全 文 ： 科技简报
[作者简介] 林焕泽 ,男 ,学士 ,主管药师 ,电话:0668-2922686
高效液相色谱法测定火炭母中槲皮苷
的含量
林焕泽 ,吴秀荣　(茂名市人民医院 ,广东 茂名 525000)
[ 摘要] 　目的:测定火炭母中槲皮苷的含量。方法:采用
HPLC 法 , 色谱柱为 Diamonsil RP-18e(250 mm×4 . 0 mm , 5
μm);流动相为乙腈-四氢呋喃磷酸水溶液(四氢呋喃∶磷酸水
溶液=5∶95 , v /v , pH 3. 0)=37∶163;柱温:35 ℃;检测波长:
365 nm。结果:以峰面积积分值 A 为纵坐标 ,进样量 C(μg)
为横坐标 ,得回归方程:A =1 188 . 3C- 15. 368 , r=1 . 000 0 ,
表明槲皮苷在0. 8～ 10. 0 μg 范围内线性关系良好;平均加样
回收率为98 . 41%, RSD为 1. 401%。结论:采用 H PLC 法测
定火炭母中槲皮苷含量 ,方法准确 、可靠 ,值得推广应用 。
[ 关键词] 　火炭母;槲皮苷;含量测定
[中图分类号] R927. 2　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1001-
5213(2006)08-1032-02
　　火炭母为多年生蓼科植物(Polygonum chinense L.)的
干燥枝叶 ,主要分布于两广地区 , 用于湿热泄泻 、痢疾 、黄疸 、
咽喉疼痛 、湿热疮疹[ 1] 。火炭母曾收载于《广东省药材地方
标准》中 ,但没有含量测定项 ,缺少可靠的定量控制指标。笔
者采用 H PLC 法测定了火炭母中槲皮苷的含量 ,完善了火炭
母药材的质量控制体系。
1　材料
1. 1　药材　本实验所用火炭母药材样品来源见表 1 , 经鉴定
为蓼科植物 Polygonum chinense L.的干燥枝叶。
表 1　供试样品
Tab 1　Samples for e xperiment
编
号 来　　　　源 采收季节
1 广东产, 2005年 1月购于深圳一致药店 2003年秋(老叶)
2 广东产, 2005年 1月购于康之选药店 2003年秋(老叶)
3 广东连县产 , 2004年 12月购于广州清平市场 2003年秋(嫩叶)
4 广东产, 2005年 1月购于鸿泽药店 2003年秋(老叶)
5 广东产, 2005年 1月购于裕康药店 2003年秋(老叶)
6 广东产, 2005年 1月购于金凤药店 2003年秋(嫩叶)
7 广东产, 2005年 1月购于广州采芝林 2003年秋(老叶)
8 广东清远产 , 2004年 12月购于清平市场 2003年秋(嫩叶)
9 广东产, 2005年 1月购于万康药店 2003年秋(老叶)
10 广西产, 2004年 12月购于广州清平市场 2003年秋(嫩叶)
1. 2　仪器与试药　Dionex 高效液相色谱仪(美国戴安公
司);槲皮苷对照品(含量测定用 , 中国药品生物制品检定
所), 所有试剂均为分析纯。
2　方法
2. 1　样品溶液的制备
2. 1. 1　对照品溶液的制备　精密称取减压干燥至恒重的槲
皮苷对照品10 . 07 mg , 置 25 m L量瓶中加甲醇至刻度 ,摇匀 ,
即得(每 1 mL 含槲皮苷4. 028 mg)。
2. 1. 2　供试品溶液的制备　精密称取火炭母药材粉末(过 2
号筛)0 . 5 g ,置索氏提取器中 ,加入甲醇 100 m L , 105 ℃水浴
加热回流3 . 5 h ,至提取器内液体近乎无色 , 取出 , 回收溶剂 ,
用甲醇定容到 10 mL ,摇匀 , 经0 . 45 μm 微孔滤膜过滤 , 取续
滤液 1 m L ,即得。
2. 2　色谱条件与系统适应性
2. 2. 1　色谱条件　色谱柱为 Diamonsil RP-18e(250 mm×
4 . 0 mm , 5 μm);流动相为乙腈-四氢呋喃磷酸水溶液(四氢
呋喃∶磷酸水溶液=5∶95 , pH 3 . 0)=37∶163;柱温35 ℃;检
测波长 365 nm。
2. 2. 2　系统适应性试验　分别精密量取槲皮苷对照品溶液
10 μL及供试品溶液 20 μL ,注入液相色谱仪测定 , 在3 . 1色
谱条件下槲皮苷与其他组分达到基线分离 , 分离度 R>1. 5 ,
理论板数按槲皮苷计算不少于5 000 ,见图 1 ,图 2。
图 1　槲皮苷对照品色谱图
Fig 1　Chromatogram s of qu erci t rin
图 2　火炭母药材色谱图
Fig 2　Chromatogram s of Polygonum ch inen se
2. 3　方法学考察
2. 3. 1　线性及线性范围　精密称取减压干燥置恒重的槲皮
苷对照品适量 ,用甲醇配制成浓度为4 . 028 g L - 1对照品溶
液。按上述色谱条件 , 分别进样 2 , 5 , 10 , 15 , 20 , 25 μL;测定 ,
以峰面积积分值 A 为纵坐标 , 进样量 C(μg)为横坐标 , 得回
归方程:A=1 188 . 3C - 15. 368 , r =1 . 000 0 , 表明槲皮苷在
0 . 8 ～ 10 . 0 μg 范围内线性关系良好 ,可用外标法进行测定和
计算。
2. 3. 2　精密度试验　取上述对照品溶液 10 μL , 按相同的色
谱条件重复进样 5 次 , 依法测定 , 计算槲皮苷对照品峰面积
的相对标准偏差 ,结果 RSD为1. 36%,表明精密度良好。
2. 3. 3　稳定性试验　取槲皮苷对照品溶液和火炭母供试品
溶液 ,室温下分别放置 0 , 2 , 4 , 12 , 24 , 48 h 后 , 依法操作 ,测定
峰面积 ,计算槲皮苷峰面积的相对标准偏差。结果:对照品
RSD为0. 809%, 供试品 RSD 为1 . 94%, 表明稳定性好。
2. 3. 4　重复性试验　精密称取火炭母药材(购于广州清平
市场 ,产地为广西)6份样品 , 按供试品溶液制备方法操作 , 每
1032 中国医院药学杂志 2006年第 26卷第 8期 Chin H osp Pharm J , 2006 Aug , Vol 26 , No. 08
份进样 2 次 ,每次进样量为 20 μL , 计算槲皮苷的含量及相对
标准偏差 ,结果 RSD 为1. 48%,表明方法重复性好。
2. 3. 5　加样回收率试验　根据线性范围设计槲皮苷含量高
中低 3 种水平 , 精密吸取已测知槲皮苷含量的火炭母药材
(购于广州清平市场 , 产地为广西)适量 ,每水平 3 份 , 再分别
按要求精密加入一定量的对照品 ,按供试品溶液制备方法项
下操作 ,依法测定 , 计算回收率 ,结果见表 2 , 表明方法回收率
好。
表 2　加样回收率试验
Tab 2　Results of recover y test
原有量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收
率 /%
RSD
/%
0. 204 7 0. 241 68 0. 438 9 96. 905 98. 41 1. 401
0. 235 3 0. 241 68 0. 471 0 97. 526
0. 273 9 0. 241 68 0. 508 7 97. 153
0. 934 5 1. 007 0 1. 934 4 99. 295
0. 932 7 1. 007 0 1. 931 3 99. 165
0. 785 5 1. 007 0 1. 772 5 98. 010
1. 893 9 1. 805 1 3. 697 5 99. 917
1. 937 6 1. 805 1 3. 689 7 97. 064
1. 846 4 1. 805 1 3. 663 2 100. 646
2. 3. 6　最小检出量与定量限　取上述槲皮苷对照品溶液 ,
稀释至4. 028 μg mL - 1 , 分别进样 3 μL 和 5 μL , 依法测定。
结果:槲皮苷的最小检出量为1 . 21×10- 2 μg , 槲皮苷定量限
为4. 03×10- 2 μg。
3　结果
取 10 批火炭母药材 ,照供试品溶液制备方法操作 ,每批
平行操作两份 ,分别精密吸取供试品溶液各 20 μL ,每份进样
两次 ,依法测定 , 按外标法计算样品中槲皮苷的含量 , 结果见
表 3。
表 3　火炭母药材中槲皮苷含量测定结果
Tab 3　Results of determina tion of que rcitrin in Polygonum
Chinense
样品编号 槲皮苷含量 /mg g- 1
1 2. 021
2 0. 874
3 2. 505
4 0. 816
5 1. 351
6 2. 837
7 0. 600
8 1. 794
9 0. 852
10 1. 524
[作者简介] 郑承红 ,女 ,博士 ,副主任医师 ,电话:85855908-420 , E-m ail:chzheng28@yahoo. com. cn
4　讨论
本实验首次采用 H PLC 法测定了火炭母药材中槲皮苷
的含量 ,为评价火炭母药材质量提高了定量依据 , 完善了该
药材的质量标准。该方法准确 、可靠 , 值得推广应用。
参考文献:
[ 1] 　向红 ,林长松 ,古经会 , 等.水城蓼科植物资源及其药用价值研
究[ J] . 黔西南民族师范高等专科学校学报 , 2003 ,(3):81.
[ 收稿日期] 2005-09-22
糖脉宁对糖尿病大鼠内皮依赖性血管
舒张功能的影响
郑承红 , 柯淑红 , 马威　(武汉市第一医院 , 湖北 武汉 ,
430022)
[ 摘要] 　目的:观察中药糖脉宁对糖尿病大鼠大血管内皮细
胞功能的影响。方法:采用尾静脉注射四氧嘧啶制备 DM 大
鼠模型 ,造模成功后分组 , 用药治疗 4 周后采血并检测内皮
素(ET)、一氧化氮(NO)水平 , 结果行组间对照分析。 结果:
病理组大鼠血清 ET 水平明显增加 、NO水平明显减少 ,与正
常组相比有明显的统计学意义(P<0. 01)。糖脉宁可以降低
ET 、增高 NO ,与病理组及优降糖组相比较 , 均有明显的统计
学意义(P <0. 01);与中西医结合治疗组相比 , NO 轻度下
降 , ET 轻度增加 , 但是没有明显的统计学意义(P >0 . 05)。
结论:糖脉宁可以降低 ET , 增加 NO 的合成或释放 , 可以改
善内皮细胞功能 ,疗效明显优于优降糖组 , 与中西医结合治
疗组疗效相当。
[ 关键词] 　糖脉宁 /中药;糖尿病;内皮细胞
[中图分类号] R285. 5　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1001-
5213(2006)08-1033-02
　　一氧化氮(NO)和内皮素(endo thelin , ET)是一对具有
拮抗效应的血管活性物质 ,在血管平滑肌功能及血管张力的
调节中具有重要作用 ,参与多种疾病的病理生理过程。糖尿
病时 ,多种代谢因素作用导致内皮细胞 EC 功能紊乱 , 是动
脉粥样硬化的早期改变[ 1] 。血清 NO 下降 、ET-1 增高反应
了血管内皮细胞的功能紊乱 ,同时也诱发和加剧了糖尿病血
管病变(DMC)的发展。从改善内皮细胞功能紊乱方面入手
进行研究 ,已成为一条防治糖尿病血管病变的新途径。
1　材料
实验动物:Wistar 大鼠 47 只 , SPF 级 , ♀, 200 ～ 220 g 。
四氧嘧啶(Allox an ,购自 SIGMA 公司 , 批号 39H1482);中药
糖脉宁(自行煎制);西药优降糖(哈药集团制药四厂 , 批号
20001102)。
2　方法
对照组自由饮食 , 模型组参照潘性源 、王吉甫的方法[ 2] ,
以四氧嘧啶尾静脉注射制备糖尿病模型。注射四氧嘧啶后
随机血糖大于 10 mmo l L -1 , 并维持 3 周以上 , 为大鼠糖尿
病成功模型。实验分为 5 组 ,每日灌胃一次。糖脉宁治疗组
(9 只):灌服1. 25 g mL - 1糖脉宁 2 m L;中西药结合治疗组
(10 只):灌服1 . 25 g mL - 1糖脉宁 1 m L+3 . 87 g L - 1优降糖
悬浮液 1 m L;优降糖治疗组(10 只):灌服3 . 87 g L - 1优降糖
悬浮液 2 m L ;病理组(8 只):灌服生理盐水 2 m L;正常对照
组(10 只):灌服生理盐水 2 mL。 各组治疗 30 d 后采血送
检 ,处死动物。
统计学处理　实验数据用 x±s来表示 , 采用 SPSS 12 . 0
统计软件进行分析。
3　结果
病理组大鼠血清 ET 水平明显增加 、NO 水平明显减少 ,
1033 中国医院药学杂志 2006年第 26卷第 8期 Chin H osp Pharm J , 2006 Aug , Vol 26 , No. 08