全 文 ：6 种植物粗提物对海棠花灰霉菌的抑制效果
张 悦，陈子牛，李 丹，侯思明 (昆明学院生命科学与技术系，云南昆明 650214)
摘要 采用生长速率法测定了 6种常见植物的无水乙醇粗提物和水粗提物对海棠花灰霉菌的抑制效果。结果表明，6种植物的水和无
水乙醇粗提物对灰霉菌的抑制效果差别较大，其中马褂木和紫茎泽兰的抑菌效果最明显，而其他材料也有一定的抑菌效果。6种植物材
料中除紫茎泽兰外无水乙醇粗提物的提取率均低于水粗提物，在不同浓度时 6种植物的无水乙醇、水粗提物对灰霉菌的抑制作用均不
同，但基本上表现为无水乙醇粗提物大于水粗提物。
关键词 无水乙醇粗提物;水粗提物;灰霉菌;抑菌作用
中图分类号 S432． 1 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2012)01 －00259 －02
Bacteriostatic Effect of Extracts from Six Different Plants on Botrytis cinerea of Malus spectabilis
ZHANG Yue et al (College of Life Science and Technology，Kunming University，Kunming，Yunnan 650214)
Abstract The bacteriostatic effects of ethanol and aqueous crude extracts from six common plants on Botrytis cinerea of Malus spectabilis were
studied． Results showed that，the control effect of ethanol and aqueous crude extracts from the six plants differed largely from each other，the
most obvious control effects were found in the extracts of Liriodendron chinensis (Hemsl．)Sarg． and Ageratina adenophora，Apart from Agera-
tina adenophora，the extraction yield of ethanol extracts from other five plants was higher than that of aqueous extracts，different concentrations
of ethanol and aqueous extracts had different bacteriostatic effects on Botrytis cinerea，the ethanol extracts of the six plants basically had higher
bacteriostatic effects than aqueous extracts．
Key words Ethanol crude extracts;Aqueous crude extracts;Botrytis cinerea;Bacteriostatic effect
基金项目 云南省教育厅科学研究基金一般项目(2011Y234)。
作者简介 张悦(1981 －) ，男，云南昆明人，讲师，博士，从事植物病理
学研究，E-mail:www151519190@ 163． com。
收稿日期 2011-09-23
灰霉病是最早被研究和描述的一种真菌病害之一，病原
菌为灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea) ，属半知菌亚门［1］。B． cine-
rea的寄主范围很广，可侵染茄科、葫芦科、蔷薇科、豆科等
400余种植物，包括葡萄、番茄、草莓等浆果、蔬菜以及果核类
作物等多种经济植物，每年都造成严重的经济损失。B． cine-
rea不但可从活细胞中获得养料，而且可从坏死组织中获得
养料，所以灰霉病不仅能引起田间损失，而且在果实的储存
和运输过程中也可造成严重危害，使得果实的储存期变短、
品质变差，对农业生产己构成严重威胁［2］。
20世纪 80年代以前防治灰霉病的杀菌剂如苯并咪哇类
的多菌灵、硫代氨基甲酸醋类的甲基托布津、二梭酞亚胺类
的异菌脉、腐霉利等已使用了近 30年，目前灰霉病菌对以上
药剂均产生了不同程度的抗药性［3］。随着人们健康意识的
不断增强，植物源农药以其高效、低毒、安全的特性得到广泛
关注，在农业生产中使用高效无公害农药将是必然趋势［4］。
为此，笔者探讨了 6种不同种属植物无水乙醇和水粗提物对
海棠花灰霉菌的抑制效果，以期为开发新型植物源抗灰霉菌
材料提供理论依据。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 供试植物。香樟［Cinnamomum camphora (L．)Presl．］、
石楠(Photinia serrulata Lindl．)、紫茎泽兰(Eupatorium adenopho-
rum Spreng)、石竹(Dianthus chinensis)、蓝桉(Eucalyptus globu-
lus)、马褂木［Liriodendron chinense(Hemsl．)Sarg．］6种植物材料
于 2008年 10月采自昆明学院校园，烘干后用粉碎机破碎成
粉末状备用。
1． 1． 2 供试菌种。海棠花灰霉菌菌株由昆明学院生命科学
与技术系微生物实验室提供。
1． 2 方法
1． 2． 1 真菌的培养。采用 PDA培养基培养，培养基配制方
法如下:称取 200 g 马铃薯，洗净，去皮切成小块，加水煮烂
(煮沸 20 ～30 min，能被玻璃棒戳破即可) ，用 4层纱布过滤，
再据实际试验需要加葡萄糖和琼脂，继续加热搅拌混匀，稍
冷却后补足水至 1 000 ml，分装于培养皿内，121 ℃下灭菌 20
min左右后取出，冷却，贮存备用。将灰霉菌接种在 PDA 平
板培养基上扩大培养 25 d，作为备用菌种。
1． 2． 2 粗提物的制备。以香樟为例，取已粉碎的香樟叶子
粉末 50 g，分别用无水乙醇和蒸馏水(样品∶无水乙醇或蒸馏
水 =1∶10，W/V)浸泡 72 h后过滤，将滤液用旋转蒸发仪蒸干
后得到 2种溶剂粗提物的浸膏。其余植物则根据制备香樟
叶子粗提物的方法，分别称取石楠 50 g、紫茎泽兰 30 g、石竹
50 g、蓝桉 50 g和马褂木 50 g制备其相应的粗提物。
1． 2． 3 抗菌活性的测定。采用生长速率法测定［5］:在培养
基未凝固前(约 50 ℃) ，将供试提取物加入培养基中，使供试
样品在培养基中的浓度分别为 25、50、75 mg /ml，摇匀后迅速
倒入培养皿(Ф = 90 mm)中，每皿 15 ml，待其凝固后用接种
器取培养的灰霉菌菌饼(Ф = 5 mm)移到含植物提取物的培
养基上，有菌的一面向下与培养基贴合，每皿正中央接 1 个
菌饼，30 ℃下暗培养 5 d后用十字交叉法测量菌落直径。试
验设空白对照、溶剂对照和加药处理(植物提取物) ，每个处
理 3次重复。用以下公式计算抑制率(计算抑制率时用对应
的溶剂作对照) :
菌落扩展直径(mm)=菌落的平均直径(mm)－菌饼直
径(5． 5 mm)
相对抑制率 =(溶剂对照菌落扩展直径 －处理菌落扩展
直径)/溶剂对照菌落扩展直径 ×100%
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2012，40(1):259 － 260 责任编辑 乔利利 责任校对 况玲玲
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.01.182
2 结果与分析
2． 1 不同溶剂粗提物的提取率比较 由表 1 可知，6 种植
物材料中除紫茎泽兰外水粗提物的提取率均高于无水乙醇
粗提物，且不同植物在相同溶剂中的粗提物提取率也不同，
如水粗提物中提取率最高的为石楠，达到 9． 24%，最低是紫
茎泽兰，为 2． 20%;无水乙醇粗提物中提取率最高的为蓝桉，
达 4． 34%，最低是石竹，仅为 0． 42%。
表 1 6种植物不同溶剂粗提物的提取率 %
植物种类
提取物种类
水粗提物 无水乙醇粗提物
马褂木 4． 02 0． 96
石竹 3． 12 0． 42
紫茎泽兰 2． 20 2． 90
香樟 2． 46 1． 86
蓝桉 7． 20 4． 34
石楠 9． 24 1． 24
2． 2 不同浓度水粗提物的抑菌率比较 由表 2 可知，6 种
植物水粗提物对灰霉菌均有一定的抑制作用，抑菌率基本都
达到了 50%，其中以石竹水粗提物在 50 mg /ml 时对灰霉菌
的抑制效果最明显，其抑菌率达到了 75． 80%。各种植物水
粗提物的抑制效果与它们的浓度并无明显相关性。在相同
浓度下，6种植物水粗提物对灰霉菌的抑菌率也不同，在 25
mg /ml时抑菌率最高的是马褂木和紫茎泽兰水提取物，为
66． 12%;在 50 mg /ml 时抑菌率最高的是石竹水提取物;在
75 mg /ml时抑菌率最高的是马褂木水提取物，为 67． 74%。
表 2 不同浓度水粗提物的抑菌率 %
粗取物种类
处理浓度∥mg /ml
25 50 75
香樟水粗提物 56． 45 53． 22 51． 61
石楠水粗提物 59． 67 51． 61 56． 45
马褂木水粗提物 66． 12 59． 67 67． 74
石竹水粗提物 50． 00 75． 80 45． 16
紫茎泽兰水粗提物 66． 12 59． 67 61． 29
蓝桉水粗提物 62． 90 54． 83 50． 00
2． 3 不同浓度无水乙醇粗提物的抑菌率比较 由表 3 可
知，香樟、石竹、马褂木、紫茎泽兰、石楠和蓝桉无水乙醇粗提
物对灰霉菌都有一定的抑菌作用，其中效果最明显的是马褂
木，其抑菌率随乙醇粗提物浓度的增加而增加，在浓度为 75
mg /ml时达到 100%;其次是紫茎泽兰、蓝桉、香樟、石竹乙醇
粗提物。各种植物无水乙醇粗提物的抑菌率与浓度无明显
相关性。虽然在相同浓度下 6 种植物无水乙醇粗提物的抑
菌率不同，但整体上在 3种浓度中抑菌效果最明显的是马褂
木。另外结合表 2可知，6 种植物材料的抑菌率基本上表现
为无水乙醇粗提物大于水粗提物，说明无水乙醇粗提物的抑
菌作用较水粗提物强。
表 3 不同浓度无水乙醇粗提物的抑菌率 %
粗取物种类
处理浓度∥mg /ml
25 50 75
石竹乙醇粗提物 70． 96 74． 19 61． 29
紫茎泽兰乙醇粗提物 72． 58 54． 83 99． 74
马褂木乙醇粗提物 64． 51 93． 54 100
香樟乙醇粗提物 67． 74 75． 80 66． 12
石楠乙醇粗提物 61． 29 59． 67 56． 45
蓝桉乙醇粗提物 70． 96 61． 29 64． 51
3 结论
用 2种极性不同的溶剂(水、无水乙醇)对香樟、石楠、蓝
桉、紫茎泽兰、石竹和马褂木叶中的抑菌成分进行粗提，6 种
植物材料除紫茎泽兰外无水乙醇粗提物的提取率均低于水
粗提物。6种植物的不同溶剂粗提物都有一定的抑菌效果，
其中马褂木水和无水乙醇粗提物对灰霉菌的抑制作用显著
高于其他植物的溶剂粗提物，表明马褂木可作为开发植物源
抗灰霉药剂的重点研究对象。关于 6 种植物叶片中抑菌的
有效化学成分还不明确，有待进一步研究。该研究结果可用
于利用植物叶片制备植物源农药的研究与开发，不但在农业
生态环境保护方面具有重要意义，还有利于进一步综合利用
植物资源。
参考文献
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檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
(上接第 245页)
数量和面积均发生变化，斑块面积的差异程度增大。研究旨
在为济南市景观优化配置提供理论依据，为该区域的生态建
设提供规划、决策依据，确保研究区在快速城市化的过程中
健康、稳定发展。
参考文献
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062 安徽农业科学 2012 年