全 文 :江西农业学报 2009, 21(1):77 ~ 78ActaAgriculturaeJiangxi
坡柳种子石油醚提取物对玉米象的生物活性
张玲 ,杨美林 ,秦小萍* ,录丽平
收稿日期:2008-10-13
基金项目:国家自然科学基金项目(30660108);云南省教育厅科研基金资助项目(06Y031B)。
作者简介:张玲(1982-),女 ,云南潞西人 ,硕士 ,主要从事生物农药的研究。*通讯作者:秦小萍。
(云南农业大学农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室、云南农业大学植物保护学院 ,云南 昆明 650201)
摘 要:研究了坡柳种子石油醚提取物对玉米象的毒杀 、熏蒸和种群抑制作用。结果表明 , 坡柳种子石油醚提取物在处
理后 7d和 14d对玉米象成虫毒杀活性的 LC50分别为 1.6646g/kg和 1.1994 g/kg。处理 24 h后熏蒸活性的 LC50为 3252.80
mg/L。在浓度为 2000 mg/kg时 ,对种群的抑制率达到 68.04%。
关键词:坡柳种子;玉米象;生物活性;提取物
中图分类号:S435.132 文献标识码:A 文章编号:1001-8581(2009)01-0077-02
BioactivityofPetroleumEtherExtractfromDodonaeaviscosaSeedagainstSitophiluszaemais
ZHANGLing, YANGMei-lin, QINXiao-ping* , LULi-ping
(KeyLaboratoryforAgriculturalBiodiversityforPestManagement, EducationMinistry;FacultyofPlantProtection, YunnanAg-
riculturalUniversity, Kunming650201, China)
Abstract:ThecontrolingefectsofpetroleumetherextractsfromDodonaeaviscosaseed, includingpoison, sufocationandpopu-
lationinhibition, wereinvestigated.Theresultsshowedthatthemediumlethalconcentrations(LC
50
)ofpetroleumetherextractsto
Sitophiluszaemaiswere1.6646 g/kgand1.1994 g/kgafter7 daysand14 daysrespectively.TheLC
50
ofsufocationtreatmentwas
3252.80 mg/L.Thepopulationinhibitionpercentagereachedto68.04% at2000mg/kgdosage.
Keywords:Dodonaeaviscosa;Sitophiluszaemais;Bioactivity;Extract
随着经济的飞速发展 ,人们对环境及农副产品的质
量要求日益提高 ,化学合成农药的弊端逐渐显现 ,其导致
的环境污染、害虫抗药性等问题也越来越受到关注。玉
米象(SitophiluszeamaisMotschulsky)隶属鞘翅目象甲科 ,
为储藏物的主要害虫之一 ,分布于世界各国 ,为害稻谷 、
小麦、玉米 、薯类及其加工品 ,同时也为害莲籽、天麻等土
特产及中药材 [ 1] 。由于磷化氢、马拉硫磷等药剂的长期
单一使用 ,使玉米象等储粮害虫对这些药剂产生了严重
的抗药性[ 2] 。因此 ,寻找植物源杀虫活性物质已成为储
粮害虫控制中一个新的研究热点。
坡柳(DodonaeavoscosaL.)又名车桑子、透骨草 ,为
无患子科灌木或小乔木 ,在我国西南部、南部和东南部均
有分布 ,盛产于云南、贵州、陕西等地 [ 3] 。坡柳具有消
炎 、解毒等功效[ 4] ,在农业上的应用还很少有人报道。笔
者采用坡柳种子石油醚提取物对玉米象成虫进行了毒
杀 、熏蒸和种群抑制作用试验 ,现将初步试验结果报道
如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试植物 坡柳种子购自云南生态公司。
1.1.2 供试昆虫 玉米象为本实验室自行饲养。以小
麦为饲料 ,饲料使用前置入 80 ℃烘箱内消毒 2 h后 ,调
整含水量为 16% ~ 18%,接入试虫约 100头 ,置于(27 ±
1)℃温箱里饲养 , 15 d后将接入的成虫筛去 ,约 30 d后
玉米象成虫大量发生 ,挑选其中大小基本一致的成虫进
行生物测定 。
1.1.3 供试溶剂与仪器 石油醚;粉碎机(天津市泰勒
斯仪器有限公司);超声波清洗仪(上海申生科技有限公
司);旋转蒸发仪(上海亚荣仪器公司)。
1.2 方法
1.2.1 坡柳种子石油醚提取物的制备 将坡柳种子粉
碎过 40目筛 ,用石油醚浸泡 24 h,超声波提取 30 min。
滤纸过滤 ,滤液用旋转蒸发仪在 40 ℃下减压浓缩 ,即得
到石油醚提取物 ,冰箱中密闭冷藏备用。
1.2.2 提取物对玉米象的毒杀作用 采用饲料拌药
法:称取饲料小麦 100 g于 500 mL广口瓶中 ,分别以
2000、1000、500、250 mg/kg的剂量拌入各提取物 ,以丙酮
为溶剂并设对照 ,每个处理设 3个重复 。每瓶内投入玉
米象成虫各 30头 ,用扎有小孔的瓶盖盖好 ,置于 28 ℃±
1℃的恒温培养箱内饲养 ,分别在 7d、14 d检查结果 ,计
算出校正死亡率 。
1.2.3 提取物对玉米象的熏蒸作用 采用三角瓶密闭
熏蒸法[ 5]测定:用移液管吸取不同体积的石油醚提取物 ,
滴入到一直径为 2 cm的小称量瓶内 ,将其置于三角瓶
(600 mL)底部。然后接入试虫于小纱网袋中 ,将小袋子
悬挂在三角瓶中央 ,迅速用软胶塞封口密闭 。每瓶接入
30头试虫 ,每个处理重复 3次 ,设空白对照 ,置于(27±
1)℃环境下 , 24 h后调查死亡虫数 ,并计算死亡率和校
正死亡率。
1.2.4 提取物对玉米象的种群抑制作用 采用饲料拌
药法测定:将罐头瓶洗净、烘干 ,在瓶中加入 50 g小麦粉
作为饲料 ,并放入 10 g燕麦片以方便玉米象产卵 [ 6] 。将
提取物配制为 4个不同浓度 ,每个瓶中加入 1 mL提取物
的丙酮溶液 ,在滴加的过程中用玻璃棒充分搅拌混合 ,对
照瓶中加入等量的丙酮。待丙酮挥发后 ,每瓶接入玉米
象成虫 30头 ,用薄膜封口 ,置于(27 ±1)℃环境下培养 ,
每个处理 3次重复 。 1个月后筛出成虫 ,约 60 d后记录
虫口数 ,计算种群抑制率。
1.3 计算与数据处理 计算公式如下:
死亡率(%)=死亡虫数总虫数 ×100;
校正死亡率(%)=处理死亡率 -对照死亡率
1-对照死亡率 ×100;
种群抑制率(%)=对照组虫数 -处理组虫数对照组虫数 ×100
采用 DPS3.01软件对数据进行分析 ,并求出毒力回
归方程 、相关系数以及 LC50等相关参数。
2 结果与分析
2.1 坡柳种子石油醚提取物对玉米象成虫的毒杀活性
表 1结果显示 ,在浓度为 2000 mg/kg、处理时间为 2 d
时 ,玉米象的校正死亡率达到 33.33%,随着时间的延
长 ,玉米象的死亡率也逐渐增大 ,在 14 d后 ,校正死亡率
达到了 70.23%。在 7d和 14d时 ,对玉米象的致死中浓
度 LC50分别为 1.6646 g/kg和 1.1994 g/kg。
表 1 坡柳种子石油醚提取物对玉米象的毒杀活性
浓度
(g/kg)
校正死亡率 (%)
7 d 14 d
2.0 63.63±14.90a 70.23 ±13.41a
1.0 18.18±1.97bc 33.72 ±3.49b
0.5 6.83±1.14c 16.28 ±4.03bc
0.25 2.27±1.14c 11.63 ±3.08c
CK 0.02±0.01c 0.04±0.01c
回归方程 y=2.4923x+4.4485
(r=0.9586)
y=1.8169x+4.8565
(r=0.952)
注:表中同列数据后有相同字母表示在 5%水平下无显著差异(P
<0.05)。下同。
2.2 坡柳种子石油醚提取物对玉米象成虫的熏蒸活性
实验结果(表 2)表明 ,坡柳种子石油醚提取物对玉米
象成虫具有明显的熏蒸活性 。在处理 24 h后 ,浓度为
3752.67 mg/L时 ,玉米象校正死亡率达到了 84.44%,并
且随着浓度的降低 ,熏蒸活性也逐步降低 ,在浓度为
2580mg/L时 ,死亡率仅达到 4.44%。提取物对玉米象
熏蒸活性的 LC50为 325 2.80mg/L, 相关系数达到
0.9798,说明此提取物对玉米象成虫具有良好的熏蒸杀
虫效果。
表 2 不同浓度提取物对玉米象成虫的熏蒸活性
浓度(mg/L) 校正死亡率(%)
3752.67 84.44±1.11a
3440.00 71.11±5.88b
3175.33 31.11±1.11c
2886.67 24.44±1.11a
2580.00 4.44 ±4.44d
CK 0d
回归方程 y=16.21x-51.95 (r=0.9798)
注:为处理 24 h后调查分析结果。
2.3 坡柳种子石油醚提取物对玉米象成虫的种群抑制
作用 表 3中数据显示 ,坡柳种子石油醚提取物对玉米
象种群具有一定的抑制效果 ,并且在实验剂量范围内 ,随
着浓度的增大 ,其抑制率也有所提高 ,在浓度为 2000 mg
/kg时 ,抑制率达到 68.04%。
表 3 不同浓度提取物对玉米象成虫种群的抑制作用
处理浓度(mg/kg) 抑制率(%)
2000 68.04±4.12a
1000 64.95±16.49a
500 50.52±4.27a
250 40.20±8.99a
3 讨论
对储粮害虫的防治 ,目前主要使用化学杀虫剂 。由
于长期大量使用化学杀虫剂 ,不仅使储粮害虫产生了严
重的抗药性 ,而且也把储粮害虫的天敌杀死 ,致使某些储
粮害虫繁殖得更快 ,使储粮害虫的防治更加困难[ 7] 。由
于植物性杀虫剂具有低毒、易降解和害虫难以产生抗性
等特点 ,所以从植物中寻找储粮害虫的防治药剂成为目
前研究的热点之一。
本实验室在新型植物源农药的研发中 ,发现云南干
热河谷地区的一种植物 坡柳有较好的农药活性 , 2007
年赵红艳等报道坡柳种子石油醚提取物对米象具有较强
的诱杀活性 [ 9] ;2008年秦小萍等报道了坡柳种子乙醇提
取物对小菜蛾幼虫具有较强的拒食活性 [ 10] ,对菜青虫的
取食和生长发育也有一定影响[ 11] 。本研究在继续寻找
坡柳种子杀虫谱过程中 ,发现其代谢产物对玉米象有较
明显的熏蒸作用和一定的种群抑制作用 。该结果再次显
示了坡柳代谢产物的杀虫广谱性和多种的杀虫方式 。在
种群抑制作用实验中 ,本实验只对各处理的 F1代数量进
行了观察 ,而对卵的孵化、幼虫生长发育 、化蛹等的影响
还有待进一步研究。
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(下转第 82页)
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全禁止黑雀麦的传入 ,从对经济的危害性及环境影响等
考虑 ,该方案积极有效。但是近年来我国是全球经济的
火车头 ,美国是世界超级大国 ,中美贸易密不可分 ,如果
完全禁止 ,将对世界贸易及国家的粮食安全和农产品贸
易产生严重的影响 。所以 ,该方案与风险分析的原则不
完全一致 ,建议不予采纳。
3.2.2 备选方案 2的风险评估 这种方案可以将对贸
易的消极影响降低到最小 ,可避免备选方案 1带来的不
足 ,又符合 SPS协定的原则和国际管理的要求 。消极之
处就是装货前采取的措施可能要花费较高的人力、物力 ,
但从长远考虑 ,该成本小于实施方案 1带来的损失 ,这种
方案从整体上优于备选方案 1。
3.3 小结 从上述两个备选方案中 ,建议采取备选方
案 2,将黑雀麦列为检疫性有害生物 ,并对外公布 ,适当
采取针对性的措施 ,把黑雀麦拒之于国门之外 。该方案
符合 WTO中 SPS协定的原则 ,同时也与我国的农产品
贸易相一致。
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