全 文 ：第 3 0卷第 2期
2 0 01年 4月
吉 林 林 业 科 技
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2
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2 0 01
文章编号 :1 0 05一 1 7 29( 2 0 01) 02一 0 0 01一 03
三倍体欧洲 山杨组培技术的研究
尹京男 , 纪绍辉 , 周 玉兰 , 朴核哲 ,
杜香玲 , 周延峰 , 李 华
(延边林业科学研究所 , 吉林 延边 、 1 3 3 0 0 0)
摘要 : 通过对三倍体欧洲山杨组培技术的研究试验 , 采用增殖与生根同步进行的方法进行快繁 , 其
年增殖次数可达 8 次 , 平均每次增殖培数为 4 . 4 倍 , 可 以达到工厂化生产的指标要求 。 培养出的
组培苗质量好 , 移栽成活率高 , 而且可以降低苗木的成本 .
关 键 词 : 三倍体 ; 欧洲山杨 ; 组培技术
中图分类号 : 5 72 . 3+ 5 文献标识码 : A
S t u d y o n t i s s u e
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e u l t u r e t e e h n i q u e s o f
oP ul 琳 t理m ul a
Y I N J i n g 一 n a n , J l S h a o 一 h u i , Z HO U Y u 一 L ia n , P I A O X u a n 一 z h e ,
D U X ia n g 一 l i n g , Z H O U Y a n 一 f e n g , L l H u a
( F o r e s r t y I n s t it u t e o f Y a n b i a n
,
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A加 t r a c t : A t r ia l s t u d y w a s d o n赵o n t is s u e e u i r u r e t e e h n iq u e s o f t r i p lo i d p ol, ,: l u s t er m u z a . T h e r e -
s u l t s s h o w e d t h a t r a p i d p r o P a g a t i o n m a d e t h e e x p l a n t s e u l t u r e d f o r 4 5 d a y 、 i一、 s u b e u l t u r e , a n d
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K e y w o r d s
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T
r i p lo id ; P o P u lu s t er m u al ; t is s u e e u l t u r e t e e h n iq u e
林业科技发达的欧美各国早就重视山杨
收稿 日期 : 2 0 0 1一 0 1一 0 8
作者简介 : 尹京男 ( 1 9 4 3一 ) , 男 , 延边龙井人 , 副
研究员 , 主要从事林木育种工作 .
的遗传改 良工作 , 他们通过 良种选育提高了
山杨 的产量和质量 , 选育出的三倍体欧洲山
杨杂种优势非常突出 。
三倍体欧洲山杨 , 是 1 9 3 6 年首先在瑞典
经染色体鉴定后被确认的 。 三倍体欧洲山杨
一 1 一
DOI : 10. 16115 /j . cnki . i ssn. 1005 -7129. 2001. 02. 001
材质好 , 木材密度高 , 纤维长 , 纸浆质量好 ,
而且生长迅速 。 据报道 , 18 a 生三倍体欧洲
山杨平均高 1 2 m , 平均胸径 1 2 . 4 c m , 蓄积
1 4 3 m丫 hm Z , 而对照平均高 9 . 6 m , 平均胸
径 9 . 8 。 m , 蓄积 1 0 2 m 3 / h m Z 。
在我国 , 山杨虽然是次生林的主要树种 ,
而且分布面积很大 , 但是由于对这一树种 的
改 良与选育工作没有跟上 ,林木生产力很低 。
目前 , 生产单位对山杨是处于只砍不造的状
态 。 在这种情况下 , 积极引进国外的优 良山
杨新品种 , 努力营造优质山杨林 , 满足造纸
工业对杨树纸浆材的需求 , 是我们林业工作
者的责任 。
三倍体欧洲山杨属杨柳科杨属白杨派植
物 , 而白杨派杨树采用传统的扦插繁殖 , 生
根率非常低 ,’ 进行有性繁殖又不能保护优 良
单株或无性系的良种性状 。 因此 , 进行组培
快繁是能够保证在短时间内大量繁殖出性状
一致的 良种的最佳途径 。
国外 , 德国早在 80 年代初进行三倍体欧
洲山杨工厂化生产 ,并营造大面积人工林 。 国
内 , 中国林业科学 院在 80 年代曾与德国合
作 , 在我国山西省进行了三倍体欧洲山杨造
林试验 。 另外 , 黑龙江省林业科学院和宁夏
农学院等单位先后进行过组培试验 。
1 三倍体欧洲 山杨组培快繁技术
1
.
1 培养程序和培养基
L .1 1 试验材料
试验材料由中国林业科学院林业研究所
提供 。 我们于 1 9 9 8 年 4 月 2 5 日收到 l a 生
小苗后 , 第 2 天定植于苗圃地里 。 从第 2 年
起 , 每年秋季进行平茬 , 以便利用当年生嫩
枝进行组培试验 。据我们的经验 , 材料于 6 月
下旬剪取为宜 , 如采集过早 , 材料过嫩 , 不
易掌握消毒时间 , 采取过晚 , 腋芽不易抽梢 。
本项研究所使用材料 , 于 1 9 9 8 年 6 月
23 日采集 , 之后立 即带到实验室消毒接种 。
1
·
1
·
2 诱导芽分化
基本 培养 基是改 良 M S 培养基 , 减少
一 2 一
N H
4
N O
3 和 K N ( ) 3 的含量 , 增加 Z n S O ; 7H ZO
含量 , 去掉有机成份 中的甘氨酸 , 新增赖氨
酸 , 维生素 B , 和维生素 B 。 也做了相应调整 。
蔗糖为 3 0 0 0 0 m g / l , 琼脂 7 0 0 0 m g / l , P H 为
6
.
5
。
诱导芽分化阶段 , 在改 良 M S 培养基中
附加适量 6一 B A 和腺嚷吟 。
在上述培养基 中外植体约 20 ~ 30 d 抽
梢 , 当新梢长至 2 c m 左右时 , 即可剪下接在
生根培养基上 , 经 10 d 左右生根 , 然后就可
以转人下一步工作 。
1
.
1
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3 继代培养和生根繁殖
戈开始时我们 曾用叶脉切断法进行快繁 ,
即将诱导分化出的幼嫩叶片的叶脉切断后接
种在一种培养基上 , 待长出愈伤组织后将愈
伤组织块转移到另一种培养基上 , 愈伤组织
块上长出芽点后再换成别的培养基 , 芽长出
还要经一种培养基上生长后才能接种于生根
培养基上 。 这个方法 , 先后须经多个培养基
上培养 , 操作繁琐 , 长出的苗非常细弱 , 不
易生根 , 而且培养出的苗木有可能产生遗传
变异现象 , 因此 , 不是快繁的好办法 。
后来改用单芽茎段直接生根法 , 即将分
化阶段长出的带根培养的茎部切成小段 (每
个茎段带一个腋芽 ) 直接接种在生根培养基
上 。 所用培养基是基本培养基 中大量元素减
半 , 微量元素不变 , 附加适 量 M A A 。 约经 10
d 生根 , 再经一个月左右可 以进行下一周期
快繁 。 按照这个方法 , 年增殖次数达 8 次 , 增
殖倍数可达 4 . 4 倍 , 生根率可达 97 % 。 增殖
与生根同步进行 , 操作简便 , 苗木粗壮 , 生
根容易 , 移栽成活率高 , 是三倍体欧洲山杨
快速繁殖的好方法 。
1
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2 操作技术要点与培养条件
1
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2
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1 外殖体的灭菌与接种
1
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2
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1
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1 预处理 : 采集的嫩枝立即带到室内 ,
将叶片从叶柄基部切除后进行湿润处理 。 可
用 75 %酒精 , 酒精不仅对活体有较好的渗透
能力 , 而且还有一定的杀菌能力 。
1
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2
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1
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2 材料切割 : 湿润后的材料切成 1 c m
左右的小段 (每段带 1个腋芽 )。
1
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2
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1
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3灭菌处理 :用 0 .1 %升汞水溶液处理
1 0 m in左右 。
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1
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4清洗 :灭菌材料用无菌水清洗 3一 4
次 , 以除去多余药剂 , 有利于接种材料的正
常分化和生长 。
1
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2
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1
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5 接种 : 外殖体清洗之后正插于预先
消毒的芽诱导培养基上 。
1
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.2 2 培养条件
1
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2
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1 培养温度 : 24 士 2 ` C 为宜 。
1
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2
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2
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2 光照温度 : 以 1 8 0 0一 2 2 0 0 l x 为宜 。
1
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2
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2
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3 光照时间 : 每天白天照射 12 h , 夜间
黑暗 。
.1 3 小植株 的移栽与定植
当小植株根长 1 ~ 2 c m 、 尚发 白时即可
移栽 。 若待长出侧根 , 而且颜色为褐色时移
栽 , 成活率低 。
1
.
3
.
1 移栽前一周 , 将培养瓶上覆盖物撤去 ,
使小植株适应外界环境 。
1
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3
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2 移栽 时将根部 附着的培养基 冲洗 干
净 , 以保证根部吸收通畅 , 然后将根部浸于
5 0%多菌灵配制的 0 . 1 %水溶液中 。
1
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3
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3 一定要注意移栽深度 , 将土埋到根茎
相交处 。
1
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3
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4 移栽土可用 等量混合的壤土和河沙 。
移栽前用 5 %敌克松进行土壤消毒 , 用量为
1 9 /m
, 。
1
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3
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5 移栽可用 6 。 m 左右的营养钵 。 小植株
移栽后将营养钵整 齐地摆放在塑料 育苗盘
内 , 以便以后管理 、 运输 。
1
.
3
.
6 移栽后应浇透水 。 浇水时注意勿将苗
木根系冲出或将植株冲倒 , 因营养钵密集 ,且
上面罩有塑料薄膜 , 因此 , 一般不必经常浇
水 , 浇水过多反而易使苗木窒息而死 。
.1 .3 7 移栽后 5 ~ 7 d 完全用塑料薄膜封住 ,
以后逐步打开薄膜 ,达到通风透气的 目的 。小
植株长出新叶 , 说明根系生理功能恢复 。 这
时可完全撤去覆盖物 , 转人正常管理 。 2 0 0 。
年 4 月移栽 5 3 7 5株 , 6 月初调查 , 成活 4 9 07
株 , 成 活率为 9 1 . 3% 。
当小植株长到 6 。 m 以上时即可运到苗
圃地定植 。 运输过程 中勿使苗木地上部分碰
伤 , 而且车箱上面用塑料薄膜覆盖 以防苗木
失水 。 定植最好在阴天进行 , 否则采取遮阴
措施 。
定植时将苗 木带土轻轻从 营养钵中取
出 , 埋人土坑中 , 此时也要注意不要埋得过
深 。 定植可按行距 80 C m 、 株距 1 5 。 m 进行双
垅栽植 。 定植后一定要浇透水 , 以后根据天
气情况掌握浇水次数 。
2 0 0 0 年 6 月 8 日定植三倍体 欧洲山杨
组培苗共 4 9 07 株 , 于 9 月 28 日调查 , 成活
率 9 7 . 3% 、 , 平均高 1 0 0 . 2 。 m 。
2 三倍体 欧洲 山杨组培快繁苗木的成本投资
概算
据有关报道 , 组培过程 中只要培养物的
年增殖次数达到 8~ 10 次 , 每次增殖 3 ~ 4倍
以上 , 就能够满足快繁要求 。
按照我们掌握 的快繁技术 , 年增殖次数
达到 8 次 , 每次增殖达到 4 . 4倍 。 因此完全
可以进行工厂化生产 。
根据公式 Y一 X ” , 可以推算出我们所进
行 的三倍体欧洲山杨快繁技术的年增殖数 的
理论值 。 式中 Y 代表年增殖数 , X 代表每次
增殖倍数 , n 代表全年可增殖周期数 , 即 n -
3 6 5 /每周期天数 。 因 n 为 4 . 4 , X 为 8 , 所 以
Y 一 1 4 0 4 8 。 生产开始时 , 如果有 1 0 瓶培养
物 , 每瓶有 10 株苗 , 则年底可培养出 1 4 0
万株苗 。 当然 , 这只是理论植 , 在生产中应
扣除污染苗和其它限制因素之后 , 一年内繁
殖 10 0 万株苗是完全可以做到的 。
通过对年生产规模为 1 0 万株苗木的总
投资和单株成本预算为 2 4 . 2 万元 , 折旧金额
为 3 . 57 万元 。
2
.
2 人工费用 (固定人员和临时工人 ) 投资为
9
·
1 2 万元 。
2
.
3 主要物料投资费用为 3 . 38 万元 , 折 旧后
金额为 0 . 8 7 万元 。
2
.
4 水电费用投资 3 . 46 万元 。 (下转第 8 页 )
一 3 一
方向 、 木段长度对 出耳块数无显著影响 。 东南一西北 , 植菌深度为 2 . 5 c m , 植菌密度
根据各因素 X 值大小选 择最优组合为 为 s c m 。
A
3
B
3
C
I
D
I , 即木段长度为 4 0 e m , 摆放方向为
表 5 榆菊木段人工栽培试验结果方差分析
变差来源 离差平方和 自由度 均方 均方比 F 。
D
. 植菌密度 1 . 2 2 2 0 . 6 1 1 0 . 1 7 * F o . 25 = 3 . 0
C
. 植菌深度 0 . 3 6 2 0 . 1 8 3 . 0 0 , F o . 1。 = 9 . 0
B
. 摆放方向 0 . 3 3 2 0 . 1 7 2 . 8 0 F o . 。。 = 1 9 . 0
剩余 0 . 1 2 2 0 . 0 6
总和 2 . 0 3 8
5 结果与讨论
5
.
1 通过研究试验 , 搞清楚了榆蘑 的形态特
征 , 生物学特性及其培养特性 , 能成功的从
野生榆蘑子实体上分离培养出榆蘑菌 。
5
.
2 榆蘑人工袋料栽培 , 袋产子实体最多可
达 3 3 0 9 , 生长效率为 8 8% 。
5
.
3 榆蘑的木段栽培试验结果只是初步的 ,
还需进一步研究增加产量的技术措施 。
.5 4 榆蘑人工栽培的原料来源广泛 , 生物效
率在 60 % ~ 8 %之间 , 栽培管理大致与黑木
耳相似 , 是一种有待于开发的食 、 药兼用真
菌 。
(上接第 3 页 )
2
.
5 培养基费用投资 0 . 91 3万元 。
2
.
6 不可预见费定为 2 . 0 万元 。
2
.
7 温室大棚燃料费定为 3 . 0 万元 。
以上为截止到苗木移栽成活后可以出棚
时 为止 的各项 投资概 算 情 况 , 共需 投 资
46
.
07 万元 。 单株成本为 0 . 2 29 元 , 此时苗木
亦可出售 。
如果幼苗暂不销售 , 定植在苗圃地继续
培养 , 第 2 年春季出售 , 那么 , 还要计算定
植以后各项费用 、
2
.
8 苗木 定植后 的 各 项 管 理 费 用 投 资为
1 3
.
3 9 万元 。
2
.
9 苗木定植苗圃地至第 2 年 出售不可预见
费定为 2 . 0 万元 。
到第 2 年春季苗木出圃时为止 , 总投资
59
.
10 万元 , 单株苗木成本为 0 . 36 3 元 d
如果利用 已有房屋 、 温室 , 而且还有苗
圃地 , 生产投资将大幅度减少 , 苗木成本也
会相应降低 。
3 结论
3
.
1 经过 s a 的研究 , 按上述方法进行三倍体
山杨组培快繁 , 年增殖次数达 8 次 , 每次增
殖数达 4 . 4倍 , 已经达到年增 8~ 10 次 、 每
次增殖 3~ 4 倍的组培快繁基本要求 。 因此 ,
我们认为完全可以用这种方法进行三倍体欧
洲山杨的工厂化生产 。
3
.
2 将传统的增殖与生根两个阶段合并为一
个阶段进行 , 即将增殖与生根同步进行 , 培
养出的苗木质量好 ,不仅简化了操作程序 , 而
且可以降低苗木成本 。
3
.
3 从成本核算过程中可以看 出 , 人工费用
和能源消耗费为制约苗木成本的两大因素 ,
其中人工费用约 占全部支出的 40 %左右 。 因
此 , 加强人员技术培训 , 不断提高他们的劳
动技能是提高劳动生产率的关键 。
一 8 一