｅｎｔｓ．Ｈｅｒｅ，ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ａ　ｌｉｇｎａｎ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ａｎｄ　ｈｕｍａｎ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　ｓｅ－
ｑｕｅｎｃｅ　ｄＧＧＧ（ＴＴＡＧＧＧ）３Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ＨＴＧ２１ｗｅｒｅ　ｅｘａｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＣＤ，ＦＲＥＴ，ａｎｄ　ＮＭＲ　ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃ
ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｉｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｏｃｋｉｎｇ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｏｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｔｏ　ｄＴＡＧＧＧ
（ＴＴＡＧＧＧ）３Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ＨＴＧ２３．Ｔｈｅ　ＣＤ　ｄａｔａ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｅｎｈａｎｃｅｄ　ＨＴＧ２１　Ｔｍ．Ｔｈｅ　Ｔｍｖａｌｕｅ
ｏｆ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｗａｓ　ｅｎｈａｎｃｅｄ　３．２℃ｂｙ　４．０μｍｏｌ·Ｌ
－１　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｉｎ　ＦＲＥＴ．Ｔｈｅ　ＮＭＲ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ＨＴＧ２１
ｓｈｏｗｅｄ　ｖｉｖｉｄ　ａｌｔｅｒａｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　ｒｅａｃｔｉｎｇ　ｗｉｔｈ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｉｎ　３ｈｏｕｒｓ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｏｃｋｉｎｇ　ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ
ｂｏｕｎｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｗｉｄｅ　ｇｒｏｏｖｅ　ｏｆ　ＨＴＧ２３ａｔ　Ｇ９，Ｇ１０，Ｇ１６ａｎｄ　Ｇ１７．Ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｌｉｇｎａｎ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ　ｔｈａｔ
ｃｏｕｌｄ　ｓｔａｂｉｌｉｚｅ　ＨＴＧ２１ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙ　ａｎｄ　ｐｒｏｖｉｄｅｄ　ａ　ｎｅｗ　ｃａｎｄｉｄａｔｅ　ｆｏｒ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ｄｒｕｇ　ｄｅｓｉｇｎ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ｏｎ　ｈｕｍａｎ
ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ　Ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ；Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ；Ｈｕｍａｎ　ｔｅｌｏｍｅｒｅ；Ｓｐｅｃｔｒａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ；Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ
中图分类号：Ｏ６５７．３　　文献标识码：Ａ　　　ＤＯＩ：１０．３９６４／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－０５９３（２０１６）０３－０８９６－０７
　Ｒｅｃｅｉｖｅｄ：２０１５－０５－０８；ａｃｃｅｐｔｅｄ：２０１５－１１－０２
　Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　ｉｔｅｍ：Ｔｈｅ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ（３１２００２６０），Ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ－ｃｌａｓｓ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ－ｒａｔｅ　Ｄｉｓｃｉｐｌｉｎｅ　Ｃｏｎ－
ｓｔｒｕｃｔｉｏｎ　Ｐｒｏｊｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｍｉｎｚｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ（ＹＬＤＸ０１０１３，２０１５ＭＤＴＤ０８Ｃ），ｔｏｇｅｔｈｅｒ　ｗｉｔｈ　１１１Ｐｒｏｊｅｃｔ（Ｂ０８０４４），Ｔｈｅ
Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ　Ｓｔｕｄｅｎｔｓ’ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｅｎｔｒｅｐｒｅｎｅｕｒｓｈｉｐ　ｔｒａｉｎｉｎｇ　ｐｒｏｇｒａｍ（ＧＣＣＸ　２０１４１１００１７，ＧＣＣＸ　２０１５１１００１２）
　Ｂｉｏｇｒａｐｈｙ：ＬＩＵ　Ｔｉｎｇ－ｔｉｎｇ，（１９８７—），Ｄｏｃｔｏｒａｌ　Ｃａｎｄｉｄａｔｅ　ｏｆ　Ｃｏｌｅｇｅ　Ｌｉｆｅ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍｉｎｚｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ
ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｕｔｉｎｇｔｉｎｇ１２０４＠１６３．ｃｏｍ　　＊Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒ　　ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｗｓ＠ｍｕｃ．ｅｄｕ．ｃｎ
Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ
　　Ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，ｓｐｅｃｔｒａｌ
ａｎａｌｙｓｉｓ　ｃｏｕｌｄ　ｇｉｖｅ　ｓｔｒａｉｇｈｔｆｏｒｗａｒｄ，ｖｉｖｉｄ　ａｎｄ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｉｎｆｏｒ－
ｍａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｒｅａｃｔｉｏｎｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｌｉｇａｎｄ　ａｎｄ　ｂｉｏｍａｃｒｏ－
ｍｏｌｅｃｕｌｅ　ｗｈｉｃｈ　ｍａｋｅｓ　ｔｈｅ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｆａｓｔ　ａｎｄ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｌｙ．Ｇｕａ－
ｎｉｎｅ－ｒｉｃｈ　ＤＮＡ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｉｎ　ｖｉｖｏ，ｓｕｃｈ　ａｓ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　ＤＮＡ　ｓｅ－
ｑｕｅｎｃｅ　Ｔｅｌ２１，Ｔｅｌ２６ａｎｄ　ｏｎｃｏｇｅｎｅ　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｒｅｇｉｏｎｓ（ｃ－ｍｙｃ，
ｂｃｌ－２，ｏｒ　ｃ－ｋｉｔ），ｃａｎ　ｆｏｒｍ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｖｉａ　Ｈｏｏｇｓｔｅｅｎ　ｈｙｄｒｏ－
ｇｅｎ　ｂｏｎｄｉｎｇ，ｗｈｉｃｈ　ｐｌａｙｓ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｒｏｌｅ　ｉｎ　ｍａｎｙ　ｓｉｇｎｉｆｉ－
ｃａｎｔ　ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓｅｓ［１］．Ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ　ｉｓ　ａ　ｃａｎｃｅｒ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｒｅｖｅｒｓｅ
ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ　ａｃｔｉｖａｔｅｄ　ｉｎ　８０％ ～９０％ ｏｆ　ｔｕｍｏｒｓ，ａｎｄ　ｅｘ－
ｐｒｅｓｓｅｄ　ｉｎ　ｖｅｒｙ　ｌｏｗ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｒ　ａｌｍｏｓｔ　ｕｎｄｅｔｅｃｔａｂｌｅ　ｉｎ　ｎｏｒｍａｌ
ｃｅｌｓ［２］．Ｉｔ　ｉｓ　ｒｅｐｏｒｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｗｈｅｎ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　ＤＮＡ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ
ｆｏｒｍｅｄ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ，ｉｔ　ｂｅｃｏｍｅｓ　ｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ
ｂｙ　ｔｈｅ　ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ，ｗｈｉｃｈ　ｉｓ　ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｆｏｒ
ｃｅｌｓ　ｔｏ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｅ［３］．Ｔｈｕｓ，ｌｉｇａｎｄｓ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｔｏ　ａｎｄ　ｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇ
ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｃｏｕｌｄ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ
ａｎｄ　ｉｎｄｕｃｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒｓ［４］．
Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅ　ｌｏｗ　ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｅｐｏｒｔｅｄ　ｌｉｇａｎｄｓ　ｏｖｅｒ
ｄｕｐｌｅｘ　ＤＮＡ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ＤＮＡ　ｆｏｌｄｅｄ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｌｅａｄ　ｔｏ　ｔｈｅｉｒ
ｖａｒｉｏｕｓ　ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ａｎｄ　ｉｎｅｖｉｔａｂｌｅ　ｓｉｄｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ，ｗｈｅｎ　ｔｈｅｙ
ｗｅｒｅ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ａｓ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ｌｅａｄｓ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇｌｙ，ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ
ｎｅｗ　ｌｉｇａｎｄｓ　ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈ　ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｎ　ｈｕｍａｎ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　Ｇ－ｑｕａｄ－
ｒｕｐｌｅｘ　ｉｓ　ｄｅｅｍｅｄ　ｔｏ　ｂｅ　ａｎ　ａｔｔｒａｃｔｉｖｅ　ｔａｃｔｉｃ　ｆｏｒ　ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ　ｅｆｆｅｃ－
ｔｉｖｅ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ｌｅａｄｓ［５］．
Ｉｎ　ｏｕｒ　ｐｒｅｖｉｏｕｓ　ｒｅｓｅａｒｃｈ，ａ　ｎｅｗ　ｌｉｇｎａｎ　ｎａｍｅｄ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ
ｗａｓ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｍａｇｎｏｌｉａ　ｌｉｌｉｆｌｏｒａ　Ｄｅｓｒ．（Ｍａｇｎｏｌｉａｃｅ－
ａｅ），ａｎｄ　ｉｔ　ｒｅｌｉｅｖｅｄ　ＤＮＡ　ｄａｍａｇｅｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ＵＶＢ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ
ｉｎ　ｒａｔ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ　ｃｅｌｓ　ｉｎ　ＳＣＧＥ　ａｓｓａｙ［６］．Ｉｔ　ｉｓ　ｒｅｐｏｒｔｅｄ　ｔｈａｔ
ＵＶＢ－ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｍａｙ　ｃａｕｓｅ　ａ　ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｕａｎｉｎｅ
ｆｏｌｏｗｅｄ　ｂｙ　ｉｔｓ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　ｓｔｒｕｃ－
ｔｕｒｅ［７］．Ｔｈｕｓ，ｉｔ　ｉｓ　ｄｅｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｕｓ　ｔｈａｔ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｍｉｇｈｔ　ｉｎｔｅｒ－
ａｃｔ　ｗｉｔｈ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｌｅａｄｉｎｇ　ｔｏ
ｉｔｓ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｉｎ　ＳＣＧＥ，ｗｈｉｃｈ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｍｏｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｏｕｒ
ｐｒｅｓｅｎｔ　ｓｔｕｄｙ．Ｈｅｒｅｉｎ，ｄｕｅ　ｔｏ　ｔｈｅｉｒ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ，
ＣＤ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｗｅｒｅ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｗｈｅｔｈｅｒ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ
ｃｏｕｌｄ　ｓｔａｂｉｌｉｚｅ　ｈｕｍａｎ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ： ＨＴＧ２１
｛ｄＧＧＧ（ＴＴＡＧＧＧ）３｝．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ａ　ｓｅｒｉｅｓ　ｏｆ　ＦＲＥＴ　ｗｅｒｅ
ｒｅｃｏｒｄｅｄ　ｔｏ　ｅｘａｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｔｏｗａｒｄ　ＨＴＧ２１，ｔｈｅ
ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ　ｂｙ　ＮＭＲ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｆｉｎａｌ－
ｌｙ，Ｄｏｃｋｉｎｇ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｔｏ　ｃｈｅｃｋ　ｈｏｗ　ａｎｄ　ｗｈｅｒｅ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ
Ａ　ｃｏｕｌｄ　ｉｎｔｅｒａｃｔ　ｗｉｔｈ　ＨＴＧ２３｛ｄＴＡＧＧＧ（ＴＴＡＧＧＧ）３｝ａｓ　ａ
ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｔｒａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ．Ａｓ　ａ　ｒｅｓｕｌｔ，ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ
ｉｓ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｌｉｇｎａｎ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｐｌａｎｔｓ　ｗｈｉｃｈ　ｃａｎ　ｓｔａｂｉｌｉｚｅ
ＨＴＧ２１ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｎｏｔ　ｏｎｌｙ　ｔｈｅ　ｈａｉｒｐｉｎ　ｌｏｏｐ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　Ｆ１０Ｔ，ｂｕｔ　ａｌｓｏ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ
ｆｏｒｍｅｄ　ｂｙ　ｏｎｃｏｇｅｎｅ　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｒｅｇｉｏｎｓ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｃ－ｍｙｃ　ａｎｄ　ｃ－
ｋｉｔ．Ｉｔ　ｉｓ　ａ　ｇｏｏｄ　ｃａｎｄｉｄａｔｅ　ｆｏｒ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ｄｒｕｇ　ｄｅｓｉｇｎ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ
ｈｕｍａｎ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ．
１　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ　ａｎｄ　ｍｅｔｈｏｄｓ
１．１　Ｒｅａｇｅｎｔｓ
ＤＮＡ（ＨＴＧ２１：５’－Ｇ３（Ｔ２ＡＧ３）３－３’；Ｆ２１Ｔ：５’－ＦＡＭ－
Ｇ３（Ｔ２ＡＧ３）３－ＴＡＭＲＡ－３’；ｃ－ｍｙｃ　２３４５：５’－ＴＧＡＧ３ＴＧ４－
ＡＧ３ＴＧ４Ａ２－３’；Ｆ－ｍｙｃ－Ｔ：５’－ＦＡＭ－ＧＡＧ３ＴＧ４ＡＧ３ＴＧ４Ａ２Ｇ－
ＴＡＭＲＡ－３’；ｃ－ｋｉｔ：５’－ＡＧ３ＡＧ３ＣＧＣＴＧ３ＡＧ２ＡＧ３－３’；Ｆ－
ｋｉｔ１：５’－ＦＡＭ－Ｇ３ＡＧ３ＣＧＣＴＧ３ＡＧ２ＡＧ３－ＴＡＭＲＡ－３’；ｄｓ２６：
５’－ＣＡ２ＴＣＧ２ＡＴＣＧＡ２Ｔ２ＣＧＡＴＣ２ＧＡＴ２Ｇ－３’；Ｆ１０Ｔ：５’－
ＦＡＭ－ＴＡＴＡＧＣＴＡＴＡ－ＨＥＧ－ＴＡＴＡＧＣＴＡＴＡ－ＴＡＭＲＡ－３’）
ｗｅｒｅ　ｐｕｒｃｈａｓｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｓａｎｇｏｎ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｃｏ．
（Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ），ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ＰＡＧＥ．
Ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｗａｓ　ａｂｓｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｍａｇｎｏｌｉａ　ｌｉｌｉｉｆｌｏｒａ
Ｄｅｓｒ．ｉｎ　ｏｕｒ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ［６］．Ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ　ａｎｄ　Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｗｅｒｅ　ｏｂ－
ｔａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｆｏｒ　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｔｒｏｌ
（Ｂｅｉｊｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）ａｎｄ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ．
Ｄｅｕｔｅｒｉｕｍｏｘｉｄｅ （Ｄ２Ｏ）ｗａｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ
Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ．（Ｇｅｒｍａｎｙ）．Ｄｉｍｅｔｈｙｌ　ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ（ＤＭＳＯ）ｗａｓ
ｐｕｒｃｈａｓｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｓｉｇｍａ　Ｃｏ．（ＵＳＡ）．ＫＣｌ，ＮａＣｌ，ＫＨ２ＰＯ４ａｎｄ
Ｋ２ＨＰＯ４ｗｅｒｅ　ｏｆ　ａｌ　ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　ｒｅａｇｅｎｔ　ｇｒａｄｅｓ　ｐｕｒｃｈａｓｅｄ　ｆｒｏｍ
Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｃｈｅｍ．Ｃｏ．Ｔｒｉｓ　ｗａｓ　ｐｕｒｃｈａｓｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ　Ｉｓｏ－
ｔｏｐｅ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．
１．２　Ｓａｍｐｌｅ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ
Ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ，Ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ　ａｎｄ　Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｗｅｒｅ　ｉｎｉｔｉａｌｙ　ｄｉｓ－
ｓｏｌｖｅｄ　ａｓ　ａ　５０．０μｍｏｌ·Ｌ
－１　ｓｔｏｃｋ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｉｎ　ＤＭＳＯ．Ｔｈｅ　ｏｌｉ－
ｇｏｍｅｒ　ＤＮＡ　ｗａｓ　ｈｅａｔｅｄ　ａｔ　９５．０℃ｆｏｒ　５ｍｉｎｕｔｅｓ，ｔｈｅｎ　ｓｌｏｗｌｙ
ｃｏｏｌｅｄ　ｔｏ　ｒｏｏｍ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ａｎｄ　ｉｎｃｕｂａｔｅｄ　ａｔ　４．０ ℃ｆｏｒ　６
ｈｏｕｒｓ　ａｔ　ｌｅａｓｔ．Ｔｈｅ　ｌｉｇａｎｄ－ＤＮＡ　ｃｏｍｐｌｅｘ　ｗｅｒｅ　ｆｏｒｍｅｄ　ｂｙ
ａｄｄｉｎｇ　ｓｍａｌ　ａｌｉｑｕｏｔｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｆｒｏｍ　５０．０μｍｏｌ·Ｌ
－１　ｓｏ－
ｌｕｔｉｏｎ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ＤＮＡ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｉｎ　ＣＤ　ａｎｄ　ＦＲＥＴ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．
Ｔｈｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｅｑｕｉｌｉｂｒａｔｅｄ　ａｔ　ｒｏｏｍ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｆｏｒ　２４．０
ｈｏｕｒｓ　ｂｅｆｏｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ．Ｆｉｎａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＣＤ　ａｎｄ
ＦＲＥＴ　ｄａｔａ　ｗｅｒｅ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｂｙ　Ｏｒｉｇｉｎ　８．０ （ＯｒｉｇｉｎＬａｂ
Ｃｏｒｐ．）．
１．３　ＣＤ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
Ｔｈｅ　ｏｌｉｇｏｍｅｒ　ＤＮＡ（ＨＴＧ２１）ａｔ　ａ　ｆｉｎａｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ
５．０μｍｏｌ·Ｌ
－１　ｗａｓ　ｄｉｌｕｔｅｄ　ｉｎ　１０．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ
ｂｕｆｆｅｒ（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　１００．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ＮａＣｌ，ｐＨ　７．４）ｔｏ　ｂｅ
ｔｅｓｔｅｄ　ｂｙ　ＣＤ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ａｔ　２５．０
℃ｕｓｉｎｇ　ａ　Ｐｉｓｔａｒπ－１８０ｓｐｅｃｔｒｏｐｏｌａｒｉｍｅｔｅｒ．Ｔｈｅ　ｓｃａｎ　ｏｆ　ｔｈｅ
ｂｕｆｆｅｒ　ａｌｏｎｅ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ，ｗｈｉｃｈ　ｗａｓ　ｓｕｂｔｒａｃ－
ｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｓｃａｎ　ｆｏｒ　ｅａｃｈ　ｓａｍｐｌｅ．Ａ　ｑｕａｒｔｚ　ｃｕｖｅｔｔｅ
ｗｉｔｈ　４ｍｍ　ｐａｔｈ　ｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ　ｏｖｅｒ
ａ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　２３０～４５０ａｔ　１ｎｍ　ｂａｎｄｗｉｄｔｈ，１ｎｍ
ｓｔｅｐ　ｓｉｚｅ，ａｎｄ　０．５ｓｔｉｍｅ　ｐｅｒ　ｐｏｉｎｔ．Ｔｈｅ　ＣＤ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｄａｔａ
ｗｅｒｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　２３０ｔｏ　４５０ｎｍ［８］．ＣＤ－ｍｅｌｔｉｎｇ　ｅｘｐｅｒｉ－
ｍｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｔａｋｅｎ　ａｔ　２９５ｎｍ　ａｎｄ　ａｔ　ｉｎｔｅｒｖａｌｓ　ｏｆ　５．０℃ ｏｖｅｒ
ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　１０．０～９０．０℃，ｗｉｔｈ　ａ　ｃｏｎｓｔａｎｔ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｂｅｉｎｇ
ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ　ｆｏｒ　１ｓｐｒｉｏｒ　ｔｏ　ｅａｃｈ　ｒｅａｄｉｎｇ　ｔｏ　ｅｎｓｕｒｅ　ａ　ｓｔａｂｌｅ　ｖａｌ－
ｕｅ［９］．Ｔｈｅ　ｆｉｎａｌ　ｄａｔａ　ｗｅｒｅ　ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ．
１．４　ＦＲＥＴ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｍｅｌｔｉｎｇ　ｃｕｒｖｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｕｓｉｎｇ　ａ　ｒｅ－
ａｌ－ｔｉｍｅ　ＰＣＲ　ｍａｃｈｉｎｅ（ＭＹＩＱ２，Ｂｉｏ－ｒａｄ，ＵＳＡ），ｗｉｔｈ　０．２
μｍｏｌ·Ｌ
－１　ｏｆ　ｌａｂｅｌｅｄ　ｏｌｉｇｏｍｅｒ　ＤＮＡ （Ｆ２１Ｔ，Ｆ１０Ｔ，Ｆ－ｍｙｃ－
Ｔ，Ｆ－ｋｉｔ１）ｉｎ　ｔｈｅ　１０．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ　ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ　７．４）
ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　６０．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ＫＣｌ　ｏｆ　ａ　ｔｏｔａｌ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｖｏｌｕｍｅ　ｏｆ
２０μＬ．Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｒｅａｄｉｎｇｓ　ｗｉｔｈ　ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ　ａｔ　４７０ｎｍ　ａｎｄ
ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ａｔ　５３０ｎｍ　ｗｅｒｅ　ｔａｋｅｎ　ａｔ　ｉｎｔｅｒｖａｌｓ　ｏｆ　１．０℃ｏｖｅｒ　ｔｈｅ
ｒａｎｇｅ　３７．０～９９．０ ℃，ｗｉｔｈ　ａ　ｃｏｎｓｔａｎｔ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｂｅｉｎｇ
ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ　ｆｏｒ　３０ｓｐｒｉｏｒ　ｔｏ　ｅａｃｈ　ｒｅａｄｉｎｇ　ｔｏ　ｅｎｓｕｒｅ　ａ　ｓｔａｂｌｅ
ｖａｌｕｅ［９］．Ａｓ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐｅｔｉｔｏｒ，ａ　ｓｅｒｉｅｓ　ｏｆ　ｄｏｕｂｌｅ－ｓｔｒａｎｄｅｄ
（ｄｓ２６）ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｂｙ　ａ　ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ　ＦＲＥＴ－ｍｅｌｔ－
ｉｎｇ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．
１．５　ＮＭＲ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
Ｔｈｅ　ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ（ＨＴＧ２１，ｃ－ｍｙｃ　２３４５ａｎｄ　ｃ－ｋｉｔ）
ｗｅｒｅ　ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ　ｉｎ　８０％ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｂｕｆｆｅｒ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ （２０．０
ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ＫＨ２ＰＯ４／Ｋ２ＨＰＯ４，７０．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ＫＣｌ，９０％
Ｈ２Ｏ／１０％ Ｄ２Ｏ，ｐＨ　７．４）ａｎｄ　２０％ ＤＭＳＯ－ｄ６．Ｔｈｅ　ｋｎｏｗｎ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ（０．０１ｍｍｏｌ·Ｌ－１）Ｄｉｍｅｔｈｙｌ－２－ｓｉｌａｐｅｎｔａｎｅ－
５－ｓｕｌｆｏｎａｔｅ（ＤＳＳ）ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｉｎｔｅｒｎａｌ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ．Ｔｈｅ　ｃｏｎ－
７９８第３期　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　光谱学与光谱分析
ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｅａｃｈ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＮＭＲ　ｓａｍ－
ｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　１．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１．Ａｓ　ｔｈｅ　ＮＭＲ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｒｅｑｕｉｒｅｄ
ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ　ｈｉｇｈ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ （１．０ ｍｍｏｌ·
Ｌ－１），ｂｕｔ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ　ｉｎ　ｗａｔｅｒ　ａｔ　ｓｕｃｈ　ｈｉｇｈ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｔｈｕｓ，２０％ ＤＭＳＯ　ｈａｓ　ｂｅｅｎ　ａｄｄｅｄ　ｔｏ　ｅｎｈａｎｃｅ
ｔｈｅ　ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ．Ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｗａｓ　ｆｉｒｓｔ　ｄｉｓ－
ｓｏｌｖｅｄ　ｉｎ　ＤＭＳＯ－ｄ６ａｓ　２００．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ｓｔｏｃｋ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ．Ｔｈｅ
ｌｉｇａｎｄ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｃｏｍｐｌｅｘ　ｗａｓ　ｆｏｒｍｅｄ　ｂｙ　ａｄｄｉｎｇ　ｓｍａｌ　ａｌｉ－
ｑｕｏｔｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｆｒｏｍ　２００．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ
Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｓａｍｐｌｅｓ（ＨＴＧ２１，ｃ－ｍｙｃ　２３４５ａｎｄ　ｃ－ｋｉｔ）．Ｔｈｅ
ｍｏｌａｒ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ［ｌｉｇａｎｄ］／［Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ］ｗａｓ　１∶１ｉｎ　ｔｈｅ　ＮＭＲ
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｔｈｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｅｑｕｉｌｉｂｒａｔｅｄ　ａｔ　ｒｏｏｍ　ｔｅｍｐｅｒａ－
ｔｕｒｅ　ｆｏｒ　２４ｈｏｕｒｓ　ｂｅｆｏｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ．１　Ｈ－ＮＭＲ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ
ｔｈｅ　ｌｉｇａｎｄ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｃｏｍｐｌｅｘ　ｗｅｒｅ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ　ｅｖｅｒｙ　ｏｎｅ　ｈｏｕｒ．
ＮＭＲ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｏｎ　ａ　Ｂｒｕｋｅｒ
ＡＶＡＮＣＥ　６００ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ　ｅｑｕｉｐｐｅｄ　ｗｉｔｈ　ａ　５ｍｍ　ＢＢＩ　ｐｒｏｂｅ
ｃａｐａｂｌｅ　ｏｆ　ｄｅｌｉｖｅｒｉｎｇ　ｚ－ｆｉｅｌｄ　ｇｒａｄｉｅｎｔｓ．Ｔｈｅ　１　Ｈ－ＮＭＲ　ｓｐｅｃｔｒａ
ｗｅｒｅ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　Ｂｒｕｋｅｒ　ｐｕｌｓｅ　ｐｒｏｇｒａｍ　ｐ３９１９ｇｐ
ｔｈａｔ　ａｐｐｌｉｅｓ　３－９－１９ｐｕｌｓｅｓ　ｗｉｔｈ　ｇｒａｄｉｅｎｔｓ　ｆｏｒ　ｗａｔｅｒ　ｓｕｐｐｒｅｓ－
ｓｉｏｎ，２．０ｓｒｅｌａｘａｔｉｏｎ　ｄｅｌａｙ，６４Ｋｄａｔａ　ｐｏｉｎｔｓ，１６ｐｐｍ　ｓｐｅｃ－
ｔｒｕｍ　ｗｉｄｔｈ，１２８ｓｃａｎｓ．Ａｌ　ＮＭＲ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｃａｒｒｉｅｄ
ｏｕｔ　ａｔ　２９８Ｋ．
１．６　Ｄｏｃｋｉｎｇ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｕｓｉｎｇ　ＤｏｃｋｉｎｇＳｅｒｖｅｒ（ｈｔ－
ｔｐ：／／ｗｗｗ．ｄｏｃｋｉｎｇｓｅｒｖｅｒ．ｃｏｍ）．Ｇａｓｔｅｉｇｅｒ　ｐａｒｔｉａｌ　ｃｈａｒｇｅｓ
ｗｅｒｅ　ａｄｄｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｌｉｇａｎｄ　ａｔｏｍｓ．Ｎｏｎ－ｐｏｌａｒ　ｈｙｄｒｏｇｅｎ　ａｔｏｍｓ
ｗｅｒｅ　ｍｅｒｇｅｄ，ａｎｄ　ｒｏｔａｔａｂｌｅ　ｂｏｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｆｉｎｅｄ．Ｄｏｃｋｉｎｇ　ｃａｌ－
ｃｕｌａｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｏｎ　ｕｎｔｉｔｌｅｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｍｏｄｅｌ．Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ
ｈｙｄｒｏｇｅｎ　ａｔｏｍｓ，Ｋｏｌｍａｎ　ｕｎｉｔｅｄ　ａｔｏｍ　ｔｙｐｅ　ｃｈａｒｇｅｓ，ａｎｄ　ｓｏｌ－
ｖａｔｉｏｎ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｗｅｒｅ　ａｄｄｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ａｉｄ　ｏｆ　ＡｕｔｏＤｏｃｋ
ｔｏｏｌｓ［１０］．Ｔｈｅ　ｃｒｙｓｔａｌ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ
（ＰＤＢ　ＩＤ　２ＪＳＭ）ＨＴＧ２３ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ａｎ　ｉｎｉｔｉａｌ　ｍｏｄｅｌ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ
ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ａｎｄ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　ＤＮＡ．
Ｌｉｇａｎｄ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ　ｉｎ　Ｃｈｅｍｄｒａｗ．
２　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ａｎｄ　ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ
２．１　Ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｓｔａｂｌｅ　ｈｕｍａｎ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ
ＨＴＧ２１：ｄＧＧＧ（ＴＴＡＧＧＧ）３ｉｎ　Ｎａ＋ｓｏｌｕｔｉｏｎ
Ｃｉｒｃｕｌａｒ　ｄｉｃｈｒｏｉｓｍ，ＣＤ，ｉｓ　ａ　ｕｓｅｆｕｌ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ　ｔｏ　ｇａｉｎ　ｉｎ－
ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ａｂｏｕｔ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ＤＮＡ．Ｉｔ　ｉｓ　ａｌｓｏ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｍｏｎｉ－
ｔｏｒ　ｔｈｅ　ｔｈｅｒｍａｌ　ｍｅｌｔｉｎｇ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｋｉｎｅｔｉｃｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｇ－
ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ［１１］．Ｔｈｅ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ａｔ　ｗｈｉｃｈ　ｔｈｅ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ
ｆｏｌｄｅｄ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｄｅｃｏｍｐｏｓｅｄ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ＤＮＡ　ｕｎｆｏｌｄ　ｓｔｒａｎｄ　ｉｓ
ｃａｌｅｄ　ｔｈｅ　ｍｅｌｔｉｎｇ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ（Ｔｍ）ｔｈａｔ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｊｕｄｇｅ
ｔｈｅ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．Ｉｆ　ｌｉｇａｎｄｓ　ｂｉｎｄ　ｔｏ　ａｎｄ
ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｔｈｅ　Ｔｍｖａｌｕｅ　ｏｆ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕ－
ｐｌｅｘ　ｗｉｌ　ｂｅ　ｅｎｈａｎｃｅｄ．Ｂｙ　ａｎａｌｙｚｉｎｇ　ｔｈｅ　ｍｅｌｔｉｎｇ　ｃｕｒｖｅｓ　ｓｈｉｆｔｓ
ａｔ　ｔｈｅ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＣＤ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ，Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ
Ｔｍｃａｎ　ｂｅ　ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ　ａｎｄ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｅｓｔｉｍａｔｅ　ｔｈｅ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｃｏｍ－
ｐｌｅｘ　ｏｆ　ｌｉｇａｎｄ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｔｏ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ．
ＨＴＧ２１ｉｓ　ｒｅｐｏｒｔｅｄ　ｔｏ　ｆｏｒｍ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｏｐｏｌｏｇｉｃａｌ　ｓｔｒｕｃ－
ｔｕｒｅｓ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｍｏｎｏｖａｌｅｎｔ　ｃａｔｉｏｎ　ｂｕｆｆｅｒｓ．Ｉｎ　Ｎａ＋ｓｏｌｕｔｉｏｎ，
ａ　ｂａｓｋｅｔ－ｔｙｐｅ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｉｓ　ｆｏｒｍｅｄ［１２］，ｗｈｅｒｅａｓ　ａ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｏｆ
ｈｙｂｒｉｄ－１ａｎｄ　ｈｙｂｒｉｄ－２ｔｙｐｅ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ａｒｅ　ｆｏｒｍｅｄ　ｉｎ　Ｋ＋ｓｏｌｕ－
ｔｉｏｎ［１３］．Ｄｕｅ　ｔｏ　ｉｔｓ　ｓｉｍｐｌｉｃｉｔｙ，ａ　ｂａｓｋｅｔ－ｂａｌ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｗａｓ
ｆｉｒｓｔｌｙ　ｃｈｏｓｅｎ　ｂｙ　ｕｓ　ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｉｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｃｏｕｌｄ　ｓｔａｂｉｌｉｚｅ
ＨＴＧ２１ｂｙ　ＣＤ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ．Ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ　ａｎｄ　Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ［１４］ｗｅｒｅ
ｕｓｅｄ　ａｓ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌｓ．Ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｔ　２９５
ｎｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＣＤ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ，ａ　ｔｙｐｉｃａｌ　ｓｉｇｎａｌ　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ｔｏ
ＨＴＧ２１ｉｎ　Ｎａ＋ ｗａｓ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｌ　ｔｈｅ
ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗａｓ　ｃｈａｎｇｅｄ　ｇｒａｄｕａｌｙ　ｆｒｏｍ　０．０ｔｏ　２００．０μｍｏｌ·
Ｌ－１　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｄａｔａ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　Ｔｍ ｖａｌｕｅ　ｏｆ
ＨＴＧ２１ｗａｓ　ｅｎｈａｎｃｅｄ　ｉｎ　ａｃｃｏｒｄａｎｃｅ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｉｎｃｅｎｓｅｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｌｉｌ－
ｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　Ｔｍ ｗａｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ａｔ
７２．５３℃ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　７５．０μｍｏｌ·Ｌ
－１　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ
Ａ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　Ｔｍｖａｌｕｅ　ｏｆ　ＨＴＧ２１ｏｎｌｙ　ｉｎ　Ｎａ＋ｓｏｌｕ－
ｔｉｏｎ，ｔｈｅΔＴｍ ｗａｓ　１．９４℃．Ｉｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｓｈｏｗｅｄ
ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｎ　ｅｎｈａｎｃｉｎｇ　ＨＴＧ２１　Ｔｍ，ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｔｏ
ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ　ａｎｄ　ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ａｔ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（Ｔａｂｌｅ　１）．
Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｍｅｌｔｉｎｇ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ　ｏｆ　ｔｒｅａｔｅｄ　ＨＴＧ２１ （５．０
μｍｏｌ·Ｌ－１　ｓｔｒａｎｄ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）ａｆｔｅｒ　ｒｅａｃｔｉｎｇ　ｗｉｔｈ
ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｉｎ　ａ　ｓｅｒｉｅｓ　ｏｆ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　１０．０
ｍｍｏｌ·Ｌ－１　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ　ｂｕｆｆｅｒ　ａｎｄ　１００ｍｍｏｌ·Ｌ－１
ＮａＣｌ　ａｔ　２５．０℃
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ
／（μｍｏｌ·Ｌ－１）
Ｔｍｖａｌｕｅ　ｏｆ　ＨＴＧ２１／℃ａ
Ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　 Ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ　 Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ
０　 ７０．５９　 ７０．５９　 ７０．５９
２５．０　 ６９．８０　 ７１．０７　 ７０．３６
５０．０　 ７０．１０　 ７１．８６　 ７１．０５
７５．０　 ７２．５３　 ７２．４７　 ７２．１７
１００．０　 ７２．３７　 ７２．５２　 ７２．７９
２００．０　 ７２．５３　 ７１．７０　 ７３．９０
ａ：Ａｌ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ａｒｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ａｓ　ｍｅａｎ±ＳＥ　ｆｏｒ　ａｌ　ｇｒｏｕｐｓ（ｎ＝３）
　　Ｄｕｅ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈｉｎ　ｔｈｅ
ｃｅｌ，Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　Ｋ＋ｉｓ　ｍｏｒｅ
ｒｅｌｅｖａｎｔ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｙ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｔｏｐｏｌｏｇｉｃａｌ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｉｎ
Ｎａ＋［１５］．Ｔｈｕｓ，Ｋ＋ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｉｎ　ａｌ　ｔｈｅ　ｌａｔｅｒ　ｅｘｐｅｒｉ－
ｍｅｎｔｓ．
２．２　Ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙ　ｓｔａｂｉｌｉｚｅ　ｈｕｍａｎ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　Ｇ－ｑｕａｄ－
ｒｕｐｌｅｘ　ｉｎ　ＦＲＥＴ－ｍｅｌｔｉｎｇ
Ｂｅｃａｕｓｅ　ｏｆ　ｉｔｓ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｆｌｅｘｉｂｉｌｉｔｙ，ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｒｅｓ－
ｏｎａｎｃｅ　ｅｎｅｒｇｙ　ｔｒａｎｓｆｅｒ（ＦＲＥＴ）ｉｓ　ｗｉｄｅｌｙ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ
ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘｅｓ，ａｎｄ　ａｌｓｏ　ｂｅｃｏｍｅｓ
ｖｅｒｙ　ｐｏｐｕｌａｒ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｌｉｇａｎｄｓ　ａｎｄ　Ｇ－
ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ［１６］．Ｔｈｅ　ｍｅｌｔｉｎｇ　ｃｕｒｖｅ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ　ｔｈｒｏｕｇｈ
ｔｈｅ　ｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ　ｖｓ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｐｌｏｔｔｉｎｇ
ｔｈｏｕｇｈ　ＦＲＥＴ－ｍｅｌｔｉｎｇ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｄｕｅ　ｔｏ　ａ　ｌａｒｇｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ
ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｏｌｄｅｄ　ａｎｄ　ｕｎｆｏｌｄｅｄ
８９８ 光谱学与光谱分析　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 第３６卷
ｄｏｕｂｌｙ　ｌａｂｅｌｅｄ　ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ．Ｂｙ　ｔｈｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｌｕｃｔｕ－
ａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｌｔｉｎｇ　ｃｕｒｖｅ　ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｈｅａｔｉｎｇ　ｐｒｏｃｅｓｓ，ｔｈｅ　Ｔｍ
ｃａｎ　ｂｅ　ｇｉｖｅｎ　ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｃｏｍｐｌｅｘ　ｏｆ　ｌｉｇａｎｄ
ｂｉｎｄｉｎｇ　ｔｏ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ．Ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ＨＴＧ２１ｉｓ　ｌａ－
ｂｅｌｅｄ　ｗｉｔｈ　ａ　ＦＡＭ （ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ｄｏｎｏｒ）ｏｎ　ｔｈｅ　５’ｅｎｄ　ａｎｄ　ａ
ＴＡＭＲＡ（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ａｃｃｅｐｔｏｒ）ｏｎ　ｔｈｅ　３’ｅｎｄ．Ｔｈｉｓ　ｄｏｕｂｌｙ
ｌａｂｅｌｅｄ　ｏｌｉｇｏｍｅｒ　ｗａｓ　ｃａｌｅｄ　Ｆ２１Ｔ．
２．２．１　Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｏｆ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ
ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ａｎｄ　Ｆ２１Ｔ
Ｔｈｅ　ｍｅｌｔｉｎｇ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｆ　Ｆ２１Ｔｉｎ　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ　ｂｕｆｆｅｒ
ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　ｏｆ　６０．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　Ｋ＋ ｗａｓ　ｄｅｅｐｌｙ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｕｎｄｅｒ　ａ
ｓｅｒｉｅｓ　ｏｆ　Ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．Ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
ｒａｎｇｉｎｇ　ｆｒｏｍ　１．０ｔｏ　４．０μｍｏｌ·Ｌ
－１，ｔｈｅ　ｍｅｌｔｉｎｇ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆ
Ｆ２１Ｔｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ａ　ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｓｈｉｆｔ　ｇｒａｄｕａｌｙ ［Ｆｉｇ．１
（ａ）］，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃａｌｃｕｌａｔｅｄΔＴｍｗａｓ　０．２６，１．０７，１．６１ａｎｄ　３．２２
℃ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｔｍｓｔｏｐｐｅｄ　ａｓ　Ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ
Ａ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｔｏ　５．０ａｎｄ　６．０μｍｏｌ·Ｌ
－１［Ｆｉｇ．１
（ｂ）］．Ｔｈｅ　ｄａｔａ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　Ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｉｎｔｅｒａｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ
Ｆ２１Ｔ，ａｎｄ　ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ　ｔｈｅ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｉｎ　ａ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ－ｄｅ－
ｐｅｎｄｅｎｔ　ｍａｎｎｅｒ．Ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　Ｔｍ６９．９３℃ ａｐｐｅａｒｅｄ　ａｔ　４．０
μｍｏｌ·Ｌ
－１．
Ｆｉｇ．１　ＦＲＥＴ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｗａｓ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｉｎ　１０．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　Ｔｒｉｓ－
ＨＣｌ　ｂｕｆｆｅｒ　ａｎｄ　６０．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ＫＣｌ
（ａ）：Ｍｅｌｔｉｎｇ　ｃｕｒｖｅｓ　ｏｆ　Ｆ２１Ｔ（０．２μｍｏｌ·Ｌ－１）ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　ｌｉｌｉ－
ｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｉｎ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ．Ｃｕｒｖｅｓ　ｗｉｔｈ　ｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ　ＦＡＭ　ｆｌｕｏ－
ｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｔｏ　ａ　０－１ｒａｎｇｅ；（ｂ）：ΔＴｍｏｆ　Ｆ２１Ｔｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ
Ａ　ｉｎ　１．０，２．０，３．０，４．０，５．０ａｎｄ　６．０μｍｏｌ·Ｌ－１　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ
２．２．２　Ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ　ＦＲＥＴ－ｍｅｌｔｉｎｇ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
Ｔｏ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｔｏ
Ｆ２１Ｔ，ａ　ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ　ＦＲＥＴ－ｍｅｌｔｉｎｇ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｗａｓ　ｓｔｕｄｉｅｄ，
ｉｎ　ｗｈｉｃｈ　ｔｈｅ　ｅｘｃｅｓｓ　ｏｆ　ｕｎｌａｂｅｌｅｄ　２６－ｂｐ　ｄｕｐｌｅｘ－ＤＮＡ （ｄｓ２６）
ｗａｓ　ａｄｄｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｓｙｓｔｅｍ　ｏｆ　０．２μｍｏｌ·Ｌ
－１　Ｆ２１Ｔａｎｄ
４．０μｍｏｌ·Ｌ
－１　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ．Ａｓ　ａ　ｒｅｓｕｌｔ，ｌｉｔｔｌｅ　ｃｈａｎｇｅ　ｏｆ　ｔｈｅ
ΔＴｍｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ（Ｆｉｇ．２），ｅｖｅｎ　ｗｈｅｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
ｏｆ　ｄｓ２６ｒｅａｃｈｅｄ　１０．０μｍｏｌ·Ｌ
－１，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｄｕｐｌｅｘ－
ＤＮＡ　ｄｓ２６ｈａｄ　ｎｏ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｆ２１Ｔ
ａｎｄ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ．
Ｆｉｇ．２　Ｍｅｌｔｉｎｇ　ｃｕｒｖｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｏｆ　０．２μｍｏｌ·Ｌ－１　Ｆ２１Ｔ
ａｎｄ　４．０μｍｏｌ·Ｌ－１　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｉｎ　３．０ａｎｄ　１０．０μｍｏｌ
·Ｌ－１　ｄｓ２６ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ　ｉｎ　１０．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ
ｂｕｆｆｅｒ　ａｎｄ　６０．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ＫＣｌ
２．２．３　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ａｎｄ　Ｆ１０Ｔｂｙ　ＦＲＥＴ－
ｍｅｌｔｉｎｇ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
Ｆ１０Ｔ，ｗａｓ　ａｎｏｔｈｅｒ　ｆｏｌｄｅｄ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　ｎｕｃｌｅｉｃ　ａｃｉｄｓ
ｗｈｉｃｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｉｎ　ｈａｖｉｎｇ　ｔｈｅ　ｈａｉｒｐｉｎ　ｌｏｏｐ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．Ｉｎ　ＦＲＥＴ－ｍｅｌｔｉｎｇ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ａｌｔｈｏｕｇｈ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ
ｗｉｔｈ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｔ　１．０，２．０，３．０，４．０，５．０ａｎｄ　６．０
μｍｏｌ·Ｌ
－１　ｗａｓ　ａｄｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｏｆ　Ｆ１０Ｔｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，
ΔＴｍｏｆ　Ｆ１０Ｔｒｅｍａｉｎｅｄ　ｕｎｃｈａｎｇｅｄ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ　ｔｈａｔ　ｎｏ　ｉｎｔｅｒａｃ－
ｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｈａｉｒｐｉｎ　ｌｏｏｐ　Ｆ１０Ｔ ［Ｆｉｇ．３
（ａ）］．
２．２．４　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｆ－ｍｙｃ－Ｔ　ａｎｄ　Ｆ－ｋｉｔ１
Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｂｙ　ＦＲＥＴ－ｍｅｌｔｉｎｇ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
Ｔｈｅ　ｏｔｈｅｒ　ｔｗｏ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘｅｓ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｒｅ－
ｇｉｏｎｓ　ｏｆ　ｍｙｃ　ａｎｄ　ｋｉｔ　ｇｅｎｅｓ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｂｙ　ＦＲＥＴ－ｍｅｌｔ－
ｉｎｇ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ［１７］．Ｆ－ｍｙｃ－Ｔ　ａｎｄ　Ｆ－ｋｉｔ１，ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ
ｄｏｕｂｌｙ　ｌａｂｅｌｅｄ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ΔＴｍｏｆ　ｂｏｔｈ
ｏｆ　ｔｈｅ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｗｅｒｅ　ａｌｍｏｓｔ　０ｉｎ　ａｌ　ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，
ｓｈｏｗｉｎｇ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｔｈｅｒｍａｌ　ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ
ｆｏｒｍｅｄ　ｂｙ　ｃ－ｋｉｔ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｃ－ｍｙｃ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｗｅｒｅ　ｎｏｔ　ｉｎｆｌｕ－
ｅｎｃｅｄ，ｄｕｅ　ｔｏ　ｌｉｔｔｌｅ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ａｎｄ　Ｇ－
ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ［Ｆｉｇ．３（ｂ）ａｎｄ（ｃ）］．
２．３　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ａｎｄ　ＨＴＧ２１，ｃ－ｍｙｃ　２３４５
ａｎｄ　ｃ－ｋｉｔ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＮＭＲ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
Ｎｕｃｌｅａｒ　ｍａｇｎｅｔｉｃ　ｒｅｓｏｎａｎｃｅ　ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ（ＮＭＲ）ｉｓ　ａｎ
ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｔｏｏｌ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｎｕｃｌｅｉｃ　ａｃｉｄｓ．Ｉｍｉ－
ｎｏ　ｐｒｏｔｏｎｓ　ａｔδ１０～１２ｐｐｍ　ｉｎ　１　Ｈ－ＮＭＲ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｃｏｒｒｅ－
ｓｐｏｎｄｉｎｇ　ｔｏ　ｇｕａｎｉｎｅ　ｉｍｉｎｏ　ｐｒｏｔｏｎｓ　ｉｎ　Ｇ－ｔｅｔｒａｄ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ［１８］
９９８第３期　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　光谱学与光谱分析
ｗｅｒｅ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ　ｓｉｇｎａｌｓ　ｆｏｒ　Ｇ－ｑｕａｄｒｐｌｅｘ．Ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ
ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｈｉｆｔ　ｖａｌｕｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｅｌｅｖａｎｔ　ｉｍｉｎｏ　ｐｒｏｔｏｎｓ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ
ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｕｐｏｎ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｌｉｇａｎｄ　ａｎｄ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ．
Ｄｅｐｅｎｄｉｎｇ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｔｙｐｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅｓ，ｔｈｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｍｏｄｅ　ａｎｄ
ｔｈｅ　ｓｔｒｅｎｇｔｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｌｉｇａｎｄ　ａｎｄ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕ－
ｐｌｅｘ　ｃａｎ　ｂｅ　ｐｒｏｐｏｓｅｄ［５，１９］．
Ｆｉｇ．３　Ｍｅｌｔｉｎｇ　ｃｕｒｖｅｓ　ｏｆ　０．２μｍｏｌ·Ｌ－１（ａ）Ｆ１０Ｔ，（ｂ）Ｆ－
ｍｙｃ－Ｔ，（ｃ）Ｆ－ｋｉｔ１ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ａｔ
１．０，２．０，３．０，４．０，５．０ａｎｄ　６．０μｍｏｌ·Ｌ－１　ｒｅｓｐｅｃ－
ｔｉｖｅｌｙ　ｉｎ　１０．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ　ｂｕｆｆｅｒ　ａｎｄ　６０．０
ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ＫＣｌ
　　Ｔｏ　ｖｅｒｉｆｙ　ｔｈｅ　ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ａｎｄ
ＨＴＧ２１ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｉｎ　ＦＲＥＴ，１　Ｈ－ＮＭＲ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｐｅｒ－
ｆｏｒｍｅｄ．Ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｍｏｒｅ　ｔｈａｎ　１２ｇｕａｎｉｎｅ　ｉｍｉｎｏ　ｐｒｏｔｏｎｓ　ｓｉｇ－
ｎａｌｓ　ａｔδ１０～１２ｐｐｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　１　Ｈ－ＮＭＲ　ｏｆ　ＨＴＧ２１Ｇ－ｑｕａｄｒｕ－
ｐｌｅｘ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ　ａ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｏｆ　ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　Ｋ＋ ｓｏｌｕ－
ｔｉｏｎ［１３］．Ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｉｎｔｏ　ＨＴＧ２１ｓｏｌｕ－
ｔｉｏｎ，ｔｈｅ　１　Ｈ－ＮＭＲ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｗａｓ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ　ｅｖｅｒｙ
ｏｎｅ　ｈｏｕｒ．Ｉｔ　ｃａｎ　ｂｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｔｈａｔ　ｆｉｖｅ　ｐｅａｋｓ　ｂｅｃａｍｅ　ｂｒｏａｄ　ａｎｄ
ｓｈｉｆｔｅｄ　ｕｐｆｉｅｌｄ［Ｆｉｇ．４（ａ）ａｎｄ　Ｆｉｇ．５］ｇｒａｄｕａｌｙ　ｆｒｏｍ　１ｔｏ　３
ｈｏｕｒｓ，ｗｈｅｒｅａｓ，ｎｏ　ｍｏｒｅ　ｃｈａｎｇｅｓ　ａｐｐｅａｒｅｄ　ａｆｔｅｒ　３ｈｏｕｒｓ，
ｓｈｏｗｉｎｇ　ｔｈａｔ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｂｏｕｎｄ　ｔｏ　ＨＴＧ２１ｉｎ　３ｈｏｕｒｓ．Ｍｏｒｅｏ－
ｖｅｒ，ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｎｏｔ　ａｎｙ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　１　Ｈ－ＮＭＲ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ｔｈｅ
ｍｉｘｔｕｒｅ　ｏｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ａｎｄ　ｃ－ｍｙｃ２３４５ｏｒ　ｃ－ｋｉｔ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ
［Ｆｉｇ．４（ｂ）ａｎｄ（ｃ）］，ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇ　ｎｏ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｌｉｌｉ－
ｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ａｎｄ　ｃ－ｍｙｃ　２３４５ｏｒ　ｃ－ｋｉｔ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ．
Ｆｉｇ．４　１　Ｈ－ＮＭＲ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　１．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１（ａ）ＨＴＧ２１，（ｂ）
ｃ－ｍｙｃ　２３４５，（ｃ）ｃ－ｋｉｔ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ａｆｔｅｒ　ｒｅａｃｔｉｎｇ　ｗｉｔｈ
１ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｉｎ　ａ：０ｈ，ｂ：１ｈ，ｃ：２ｈ，ｄ：
３ｈ，ａｎｄ　ｅ：４ｈｉｎ　８０％ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｂｕｆｆｅｒ （２０．０
ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ＫＨ２ＰＯ４／Ｋ２ＨＰＯ４，７０．０ ｍｍｏｌ· Ｌ－１
ＫＣｌ，９０％Ｈ２Ｏ／１０％ Ｄ２Ｏ，ｐＨ　７．４）ａｎｄ　２０％ ＤＭＳＯ
ａｔ　２９８Ｋ
２．４　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｏｃｋｉｎｇ
Ｔｈｅｒｅ　ｈａｓ　ｂｅｅｎ　ａｎ　ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ　ｉｎｔｅｒｅｓｔ　ｉｎ　ｕｓｉｎｇ　ｄｏｃｋｉｎｇ
ｍｅｔｈｏｄ　ｔｏ　ｃａｒｒｙ　ｏｕｔ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ａｎｄ　ｒｏｂｕｓｔ　ｄｏｃｋｉｎｇ　ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｓ
ｏｆ　ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ　ｄｒｕｇ　ｃａｎｄｉｄａｔｅｓ［２０］．Ｄｏｃｋｉｎｇ　Ｓｅｒｖｅｒ　ｉｓ　ａ　ｗｅｂｓｉｔｅ
ｔｈａｔ　ｈａｎｄｌｅｓ　ａｌ　ａｓｐｅｃｔｓ　ｏｆ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｄｏｃｋｉｎｇ　ｆｒｏｍ　ｌｉｇａｎｄ　ａｎｄ
ｂｉｏ－ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　ｓｅｔ－ｕｐ，ｐｒｏｖｉｄｅｓ　ｆｕｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｅｔ－
００９ 光谱学与光谱分析　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 第３６卷
ｔｉｎｇ　ｏｆ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｏｆ　ｌｉｇａｎｄ　ａｎｄ　ｂｉｏ－ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ
ｓｅｔ　ｕｐ　ａｎｄ　ｄｏｃｋｉｎｇ　ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｓ．Ｈｅｒｅ，ｈｕｍａｎ　ｔｅｌｏｍｅｒｅ　ｓｅ－
ｑｕｅｎｃｅ　ｄＴＡＧＧＧ（ＴＴＡＧＧＧ）３ Ｔｅｌ２３ｗａｓ　ｃｈｏｓｅｎ　ａｓ　ｔｈｅ　Ｇ－
ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｍｏｄｅｌ［２１］（２ＪＳＭ　ｉｎ　ＰＤＢ）．Ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｍｏｒｅ　ｂａｓｅｓ
ｔｈａｎ　Ｔｅｌ２１ｒｅｉｎｆｏｒｃｅ　ｔｈｅ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｏｆ　Ｔｅｌ２３，ｔｈｕｓ　ｉｔｓ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｍｏｄｅｌ　ｏｆ　ＨＴＧ２３ｃａｎ　ｂｅ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　ＰＤＢ．
Ｆｉｇ．５　Ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｈｉｆｔｓ’ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｉｖｅ　ｇｕａｎｉｎｅ　ｉｍｉｎｏ
ｐｒｏｔｏｎｓ　ｉｎ　ＨＴＧ２１ａｆｔｅｒ　ｒｅａｃｔｉｎｇ　ｗｉｔｈ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｆｏｒ　３
ｈｏｕｒｓ
　　Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｆｒｏｍ　Ｄｏｃｋｉｎｇ，ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｂｉｎｄｓ
ｔｏ　ＨＴＧ２３ｉｎ　１∶１ｂｉｎｄｉｎｇ　ｓｔｏｉｃｈｉｏｍｅｔｒｙ（Ｆｉｇ．６）．Ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉ－
Ｆｉｇ．６　Ｈｙｐｏｔｈｅｔｉｃａｌ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｍｏｄｅｌｓ　ｓｈｏｗｉｎｇ　ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ
ｏｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｗｉｔｈ　ｈｕｍａｎ　ｔｅｌｅｍｏｒｉｃ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ
Ｔｅｌ２３（ＰＤＢ　ＩＤ：２ＪＳＭ）．Ｔｈｅ　ｌｏｏｐ　ｏｆ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｉｓ
ｓｈｏｗｎ　ｉｎ　ｃａｒｔｏｏｎ，ａｎｄ　Ｇ－ｔｅｔｒａｄ　ｉｓ　ｓｈｏｗｎ　ｉｎ　ｓｔｉｃｋｓ，
ｗｈｉｌｅ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｗａｓ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｒｅｄ　ｓｔｉｃｋｓ
ｔｉｏｎ　ｃｏｎｓｔａｎｔ（Ｋｉ）ｉｓ　３８７．４０μｍｏｌ·Ｌ
－１　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｆｒｅｅ　ｅｎｅｒｇｙ
ｏｆ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｉｓ－４．６５ｋｃａｌ·ｍｏｌ－１（Ｔａｂｌｅ　２）．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅ
ｄｏｃｋｉｎｇ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｂｉｎｄｓ　ｔｏ　ＨＴＧ２３ａｔ
Ｇ９，Ｇ１０，Ｇ１６ａｎｄ　Ｇ１７（Ｆｉｇ．６）．Ｔｈｅ　ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｃｏｎ－
ｆｉｒｍｅｄ　ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ａｎｄ　ＨＴＧ２１ｏｂ－
ｓｅｒｖｅｄ　ｂｙ　ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．
Ｔａｂｌｅ　２　Ｂｉｎｄｉｎｇ　ｅｎｅｒｇｉｅｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　ｄｏｃｋｉｎｇ　ｏｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｔｏ　ＨＴＧ２３ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｋ　ｏｆ　ｆｉｖｅ　ｃａｌｃｕｌａｔｉｎｇ
Ｒａｎｋ
Ｅｓｔ．Ｆｒｅｅ　Ｅｎｅｒｇｙ
ｏｆ　Ｂｉｎｄｉｎｇ／
（ｋｃａｌ·ｍｏｌ－１）
Ｅｓｔ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ
Ｃｏｎｓｔａｎｔ，Ｋｉ／
（μｍｏｌ·Ｌ－１）
ｖｄＷ＋Ｈｂｏｎｄ＋
ｄｅｓｏｌｖ　Ｅｎｅｒｇｙ
／（ｋｃａｌ·ｍｏｌ－１）
Ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃ
Ｅｎｅｒｇｙ
／（ｋｃａｌ·ｍｏｌ－１）
Ｔｏｔａｌ　Ｉｎｔｅｒｍｏｌ．
Ｅｎｅｒｇｙ
／（ｋｃａｌ·ｍｏｌ－１）
１ －４．６５　 ３８７．４０ －５．６５ －０．２３ －５．８８
２ －４．４１　 ５８２．００ －５．４４ －０．１０ －５．５５
３ －４．３４　 ６５７．３８ －４．９５ －０．４５ －５．３９
４ －４．２０　 ８３４．９４ －４．９２ －０．４２ －５．３４
５ －４．４０　 ９８３．６８ －５．２４ －０．２５ －５．５０
３　Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ
　　Ｈｅｒｅ，ａｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｏｆ　ｎａｔｕｒａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｗｈｉｃｈ
ｃａｎ　ｉｎｔｅｒａｃｔ　ｗｉｔｈ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｂｙ　ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｗａｓ
ｒｅｐｏｒｔｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ＣＤ，ＦＲＥＴ　ａｎｄ　ＮＭＲ　ｓｐｅｃｔｒａ，ａｓ
ｗｅｌ　ａｓ　ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｏｃｋｉｎｇ　ｗｅｒｅ　ｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ，
ａｎｄ　ｔｈｅ　ｆｏｌｏｗｉｎｇ　ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　ｃａｎ　ｂｅ　ｄｒａｗｎ：
（１）Ｉｎ　ＣＤ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ　ａｎｄ
ｑｕｅｃｅｒｔｉｎ，ｔｈｅ　ｍｅｌｔｉｎｇ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｆ　ＨＴＧ２１ｉｎ　ｓｏｄｉｕｍ　ｓａｌｔ
ｂｕｆｆｅｒｓ　ｗａｓ　ｅｎｈａｎｃｅｄ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｉｎｔｅｒａｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ
ＨＴＧ２１ａｎｄ　ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ　ｔｈｅ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ．
（２）Ｉｎ　ＦＲＥＴ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，ＨＴＧ２１　Ｔｍｐｒｅｓｅｎｔｅｄ　ｖａｒｉａ－
ｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｔｒｅｎｄ　ｏｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅ
ｈｉｇｈｅｓｔΔＴｍ ｗａｓ　３．２℃ａｔ　４．０μｍｏｌ·Ｌ
－１．Ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐｅｔｉ－
ｔｉｖｅ　ｃｉｒｃｕｍｓｔａｎｃｅ，ｄｏｕｂｌｅ　ｓｔｒｉｎｇｓ　ＤＮＡ　ｄｓ２６ｈａｄ　ｎｏ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ
ｏｎ　ｔｈｅΔＴｍｏｆ　ＨＴＧ２１．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｔｈｅ　Ｔｍｏｆ　Ｆ１０Ｔａｎｄ　Ｇ－
ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ　ｆｏｒｍｅｄ　ｂｙ　ｃ－ｍｙｃ　ａｎｄ　ｃ－ｋｉｔ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ　ｌｉｔ－
ｔｌｅ　ｆｌｕｃｔｕａｔｉｏｎ　ｒｅｇａｒｄｌｅｓｓ　ｏｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ’ｓ　ｅｘｉｓｔｅｎｃｅ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ
ｔｈｅ　ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｔｏｗａｒｄ　ＨＴＧ２１．
（３）Ｉｎ　ＮＭＲ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，ｔｈｅ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ＨＴＧ２１ｓｈｏｗｅｄ
ｖｉｖｉｄ　ａｌｔｅｒａｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　ｒｅａｃｔｉｎｇ　ｗｉｔｈ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｉｎ　３ｈｏｕｒｓ．Ｎｏ
ｃｈａｎｇｅｓ　ｗｅｒｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｉｎ　ｔｈｏｓｅ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ｃ－ｍｙｃ　２３４５ａｎｄ　ｃ－
ｋｉｔ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｉｎ　３ｈｏｕｒｓ．Ｔｈｉｓ　ｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎ　ｖｅｒｉｆｉｅｄ　ｔｈｅ　ｂｅｔｔｅｒ
ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ　ｔｏｗａｒｄ　ＨＴＧ２１．
（４）Ｉｎ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｏｃｋｉｎｇ，ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ　ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ
Ａ　ｂｉｎｄｓ　ｔｏ　ＨＴＧ２３ａｔ　Ｇ９，Ｇ１０，Ｇ１６ａｎｄ　Ｇ１７，ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｌｏ－
ｃａｔｅｄ　ｏｎ　ｗｉｄｅ　ｇｒｏｏｖｅ　ａｔ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ａｎｄ　ｓｅｃｏｎｄ　Ｇ－ｔｅｔｒａｄ　ｐｌａｎｅｓ．
Ｃｏｌｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ，ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｍ．ｌｉｌｉｆｌｏｒａ　ｂｙ
ｕｓ，ｗａｓ　ｒｅｐｏｒｔｅｄ　ｈｅｒｅ　ａｓ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｌｉｇｎａｎ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ，ｗｈｉｃｈ
ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ　ａ　ｎｅｗ　ｔｙｐｅ　ｏｆ　ｌｉｇａｎｄ　ｏｆ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ，ａｎｄ　ｍａｙ　ｇｅｎ－
ｅｒａｔｅ　ａ　ｎｅｗ　ｃａｎｄｉｄａｔｅ　ｆｏｒ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ｄｒｕｇ　ｄｅｓｉｇｎ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ｏｎ
ｈｕｍａｎ　ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　Ｇ－ｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ．
１０９第３期　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　光谱学与光谱分析
Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ
［１］　Ｍａｉｚｅｌｓ　Ｎ．Ｎａｔ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ．，２００６，１３：１０５５．
［２］　Ｓｈａｙ　Ｊ　Ｗ，Ｂａｃｃｈｅｔｔｉ　Ｓ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，１９９７，３３：７８７．
［３］　Ｈｅａｌｙ　Ｋ　Ｃ．Ｏｎｃｏｌ．Ｒｅｓ．，１９９５，７：１２１．
［４］　Ｃｏｓｃｏｎａｔｉ　Ｓ，Ｍａｒｉｎｅｌｉ　Ｌ，Ｔｒｏｔｔａ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００９，１３１：１６３３６．
［５］　Ｈａｕｄｅｃｏｅｕｒ　Ｒ，Ｓｔｅｆａｎ　Ｌ，Ｄｅｎａｔ　Ｆ，ｅｔ　ａｌ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２０１３，１３５：５５０．
［６］　Ｗａｎｇ　Ｗ　Ｓ，Ｌａｎ　Ｘ　Ｃ，Ｗｕ　Ｈ　Ｂ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｌａｎｔａ．Ｍｅｄ．，２０１２，７８：１４１．
［７］　Ｋａｗａｉ　Ｋ，Ｆｕｊｉｔｓｕｋａ　Ｍ，Ｍａｊｉｍａ　Ｔ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２００５，１４７６．
［８］　Ｌｉ　Ｚ，Ｔａｎ　Ｊ　Ｈ，Ｈｅ　Ｊ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２０１２，４７：２９９．
［９］　Ｍａ　Ｙ，Ｏｕ　Ｔ　Ｍ，Ｈｏｕ　Ｊ　Ｑ，ｅｔ　ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００８，１６：７５８２．
［１０］　Ｍｏｒｒｉｓ　Ｇ　Ｍ，Ｇｏｏｄｓｅｌ　Ｄ　Ｓ，Ｈａｌｉｄａｙ　Ｒ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ｊ．Ｃｏｍｐｕｔ．Ｃｈｅｍ．，１９９８，１９：１６３９．
［１１］　Ｐａｒａｍａｓｉｖａｎ　Ｓ，Ｒｕｊａｎ　Ｉ，Ｂｏｌｔｏｎ　Ｐ　Ｈ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００７，４３（４）：３２４．
［１２］　Ａｍｂｒｕｓ　Ａ，Ｃｈｅｎ　Ｄ，Ｄａｉ　Ｊ　Ｘ，ｅｔ　ａｌ．Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｒｅｓ．，２００６，３４（９）：２７２３．
［１３］　Ｄａｉ　Ｊ　Ｘ，Ｃａｒｖｅｒ　Ｍ，Ｐｕｎｃｈｉｈｅｗａ　Ｃ，ｅｔ　ａｌ．Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｒｅｓ．，２００７，３５（１５）：４９２７．
［１４］　Ｂｈａｄｒａ　Ｋ，Ｋｕｍａｒ　Ｇ　Ｓ．Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，２０１１，１８１０：４８５．
［１５］　Ｒｅｄｏｎ　Ｓ，Ｂｏｍｂａｒｄ　Ｓ，Ｅｌｉｚｏｎｄｏ－Ｒｉｏｊａｓ　Ｍ　Ａ，ｅｔ　ａｌ．Ｎｕｃｌｅｉｃ．Ａｃｉｄｓ．Ｒｅｓ．，２００３，３１：１６０５．
［１６］　Ｒｅｎˇｃｉｕｋ　Ｄ，Ｚｈｏｕ　Ｊ，Ｂｅａｕｒｅｐａｉｒｅａ　Ｌ，ｅｔ　ａｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２０１２，５７（１）：１２２．
［１７］　Ｄａｓｈ　Ｊ，Ｓｈｉｒｕｄｅ　Ｐ　Ｓ，Ｈｓｕ　Ｓ　Ｄ，ｅｔ　ａｌ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００８，１３０（４７）：１５９５０．
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紫玉兰素Ａ与人端粒Ｇ－四链体相互作用的光谱学研究，
第一个木脂素类衍生物与Ｇ－四链体相互作用
刘婷婷１，周　爽１，贾千澜１，王文蜀１，２＊，闫晓倩１，张文浩３，王帅旗１，焦玉国１
１．中央民族大学生命与环境科学学院，北京　１０００８１　　　　　　　　　
２．中央民族大学，北京市食品环境与健康工程研究中心，北京　１０００８１
３．清华大学，生物医学测试中心，北京　１０００８４
摘　要　人端粒Ｇ－四链体结构是指端粒末端富含鸟嘌呤（Ｇ）的ＤＮＡ序列在一价阳离子（如Ｋ＋和Ｎａ＋）诱导
下通过Ｇ碱基间 Ｈｏｏｇｓｔｅｅｎ氢键连接形成的ＤＮＡ二级结构。能够稳定端粒Ｇ－四链体的配体通常为端粒酶
抑制剂，其可能成为抗肿瘤药物。应用ＣＤ，ＦＲＥＴ，ＮＭＲ光谱方法第一次较全面地研究了一种木脂素衍生
物，紫玉兰素Ａ（ｌｉｌｉｆｌｏｒｉｎ　Ａ）与人端粒序列ｄＧＧＧ（ＴＴＡＧＧＧ）３Ｇ－四链体ＨＴＧ２１的相互作用，采用分子对接
技术进一步研究紫玉兰素Ａ与人端粒序列ｄＴＡＧＧＧ（ＴＴＡＧＧＧ）３Ｇ－四链体 ＨＴＧ２３的结合位点。ＣＤ实验数
据表明紫玉兰素Ａ提高 ＨＴＧ２１解链温度，ＦＲＥＴ实验测得４．０μｍｏｌ·Ｌ
－１紫玉兰素Ａ可以将 ＨＴＧ２１稳定
温度提高３．２℃。ＮＭＲ实验结果表明，加入紫玉兰素Ａ三小时后 ＨＴＧ２１核磁谱图出现明显变化。分子对
接结果表明紫玉兰素Ａ结合到 ＨＴＧ２３较宽沟槽上，结合位点为Ｇ９，Ｇ１０，Ｇ１６和Ｇ１７。紫玉兰素Ａ是第一
个能够选择性稳定人端粒Ｇ－四链体 ＨＴＧ２１的木脂素类衍生物配体。实验结果为以人端粒Ｇ－四链体为靶点
的抗肿瘤药物设计提供了新型候选化合物。
关键词　紫玉兰素Ａ；Ｇ－四链体；人端粒；光谱分析；相互作用
　　＊通讯联系人 （收稿日期：２０１５－０５－０８，修订日期：２０１５－１１－０２）　　
２０９ 光谱学与光谱分析　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 第３６卷