全 文 ：２９卷０５期
Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．０５
草　业　科　学
ＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ
７３５－７４０
０５／２０１２
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植物
生产层 钝叶瓦松带芽叶片的组织培养和快速繁殖
张彦妮，韩荣娜
（东北林业大学园林学院，黑龙江 哈尔滨１５００４０）
摘要：以钝叶瓦松（Ｏｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｍａｌａｃｏｐｈｙｌｌｕｓ）带芽叶片为外植体，ＭＳ为基本培养基添加不同质量浓度的６－ＢＡ、
ＮＡＡ和２，４－Ｄ，探讨了不同植物生长调节剂对钝叶瓦松带芽叶片启动的影响，以期筛选出最佳培养基配方，建立
钝叶瓦松组织培养再生体系。结果表明，叶片腋芽最佳启动培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ　３ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　０．１
ｍｇ·Ｌ－１，腋芽增殖的最佳培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ　１．５ｍｇ·Ｌ－１＋２，４－Ｄ　０．２ｍｇ·Ｌ－１，腋芽的增殖倍数为５．３５。
最佳生根培养基为１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．３ｍｇ·Ｌ－１，生根率为９６．６７％，移栽后成活率为７６．６７％。
关键词：钝叶瓦松；带芽叶片；组织培养
中图分类号：Ｑ９４３．１；Ｓ７９１．２４　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１００１－０６２９（２０１２）０５－０７３５－０６
＊
　　钝叶瓦松（Ｏｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｍａｌａｃｏｐｈｙｌｌｕｓ）［１］为景
天科瓦松属的二年生肉质草本植物。在我国东北、
华北、内蒙古等地区均有分布，朝鲜、日本也有分
布［２］。钝叶瓦松系旱生植物，在内蒙古典型草原和
草甸草原地区，为常见的伴生种，生于砾石性山坡或
沙砾质土壤。全草皆可入药，有止血通经之功效［３］。
钝叶瓦松第１年仅有莲座叶，第２年抽茎［４］。叶片
呈莲座状密集排列，总状花序，花期在夏秋季节，开
白色或者白绿色小花［５］。可作为花坛花卉植于山
坡、岩石园或屋顶，是一种颇具开发价值的野生花
卉。迄今为止，对景天科瓦松属植物的组织培养研
究较少，曲伟红和赵建国［６］对瓦松愈伤组织的诱导
进行了研究，而对于钝叶瓦松组织培养方面尚未见
报道。由于野生资源有限，为了快速繁殖出大量的
钝叶瓦松植株，本试验以带芽叶片为材料，进行组织
培养研究，以期为钝叶瓦松大量繁殖提供新的有效
途径，为优良种质资源保存、野生资源的保护以及钝
叶瓦松可持续开发利用的实现提供理论依据。
１　材料与方法
１．１试验材料　钝叶瓦松的植株由东北林业大学
园林学院花圃提供。选取健康的钝叶瓦松带芽叶片
为外植体。
１．２试验方法
１．２．１带芽叶片消毒时间的筛选　参照程林梅等［７］
方法，将采集的钝叶瓦松带芽叶片用洗衣粉水浸泡
１０ｍｉｎ，在流水下冲洗１～２ｈ后，放入超净工作台，
用７５％的乙醇溶液消毒１５～３０ｓ，再用无菌水冲洗
２次，再用０．１％的升汞（ＨｇＣｌ２）溶液分别消毒３、５、
７、９、１１ｍｉｎ，中间不断晃动，然后用无菌水冲洗５～
６次，无菌滤纸吸干外植体表面的水分，用消毒过的
小刀将带有腋芽的叶片切成大小约为０．５～１．０ｃｍ
的小块，接种到 ＭＳ培养基上。每个处理３０个外植
体，重复３次。２周后分别统计不同消毒时间的污
染率、启动率和死亡率。筛选出外植体最佳的消毒
时间。本试验培养基ｐＨ值均调至５．８～６．０，高压
灭菌（１．１ＭＰａ，１２１℃）１５ｍｉｎ。培养室培养温度为
（２５±２）℃，光照强度为１　５００～２　０００ｌｘ，光照时间
为１６ｈ·ｄ－１。
１．２．２钝叶瓦松带芽叶片的启动培养　将消毒后的
带芽叶片接种到添加不同质量浓度６－ＢＡ（１．０、２．０
和３．０ｍｇ·Ｌ－１）、ＮＡＡ（０．１、０．３和０．５ｍｇ·Ｌ－１）
的 ＭＳ培养基上，试验采取二因素三水平的正交试
验设计，每处理接种３０个外植体，３０ｄ后统计钝叶
瓦松带芽叶片的启动率、出芽指数和出愈率。出芽
指数等于发生芽的外植体上出芽数的平均数。
１．２．３腋芽的增殖培养　初代培养得到的腋芽，剪
下后接种增殖培养基上进行丛芽的诱导，试验采用
三因素三水平的正交试验设计，每处理接种３０个外
＊收稿日期：２０１１－０７－２５　　接受日期：２０１１－０９－１４
基金项目：中央高校基本科研业务费专项资金（ＤＬ０９ＢＡ３７）
作者简介：张彦妮（１９７４－），女，山西大同人，副教授，博士，研究方向为园林花卉的繁殖栽培及育种。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｙａｎｎｉ８０８＠１２６．ｃｏｍ
ＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ（Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．０５） ０５／２０１２
植体，３０ｄ后统计腋芽的增殖倍数。
１．２．４组培苗的生根诱导　将高３ｃｍ左右、未生根
的组培苗转至１／２ＭＳ＋ＮＡＡ（０．１、０．３ｍｇ·Ｌ－１）
培养基上进行生根诱导。２０ｄ后分别统计生根率、
根长及生根情况。
１．２．５无菌苗的移栽　选取高３ｃｍ左右、根系健壮
的钝叶瓦松无菌生根苗进行移栽。用镊子小心的取
出生根苗，自来水冲洗掉根上附着的培养基，移栽到
事先准备好的基质中，浇适量水，放置在通风良好、
湿度较大、光照充足的环境下进行培养，观察幼苗生
长情况，３０ｄ后统计移栽成活率，筛选出适宜的移
栽基质。
１．３数据分析　数据采用ＥＸＣＬＥ、ＳＰＳＳ　１７．０软
件进行方差分析及多重比较分析（Ｄｕｎｃａｎ’ｓ法）。
２　结果
２．１钝叶瓦松带芽叶片消毒时间的筛选　随
着０．１％ ＨｇＣｌ２ 处理时间的延长，钝叶瓦松叶片的
污染率逐渐递减，启动率呈先升后降的趋势（表１），
而死亡率却逐渐增加，可见，ＨｇＣｌ２ 消毒效果虽然较
好，但对外植体的活化等方面影响很大，如果消毒时
间过长，就会在杀死外植体表面微生物的同时对植
物细胞也造成损伤，导致外植体死亡率的增加，从而
影响到外植体愈伤组织的诱导。０．１％ＨｇＣｌ２ 处理
５ｍｉｎ污染率和死亡率均较低，方差分析结果显示，
０．１％ＨｇＣｌ２ 处理５ｍｉｎ污染率与其他灭菌时间相
比差异显著，且启动率最高，为５６．６７％，有利于带
芽叶片的启动培养。说明０．１％ＨｇＣｌ２ 处理５ｍｉｎ
最适合钝叶瓦松带芽叶片的消毒。
表１　不同灭菌时间对外植体消毒效果的影响及方差分析结果
Ｔａｂｌｅ　１　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｓｔｅｒｉｌｉｚｉｎｇ　ｔｉｍｅ　ｏｎ　ｅｘｐｌａｎｔｓ’ｓｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ａｎｄ　ｖａｒｉａｎｃｅ　ｒｅｓｕｌｔ
灭菌时间
Ｓｔｅｒｉｌｉｚｉｎｇ　ｔｉｍｅ／ｍｉｎ
接种数／个
Ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｎｕｍｂｅｒ
污染率
Ｐｏｌｕｔｉｏｎ　ｒａｔｅ／％
死亡率
Ｄｅａｔｈ　ｒａｔｅ／％
启动率
Ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ／％
３　 ３０　 ５３．３３ａ ０．００ｄ ３６．６７ｃ
５　 ３０　 ２３．３３ｂ ６．６７ｄ ５６．６７ａ
７　 ３０　 １３．３３ｃ ２０．００ｃ ５０．００ａｂ
９　 ３０　 ６．６７ｃｄ　 ３３．３３ｂ ４３．３３ｂｃ
１１　 ３０　 ０．００ｄ ５６．６７ａ １６．６７ｄ
注：表中数据是３个重复的平均值，不同字母表示不同灭菌时间之间差异显著（Ｐ＜０．０５）。下表同。
Ｎｏｔｅ：Ｔｈｅ　ｆｉｇｕｒｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔａｂｌｅ　ａｒｅ　ｍｅａｎ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｍｅａｎ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ａｔ　０．０５ｌｅｖｅｌ　ａｍｏｎｇ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｓｔｅｒｉｌｉ－
ｚｉｎｇ　ｔｉｍｅ．Ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｂｅｌｏｗ．
２．２钝叶瓦松带芽叶片的启动培养　将带芽
钝叶瓦松叶片接种到不同激素组合的培养基上４ｄ
左右，腋芽开始萌动，１０ｄ左右差异并不显著，有些
腋芽基部开始产生愈伤组织经继代后会分化出根和
不定芽（图１）。其中在 Ａ１、Ａ３、Ａ６ 和 Ａ９ 培养基上
腋芽的萌发率均较高，但 Ａ１ 和 Ａ９ 腋芽长势一般，
Ａ３、Ａ６ 出芽指数相对较高且腋芽长势较好（表２），
可见高质量浓度的６－ＢＡ有利于钝叶瓦松腋芽的萌
发与 生 长，而 高 质 量 浓 度 的 ＮＡＡ（超 过 ０．１
ｍｇ·Ｌ－１）对于钝叶瓦松腋芽生长有抑制作用。因
此高质量浓度的６－ＢＡ（３．０ｍｇ·Ｌ－１）和低质量浓
度的ＮＡＡ（０．１ｍｇ·Ｌ－１）组合是钝叶瓦松带芽叶
片启动的最佳培养基。
２．３腋芽的增殖培养　不同质量浓度６－ＢＡ、
ＮＡＡ和２，４－Ｄ的组合对于腋芽的增殖及苗的长势
影响相差很大。高质量浓度的６－ＢＡ（１．５ｍｇ·Ｌ－１）
和ＮＡＡ（０．１～０．２ｍｇ·Ｌ－１）组合使用有利于带芽
叶片腋芽的增殖，随着６－ＢＡ质量浓度的升高，腋芽
增殖倍数呈增加的趋势，最高达５．３５。方差分析表
明，此组合与其他组合之间存在显著差异，且苗长势
很好（图２Ａ）。但是当低质量浓度的６－ＢＡ（０．５
ｍｇ·Ｌ－１）或６－ＢＡ与２，４－Ｄ组合使用时，腋芽增殖
倍数较小，芽苗长势也较弱，可见在腋芽增殖时低质
量浓度的６－ＢＡ或６－ＢＡ＋２，４－Ｄ对于钝叶瓦松叶片
腋芽的增殖有抑制作用（表３）。因此最适宜带芽叶
片腋芽增殖的培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ　１．５ｍｇ·Ｌ－１＋
ＮＡＡ　０．２ｍｇ·Ｌ－１。
６３７
０５／２０１２ 草　业　科　学 （第２９卷０５期）
表２　带芽叶片的启动培养结果
Ｔａｂｌｅ　２　Ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｌｅａｖｅｓ　ｗｉｔｈ　ｂｕｄｓ
编号
Ｎｕｍｂｅｒ
植物生长调节剂
Ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ／ｍｇ·Ｌ
－１
６－ＢＡ　 ＮＡＡ
接种数／个
Ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ
ｎｕｍｂｅｒ
萌发率
Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｒａｔｅ／％
出愈率
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｃａｌｕｓ
ｒａｔｅ／％
出芽指数
Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ
ｂｕｄｓ　ｉｎｄｅｘ
苗生长状况
Ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ｇｒｏｗｉｎｇ
ｓｔａｔｕｓ
Ａ１ １．０　 ０．１　 ３０　 ８０．００ａ ２６．６７ｃｄ　 １．５４ａ ＋
Ａ２ ２．０　 ０．３　 ３０　 ７３．３３ａｂ　 １０．００ｆ １．５０ａ ＋＋
Ａ３ ３．０　 ０．５　 ３０　 ８０．００ａ ２０．００ｃ １．６７ａ ＋＋＋
Ａ４ １．０　 ０．３　 ３０　 ７３．３３ａｂ　 １６．６７ｄｅｆ　 １．５９ａ ＋＋
Ａ５ ２．０　 ０．５　 ３０　 ７６．６７ａ １３．３３ｅｆ　 １．５７ａ ＋＋
Ａ６ ３．０　 ０．１　 ３０　 ８３．３３ａ ５６．６７ａ １．７２ａ ＋＋＋
Ａ７ １．０　 ０．５　 ３０　 ６３．３３ｂ ２３．３３ｃｄｅ　 １．６３ａ ＋
Ａ８ ２．０　 ０．１　 ３０　 ７６．６７ａ ４０．００ｂ １．５５ａ ＋＋
Ａ９ ３．０　 ０．３　 ３０　 ８０．００ａ ５３．３３ａ １．５４ａ ＋
注：“＋”的数目表示腋芽的长势好坏程度，“＋”表示长势一般，“＋＋”表示长势较好，“＋＋＋”表示长势最好。
Ｎｏｔｅ：Ｔｈｅ　ｎｕｍｂｅｒｓ　ｏｆ“＋”ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ　ｄｅｇｒｅｅｓ　ｏｆ　ｇｏｏｄ　ａｎｄ　ｂａｄ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ，“＋”ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｎｏｒｍａｌ，“＋＋”
ａｒｅ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｂｅｔｔｅｒ，ａｎｄ“＋＋＋”ａｒｅ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｂｅｓｔ．
２．４组培苗的生根诱导　丛生芽中未生根的苗
高３ｃｍ左右时，继代到附加不同质量浓度 ＮＡＡ
（０．１～０．３ｍｇ·Ｌ－１）的１／２ＭＳ培养基中进行生根
诱导。试验中发现钝叶瓦松无菌苗较易生根，在接
种后４ｄ左右开始生根，２０ｄ后统计结果，大部分苗
已经生根，且生根率均在７５％以上，其中，Ｃ３ 培养基
的生根率最高，达９６．６７％，且平均诱导出１４条根
（表４），从方差分析可以看出，Ｃ３ 培养基的生根率与
Ｃ１、Ｃ２ 培养基之间存在显著差异，且诱导出的根较
粗状数量较多（图２Ｂ）。因此钝叶瓦松最适生根培
养基为：１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．３ｍｇ·Ｌ－１。
２．５组培苗的移栽　选择生根良好的钝叶瓦松
生根苗移栽到不同的基质中，３０ｄ后统计不同移栽
基质的移栽成活率。基质珍珠岩∶蛭石∶田间土
（１∶１∶１）的移栽成活率最高，达７６．６７％（表５），与
另外３种基质的成活率之间存在显著差异，且苗的
长势较好（图２Ｃ）。
图１　愈伤组织增殖（Ａ）和分化（Ｂ）
Ｆｉｇ．１　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ（Ａ）ａｎｄ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ（Ｂ）ｏｆ　ｃａｌｕｓ
７３７
ＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ（Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．０５） ０５／２０１２
表３　带芽叶片不定芽的增殖培养
Ｔａｂｌｅ　３　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄｓ　ｆｒｏｍ　ｌｅａｖｅｓ　ｗｉｔｈ　ｂｕｄｓ
编号
Ｎｕｍｂｅｒ
植物生长调节剂
Ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ／ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ　 ＮＡＡ　 ２，４－Ｄ
增殖倍数
Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ｍｕｌｔｉｐｌｅｓ
新芽生长状况
Ｎｅｗ　ｂｕｄｓ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｓｔａｔｕｓ
Ｂ１ ０．５　 ０．０　 ０．０　 ３．４５ｅ
基部有大量愈伤组织发生，芽苗浅黄或绿色，长势较好，有根发生
Ｐｌｅｎｔｙ　ｏｆ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｃａｌｕｓ　ａｔ　ｂａｓｅ，ｓｅｅｄｌｉｎｇ　ｙｅｌｏｗｉｓｈ　ｏｒ　ｇｒｅｅｎ，
ｇｒｏｗｉｎｇ　ｗｅｌ　ｗｉｔｈ　ｒｏｏｔｓ
Ｂ２ １．０　 ０．０　 ０．１　 ３．３８ｅ
基部有大量愈伤组织，芽苗浅黄色，长势很弱
Ｐｌｅｎｔｙ　ｏｆ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｃａｌｕｓ　ａｔ　ｂａｓｅ，ｓｅｅｄｌｉｎｇ　ｙｅｌｏｗｉｓｈ，ｇｒｏｗｉｎｇ
ｖｅｒｙ　ｗｅａｋ
Ｂ３ １．５　 ０．０　 ０．２　 ４．０６ｄ
基部有大量愈伤组织发生，芽苗浅黄，长势较弱，有少许根
Ｐｌｅｎｔｙ　ｏｆ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｃａｌｕｓ　ａｔ　ｂａｓｅ，ｓｅｅｄｌｉｎｇ　ｙｅｌｏｗｉｓｈ，ｇｒｏｗｉｎｇ
ｗｅａｋｅｒ　ｗｉｔｈ　ｆｅｗ　ｒｏｏｔｓ
Ｂ４ ０．５　 ０．２　 ０．１　 ４．１３ｄ
基部有愈伤组织发生，芽苗浅黄色，长势一般，有根发生
Ｉｎｄｕｃｅｄ　ｃａｌｕｓ　ａｔ　ｂａｓｅ，ｓｅｅｄｌｉｎｇ　ｙｅｌｏｗｉｓｈ，ｇｒｏｗｉｎｇ　ｎｏｒｍａｌ　ｗｉｔｈ
ｒｏｏｔｓ
Ｂ５ １．０　 ０．２　 ０．２　 ４．２５ｃ
基部有愈伤组织发生，芽苗较多，小叶绿色或浅黄色，长势较
好，有少许根Ｉｎｄｕｃｅｄ　ｃａｌｕｓ　ａｔ　ｂａｓｅ　ａｎｄ　ｍｏｒｅ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ｗｉｔｈ
ｇｒｅｅｎ　ｏｒ　ｙｅｌｏｗｉｓｈ　ｌｉｔｔｌｅ　ｌｅａｖｅｓ，ｇｒｏｗｉｎｇ　ｗｅｌ　ｗｉｔｈ　ｆｅｗ　ｒｏｏｔｓ
Ｂ６ １．５０　 ０．２　 ０．０　 ５．３５ａ
基部有愈伤组织发生，芽苗多而密，小叶绿色，长势很好
Ｉｎｄｕｃｅｄ　ｃａｌｕｓ　ａｔ　ｂａｓｅ，ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ｍｏｒｅ　ａｎｄ　ｃｌｏｓｅ　ｗｉｔｈ　ｇｒｅｅｎ　ｌｉｔｔｌｅ
ｌｅａｖｅｓ，ｇｒｏｗｉｎｇ　ｂｅｓｔ
Ｂ７ ０．５　 ０．４　 ０．２　 ５．２２ｂ
基部有愈伤组织发生，芽苗较多，浅黄色或浅绿色，长势较好
Ｉｎｄｕｃｅｄ　ｃａｌｕｓ　ａｔ　ｂａｓｅ，ｍｏｒｅ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ｗｉｔｈ　ｙｅｌｏｗｉｓｈ　ｏｒ　ｇｒｅｅｎ－
ｉｓｈ，ｇｒｏｗｉｎｇ　ｗｅｌ
Ｂ８ １．０　 ０．４　 ０．０　 ５．１４ｂ
基部有大量愈伤组织发生，芽苗较多，绿色或浅黄色，长势较好
Ｐｌｅｎｔｙ　ｏｆ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｃａｌｕｓ　ａｔ　ｂａｓｅ，ｍｏｒｅ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ｗｉｔｈ　ｇｒｅｅｎ　ｏｒ
ｙｅｌｏｗｉｓｈ，ｇｒｏｗｉｎｇ　ｗｅｌ
Ｂ９ １．５　 ０．４　 ０．１　 ５．２３ｂ
基部有愈伤组织发生，芽苗多而密，浅黄色，长势一般，有根发生
Ｉｎｄｕｃｅｄ　ｃａｌｕｓ　ａｔ　ｂａｓｅ，ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ｍｏｒｅ　ａｎｄ　ｃｌｏｓｅ　ｗｉｔｈ　ｙｅｌｏｗｉｓｈ，
ｇｒｏｗｉｎｇ　ｎｏｒｍａｌ　ｗｉｔｈ　ｒｏｏｔｓ
图２　钝叶瓦松带芽叶片腋芽的增殖（Ａ）、生根诱导（Ｂ）及移栽（Ｃ）
Ｆｉｇ．２　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ（Ａ），ｒｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｅｄ（Ｂ）ａｎｄ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ（Ｃ）ｏｆ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄ　ｆｒｏｍ　ｌｅａｖｅｓ　ｗｉｔｈ
ｂｕｄｓ　ｏｆ　Ｏｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｍａｌａｃｏｐｈｙｌｌｕｓ
８３７
０５／２０１２ 草　业　科　学 （第２９卷０５期）
表４　生根试验结果
Ｔａｂｌｅ　４　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｔａｋｉｎｇ　ｒｏｏｔｓ　ｔｅｓｔｓ
编号
Ｎｕｍｂｅｒ
最早生根时间
Ｄａｙ　ｏｆ　ｅａｒｌｉｅｓｔ　ｒｏｏｔｉｎｇ／ｄ
生根率
Ｒｏｏｔｉｎｇ　ｒａｔｅ／％
根数／条
Ｒｏｏｔ　ｎｕｍｂｅｒ
根长
Ｒｏｏｔ　ｌｅｎｇｔｈ／ｃｍ
Ｃ１ ４　 ７６．６７ｃ １０ｃ ０．６２ｃ
Ｃ２ ５　 ８６．６７ｂ １１ｂｃ　 ０．６６ｂｃ
Ｃ３ ４　 ９６．６７ａ １４ａ ０．７３ａ
表５　不同栽培基质对组培苗移栽成活率的影响
Ｔａｂｌｅ　５　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｏｎ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｓｅｅｄｌｉｎｇ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ
炼苗基质
Ｓｅｅｄｌｉｎｇ　ａｄａｐｔａｔｉｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ
移栽株数／株
Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ／ｐｌａｎｔ
成活株数／株
Ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ／ｐｌａｎｔ
成活率
Ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ／％
河沙∶蛭石（１∶１）
Ｒｉｖｅｒ　ｓａｎｄ∶ｖｅｒｍｉｃｕｌｉｔｅ（１∶１）
３０　 １３　 ４３．３３ｃ
珍珠岩∶蛭石（２∶１）
Ｐｅｒｌｉｔｅｓ∶ｖｅｒｍｉｃｕｌｉｔｅ（２∶１）
３０　 ７　 ２３．３３ｄ
河沙∶田间土（３∶１）
Ｒｉｖｅｒ　ｓａｎｄ∶ｆｉｅｌｄ　ｓｏｉｌ（３∶１）
３０　 １８　 ６０．００ｂ
珍珠岩∶蛭石∶田间土（１∶１∶１）
Ｐｅｒｌｉｔｅｓ∶ｖｅｒｍｉｃｕｌｉｔｅ∶ｆｉｅｌｄ　ｓｏｉｌ（１∶１∶１）
３０　 ２３　 ７６．６７ａ
３　讨论与结论
关于景天科植物组织培养方面的试验研究已有
很多的报道［８－１０］，国内外有关瓦松属植物的研究报
道更多是围绕药理及分子方面［１１－１２］，关于组培方面
的报道却很少。本试验以钝叶瓦松带芽叶片为外植
体，经过多次试验研究，初步建立了组织培养再生体
系，短期内获得了大量的钝叶瓦松的完整植株。
在钝叶瓦松带芽叶片的培养中，用０．１％升汞
对外植体消毒５ｍｉｎ污染率较低且启动率较高，灭
菌效果最好。在带芽叶片的启动试验中发现：带芽
叶片接种４ｄ左右，腋芽开始萌动，１０ｄ左右叶片展
开；另外试验中发现激素种类和浓度对于叶片腋芽
启动培养有一定的影响，结果表明，高质量浓度的
６－ＢＡ（３．０ｍｇ·Ｌ－１）和低质量浓度的 ＮＡＡ（０．１
ｍｇ·Ｌ－１）组合使用腋芽萌发率最高，最适宜钝叶瓦
松带芽叶片的启动培养。有些腋芽在培养１０ｄ左
右，基部会产生黄绿色或绿色颗粒状的愈伤组织，结
构致密但易碎，经过继代后会分化出根和不定芽，初
步认定为胚性愈伤组织［１３－１５］。因此，有关叶片腋芽
基部产生的是否为胚性愈伤组织以及进一步提高胚
性愈伤组织的诱导率尚待进一步深入研究。
植物生长调节剂在组织培养的过程中有着重要
的作用［１６］。不同的激素组合对于腋芽增殖的效果
各不相同［１７］。对钝叶瓦松来说，在培养基 ＭＳ＋
６－ＢＡ　１．５０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　０．２ｍｇ·Ｌ－１上，腋芽
增殖效果最好，增殖倍数为５．３５，显著高于其他组
合的增殖倍数，苗的长势也较好，因此是钝叶瓦松带
芽叶片腋芽增殖的最佳培养基。在钝叶瓦松组培苗
的生根试验中发现，ＮＡＡ有利于促进钝叶瓦松植
株的生根，其生根的最适培养基为１／２ＭＳ＋ ＮＡＡ
０．３ｍｇ·Ｌ－１，２０ｄ后生根率高达９６．６７％，且根系
粗壮、苗长势较好。试验苗移栽在基质珍珠岩∶蛭
石∶田间土（１∶１∶１）中效果最好，成活率达到
７６．６７％。
本试验以钝叶瓦松的带芽叶片为外植体，首次
成功的建立了组织培养再生体系，为组培苗的移栽、
大面积的人工栽培及其工厂化生产提供了一定的理
论基础与科学依据，为钝叶瓦松的可持续开发利用
奠定了基础。
９３７
ＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ（Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．０５） ０５／２０１２
参考文献
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ｔｉｏｎ　ｂｙ　ｍｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ａｎｄ　ｍａｊｏｒ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｏｆ
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Ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｒａｐｉｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｏｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｍａｌａｃｏｐｈｙｌｌｕｓ
ｌｅａｖｅｓ　ｗｉｔｈ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ
ＺＨＡＮＧ　Ｙａｎ－ｎｉ，ＨＡＮ　Ｒｏｎｇ－ｎａ
（Ｌａｎｄｓｃａｐｅ　Ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ　Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ　１５００４０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｌｅａｖｅｓ　ｗｉｔｈ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｏｆ　Ｏｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｍａｌａｃｏｐｈｙｌｌｕｓ　ｗｅｒｅ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ
ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ　ｏｎ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ＭＳ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎ－
ｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　６－ｂｅｎｚｙｌａｍｉｎｏ　ｐｕｒｉｎｅ，１－ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｅａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ，ａｎｄ　２，４－ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｏｘｙａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｆｏｒ
ｄｅｖｅｌｏｐｐｉｎｇ　ａｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｏ．ｍａｌａｃｏｐｈｙｌｌｕｓ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ
ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｉｎｉｔｉａｔｉｎｇ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｌｅａｖｅｓ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｏｆ　Ｏ．ｍａｌａｃｏｐｈｙｌｌｕｓ　ｗａｓ　ＭＳ
ｍｅｄｉｕｍ　ａｐｐｅｎｄｅｄ　ｗｉｔｈ　３ｍｇ·Ｌ－１　６－ｂｅｎｚｙｌａｍｉｎｏ　ｐｕｒｉｎｅ　ａｎｄ　０．１ｍｇ·Ｌ－１　１－ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｅａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ．Ｔｈｅ
ｏｐｔｉｍｕｍ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｏｆ　Ｏ．ｍａｌａｃｏｐｈｙｌｌｕｓ　ｗａｓ　ＭＳ　ｍｅｄｉｕｍ　ａｄｄｅｄ　ｗｉｔｈ　１．５
ｍｇ·Ｌ－１　６－ｂｅｎｚｙｌａｍｉｎｏ　ｐｕｒｉｎｅ　ａｎｄ　０．０２ｍｇ·Ｌ－１　２，４－ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｏｘｙａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ，ａｎｄ　ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ
ｔｉｍｅｓ　ｗａｓ　５．３５．Ｉｎ　ｒｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｃｕｌｔｕｒｅ，ｓｈｏｏｔ　ｃｌｕｓｔｅｒｓ　ｉｎ　ｔｈｅ１／２ＭＳ　ｍｅｄｉｕｍ　ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ　ｗｉｔｈ　０．３
ｍｇ·Ｌ－１　１－ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｅａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｗｅｒｅ　ｗｅｌ　ｒｏｏｔｅｄ　ａｎｄ　ｇｒｅｗ　ｖｉｇｏｒｏｕｓｌｙ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　９６．６７％ｒａｔｅ　ｏｆ　ｒｏｏｔ　ｆｏｒ－
ｍａｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　７６．６７％．Ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ　ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ｐｌａｎｔ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
ｉｎ　Ｏ．ｍａｌａｃｏｐｈｙｌｌｕｓ　ｆｒｏｍ　ｌｅａｖｅｓ　ｗｉｔｈ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ　ｗａｓ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｏｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｍａｌａｃｏｐｈｙｌｌｕｓ；ｌｅａｆ　ｗｉｔｈ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄｓ；ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒ：ＺＨＡＮＧ　Ｙａｎ－ｎｉ　Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｙａｎｎｉ８０８＠１２６．ｃｏｍ
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