全 文 ：中国中医药科技 2以y7 年 1月第 14 卷第 1期 anJ .么力 7 v ol . 14 No . 1
石香蒸 、 苏州莽芋抑菌作用的实验研究 ’
曾晓艳 吴巧凤 , 程东庆 ,
(浙江中医药大学加以 级研究生 ·杭州 31哪 3 ’ 浙江中医药大学药学系 · 杭州 31 X() 53 )
摘 要 目的 : 比较石香衡、 苏州荞等水提物和醉提物的体外抑菌作用 。 方法 : 采用二倍稀释法浏定提取
物的最小抑菌浓度。 结果 : 石香菊水提物抑菌作用显著强于醉提物 ; 苏州莽等水提物和醉提物的抑菌作
用相近 ; 苏州井等对金黄色荀萄球菌的抑制效果较为显著 , 最小抑菌浓度为 0 . 125 砂耐 。 结论 : 苏州莽等
水提物和醉提物与石香蓄的水提物均具有一定的抑菌作用 ,苏州莽等可进一步开发利 用 。
主皿词 石香萦 /药理学 苏州莽等/药理学 细菌l药物作用 体外研究
苏州莽芋两种提取物的 犯 C【, 】。 用培养基将药物稀释成含
生药量为 1 .的 、 0 . 50 、 0 . 25 、 0 . 125 、 0 .伪乃 、 0 .仍 125 以d , 加人
0
.
ld 各菌液 ( 0 . 5麦氏比浊浓度 ) , 37 ℃培养 18 小时后接种
于 加1平板 37 ℃培养过夜 ,观察结果 ,未见细菌生长的最低
浓度即为如 C 。
3 结果
3
.
1 石香萦的抑菌作用 见表 1 一 2o
表 1 石香燕水提物的抑菌作用结果
石香蔫水提物的浓度 (以d )
供试荫液 —1 0 . 5 0 . 25 0 . 125 0 .伪乃 0 .仍125+
石香蒋 (对比如 d链了恻臼衬幽如 ) 、 苏州莽芋 (川比如幻配肠 `
~
肠. 训血 )均为石算芋属一年生草本植物。 有关石香
落 、 苏州葬芋等的挥发油和化学成分的药效研究国内外已有
所报道 ,石香籍挥发油具有广谱抗菌作用和提高免疫应答力
以及抗流感 戊 病毒作用川 ,其水煎剂有显著抗菌作用 l2] ,且
文献报道苏州葬芋与石香蒋有相同的功用3[] ,但对苏州莽芋
非挥发成分的抗菌作用报道较少 。 因而本文采用二倍稀释
法测定石香潇和苏州莽芋不同提取物的最小抑菌浓度 ,为明
确苏州莽芋非挥发性成分的抗菌作用及其开发利用提供科
学实验依据 。
1 实脸材料
1
.
1 药材 石香猪 、苏州莽芋采自浙江浦江 ,经浙江中医学
院药用植物教研室姚振生教授鉴定分别为唇形科植物石香
籍 (对比么 以山留心自赫叮如 ) 、苏州莽芋 ( 3枷由 ” 阅肠说心臼月如。 -u
山 ) 。
1
.
2 菌种 实验菌种 :金黄色葡萄球 ( A TC ( 2 5923 ) 、 大肠杆
菌 ( N代口巧卯 2 ) 、 铜绿假单胞菌林 1℃口 785 3 ) 。 临床分离株 :
伤寒杆菌 、痢疾杆菌 、 表皮葡萄球菌 ,由浙江中医学院生命科
学系微生物免疫教研室提供 。
1
,
3 培养基 水解酪蛋白培养基 ( M 一 H 培养基) 。
2 方法与结果
2
.
1 药材处理 分别制备石香燕 、 苏州算芋的水提物和醉
提物。
水提物 :称取 l鲍干燥药材 ,加人 20 倍药材重的水卯℃
水浴浸提两次 ,每次 3 小时 ,合并滤液 ,浓缩至一定体积 ,加
人无水乙醉至无絮状沉淀产生 ,抽滤并回收乙醇 ,浓缩挥干 ,
用灭菌水配制成含生药 2砂d 的溶液 ,灭菌备用 。
醉提物 :称取 10 9 干燥药材加人 20 倍最 so % 的乙醉
80 ℃水浴锅中回流提取两次 ,每次 4 小时。 合并滤液 ,回收
乙醉至无醇味 ,放冷后用乙酸乙醋萃取 , 回收乙酸乙酷 ,浓缩
挥干 ,用灭菌水配制成含生药 2砂d 的溶液 ,灭菌备用 。
2
.
2 体外抑菌作用 纸片琼脂扩散法初步观察两种药材水
提物和醉提物的抑菌作用 .[] ,采用倍比稀释法测定石香蒲和
金黄色葡萄球菌 (幻℃C 25 鱿巧 ) 一 + + + +
大肠杆菌 ( A TC C 25 鱿坟 ) - - 一 + +
铜绿假单胞菌 (川陀 C 刀853 ) - - 一 + +
伤寒杆菌 - - 一 + +
痢疾杆菌 - 一 + 十 +
表皮葡萄球菌 - 一 十 + 十
+ 表示细菌生长 , 一表示细菌不生长 (被抑制 ) (下同 )
表 2 石香落醉提物的抑菌作用结果
供试菌液 石香籍醉提物浓度 (以时 )
! 0
.
5 0
.
25 0
.
125 0
.肠乃 .0 仍 125
++金黄色葡萄球菌临 TC C 25 鱿纷 ) 土 士 +
大肠杆菌林 TCC 25 9 22 ) 士 + +
铜绿假单胞菌 “ TCC 27 85 3) + + +
伤寒杆菌 + + +
痢疾杆菌 土 + +
表皮葡萄球菌 + +
+ +
.3 2 苏州莽筝的抑菌作用 见表 3 一 4o
表 3 苏州葬芋水提物的抑菌作用结果
供试菌液
苏州算芋水提物的浓度 (以湘 )
! 0
.
5 0
.
25 0
.
! 25 .0 臼业5 .0 仍 125
金黄色葡萄球菌 ( ATC C 25 鱿乃 ) -
大肠杆菌 ( A代 c 25 鱿坦 )
钢绿假单胞菌 ( ^代c 刀85 3)
伤寒杆菌 -
痢疾杆菌 -
表皮葡萄球菌 -
, 浙江省教育厅课题
3 6中国中医药科技 2《刀 7年 1月第 4 1卷第 1期 Jan .么刃 7粗 . 4 1o N .l
表 4苏州莽芋醉提物的抑菌作用结果
供试菌液 苏州莽芋醇提物的浓度 (砂以 )
1. 05 0
.
5 20
.
15 2. 0伪 5 2. 0仍 15 2
金黄色翻萄球菌 (们℃ C 5 2鱿乃 )- - -一 + +
大肠杆菌 (川陀 C 5 2优乙 )-一 + + + +
锅绿假单胞菌 (A TC C 7 2助 3 )-一 十 + + +
伤寒杆菌 -一 + + + +
痢疾杆菌 -一 + + +十
表皮葡萄球菌 -一 + +十 十
3讨论
3
.
1由表 1和表 2可知 ,石香落水提物抑菌作用显著强于
其醇提物 ,醉提液的抑菌作用不明显 ;水煎液的抑菌作用与
文献报道较一致 2tJ 。
3
.
2 由表 3 和表 4 可知 ,苏州莽芋水提物和醉提物对金黄
色葡萄球菌的抑制效果较为显著 ,犯 C 均为 0 . 125 砂d 。 药理
和临床试验表明 ,苏州葬芋为一广谱抗菌药 ,其水煎剂具有
广谱抗菌作用 I’J ,其浸青有明显的治疗流感作用 ,本研究结
果与文献记载较为吻合 ,并进一步发现其醇提物也有一定的
抑菌作用。
3
.
3 从实验结果可知 ,苏州算芋与石香猪均有一定的抑菌
作用 ,且两者的醉提物苏州莽芋明显优于石香落 ,提示苏州
葬芋在抑菌作用方面与石香籍有相应的应用潜力 ,可作为石
香燕的补充应用药材。 苏州葬芋在浙江资源十分丰畜 ,全省
各地均有出产 ,并且对金黄色葡萄球菌等细菌有良好的抑制
生长效果 ,在化妆品 、洗涤剂、 牙膏 、空气净化剂等医药 、 日常
用品及洗涤行业有巨大的应用价值和前景 ,值得栽培 。
参考文献
1 严银芳 , 陈晓 , 杨小清 ,等 .石香燕挥发油对流感 3A 病毒的抑制
作用 .徽生物学杂志 . 2X() 2 , 1( 2 ) : 32
2 葛冰 ,卢向阳 .易克 , 等 . 石香落的研究概况 . 中药材 ,加以 . 刀 ( 4 ) :
叨2
3 浙江药用植物志编写组 . 浙江药用植物志 (下册 ) . 杭州 :浙江科学
技术出版社 , 19侧) : l伪岭
4 许钢 , 张红 .竹叶 、 六月霜提取物抑菌作用 比较研究 . 食品科技 ,
么刃 1 , 6 : 38
5 陈明 ,段萍 ,陈金秀 . 乌旅与黄连 、 黄等、 穿心莲抗菌活性的比较 .
右江民族医学院学报浏刃 l , 23 (4) : 5 23
6 吴风梧 ,程保族 ,戚金风 ,等 .苏州莽芋成分的研究 n . 苏葬芋黄阴
的分离及其结构 . 药学学报 , l臾。 , 17 ( 2) : 151
(收稿 侧1万 一 01 一劝 )
激疙穴位蔑射对 大双自然杀份 佃 胞 活性影响 的实脸研 究 ’
阮步青 杨 锋 江凌训 杨东晓 , 陈秀峰 ,
(浙江省立同德医院 ·杭州 31 0 12 ’ 浙江大李信息与 电于工程学系·枕州 31 加2 7 )
1 材料与方法
1
.
1 实脸动物 Wi妞 大鼠 巧 只 ,雌性 , 体重为 180 一 2以殆, 由浙江
省中医药研究院动物房提供 。
1
.
2 药物 环礴院胶( C I飞 ) : 发肠喇瓶 , 批号 01 12一刃 12 , 上海华联制
药厂生产 。
1
.
3 取穴 百会穴位于借脉经 (背部正中线 )与两耳连线的交叉点 ,
实脸时将百会穴周围鼠毛剪净 l a l产。 取穴采用实脸针灸学中的 “ 高
声导低阻抗法” 准确定位川 。
1
.
4 激光服封 使用波长为 1 . 5脚 (真皮在 1 . 5 脚 左右有一个较
高的透射峰 )的高往定半导体激光器 (电子工业部第 41 研究所新技
术开发工程中心研制 ) , 出纤光功率为 l m w , 通过固定在直径 为
0
.
7二 的注射针内的石英单模光纤导人 ,将光纤从针尖反向穿人 . 与
注射针基部接口处平面相齐 ,光纤与注射针尖用 夕刀 胶水固定 ,实脸
时将注射针基部垂直放在穴位上 ,进行激光穴位表面照射 。
1
.
5 分组 15 只大鼠分为 3组 :正常对照组 :腹腔注射生理盐水 ;其
它 2组腹腔注射环确酞胶 ( c lx ) , 剂盆 , 玩喇掩 , 3 天后进行第 2次注
射 ,剂 t , 坛留纯 ;模型组 :造模后不进行任何治疗 ;而观察组从造棋
后第 2天开始进行激光穴位表面照射 ,第 1 天治疗 30 分钟 , 第 2 、 3 天
分别治疗 25 分钟 , 共治疗 3天 。 3天后处死大鼠 , 取脾脏侧自然杀伤
( N K )细胞活性。
1
.
6 N K 细地活性洲定 脾脏在无菌条件下被取出 , 制成 1 x l护 /耐
细胞悬液 ,配取 0 . 1而 加人% 孔细胞培养板中 ,再用 3 H一1’d R同位素
, 第 17 批中国博士后科研基金支持项目
标记的 YA C 一 I细胞 0 . l d (作为靶细胞 )混合 , 一式两孔 . 培养板放
人 37 ℃ 5% C仇 培养箱中 16 小时 , 收集细胞 ,侧定 CPM (每分钟脉冲
数 ) , NK 细胞活性用细胞毒指数用 a % 表示 。 a % 二 〔1 一 ( NK 细胞
+ 靶细胞 ) l( l翻 0 + 靶细胞 ) ) x l田% 。
1
.
7 统计方法 数据均以于士 : 表示 , 配对资料用 : 或 r 检脸。
2 结果 见附表。
附表 对免疫功能低下大鼠 NK 细胞活性的影响 (奋士 : )
组别 n NK 细胞活性 ( a % )
正常对照组 5 31 . 2 出 .6 2 .
棋型对照组 5 妈 . 2 , .2 9
激光照射组 5 31 . 7 出 19 :7
与模型对照组比较 , P < 。 . 01
3 讨论 目前用于激光针灸的以 eH 一 Ne 激光器为最多 , 其次是
C仇 激光器 、扭离子激光器等等 ,而半导体激光由于它特殊的优势和
潜在的应用在激光医学领域也越来越受关注2tJ 。 目前临床上用激光
照射来改替化疗后免疫功能低下的报道并不多见 。 本文实脸结果表
明 :治疗组的 NK 细胞活性明显高于模型对照组 ,提示激光照射在改
善 N K 细胞活性方面有明显作用 ,值得进一步探讨和研究。
, 考文橄
1 祝总典 ,郝金凯 . 针灸经络生物物理学 . 北京 : 北京出版社 , 1如 9 :
67
2 李峻亨 ,高孟林 . 半导体激光器一激光医学发展推广的希望 . 中
国激光医学杂志 , 1创拓 ; 5 ( 3) : 125
(收稿 : 2X( 拓 一肠 一仍 )