全 文 ：3 讨论
3. 1 在 200 ～ 400nm 波长范围内，对丹参酮ⅡA 进行
紫外扫描，结果丹参酮ⅡA 在 270nm 的波长处有最大
吸收，故以 270nm 作为测定波长。
3. 2 流动相的选择:经多次试验，以甲醇-水按(73 ∶
27)的比例为流动相，色谱对称性较好。
3. 3 对照品 丹参酮ⅡA 及样品的制备均应使用棕
色容量瓶，以免丹参酮ⅡA 氧化。
参考文献
［1］ 国家药典委员会 .中华人民共和国药典(一部)［S］. 北京:化学工
业出版社，2005:52.
(本文校对:庞春渝 收稿日期:2010 － 07 － 02)
高效液相色谱法测定肋柱花四味汤散中
盐酸小檗碱的含量
杨 卿1 马睿婷2 乔俊缠3*
摘要:目的 利用高效液相色谱法测定肋柱花四味汤散中盐酸小檗碱的含量。方法 采用 C18柱，流动相为乙腈 － 0. 05mol·
L － 1磷酸二氢钾(用磷酸调节 pH 至 3)(30∶ 70);流速 1. 0ml·min － 1;检测波长 346nm;柱温 25℃。结果 盐酸小檗碱在 0. 03914 ～
0. 3914μg 范围内线性关系良好(r = 0. 9999)，平均加样回收率为 99. 8%，RSD 为 2. 62%。结论 该法简便、准确、可靠、重复性好，
可用于肋柱花四味汤散的质量控制。
关键词:高效液效色谱法;肋柱花四味汤散;盐酸小檗碱;实验研究
doi:10. 3969 / j. issn. 1003-8914. 2011. 02. 027 文章编号:1003-8914(2011)-02-0236-02
Content Determination of Berberine in Lomatogonium rotatum Soup-4 by HPLC
Yang Qing1 Ma Ruiting2 Qiao Junchan3*
(1. The Seventh People’s Hospital of Datong，Shanxi 037005;2. The third Hospital of Inner Mongolia，Hohehaote 010010;
3. Inner Mongolia Medical College，Hohehaote 010110)
Abstract:Objective The use of HPLC to content berberine in Lomatogonium rotatum soup-4. Methods Using C18 column，acetonitrile-
0. 05mol·L － 1 KH2 PO4(adjust pH to 3 with H3 PO4) (30 ∶ 70)as mobile phase;flow rate 1. 0ml·min
－ 1;detection wavelength 346nm;
column temperature 25℃ . Results The samples of berberine show a good linear relationship in 0. 03914 ～ 0. 3914μg (r = 0. 9999)，with
an average recovery rate was 99. 8%，with RSD 2. 62% . Conclusion The method is simple，accurately，specific，and it can be used as
concentration of Lomatogonium rotatum soup-4.
Key words:HPLC;Lomatogonium rotatum soup-4;Berberine
作者单位:1.山西省大同市第七人民医院(大同 037005);
2.内蒙古第三医院(呼和浩特 010010);
3.内蒙古医学院(呼和浩特 010110)
※指导老师
肋柱花四味汤散是蒙医常用方剂之一。本复方由
肋柱花、黄连、瞿麦、栀子四味蒙药组成，具有清“协
日”、凉血、调糟归精之功效，临床上用于治疗血热相
搏、肝胆热、咽喉肿痛、口渴烦躁等症［1］。黄连为方中
的主药之一，其主要活性成分为盐酸小檗碱。为了控
制该药的内在质量，保证临床用药准确有效，本文采用
高效液相色谱法测定了肋柱花四味汤散中盐酸小檗碱
的含量。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 L-2000 高效液相色谱仪(日本日立公
司);BT25S 电子天平(德国赛多利斯集团);FA2004
电子天平(梅特勒 － 托利多仪器(上海)有限公司);
AS3120 超声液清洗器(天津奥特赛恩斯仪器有限公
司)。
1. 2 试药 盐酸小檗碱对照品(中国药品生物制品
检定所，批号 110713-200609);肋柱花四味汤散(内蒙
古中蒙医院国家蒙药制剂中心，批号 050621、060314;
内蒙古库伦蒙药厂，批号 060419);乙腈为色谱纯;水
为市售娃哈哈纯净水;其它试剂试药均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱为 Thermo Quent C18(5μm，
·632· 光明中医 2011 年 2 月第 26 卷第 2 期 CJGMCM February 2011. Vol 26. 2
250mm × 4. 6mm);流动相为乙腈 － 0. 05mol·L － 1磷酸
二氢钾(用磷酸调节 pH 至 3)(30:70);流速 1. 0ml·
min － 1;柱温 25℃;检测波长:346nm;理论塔板数以盐
酸小檗碱计算应不低于 3000。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的盐
酸小檗碱对照品 3. 914mg，置 100ml 量瓶中，加甲醇溶
解并稀释至刻度，摇匀，即得(每 1ml 含盐酸小檗碱
39. 14μg)对照品溶液。
2. 3 供试品溶液的制备 取肋柱花四味汤散 0. 5g，
精密称定，置 100ml 量瓶中，加盐酸 － 甲醇(1 ∶ 100)
95ml，超声处理(功率 120W，频率 25kHz)30min，放冷，
加盐酸 －甲醇(1∶ 100)至刻度，摇匀，滤过。精密吸取
1ml 滤液，置 10ml 量瓶中，加水定容至刻度，摇匀。分
别吸取对照品溶液与供试品溶液 10μl 注入高效液相
色谱仪。结果表明，供试品溶液在对照品溶液的相对
应位置出现吸收峰。
2. 4 阴性对照溶液的制备 按处方取除黄连外的其
它药材，依制备工艺制成不含黄连的样品，按供试品溶
液的制备方法制备阴性对照溶液。分别吸取阴性对照
溶液与供试品溶液 10μl 注入高效液相色谱仪。结果
表明，阴性对照溶液在供试品溶液与对照品溶液相对
应位置未出现吸收峰。
2. 5 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液 1. 0、
2. 0、4. 0、6. 0、8. 0、10. 0 μl 进样，测定其峰面积值，以
峰面积对进样量(μg)进行回归，求得回归方程为 Y =
15387119. 6X － 1659. 9， r = 0. 9999，线 性 范 围 为
0. 03914 ～ 0. 3914μg。
2. 6 精密度实验 取同一批号肋柱花四味汤散，按供
试品项下方法处理后，依上述色谱条件重复进样 5 次，
测得其峰面积的 RSD 为 0. 46%。
2. 7 稳定性实验 精密吸取同一供试品溶液分别于
0、1、2、4、8、12、20、24h 进样测定峰面积，结果 RSD 为
0. 98%，表明供试品溶液在 24h 内稳定。
2. 8 重复性实验 取同一批号的样品 5 份，分别按供
试品项下方法处理后，按上述色谱条件进行含量测定，
并对所得数据进行处理，盐酸小檗碱含量的 RSD 为
1. 51%。
2. 9 加样回收率实验 精密称取已测含量的肋柱花
四味 汤 散 0. 3g，共 6 份，各 精 密 加 入 浓 度 为
0. 10046mg /ml 的盐酸小檗碱对照品溶液 20ml，分别
按供试品项下方法处理后，进行测定并计算回收率。
结果见表 1。
2. 10 样品含量测定 按供试品溶液制备方法制成样
品溶液，每次进样 10μl，测定峰面积，分别测定了 3 个
批号的肋柱花四味汤散中盐酸小檗碱的含量。结果
(3 次平均值)见表 2。
表 1 加样回收率实验结果
序号
样品中量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1 0. 1148 0. 1053 0. 2254 105. 0
2 0. 1148 0. 1053 0. 2179 97. 9
3 0. 1149 0. 1053 0. 2188 98. 7
4 0. 1149 0. 1053 0. 2187 98. 6
5 0. 1149 0. 1053 0. 2201 99. 9
6 0. 1148 0. 1053 0. 2188 98. 8
99. 8 2. 62
表 2 样品中盐酸小檗碱的含量测定结果
批号 盐酸小檗碱含量(mg / g) RSD(%)
050621 1. 1521 0. 0045
060314 1. 2147 0. 0159
060419 1. 6183 0. 0001
3 讨论
3. 1 实验中对超声提取和回流提取两种方法进行了
考察，结果超声提取优于回流提取。同时也对超声时
间进行了考察，结果提取 30min 后盐酸小檗碱含量不
再增加，故选用超声 30min 进行提取。
3. 2 根据报道，比较了乙腈 － 0. 1% 磷酸溶液(40 ∶
60)(每 100ml 加十二烷基磺酸钠 0. 1g)系统［2］、乙腈
－ 0. 03mol· L － 1 磷酸二氢钾溶液(55 ∶ 45)系统［3］、
0. 05mol·L － 1磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节 pH 值至
3)-乙腈(70∶ 30)系统［4］，效果以 0. 05mol·L － 1磷酸二
氢钾溶液(用磷酸调节 PH 值至 3)-乙腈(70 ∶ 30)最为
理想。
参考文献
［1］ 中华人民共和国卫生部药典委员会 .中华人民共和国卫生部药品
标准(蒙药分册)［S］. 1998:91.
［2］ 薛洁，张海英 . HPLC 测定糖脂益片中盐酸小檗碱含量［J］. 中医
药学报，2006，34(6):17.
［3］ 程静，何继祥，梅群，等 . HPLC 测定结肠炎散中盐酸小檗碱含量
［J］.中国药师，2007，10(12):1267.
［4］ 张春辉，杨钊，单秀明 .高效液相色谱法测定消幽胶囊中盐酸小檗
碱的含量［J］.中药新药与临床药理，2007，18(1):63.
(本文校对:尉继伟 收稿日期:2010 － 08 － 18
檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵
)
平远县中医院扶贫义诊送医药获好评
［本刊讯］日前，广东省平远县中医院组织内、外、骨、中医、
眼耳鼻咽喉等科室的医护人员深入平远县河头镇开展以“扶贫
济困促和谐，创先争优当先锋”主题的扶贫送医送药义诊活动，
旨在贯彻落实扶贫开发“规划到户、责任到人”工作和深入开展
创先争优活动。
义诊活动现场气氛热烈，医务人员耐心地为群众检查，为
他们解答各种医疗咨询，此次活动共免费为群众解答咨询 50
人、诊疗 200 多人、发放药品价值 4000 多元，发放中医药保健
知识宣传资料 300 余份。 (钟丽莲 杨建宇)
·732·光明中医 2011 年 2 月第 26 卷第 2 期 CJGMCM February 2011. Vol 26. 2