全 文 ：中回琅 学通报 第 1 2卷 第 l期 以犯5 年 1 月
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钙果 (欧李 )组织培养技术研究
任清盛
(莱芜市农业科学技术研究所 , 山东莱芜 2 71 10 )
摘 要 : 中采用 生物技术手段 , 对钙果 (欧李 )进行种苗组织培养技 术研究 , 通过无性 系建 立 、 增殖培
养 、 生根培养三个步骤 , 培育获得 了健壮的无性 系钙果试管苗 。 实验表明 M S + B A I . 0+I A AO . 2 是较好
的诱 导分化培养基 ; M s 十B OA . 5+I A A O . 2 培养基试 管苗增殖培养较好 ; 1 / ZM s +I AA O . 7 培养基诱导生
根效果较好 。
关键词 : 钙果 ;欧李 ;组织培养
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钙果 , 蔷薇科桃李属樱桃亚属欧李树种伊山刀。
h“ m il is B u n g e) 矮小灌木果树 , 是中国特有 、 世界最矮
的樱桃属野生果树 , 具有重要的研究和利用价值 。 钙
果果实中含有丰富的糖 、 蛋白质 、 矿质元素 、 维生素 、
氨基酸等营养物质 , 尤其是钙和铁含量高 , 鲜果中钙
含量达 60 m官1 009 , 铁含量达 1 . 5m留l0 0 g( 苹果分别
为 gm岁10 0 9 和 .0 2 4m g/ l o g) 。 钙果成为当前时尚的
保健水果 。 钙果作为一种新兴果树 , 不但有着较高的
营养价值 , 而且其经济价值 , 防风固沙 、 治理荒山的
生态价值以及医药价值也有相当优势 , 属果 、 牧 、 花 、
药 、 生态多用途树种 。
近几年 , 钙果种苗供不应求 。 通常果树苗木繁殖
时 , 多采用嫁接 、 扦插 、 压条 、 分株等无性繁殖的方
式 , 但是对于钙果不适应这些常规的繁殖方法 。 钙果
结果几年后 , 它原来的枝条逐渐老化死掉 , 在近根部
重新萌发新枝 , 所以嫁接树 , 不能保持接穗品种的连
续生产 。 扦插 、 压条 、分株等方法 , 成活率低 、 繁殖慢 。
笔者采用生物技术手段 , 通过无性系建立 、 增殖培
养 、 生根培养三个阶段 , 培育获得了健壮的钙果试管
苗 。 实验中重点解决了钙果试管苗瓶内难以生根 、 发
育不 良问题 , 大大提高了试管苗移栽成活率 , 并保证
了后代的品种特性 。 系统的钙果种苗组织培养技术
国内外未见公开报道 几。
, 材料与方法
1
.
1 材料 以中华钙果当年苗为试材 , 苗高 .0 4m 。
1
.
2 方法
1
.
2
.
1 无菌培养体系建立 2 0 0 3 年 8 月 1 日 , 进行诱
导培养试验 。 选取幼苗枝条顶端 1伽m , 用干挣流水冲
洗干净 ,最后一遍用蒸馏水冲洗 , 再用吸水纸将材料上
的水分吸干 , 在超净工作台上用 70 %酒精浸饱 305 , 并
不断摇动 , 然后置于 O` 1%升汞溶液中消毒 10 m in , 再
用蒸馏水冲洗 4 遍 。 切取茎尖 3 In r n ,接种在固体培养
基 ( l )M S+B A I . 0+ 认A o . 2 和 (2 )M S+B A l . 0王N A A o 、 2 。 先
暗培养 d7 ,后转入光照条件下培养 , 获得试管苗 。
1
.
2
.
2 增殖培养 诱导培养获得的试管苗长到 -7 sc m
时 , 以两个节间为一段进行剪段 , 然后接种于固体培
养基 M S + B A O. 5+ U A O . 2 上 。
1
.
.2 3 生根培养 2 0 0 4 年 2碑 月进行生根培养试验 。
经增殖培养的试管苗 ,采用以上方法剪段 , 然后接种
于固体培养基 l( l) /ZM s十认A o . 9 , (2 ) 12/ M s + M A O . 7 ,
(3 ) l 2/ M S+ M流0 . 5 , ( 4 ) l 2/ M S十护滋0 , 3 。
以上所用培养基 hP 均为 5 . 8 , 培养温度为 25 ℃ ,
作者简介 : 任清盛 , 男 , 1 971 年出生 , 农艺师 , 主要从事生物技术在园艺作物上的应用技术研究 . 卜胜目 :川期四叫乡曲让~
, 电话 : 13 063 4 92 0 . 收摘 日
期 : 2 0 04刁 7一3 0 ,修回日期 : 2 0 0 4一0 8一03 。
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其它培养条件同常规组织培养I] l。 这一阶段研究工作
均在莱芜市农科所组培实验室中进行 。
2结果与分析
2
.
1 不 同生长素对试管苗分化的影响 暗培养阶段 , 外
植体变化不明显 ;转入光培养 , 外植体颜色逐渐加深 、
变绿 ,插入培养基的一端稍膨大 。 M S+ B A I . 0 +认人0 . 2
中的外植萍曹发 、 伸长较快 , 6叼 左右 , 高度达到
5一 8叨 ; M S很a 人1`伽如A A O . 2 中的外植体萌发 、 伸长较
慢 。
.2 2 增植培养 在试管苗增殖培养阶段 , 一般经过
4 5 d左右新转接的试管苗可生长到 7一 sc m 。 试管苗在
基端剪 口处生长有直径 2一 3 n n n 的愈伤组织 , 由茎段
叶腋间萌发掖穿 ,生长后成为新的试管苗 。 试管苗叶
片浓绿 ,试管苗茎粗 l r n r n 左右 。
.2 3 IA A 浓 度对试 管苗 生根的 影响 在无性系钙果
种苗组织培养过程中 , 生根培养环节是制约本技术
是否能够应用于生产的关键 , 试管苗是否生根健壮
直接影响试管苗的炼苗 、 移栽成活率 。 本实验中这一
环节在以上 3 个环节中难度最大 。
由表 1 看出 , 在 12/ M S十认A .0 3 培养基中 , 试管
衰 1 不 同培养荃试管苗生根情况 (生根培养 礴s d )
培养基 生根数 (条 ) 生根长度 (咖 ) 株高 c( m)
21.…7气I一了l甩 M S+ 认 A 0
.
9 2 15
l忍M S十 I AA 0 . 7 4 18
l几 M S十认 A 0 . 5 1 2 0
l忍 M S+ 功流 0 3 0 . 5 2 0
注 : 每种培养基越机调查 10 瓶材料 , 每瓶中有 10 株试 管苗 。
苗极少生根 , 试管苗基部多膨大为圆球状愈伤组织 。
1/ZM容+l 汰A 0 . 5培养基中 , 试管苗生根情况不稳定 ,
即使有根发育 , 大多只有一条根 , 而且此根伸长较
长 。 在 注瓜M S+ IA A O . 7 培养基中 , 试管苗生根最多 、 长
度较整齐 ,着生须根也较多 ,试管苗生长健壮 。
3 讨论
3
.
1 。 一茶乙酸 (N A A )为人工合成生长调节剂 , 靠植物
细胞自身的转化酶系统转化成相关生长素而发挥生
物学效应 ,在本实毅中 , 外植体分化阶段 N A A 效果
不如 M诫 , 是否与本试材细胞中 N A A 转化酶有关 ,
有待进一步论证 。
.3 2 在 生根培养阶段 , 当生 长 素浓度较低 (认 A
0
.
3刁加吃压 )时 , 试管苗生根数 目少 ,但根伸长快 。 根
原夔的治动和瘩成 , 需要一定水平的外源生长素 。 根
原基的伸长和生长则可以在没有外源生长素的情况
下发生 , 相反较高浓度外源生长素的存在不利于试
管苗幼根的生长 。 当 U滋0 . 3司 . 5 时 , 该水平的生长素
能够启动根原基数目较少 , 所以在生长素的作用下 ,
幼根伸长较快 ; 当 认六0 . 7 时 , 能够启动较多数量的
根原基 , 同时也适当控制了幼根的伸长2eq[ 。
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