全 文 ：园　艺　学　报　2000 , 27(2):148～ 150
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期:1999-11-01;修回日期:2000-01-10。
研究简报 Research Notes
金叶风箱果离体快繁技术研究
周玉珍
(苏州大学生物系 , 苏州 215151)
提　要　研究了影响金叶风箱果离体快速繁殖的若干因素 , 选出了最适金叶风箱果离体
快繁的外植体为春季解除休眠的冬芽。启动培养基为 MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.01 mg/L ,
萌动率可达 71.1%。继代和增殖培养基为MS+6-BA 1～ 2 mg/ L+NAA 0.05 mg/ L, 继代培养 45
d , 平均增殖系数为 12。试管苗的最适生根培养基为 1/2 MS+IBA 1.0 mg/ L , 生根率 82.6%。
过渡移栽基质为蛭石与珍珠岩 (1∶1), 试管生根苗根长约 1 mm 时移栽 , 成活率达 95.8%。
关键词　金叶风箱果;植物组织培养;离体快速繁殖
1　目的 、 材料与方法
金叶风箱果 (Physocarpus opulifolius `Lutein )原产北美 , 为落叶灌木 , 春季叶色金黄 , 5 月开花 , 花
白色 , 花序密集 , 宜栽于庭园观赏〔1〕。常规播种繁殖往往失去金叶这一观赏特性 , 而扦插繁殖系数低。
为了在短时间内进行大量繁殖 , 作者对其离体快繁技术进行了系统研究 , 为工厂化育苗提供技术依据。
金叶风箱果外植体采自北京林业大学花卉研究所 (1992 年从美国引进), 为植株基部 1 ～ 2 年生枝条
不同时期的嫩枝段和休眠芽。将采集的枝条在洗涤灵中浸泡 5 min , 用自来水冲洗 30 min。将休眠枝插入
自来水中放入培养室内待冬芽解除休眠萌动后取冬芽 , 取长约 1.5 cm 带一腋芽的嫩枝段作外植体 , 在
无菌条件下用70%～ 75%酒精表面消毒 30 ～ 60 s , 再用 0.1% HgCl2 加 2 ～ 3 滴吐温 20 , 消毒 5 ～ 8 min ,
无菌水冲洗 6 次。培养基为 MS , 添加的激素为 6-BA、 NAA 和 IBA , 蔗糖 1%～ 3%, 琼脂粉 0.7%～
0.8%, pH 5.8 ～ 6.0。培养温度 (25±0.5)℃, 光周期为 14 h/10 h (光照/黑暗), 日光灯光源 , 光强
1 400～ 2 270 lx。
将消毒好的材料接种到启动培养基中 , 15～ 20 d 后统计生长状况。当外植体萌动且芽生长至 0.5 cm
长时切离 , 转入增殖培养基上 , 多次反复切割继代培养。以相同培养基上的材料进行增殖及生根试验 ,
每处理 25瓶左右 , 重复 2 ～ 3 次。试验统计方法参考文献〔2〕。
2　结果与分析
2.1 　外植体的选择
试验结果表明 , 1998年 3月 18 日所取自然状态下已萌动的枝条上的芽作外植体最佳 , 其启动培养所
需平均天数为 11 d , 芽萌动率为 92.5%, 而 1997 年 12 月 26日 、 1998 年 2月 25 日 、 3月 5 日所取解除休
眠的冬芽作外植体时启动培养所需天数分别为 41、 31 和 17 d , 芽萌动率为 68.4%、 71.1%、 75.4%。因
此 , 用冬芽作外植体时 , 应取春季即将萌动的冬芽。
在生长季节 4～ 7月 , 取不同时期的嫩枝段作外植体接种 , 结果表明 , 在 4～ 6 月 , 腋芽在启动培养
基中萌动所需的天数较少 , 为 9～ 13 d , 萌芽率高达 97.8%以上。而进入 7 月高温季节后腋芽较弱不饱
满 , 萌动所需天数增加为 17～ 20 d , 且萌动率明显下降 , 仅为 68.2 %。因此 , 7月以后就不适宜再取嫩
枝段作外植体。
2.2 　植物生长调节物质的筛选　
试验结果显示 , 用已解除休眠的冬芽作外植体时 , 启动培养基 (MS)中添加 6-BA 和 NAA 对萌动有
显著影响 , 当添加 6-BA 0.1 mg/ L、 NAA 0.05 mg/ L时 , 试管内芽萌动生长较好。而用嫩枝段作外植体
时 , 植物生长调节物质的作用不显著 , 不加植物生长调节物质 , 腋芽也可以正常萌动生长。
　　用 MS 作基本培养基 , 进行两因子 (6-BA ,
NAA)三水平正交试验。 根据表 1 对试管苗增殖
系数做极差 (R)分析 , 结果 NAA 的极差大 , 为
7.8 , 6-BA 的极差小 , 为 3.91 , 说明 NAA 对增殖
的影响大于 6-BA 。增殖系数平均值显示 6-BA
3 mg/ L+NAA 0.05 mg/L组合最高 , 但增殖分化出
来的苗细弱发脆 , 呈玻璃化。而 6-BA 2 mg/ L+
NAA 0.05mg/ L组合 , 虽然增殖系数居第 4 位 , 但
增殖分化出的苗较壮 , 继代培养时缓苗快。因此 ,
在实际操作和生产应用时 , 我们选用此培养基组
合作为增殖培养基。
嫩枝段作外植体经启动培养后 , 将腋芽切割
转入以上相同培养基内进行增殖培养时 , 腋芽不
形成丛生芽 , 而是伸长生长。通过切割进行微扦
插的方式增殖 , 增殖系数明显比冬芽低 , 一般 1
个腋芽经 30～ 40 d 分化生长 , 可以将其切成 2～ 3
段带一腋芽的小枝段进行继代培养 , 培养基以
NAA 0.1 mg/ L和 6-BA 2 mg/ L组合为好。
2.3 　继代周期和继代次数对试管苗增殖的影响　
表 1　6-BA和 NAA对金叶风箱果试管苗增殖的影响
Table 1　Effect of PGRs composition on plantlet multiplication
培养基
Medium
6-BA
(mg/ L)
NAA
(mg/ L)
平均增殖系数＊
Planlet average
multiplication coefficient ＊
MS 1 (2) 1 (0.05) 12.90
MS 1 (2) 2 (0.1) 13.58
MS 1 (2) 3 (0.2) 11.82
MS 2 (3) 1 (0.05) 16.45
MS 2 (3) 2 (0.1) 13.49
MS 2 (3) 3 (0.2) 12.01
MS 3 (4) 1 (0.05) 14.48
MS 3 (4) 2 (0.1) 12.54
MS 3 (4) 3 (0.2) 11.92
R 3.91 7.8
　　＊冬芽外植体的继二代苗培养 40 d后统计;增殖系
数=增殖茎苗数/原接种芽丛数。
＊The multiplication seedlings are investigated after the sub-
culture seedlings are cultured for 40 days.Multiplication coeffi-
cient = No. of multiplication seedlings/No.of inoculated
shoots.
　　在继代培养中 , 分别将试管苗于 30、 45和 60 d时各转接一次 , 发现30和 45 d转接的苗 4～ 5 d开始
明显生长 , 一个月后生长至最高峰 , 并可持续至 45 d 左右。继代次数对增殖有明显的影响 , 芽分生能力
随继代次数增加而增强 , 至统计时的第 5代还具较高的增殖系数 , 为 14.0。但从第 5 代开始 , 分化出来
的苗明显变弱 , 玻璃化苗增多 , 尤其增殖系数较高的培养瓶内的苗 , 叶片失去了原有的金黄色。
2.4 　外植体类型对试管苗增殖的影响
在继代培养中 , 冬芽外植体试管苗增殖系数随继代次数增加而增加 , 而嫩枝段外植体增殖系数在 2
～ 3 左右。冬芽作外植体的试管苗继代增殖方式是形成丛生芽 , 而嫩枝段外植体的试管苗在继代培养中
只伸长生长 , 并不形成丛生芽 , 其增殖的方式是将伸长的枝段切割 , 一般一个继代周期的枝段可以切成
2 ～ 3 段 1.5～ 2.0 cm 长的小枝段进行微扦插 , 而短于 1.5 cm 长的枝段不容易成活。因此 , 选取冬芽作外
植体是最佳的快繁途径。
2.5 　NAA和 IBA浓度对试管苗生根的影响
1/ 2MS+糖 1.5%基本培养基中 , 以NAA 浓度为 0.1 mg/ L时试管苗生根率最高 , 其次为 0.05 mg/ L ,
过低和过高均不利生根。培养基中 IBA 浓度为 1.0～ 1.5 mg/L时生根率最高。
2.6 　植物生长调节物质对试管苗生根及移栽成活率的影响
统计了各生根培养基中试管苗平均根数和平均主根长及移栽成活率。移栽基质为蛭石与珍珠岩 (1∶
1), 上盆后用薄膜覆盖 , 放入温室内荫棚下。接种后 40 d统计生根率 , 移栽后 15 d统计移栽成活率。表
2 表明 , 试管苗在 5种生根培养基中均可生根 , 但在不添加任何生长素的 1/2 MS 培养基中根数少 , 且无
2 级根和根毛 , 根细弱 , 移栽成活率低;NAA 0.05 mg/L和 0.1 mg/ L的 1/2 MS 培养基中平均根数较多 ,
具2 级根及根毛 , 根较粗壮 , 移栽成活率较高;IBA 0.5 mg/ L和 1.0 mg/ L的 1/2 MS 培养基中平均根数
明显增加 , 根簇生短而粗 , 具根毛 , 移栽成活率达 68%以上。因此 , 最适的生根培养基为 1/2 MS+IBA
1.0 mg/ L。
1492 期　　　　　　　　　　　周玉珍:金叶风箱果离体快繁技术研究 　　　　　　　　　　　　
2.7 　不同根长的试管苗移栽成活率比较
　　本试验中发现 , 在试管内生根的苗 , 根越长 ,
移栽成活率越低。进一步的试验结果表明 , 在过
渡移栽前 , 应将分化的试管苗先转入生根培养基
内 , 在日光下培养至出现根尖 , 长约 1 mm时移栽
到基质中 , 其成活率可达 95.8%, 且新根仅 7 d
就出现。
2.8 　不同移栽基质对移栽成活率的影响
在移栽试验中发现 , 蛭石 、 珍珠岩 、 蛭石与
珍珠岩 (1∶1) 3 种过度移栽基质中 , 后者最佳。
蛭石的吸水保水性好 , 但透气性差;珍珠岩透气
性好但保水性差 , 将两种基质以等体积混合使用
既保水又透气 , 移栽成活率达 95.5%。
经过两年多的摸索 , 初步掌握了金叶风箱果
表 2　NAA和 IBA 对金叶风箱果试管苗生根
及移栽成活的影响
Table 2　Effect of different rooting media on rooting
and root growth of plantlet
培养基
Medium
NAA
(mg
/ L)
IBA
(mg
/L)
平 均
根 数
Average
number
of root
最长主根
平均长
Average
length of
main root
(cm)
生根率
Rooting
rate
(%)
移栽成
活率
Survival
rate
(%)
1/2 MS 0 0 4.1 3.1 62.5 36.2
1/2 MS 0.05 0 7.4 2.8 81.8 44.5
1/2 MS 0.1 0 9.6 1.8 92.3 50.5
1/2 MS 0 0.5 14.7 1.4 68.2 68.3
1/2 MS 0 1.0 16.0 1.8 82.6 69.8
离体快繁技术 , 并具备了进行规模生产育苗的能力。
参 考 文 献
1　张天麟编著.园林树木 1000种.北京:学术书刊出版社 , 1990.87～ 88
2　续九如 , 黄智慧编著.林业试验设计.北京:北京林业大学 , 1991.68～ 70
Studies on the Propagation in Vitro of Physocorpus opulifolius `Lutein
Zhou Yuzhen
(Department of Biology , Suzhou University , Suzhou 215151)
Abstract　Effects of several factors such as medium , cutting materials and plant growth regulators on in vitro cul-
ture and rapid propagation of Physocorpus opulifolius `Lutein were investigated.The buds from the cuttings of two-
year-old branches that would sprout in spring were the optimal explant.The optimal media of initial is MS medium su-
pplemented with 6-BA 0.1 mg/L and NAA 0.01 mg/L.The rate of sprouting was up to 71.1%, The explants differen-
tiated a large number of young buds on MS medium containing 6-BA 1.0-2.0 mg/L and NAA 0.05 mg/L.On this
medium shoot multiplication occurred at a 12-fold rate after 45 days.Shoots were rooted on the 1/2 strength MS medium
supplemented with IBA (1.0 mg/ L)and the rate of rooting was 82.6%.The shoots could be directly rooted in trans-
plantation medium (perlite and vermiculite in equal proportion)with up to 95.8% survival.
Key words　Physocorpus opulifolius `Lutein ;Plant tissue culture;In vitro propagation
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作者地址:浙江杭州 , 浙江大学园艺系 , 邮政编码 310029。
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