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蛇莓的组织培养方法



全 文 :特种经济动植物 2010.11
Huacaochongyu花草虫鱼
蛇莓为草莓属的一个栽培种,为良好的地被植物
和小型观赏植物,在园艺园林规划中被广泛采用,是
重要的中药材之一。同时在草莓育种中作为香味育种
和抗性育种的原始优良材料。
下面介绍一下蛇莓的组织培养方法:
1 培养所用的材料为茎尖及叶片
所用基本培养基为MS。(1)茎尖分生组织诱导和
芽分化,培养基为:MS+NAA0.1- 0.3mg.L-1+BA1.0mg.
L-1(单位下同);(2)叶片愈伤组织诱导培养基为:
MS+2,4- D0.5+BA0.25+KT0.25+NAA0.025;(3)丛生
芽分化培养基为:MS+NAA0.05+BA0.5;(4)生根培养
基为:MS+ IBA0.05- 0.1。以上培养基中均加入 3%食
用白糖、6.5%琼脂,pH5.8,培养温度 25℃,每天光照
12小时,2只 40w日光灯作为光源。
2 培养结果
2.1 茎尖培养结果
挑取 0.2mm大小的茎尖于培养基(1)中,大约 12
天茎尖开始膨大,逐渐变绿,产生少量愈伤组织。20天
后愈伤组织开始逐渐长大,并在其上形成芽点,并逐
渐长大,40天后将长大的芽团状物切割后放入丛生芽
诱导培养基(3)中。15~20天后长成芽丛,并有少量丛
芽长高形成小苗。
将上述团状物反复切割并接种到培养基(3)
中,形成芽丛的状态,并逐渐扩大基数,建立繁殖体
系。BA与 NAA配合能够很好地控制芽丛的生长状
态,BA较高时芽密集成团,BA较低时芽开始长高,
形成小苗。通常情况下,每隔 10 天即可切割繁殖,
效率较高。
2.2 叶片培养结果
将试管苗叶片剪下,用剪刀剪成小块接种于(2)
中,8天后叶片边缘开始膨大形成颗粒状愈伤组织,接
种 12 天后叶片表面上开始出现凹凸不平的愈伤组
织,慢慢形成白色透明状愈伤组织,随后整个组织完
全变成愈伤组织团。将上述愈伤组织团转入培养基
(3)中,经 13天培养后开始变绿形成突起的芽点,继
而分化出芽,此时宜再次转入新鲜的(3)中继代培养,
随后即可形成丛生芽繁殖体系,进入快繁过程。
3 生根、炼苗及移栽
蛇莓生根较易,在丛生芽结转过程中,通常有少
量的丛生芽由于培养时间较长而形成根系,但是此根
系通常较弱,不利于栽培,因此有必要加入生根剂进
行生根培养。一般附加 IBA0.05就可满足生根的需
要,形成健壮的根系。繁殖时将小苗从丛生芽的根部
切开形成单个的小苗,放入生根培养基中,大约 15天
后即可形成完整根系,待植株长出 4~5片叶、株高
2~3cm、4~5条根时,可以出瓶炼苗。
将小苗栽于消毒处理过的蛭石中,浇透水,上盖
塑料薄膜保湿 4~5天。在 20~30℃温度条件下均可炼
苗,大约 7天生出新根,16~18天长出新叶,此时就可
按常规管理,成活率一般在 95%以上。
4 试管内匍匐茎的发生
蛇莓在试管中容易发生匍匐茎。一般形成两级匍
匐茎,较少发生三级匍匐茎,匍匐茎上的茎芽可以在
试管中生根形成完整植株,也可以利用这个特点来繁
殖及研究匍匐茎的发生规律。
本文介绍的组织培养方法可为蛇莓进行种质资
源的试管保存、苗林繁殖和合理开发利用及其今后的
遗传转化奠定基础。
蛇莓的组织培养方法
●马宗新(安徽省阜阳市农业科学研究所 安徽 阜阳 236065)
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