全 文 ：时间内饮水时感腹胀难忍或呕吐 , 未能饮完规定的水量而导
致清肠失败;特别是便秘患者 , 其清肠效果不能令人满意 , 考
虑可能是便秘患者肠蠕动较弱 , 肠道排空缓慢 ,部分水分被吸
收 ,大便与硫酸镁及服下的水混合后容积增加不够多 , 机械性
刺激不足;加之该类患者直肠壁对容积扩张的低敏感 、高耐
受 、高顺应性 , 因而排便次数较少所致。为了减少饮服硫酸镁
后饮水的不适 , 增强胃肠动力加速排便 , 提高肠道清洁效果 ,
本研究在清洁肠道过程中加用胃肠动力剂西沙必利和吗丁
啉。结果表明 , A 组平均初次排便时间提前了近 15 分钟 , 且
腹胀程度也明显轻于 B 组和 C 组。由于加用西沙必利后腹胀
程度较轻 ,患者均能在限定时间内饮完规定的水量 , 肠道清洁
效果也明显优于 C 组(P <0.01), 这主要与西沙必利增强胃
肠动力加速排便有关。
西沙必利在肠道清洁中的作用:西沙必利是甲苯酰胺的
衍生物 ,作用于肠肌间神经丛运动神经元的 5-HT4 受体 , 增加
乙酰胆碱释放 , 从而增加下食管括约肌压力 、加快胃排空 、促
进肠道平滑肌运动[ 2] 。有研究表明[ 3] :西沙必利可提高正常
人和便秘患者直肠静息压和直肠 、肛门抑制反射时直肠净增
压 ,降低直肠最低敏感量。袁耀宗等[ 4]研究发现 , 西沙必利可
显著缩短全结肠及各节段结肠的转运时间。 因此 , 饮服硫酸
镁导泻的同时加用西沙必利 , 一方面可减轻饮水时上腹饱胀
的程度和减少呕吐的发生;另一方面可促进肠道推进性运动 ,
缩短粪便在结 、直肠内停留时间 , 避免肠道内液体被吸收 , 增
大肠腔容积的机械性刺激 , 促进排便;同时 , 肠蠕动的增强 , 可
起到机械性洗涤作用 , 因而可以增加硫酸镁的清肠效果。本
组结果表明:A 组肠道清洁显效者为 72.9%, 无效者为 0 ,而 C
组显效者为 25%, 无效者为 13.9%, 效果明显增强。患者对
西沙必利的耐受性良好 , 未出现严重的不良反应。因此 , 饮服
硫酸镁加西沙必利作为结肠镜检查前肠道清洁准备 , 不失为
一种成本低廉 、饮水量少 、简单有效 、准备时间短 、患者易接受
的方法 ,适用于常规结肠镜检查和内镜电凝电切息肉的术前
肠道准备。
参　考　文　献
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＊　广西中医学院 2003 届硕士毕业生;1　广西中医学院药理教研室;2　广西中医学院 1998 级实习生
台 湾 林 檎 总 黄 酮 护 肝 作 用 的 实 验 研 究
广西区人民医院药剂科　(南宁 530021)　潘　莹＊　林启云1　欧贤红2　颜　杰2
　　[ 摘要] 　目的　观察台湾林檎总黄酮的护肝作用 , 初步探讨台湾林檎护肝作用的原理。方法　从广西产蔷薇科青苹果属台
湾林檎(又名大果山楂)自行分离提取黄酮;分别采用四氯化碳(CCl4)、D-半乳糖胺(D-Gla-N)一次性腹腔注射(ip)造成急性肝损
伤小鼠模型 ,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、肝糖元水平 ,并作病理观察。 结果　台湾林檎
总黄酮大中剂量组均可降低四氯化碳 、D-半乳糖胺所致的急性肝损伤小鼠血清 ALT 、AST 、ALP 的活性 , 并能增加肝糖元含量 ,
改善肝脏组织病理损伤。结论　台湾林檎总黄酮对所致的急性肝损伤具有预防作用。总黄酮成分是大果山楂起护肝作用的最
主要因素之一。
　　[ 关键词] 　台湾林檎总黄酮;四氯化碳造膜;D-半乳糖胺造模;护肝作用;作用机理
　　[ 中图分类号] 　R392-33
　　台湾林檎为蔷薇科青苹果属台湾林檎的干燥成熟果实 ,
性味甘 、酸 、涩 、微温 , 有理气健脾 、消食导滞之功效 , 在广西作
为山楂习用已有 80 多年的历史 , 已知其化学成分有维生素 、
鞣质 、萜类 、甙类 、黄酮类 、酚类和微量元素 , 其中黄酮含量丰
富 ,是中药山楂的 2 倍多[ 1-4] ;已知某些黄酮类成分具有很好
的保肝作用 ,因此本文从保肝的角度 ,观察台湾林檎总黄酮的
药理作用 ,初步探讨台湾林檎护肝作用的原理 。
1　材料和方法
1.1　实验材料　动物:昆明种小白鼠体重 20 ～ 25g , 雌雄兼
用 , 由广西中医学院动物实验中心提供 , 桂医动字第 11004
号。药材:台湾林檎(Malus domeri(Bois)Chev.),购自广西靖
西。台湾林檎总黄酮:自行提取。药品:联苯双酯滴丸上海星
群制药厂 ,批号 010309。试剂:四氯化碳(CCl4)淮南化学试剂
厂 ,批号 930403;D-半乳糖胺(D-Gla-N),上海化学恒信化学试
剂公司 ,批号 020730;ALT 试剂盒 、AS T 试剂盒 、ALP试剂盒 ,
伊利康生物技术有限公司生产 , 批号分别为 020305 、020407 、
020209。
1.2　实验方法
1.2.1　台湾林檎总黄酮的制备　取台湾林檎 , 粉碎过 20 目
1139广西医学　2004 年 8月　第 26 卷　第 8 期
筛 ,取一定量台湾林檎粉用 75%乙醇浸泡过夜 , 后依次用
75%、70%、60%乙醇分别回流提取 3 次 , 时间分别为 2.0 小
时 、1.5 小时 、1.0 小时。合并提取液后回收乙醇至无醇味 , 余
液多次加入药用试剂萃取和提纯 , 最后所得沉淀物进一步作
黄酮鉴别实验。取沉淀物少许 , 按黄酮的理化鉴别方法进行
鉴别[ 3] ,结果该沉淀物加入各试剂后只出现黄酮类成分的反
应。以芦丁 1.0mg.ml-1甲醇溶液为对照品 , 提取物 1.0mg.
ml-1甲醇溶液为供试品 , 点于同一块碱性硅胶 G 板上(取 4%
醋酸钠溶液 100ml , 加入 0.7g CMC-Na 充分混匀 , 静置 , 取上
清液铺板 , 晾干 , 105℃活化 1 小时以上即得所需的层析板),
以醋酸乙酯-丁酮-甲酸水(10∶7∶1)为展开剂 ,展距为 9cm , 展
开 ,取出晾干 , 用 10% ALCL3 甲酸溶液喷雾显色 , 在紫外灯下
(365nm)检视 , 比较薄层板上各色斑的位置 ,结果表明台湾林
檎提取物与芦丁具有相同的色斑 , 说明所得沉淀物为总黄酮 ,
且含有芦丁成分。以芦丁为对照品 , 按比色法测定总黄酮含
量[ 4] ,结果为 74%。
1.2.2　台湾林檎总黄酮对四氯化碳(CCl4)肝损伤的影响[ 5]
　取50 只小鼠随机分为5 组 , 每组10 只小鼠:正常对照组(蒸
馏水 , 20ml.kg-1);模型组四氯化碳(CCl4)对照组(蒸馏水 ,
20ml.kg-1);联苯双酯阳性对照组(18mg.kg-1);台湾林檎总
黄酮大剂组 ,给予 1.5g.kg -1台湾林檎总黄酮;台湾林檎总黄
酮中剂量组 ,给予 0.75g.kg-1台湾林檎总黄酮。 每日 1 次 , 连
续给药 10 天 ,于末次给药后 1 小时 , 除正常对照组外 , 其他各
组小鼠均 ip 0.1%的 CCl4 溶液(0.1ml·10g-1), 禁食不禁水 ,
16 小时后股动脉采血 ,取肝备检 。
1.2.3　台湾林檎总黄酮对 D-半乳糖胺(D-Gla-N)肝损伤的影
响:动物 、分组 、给药方法及时间同四氯化碳(CCl4)肝损伤。不
同的是于末次给药后 1 小时 ,除正常对照组外 ,其他各组动物
均 ip10%的 D-半乳糖胺(D-Gla-N)溶液(900mg·kg-1 , 0.1ml·
10g -1),禁食不禁水 , 24 小时后股动脉采血 , 取肝备检。检测
项目肝糖元测定:按蒽酮法(3)进行。血清 ALT 、AST 、ALP 活
性测定:分别按照 ALT 、AS T、ALP 试剂盒使用说明书 , 用
TBA-120FR型全自动生化分析仪测定。肝组织病理学检查:
取经中性福尔马林溶液固定的肝组织标本 , 石蜡包埋 , 超薄切
片厚 5μm ,作 HE 染色 ,光镜下观察肝细胞变性坏死程度。分
级标准:(-)表示肝组织无肿胀 、坏死及炎性细胞浸润;(+)
表示轻度肝细胞肿胀 , 单个肝细胞坏死 , 或少许炎性细胞浸
润;(++)表示中度肝细胞肿胀 , 或肝细胞灶性坏死 , 或明显
炎性细胞浸润;(+++)表示重度肝细胞肿胀 ,或肝组织片状
坏死 ,或大量炎性细胞浸润。
1.3　统计方法　实验数据以 x ± s表示 , 两组间均数差异采
用 t 检验。
2　实验结果
2.1　台湾林檎总黄酮对 CCl4 所致急性肝损伤小鼠的影响[ 6]
　各组血清 ALT 、AS T、ALP 活性的变化:模型组 ALT 、AST 、
ALP明显高于正常组(P <0.001～ 0.01),说明造模成功。与
模型组比较 ,台湾林檎总黄酮大中剂量组均能显著降低 ALT 、
AST 的活性(P <0.001), ALP活性无明显变化。见表 1。各
组肝糖元含量的变化:与正常组比较 , 模型组肝糖元的含量明
显降低 ,肝脏系数明显提高(P <0.001), 说明造模成功。与
模型组比较 ,台湾林檎总黄酮大中剂量组可显著提高肝糖元
含量(P <0.001 ～ 0.05)。见表 2。病理学检查:正常组镜下
见肝细胞索 、肝血窦排列规则 , 肝小叶结构清晰 , 未见肝细胞
变性 、坏死等病理变化。模型组镜下见肝小叶结构模糊 , 肝细
胞弥漫性中度水肿 ,亦有局灶性肝细胞气球样变 , 脂肪性变 ,
点状坏死。台湾林檎总黄酮各剂量组及联苯双酯组肝细胞的
坏死程度较模型组有所减轻;中剂量组肝细胞病变较模型组
轻 ,肝细胞呈弥漫性轻至中度水肿不一 , 肝血窦也受影响 , 个
别区域有点状坏死;大剂量组肝细胞弥漫性轻度水肿 ,肝血窦
受压。见表 3。
表 1　台湾林檎总黄酮对 CCl4 所致急性肝损伤小鼠血清中
ALT 、AST、ALP活性的影响( x ± s , n =10)
组别 ALT(U .100ml-1) AST(U.100ml-1) ALP(U.100ml-1)
NS 组 174.91±40.79 62.71±16.51 153.21±58.61
模型组 482.91 ±144.29＊＊＊ 345.41±94.13＊＊＊ 244.91±58.78＊＊
阳性组 362.30±62.59■ 107.71±35.99■■■ 145.21±28.67■■■
台湾林檎总黄酮大 164.91±63.42■■■ 77.21±31.95■■■ 230.51±76.31
台湾林檎总黄酮中 174.51±76.78■■■ 89.61±30.33■■■ 233.51±62.72
　　注:与正常组比较 , ■ P <0.05 , ■■P <0.01 , ■■■P <
0.001;与模型组比较 , ＊P <0.05 , ＊ ＊P < 0.01 , ＊＊ ＊P <
0.001。
表 2　台湾林檎总黄酮对 CCL 4 所致急性肝损伤小鼠肝糖元
及肝脏系数的影响( x ± s , n =10)
组别 肝糖原含量(g.100g-1肝脏组织)
NS 组 0.1585±0.0847
模型组 0.0332±0.0063＊＊＊
阳性组 0.1005±0.0239■■■
台湾林檎总黄酮大 0.0775±0.0261■■■
台湾林檎总黄酮中 0.0576±0.0249■
　　注:与正常组比较 , ■ P <0.05 , ■■P <0.01 , ■■■P <
0.001;与模型组比较 , ＊P <0.05 , ＊ ＊P < 0.01 , ＊＊ ＊P <
0.001。
表 3　所致急性肝损伤小鼠肝脏病理变化的影响(n =8)
组别 肝细胞变性 肝细胞坏死 炎症反应- + ++ +++ - + ++ +++ - + ++ +++
正常对照组 8 0 0 0 8 0 0 0 7 1 0 0
模型对照组 0 0 0 8 0 0 2 6 0 0 3 5
联苯双酯组 1 4 3 0 1 2 4 1 0 4 3 1
台湾林檎总黄酮大 1 2 4 1 1 3 3 1 0 2 4 2
台湾林檎总黄酮中 0 2 2 4 0 1 4 3 0 1 5 2
1140 Guangx i Medical Journal , Aug.2004 , Vol.26 , No.8
表 4　台湾林檎总黄酮对(D-Gla-N)所致急性肝损伤小鼠血清中
ALT 、AST 、ALP 活性的影响( x ± s , n =10)
组别 AST(U.100ml-1) ALT(U.100ml-1) ALP(U .100ml-1)
NS组 174.91±40.79 62.71±16.51 153.21 ±58.61
模型组 362.41±67.79＊＊＊ 234.6±68.84＊＊＊ 3 28.81±40.47＊＊＊
阳性组 121.01±30.42■■■ 167.5±47.19■■ 1 93.71±55.69■■■
台湾林檎总黄酮大 190.31±86.77■■■ 91.01±32.30■■■ 1 95.01±68.75■■■
台湾林檎总黄酮小 184.21±54.05■■■ 78.61±20.79■■■ 2 16.71±34.24■■■
　　注:与正常组比较 , ■P <0.05 , ■■ P < 0.01 , ■■■P <
0.001;与模型组比较 , ＊ P <0.05 , ＊ ＊P <0.01 , ＊＊＊ P <
0.001。
2.2　台湾林檎总黄酮对 D-Gla-N 所致急性肝损伤小鼠血清
中ALT 、AST 、ALP活性的影响　模型组 ALT 、AST 、ALP 明显
高于正常组(P <0.01～ 0.001), 说明造模成功。与模型组比
较 ,台湾林檎总黄酮大 、中两个剂量组能显著降低小鼠血清中
ALT、AST 、ALP的活性(P <0.01 ～ 0.001)。见表4。各组肝
糖元含量的变化:与正常组比较 , 模型组肝糖元的含量明显降
低 ,(P <0.001),说明造模成功;与模型组比较 , 台湾林檎总
黄酮大中剂量组可明显提高小鼠肝糖元含量 P <(0.05 ～
0.01)。见表 5。病理学检查:正常组镜下可见肝细胞索结构
清晰 ,肝细胞形态较正常 。模型组镜下见肝小叶结构尚清 , 肝
细胞呈弥漫性轻至中度水肿 , 个别区域有肝细胞点状坏死。
台湾林檎总黄酮大剂量组肝脏病变较模型组轻 , 肝小叶结构
尚清楚 ,只见个别区域有肝细胞轻度水肿;中剂量组肝小叶结
构尚清楚 ,部分区域肝血 窦受压 , 肝细胞呈弥漫轻至中度水
肿 ,有灶性肝细胞点状坏死。见表 6。
表 5　D-Gla-N 所致急性肝损伤小鼠肝糖元及肝脏系数的影
响( x ± s , n =10)
组别 肝糖原含量(g.100g-1肝脏组织)
NS 级 0.1585±0.0847
模型组 0.0364±0.0589＊＊＊
阳性组 0.0649±0.0328■■
台湾林檎总黄酮大 0.0834±0.0151■
台湾林檎总黄酮中 0.0386±0.0561■■
　　注:与正常组比较 , ■ P <0.05 , ■■P <0.01 , ■■■P <
0.001;与模型组比较 , ＊P <0.05 , ＊ ＊P < 0.01 , ＊＊ ＊P <
0.001。
表 6　D-Gla-N 所致急性肝损伤小鼠肝脏病理变化的影响(n =8)
组别 肝细胞变性 肝细胞坏死 炎症反应- + ++ +++ - + ++ +++ - + ++ +++
正常对照组 8 0 0 0 8 0 0 0 7 1 0 0
模型对照组 0 1 4 3 0 1 3 4 0 1 2 5
联苯双酯组 0 5 2 1 1 4 2 1 0 2 4 2
台湾林檎总黄酮大 0 2 5 1 1 4 2 1 0 4 3 1
台湾林檎总黄酮中 0 4 2 2 0 3 2 3 0 4 2 2
3　讨　论
CCl4为一种常用的研究药物代谢 、药物相互作用和筛选
抗肝炎药的急性肝损伤模型药 , 其对肝的损伤机理是其具有
高度反应活性的代谢产物(自由基 CCL3 和 CCL 3O2)与肝细胞
膜磷脂发生共价结合 ,产生 LP作用 ,引起细胞内 GSH 含量的
降低和蛋白巯基的改变 , 使线粒体 、内质网 、细胞转运和储存
Ca2+异常 , 引起细胞浆内 Ca2+升高 , 从而破坏肝细胞膜功能
的完整 , 导致肝细胞变性坏死 , 引起肝功能损坏[ 6] 。 D-Gla-N
的致毒机理是在体内转化为肝细胞的磷酸尿嘧啶核苷的干扰
剂 ,与体内 UDP 大量结合形成稳定的尿苷衍生物 , 造成 UDP
耗竭 , 从而导致依赖磷酸尿苷进行生物合成的核酸 、糖蛋白 、
糖原等物质合成减少和受阻 ,最终导致肝损伤甚致死亡[ 5] ;另
外 , D-Gla-N 还可以引起肝细胞内 Ca2+和 Mg2+减少 , 抑制线
粒体的呼吸功能 , 加速 OFR 的产生 , 从而使肝细胞损伤加
剧[ 7] 。台湾林檎总黄酮对 CCl4和 D-Gla-N 所致小鼠急性肝损
伤有保护作用 ,提示其可能是通过上述不同途径实现的 , 并可
能与黄酮分子结构的活泼的自由电子有关。总黄酮成分是大
果山楂起护肝作用的最主要因素之一。
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