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NaCl胁迫过程中喷施ALA对菘蓝幼苗生长及主要活性成分含量的影响



全 文 :植物资源与环境学报 2014,23(4) :55 - 61
Journal of Plant Resources and Environment
NaCl胁迫过程中喷施 ALA对菘蓝幼苗生长及
主要活性成分含量的影响
唐晓清①,吕婷婷,赵雪玲,金美惠,肖云华,王康才
(南京农业大学园艺学院,江苏 南京 210095)
摘要:以来源于安徽亳州和山西运城的菘蓝(Isatis indigotica Fort.)幼苗为实验材料,对 100 mmol·L -1NaCl胁迫条
件下喷施 50. 0、25. 0、16. 7、12. 5 和 0. 0 mg·L -1 5 -氨基乙酰丙酸(ALA)后幼苗部分生长指标、叶片中靛蓝和靛玉
红含量以及根中表告依春含量的变化进行了研究。结果表明:在 100 mmol·L -1 NaCl 单一胁迫条件下,来源于安
徽亳州的幼苗单株叶鲜质量和叶片中靛蓝和靛玉红含量均低于对照,单株根鲜质量、根冠比以及根中表告依春含
量均高于对照;来源于山西运城的幼苗单株叶和根鲜质量、叶片中靛玉红含量和根中表告依春含量均低于对照,根
冠比和叶片中靛蓝含量均高于对照。在 NaCl胁迫过程中喷施 ALA对菘蓝幼苗生长和有效成分的积累均有不同效
应。其中,喷施 25. 0 mg·L -1 ALA后安徽亳州产幼苗单株叶和根鲜质量均最高且显著高于 NaCl 单一胁迫处理
组;喷施 16. 7 mg·L -1ALA后山西运城产幼苗单株叶和根鲜质量均较高但与 NaCl 单一胁迫处理组无显著差异。
喷施 50. 0 mg·L -1ALA后安徽亳州产幼苗叶片中靛蓝含量最高(0. 376 mg·g -1) ,喷施 25. 0 mg·L -1ALA后其叶
片中靛玉红含量最高(9. 977 mg·g -1) ,喷施 16. 7 mg·L -1ALA 后其根中表告依春含量最高(0. 229 mg·g -1) ,且
均显著高于 NaCl单一胁迫处理组;喷施 16. 7 mg·L -1 ALA 后山西运城产幼苗叶片中靛蓝含量最高(0. 282 mg·
g -1) ,喷施 12. 5 mg·L -1ALA后其叶片中靛玉红含量和根中表告依春含量均最高(分别为 4. 526 和 0. 301 mg·
g -1) ,且均显著高于 NaCl单一胁迫处理组。研究结果表明:喷施适宜浓度 ALA能够有效减轻 NaCl 胁迫对菘蓝幼
苗生长的影响、提高其体内药用活性成分的含量;总体上看,产自安徽亳州的菘蓝幼苗的耐盐性较强,且不同种源
适宜的 ALA浓度也有一定差异。
关键词:菘蓝;5 -氨基乙酰丙酸(ALA) ;NaCl胁迫;生长;主要活性成分
中图分类号:Q945. 78;Q946. 8;S567. 2. 048 文献标志码:A 文章编号:1674 - 7895(2014)04 - 0055 - 07
DOI:10. 3969 / j. issn. 1674 - 7895. 2014. 04. 08
Effect of spraying ALA on growth and main active component content of Isatis indigotica seedling
during NaCl stress process TANG Xiaoqing①,LYU Tingting,ZHAO Xueling,JIN Meihui,XIAO
Yunhua,WANG Kangcai (College of Horticulture,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,
China) ,J. Plant Resour. & Environ. 2014,23(4) :55 - 61
Abstract:Taking Isatis indigotica Fort. seedlings from Bozhou of Anhui and Yuncheng of Shanxi as
experimental materials,changes of some growth indexes,contents of indigo and indirubin in leaf and
epigoitrin content in root of seedling after spraying 50. 0,25. 0,16. 7,12. 5 and 0. 0 mg·L -1
5-aminolevulinic acid (ALA)under 100 mmol·L -1NaCl stress condition were researched. The results
show that under 100 mmol·L -1 NaCl single stress condition,leaf fresh weight per plant and contents of
indigo and indirubin in leaf of seedling from Bozhou of Anhui all are lower than those of the control,and
root fresh weight per plant,root-shoot ratio and epigoitrin content in root all are higher than those of the
control;while,fresh weights of leaf and root per plant,indirubin content in leaf and epigoitrin content in
root of seedling from Yuncheng of Shanxi all are lower than those of the control,and both root-shoot ratio
and indigo content in leaf are higher than those of the control. During NaCl stress process,there are
收稿日期:2014 - 02 - 25
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31171486)
作者简介:唐晓清(1970—) ,女,四川威远人,博士,副教授,主要研究方向为药用植物栽培与中药质量控制。
①通信作者 E-mail:xqtang@ njau. edu. cn
different effects of spraying ALA on growth and accumulation of active components of I. indigotica
seedling. In which,after spraying 25. 0 mg·L -1 ALA,fresh weights of leaf and root per plant of
seedling from Bozhou of Anhui are the highest and are significantly higher than those in NaCl single stress
treatment group;while after spraying 16. 7 mg·L -1 ALA,those from Yuncheng of Shanxi are high but
with no significant difference from those in NaCl single stress treatment group. Indigo content in leaf of
seedling from Bozhou of Anhui is the highest (0. 376 mg·g -1)after spraying 50. 0 mg·L -1 ALA,its
indirubin content in leaf and epigoitrin content in root are also the highest (9. 977 and 0. 229 mg·g -1,
respectively)after spraying 25. 0 and 16. 7 mg·L -1 ALA,respectively,and all of them are significantly
higher than those in NaCl single stress treatment group;indigo content in leaf of seedling from Yuncheng
of Shanxi is the highest (0. 282 mg·g -1)after spraying 16. 7 mg·L -1 ALA,its indirubin content in
leaf and epigoitrin content in root are the highest (4. 526 and 0. 301 mg· g -1,respectively)after
spraying 12. 5 mg·L -1 ALA,and all of them are significantly higher than those in NaCl single stress
treatment group. It is suggested that spraying ALA with suitable concentration can effectively reduce the
effect of NaCl stress on growth of I. indigotica seedling and enhance content of medicinal active
components in vivo. In general,salt tolerance of I. indigotica seedling from Bozhou of Anhui is stronger,
and the suitable concentration of ALA for different provenances also has a certain difference.
Key words:Isatis indigotica Fort.;5-aminolevulinic acid (ALA) ;NaCl stress;growth;main active
component
5 -氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,ALA)
是动植物体内自然存在的一种化合物,一定浓度的
ALA对植物生长具有调节作用[1],有利于提高植物适
应逆境(盐胁迫[2]、干旱胁迫[3]、冷胁迫[4]、弱光条
件[5])的能力。
目前,中国盐碱土面积已有 2 × 107 hm2,并随现
代灌溉技术的发展还将不断扩大;盐害可造成植物吸
水能力减少,引起植物生理干旱、细胞离子中毒、光合
作用下降、呼吸作用不稳定及蛋白质合成受阻等问
题[6]。由于大多数农作物为耐盐性较弱的淡土植物,
因此,提高作物耐盐性及加强盐碱土的生物治理和综
合开发是目前农业科学研究的重大课题之一。
菘蓝 (Isatis indigotica Fort.)为 十 字 花 科
(Brassicaceae)植物,其叶为常用中药“大青叶”[7]20、
根为常用中药“板蓝根”[7]191。水分胁迫条件下菘蓝
体内的有机酸及生物碱类成分能够发生明显变
化[8 - 9],而盐胁迫对菘蓝叶内的靛玉红含量也有较大
影响[10],表明逆境胁迫对菘蓝体内的次生物质代谢
影响较大。
在弱光条件下,低浓度 ALA 处理可以提高菘蓝
的生物学产量;而在其生物碱积累期,较高浓度的
ALA处理可以提高菘蓝的药用成分含量[11]。吕婷婷
等[12]的研究结果也表明:16. 7 mg·L -1 ALA 处理能
够有效缓解盐胁迫对菘蓝种子萌发及幼苗抗氧化酶
系统的影响、提高植株的抗盐性。为了明确不同浓度
ALA处理对耐盐性不同的菘蓝种源幼苗的生长和活
性成分含量的影响,作者以来自安徽亳州(耐盐性较
强)和山西运城(耐盐性较弱)的 2 个菘蓝种源为实验
材料,研究了 100 mmol·L -1NaCl 胁迫条件下喷施不
同浓度 ALA 对菘蓝幼苗生长及体内靛蓝、靛玉红和
表告依春 3 个主要活性成分含量的影响,以期为盐逆
境条件下菘蓝次生代谢产物的调控提供实验基础。
1 材料和方法
1. 1 材料
供试材料为来自安徽亳州和山西运城的菘蓝栽
培植株,由南京农业大学园艺学院王康才教授鉴定;
其中,安徽亳州种源的耐盐性相对较强,山西运城种
源的耐盐性相对较弱。
于 2013 年 4 月 28 日在南京农业大学日光温室
内进行播种。选取 2 个菘蓝种源的饱满种子分别播
种于直径 34 cm、高 40 cm 的塑料盆中,栽培基质为
W(蛭石)∶ W(珍珠岩)∶ W(园土)= 2∶ 1∶ 1 的混合基
质;出苗后进行常规管理并适时间苗。
供试 ALA购自苏州益安生物科技有限公司,现
配现用;靛蓝标准品(批号 110716 - 201111)、靛玉红
标准品(批号 110717 - 200204)和表告依春标准品
(批号 111753 - 201304)均购自中国食品药品检定研
究院;三氯甲烷为分析纯。
1. 2 方法
1. 2. 1 NaCl 胁迫和 ALA 处理方法 当幼苗长出 4
65 植 物 资 源 与 环 境 学 报 第 23 卷
片真叶时,每盆保留长势一致的幼苗 12 株,于出苗
20 d后向幼苗根部浇灌 Hoagland营养液,每盆 1 L,每
10 天浇灌 1 次。于出苗 40 d后开始 NaCl胁迫处理,
在每盆幼苗的根部均匀浇灌 100 mmol·L -1 NaCl 处
理液 1 L(对照浇灌等量清水),每 7 天浇灌 1 次,共浇
灌 5 次;在每次浇灌 NaCl溶液 3 d后进行 ALA处理,
于傍晚将不同浓度 ALA 溶液喷洒至幼苗全株,以叶
片背面滴水为限,喷施前均加入体积分数 0. 01%
吐温 - 20 作为展着剂,每盆喷洒 0. 5 L,每 7 天喷洒 1
次,共喷洒 5 次。其中,CK 为 0 mmol·L -1 NaCl 和 0
mg·L -1 ALA;T0 为 100 mmol·L -1 NaCl 和 0 mg·
L -1 ALA;T1 为 100 mmol·L -1 NaCl 和 50 mg·L -1
ALA;T2 为 100 mmol·L -1 NaCl和 25 mg·L -1 ALA;
T3 为 100 mmol·L -1 NaCl 和 16. 7 mg·L -1 ALA;T4
为 100 mmol·L -1 NaCl和 12. 5 mg·L -1 ALA。每处
理 5 盆,每盆视为 1 个重复。
1. 2. 2 单株不同器官鲜质量测定 于最后 1 次 ALA
处理 7 d后采样测定单株叶片和根的鲜质量。每处理
随机采集 10 株幼苗,用蒸馏水洗净并吸干表面水分,
从基部将叶片和根分开,分别称量单株叶片和根的鲜
质量,按公式“根冠比 =单株根鲜质量 /单株叶片鲜质
量”计算根冠比。
1. 2. 3 主要活性成分含量测定 将根和叶片分别置
于 105 ℃杀青 15 min,然后置于 60 ℃条件下烘干至
恒质量,粉碎并过 60 目筛;叶片粉末用于靛蓝和靛玉
红含量测定,根粉末用于表告依春含量测定。
1. 2. 3. 1 靛蓝和靛玉红含量测定 采用 HPLC
法[7]21测定叶片中靛蓝和靛玉红含量。色谱条件:岛
津 LC -20 高效液相色谱仪,SPD - 20 检测器;柱温
40 ℃;流动相为 V(甲醇)∶ V(水)= 75∶ 25;检测温度
25 ℃;检测波长 289 nm;理论塔板数不低于 4 000(以
靛玉红计)。
精密称取靛蓝和靛玉红标准品各 100 mg,分别用
甲醇溶解后定容至 50 mL,摇匀后用孔径 0. 45 μm 微
孔滤膜过滤;精密吸取靛蓝和靛玉红标准品溶液各 5、
8、10、15 和 20 μL,按上述色谱分析条件进行 HPLC分
析。以色谱峰面积为纵坐标(Y)、标准品浓度为横坐
标 (X)进行标准曲线拟合。靛蓝标准曲线的
回归方程为 Y靛蓝 =(2. 4 × 10
6)X + 12 273. 0,r = 0. 999
8(n = 3),线性范围为 40 ~ 400 μg;靛玉红标准曲线的
回归方程为 Y靛玉红 =(1. 9 × 10
4)X + 2 282. 2,r = 0.
999 1(n = 3),线性范围为 40 ~ 400 μg。
精密称取各处理组叶片粉末 0. 5 g,每个样品称
取 3 份,加入 100 mL三氯甲烷,浸泡 15 h后用索氏提
取器于 80 ℃水浴中回流提取至无色,提取液减压浓
缩蒸干,残渣用甲醇溶解并定容至 100 mL,摇匀后用
0. 45 μm微孔滤膜过滤;吸取供试样液 20 μL,按上述
色谱分析条件进行 HPLC 分析,并根据标准曲线计算
叶片中靛蓝和靛玉红的含量。
1. 2. 3. 2 表告依春含量的测定 采用 HPLC 法[7]191
测定根中表告依春的含量。色谱条件:岛津 LC - 20
高效液相色谱仪,SPD - 20 检测器;柱温 40 ℃;流动
相为 V(甲醇)∶ V(体积分数 0. 02%磷酸溶液)= 10∶
90;检 测 温 度 25 ℃;检测波长 245 nm;
理论塔板数不低于 5 000(以表告依春计)。
精密称定表告依春标准品 0. 02 mg,用甲醇配制
成质量浓度 40 μg·mL -1表告依春标准品溶液;分别
吸取 2、4、8、16 和 20 μL,按上述色谱条件进行 HPLC
分析。以色谱峰面积为纵坐标(Y)、标准品浓度为横
坐标(X)进行标准曲线拟合。表告依春标准曲线的
回归方程为 Y =(6. 2 × 106)X + 18 923. 0,r = 0. 999
6 (n = 3),线性范围为 40 ~ 320 μg。
精密称定各处理组根粉末 1 g,每个样品称取 3
份,精密加入 50 mL蒸馏水并称量总质量;煎煮 2 h后
冷却并再次称量总质量,并用蒸馏水补足减失的质
量;摇匀并过滤,滤液于 5 000 r·min -1离心 10 min,
上清液即为样品溶液。精密吸取各样品溶液 20 μL,
按上述色谱条件进行 HPLC 分析,并根据标准曲线计
算根中表告依春的含量。
1. 3 数据处理和分析
实验数据采用 EXCEL 2003 和 SPSS 17. 0 软件进
行数据处理和统计分析,并采用 Duncan’s 新复极差
法比较不同处理间的差异显著性。
2 结果和分析
2. 1 NaCl胁迫过程中喷施 ALA对不同种源菘蓝幼
苗生长的影响
在 100 mmol·L -1 NaCl 胁迫过程中喷施不同浓
度 ALA 对不同种源菘蓝单株叶片和根的鲜质量以及
根冠比的影响见表 1。
2. 1. 1 产自安徽亳州的幼苗生长指标比较 对来源于
安徽亳州的菘蓝幼苗部分生长指标的测定结果(表 1)显
示 :100 mmo l·L -1 NaCl 单 一胁迫处理对其地上
75第 4 期 唐晓清,等:NaCl胁迫过程中喷施 ALA对菘蓝幼苗生长及主要活性成分含量的影响
表 1 NaCl胁迫过程中喷施不同浓度 5 -氨基乙酰丙酸(ALA)对来源于安徽亳州和山西运城的菘蓝幼苗生长的影响(珚X ± SD)1)
Table 1 Effect of spraying 5-aminolevulinic acid (ALA)with different concentrations on growth of Isatis indigotica Fort. seedlings from Bozhou
of Anhui and Yuncheng of Shanxi during process of NaCl stress (珚X ± SD)1)
处理组
Treatment group
NaCl浓度 /mmol·L -1
Conc. of NaCl
ALA浓度 /mg·L -1
Conc. of ALA
单株叶鲜质量 / g
Leaf fresh weight per plant
单株根鲜质量 / g
Root fresh weight per plant
根冠比
Root-shoot ratio
来源于安徽亳州的种源 Provenance from Bozhou of Anhui
CK 0 0. 0 14. 07 ± 2. 51b 1. 82 ± 0. 74cde 0. 13 ± 0. 04c
T0 100 0. 0 10. 88 ± 1. 81bc 2. 96 ± 0. 91bcd 0. 27 ± 0. 07ab
T1 100 50. 0 11. 66 ± 0. 64bc 2. 87 ± 1. 39bcd 0. 24 ± 0. 09abc
T2 100 25. 0 18. 39 ± 4. 92a 3. 85 ± 0. 97a 0. 22 ± 0. 07abc
T3 100 16. 7 11. 14 ± 2. 87bc 3. 20 ± 0. 74bc 0. 30 ± 0. 07a
T4 100 12. 5 8. 59 ± 1. 88cd 1. 45 ± 0. 32de 0. 18 ± 0. 06bc
来源于山西运城的种源 Provenance from Yuncheng of Shanxi
CK 0 0. 0 18. 61 ± 0. 74a 2. 66 ± 0. 87a 0. 14 ± 0. 05c
T0 100 0. 0 11. 61 ± 0. 91bc 2. 56 ± 0. 26ab 0. 23 ± 0. 04ab
T1 100 50. 0 10. 35 ± 2. 15c 1. 48 ± 0. 39cd 0. 15 ± 0. 07c
T2 100 25. 0 12. 31 ± 0. 97bc 1. 65 ± 0. 32bcd 0. 14 ± 0. 03c
T3 100 16. 7 16. 67 ± 3. 07b 2. 52 ± 1. 12ab 0. 29 ± 0. 03a
T4 100 12. 5 10. 11 ± 1. 74c 1. 90 ± 0. 49bc 0. 23 ± 0. 04ab
1)同列中不同的小写字母表示在 0. 05 水平上的差异显著性 Different small letters in the same column indicate the significant difference at 0. 05 level.
部分生长有明显的抑制作用,其单株叶鲜质量低于对
照,而单株根鲜质量则高于对照,根冠比则显著大于
对照。在 100 mmol·L -1 NaCl胁迫过程中喷施 50. 0、
25. 0 和 16. 7 mg·L -1 ALA 后,其单株叶鲜质量均高
于 NaCl单一胁迫处理组,而喷施 12. 5 mg·L -1 ALA
后其单株叶鲜质量则低于 NaCl 单一胁迫处理组,且
在所有处理组中最低;喷施 25. 0 mg·L -1 ALA 后单
株叶鲜质量最大(18. 39 g) ,显著(P < 0. 05)高于其他
浓度 ALA 处理组以及对照组。在 100 mmol·L -1
NaCl胁迫过程中喷施 25. 0 mg·L -1ALA,幼苗单株根
鲜质量最大(3. 85 g) ,均与对照及其他处理组间有显
著差异;喷施 12. 5 mg·L -1ALA后单株根鲜质量低于
对照但差异不显著。在 100 mmol·L -1 NaCl 胁迫过
程中喷施不同浓度 ALA,幼苗根冠比均高于对照,但
仅 NaCl单一胁迫处理组和 16. 7 mg·L -1ALA处理组
幼苗的根冠比与对照差异显著,其余处理组与对照组
间及各处理组间幼苗根冠比均无显著差异。
2. 1. 2 产自山西运城的幼苗生长指标比较 对来源
于山西运城的菘蓝幼苗部分生长指标的测定结果(表
1)显示:100 mmol·L -1 NaCl 单一胁迫处理对菘蓝幼
苗地上部分和地下部分的生长均具有明显的抑制作
用,单株叶和根的鲜质量均低于对照,而根冠比则大
于对照。在 100 mmol·L -1 NaCl 胁迫过程中,喷施
25. 0 和 16. 7 mg·L -1ALA后幼苗单株叶鲜质量均高
于 NaCl 单一胁迫处理组,其中喷施 16. 7 mg·L -1
ALA后单株鲜叶质量最大(16. 67 g) ,但与 NaCl 单一
胁迫处理组间无显著差异;而喷施 50. 0 和 12. 5 mg·
L -1ALA后单株叶鲜质量则低于 NaCl 单一胁迫处理
组。在 100 mmol·L -1NaCl胁迫过程中,喷施 50. 0 ~
12. 5 mg·L -1 ALA后幼苗单株根鲜质量均低于对照
和 NaCl单一胁迫处理组,其中,喷施 16. 7 mg·L -1
ALA后幼苗单株根鲜质量最大(2. 52 g) ,但与对照和
NaCl单一胁迫处理组间均无显著差异。在 100 mmol
·L -1 NaCl胁迫过程中,喷施 16. 7 和 12. 5 mg·L -1
ALA后幼苗的根冠比均显著高于对照,但与 NaCl 单
一胁迫处理组无显著差异;而喷施 50. 0 和 25. 0 mg·
L -1ALA后幼苗的根冠比均与对照无显著差异,但均
显著低于其他处理组。
2. 1. 3 不同种源幼苗生长指标的综合分析 比较结
果表明(表 1) :在 100 mmol·L -1 NaCl单一胁迫条件
下,来源于安徽亳州和山西运城的菘蓝幼苗的单株叶
鲜质量分别较各自的对照低 22. 67%和 37. 61%;而
来源于安徽亳州的幼苗的单株根鲜质量则比对照高
62. 64%,来源于山西运城的幼苗单株根鲜质量则比
对照低 3. 76%,说明产自安徽亳州的菘蓝幼苗的耐盐
性高于产自山西运城的幼苗。在 100 mmol· L -1
NaCl胁迫过程中喷施 25. 0 mg·L -1ALA 后来源于安
徽亳州的幼苗单株叶和根的鲜质量均最高,分别比
NaCl单一胁迫处理组高 69. 03%和 30. 07%;而喷施
16. 7 mg·L -1ALA 后来源于山西运城的幼苗单株叶
85 植 物 资 源 与 环 境 学 报 第 23 卷
和根鲜质量均较高,分别比 NaCl 单一胁迫处理组高
43. 58%和低 1. 56%。
上述实验结果表明:在 NaCl 胁迫过程中喷施较
低浓度 ALA 对菘蓝叶片的生长有促进作用并进而促
进其根的生长,由此说明适宜浓度的 ALA 有利于缓
解菘蓝幼苗受到的 NaCl 胁迫,使其叶和根的生长量
明显提高。此外,在 NaCl 胁迫过程中喷施同浓度
ALA,来源于安徽亳州和山西运城的菘蓝幼苗的各项
生长指标有明显差异,说明耐盐性不同的菘蓝种源适
应的 ALA水平也不同。
2. 2 NaCl胁迫过程中喷施 ALA对不同种源菘蓝幼
苗主要活性成分含量的影响
在 100 mmol·L -1 NaCl 胁迫过程中喷施不同浓
度 ALA 对不同种源菘蓝幼苗叶片中靛蓝和靛玉红含
量及根中表告依春含量的影响见表 2。
2. 2. 1 对叶片中靛蓝和靛玉红含量的影响 对来源
于安徽亳州的菘蓝幼苗叶片中靛蓝和靛玉红含量的
分析结果(表 2)显示:在 100 mmol·L -1 NaCl单一胁
迫条件下,幼苗叶片中靛蓝和靛玉红含量均显著低于
对照(P < 0. 05)。在 100 mmol·L -1 NaCl 胁迫过程
中喷施 50. 0 ~ 12. 5 mg·L -1 ALA,随 ALA浓度降低,
叶片中靛蓝含量也逐渐降低,其中,喷施 50. 0 mg·
L -1ALA后叶片中靛蓝含量最高(0. 376 mg·g -1) ,并
与各处理组间存在显著差异(P < 0. 05) ;而叶片中靛
玉红含量则随 ALA 浓度降低呈低浓度时增加、高浓
度时降低的趋势,其中,喷施 25. 0 mg·L -1ALA 后叶
片中靛玉红含量最高(9. 977 mg·g -1) ,且与各处理
组间存在显著差异。
表 2 NaCl胁迫过程中喷施不同浓度 5 -氨基乙酰丙酸(ALA)对来源于安徽亳州和山西运城的菘蓝幼苗主要活性成分含量的影响(珚X ± SD)1)
Table 2 Effect of spraying 5-aminolevulinic acid (ALA)with different concentrations on main active component content in Isatis indigotica Fort.
seedlings from Bozhou of Anhui and Yuncheng of Shanxi during process of NaCl stress (珚X ± SD)1)
处理组
Treatment group
NaCl浓度 /mmol·L -1
Conc. of NaCl
ALA浓度 /mg·L -1
Conc. of ALA
叶中靛蓝
含量 /mg·g - 1
Indigo content in leaf
叶中靛玉红
含量 /mg·g - 1
Indirubin content in leaf
根中表告依春
含量 /mg·g - 1
Epigoitrin content in root
来源于安徽亳州的种源 Provenance from Bozhou of Anhui
CK 0 0. 0 0. 453 ± 0. 007a 5. 847 ± 0. 698b 0. 169 ± 0. 005d
T0 100 0. 0 0. 249 ± 0. 013c 3. 181 ± 0. 090c 0. 181 ± 0. 001c
T1 100 50. 0 0. 376 ± 0. 005b 2. 125 ± 0. 072d 0. 181 ± 0. 001c
T2 100 25. 0 0. 209 ± 0. 004d 9. 977 ± 0. 696a 0. 224 ± 0. 003a
T3 100 16. 7 0. 183 ± 0. 002e 1. 099 ± 0. 058e 0. 229 ± 0. 003a
T4 100 12. 5 0. 172 ± 0. 004e 0. 838 ± 0. 060e 0. 187 ± 0. 003b
来源于山西运城的种源 Provenance from Yuncheng of Shanxi
CK 0 0. 0 0. 212 ± 0. 007b 3. 008 ± 0. 400b 0. 526 ± 0. 031a
T0 100 0. 0 0. 246 ± 0. 009b 1. 947 ± 0. 116c 0. 248 ± 0. 002c
T1 100 50. 0 0. 270 ± 0. 012a 1. 701 ± 0. 118cd 0. 201 ± 0. 006d
T2 100 25. 0 0. 241 ± 0. 001b 1. 464 ± 0. 149d 0. 189 ± 0. 002d
T3 100 16. 7 0. 282 ± 0. 006a 2. 820 ± 0. 070b 0. 235 ± 0. 001c
T4 100 12. 5 0. 232 ± 0. 009b 4. 526 ± 0. 225a 0. 301 ± 0. 001b
1)同列中不同的小写字母表示在 0. 05 水平上的差异显著性 Different small letters in the same column indicate the significant difference at 0. 05 level.
对来源于山西运城的菘蓝幼苗叶片中靛蓝和靛
玉红含量的分析结果(表 2)显示:在 100 mmol·L -1
NaCl单一胁迫条件下,幼苗叶片中靛蓝含量略高于对
照、靛玉红含量则显著低于对照。在 100 mmol·L -1
NaCl胁迫过程中喷施 50. 0 ~ 12. 5 mg·L -1 ALA后幼
苗叶片中靛蓝含量均高于对照,且喷施 50. 0 和 16. 7
mg·L -1ALA 后叶片中靛蓝含量均显著高于对照及
其他处理组,其中喷施 16. 7 mg·L -1ALA后叶片中靛
蓝含量最高(0. 282 mg·g -1) ;叶片中靛玉红含量则
随着 ALA 浓度降低呈低浓度时降低、高浓度时增加
的趋势,其中喷施 12. 5 mg·L -1ALA后叶片中靛玉红
含量最高(4. 526 mg·g -1) ,显著高于对照及其他处
理组。
比较结果表明:在 100 mmol·L -1 NaCl单一胁迫
条件下,来源于安徽亳州的菘蓝幼苗叶片中靛蓝含量
比对照低 45. 03%,而来源于山西运城的菘蓝幼苗叶
片中靛蓝含量则比对照高 16. 04%;来源于安徽亳州
和山西运城的幼苗叶片中靛玉红含量分别比对照低
95第 4 期 唐晓清,等:NaCl胁迫过程中喷施 ALA对菘蓝幼苗生长及主要活性成分含量的影响
45. 60%和 35. 27%。在 100 mmol·L -1 NaCl 胁迫过
程中,喷施 50. 0 和 25. 0 mg·L -1 ALA后来源于安徽
亳州的幼苗叶片中靛蓝和靛玉红含量均最高,分别比
NaCl单一胁迫处理组高 51. 00%和 213. 64%;而喷施
16. 7 和 12. 5 mg·L -1 ALA 后,来源于山西运城的幼
苗叶片中靛蓝和靛玉红含量最高,分别比 NaCl 单一
胁迫处理组高 14. 63%和 132. 46%。
上述结果表明:来源于安徽亳州的菘蓝幼苗叶片
中靛蓝和靛玉红的合成和积累对 NaCl 胁迫的敏感性
强于来源于山西运城的菘蓝幼苗。在 100 mmol·L -1
NaCl胁迫条件下喷施适宜浓度的 ALA 能提高菘蓝幼
苗叶片内靛蓝和靛玉红含量,其中,喷施较高浓度
(25. 0 ~ 50. 0 mg·L -1)ALA 对来源于安徽亳州的菘
蓝幼苗叶片中靛蓝和靛玉红的积累有利,而喷施较低
浓度(12. 5 ~ 16. 7 mg·L -1)ALA 则对来源于山西运
城的菘蓝幼苗叶片中靛蓝和靛玉红的积累有利。
2. 2. 2 对根中表告依春含量的影响 对来源于安徽
亳州的菘蓝幼苗根中的表告依春含量的分析结果(表
2)显示:在 100 mmol·L -1 NaCl 单一胁迫条件下,菘
蓝幼苗根中的表告依春含量显著高于对照(P < 0.
05)。在 100 mmol·L -1 NaCl 胁迫过程中喷施 50. 0
~ 16. 7 mg·L -1 ALA 后,根中表告依春含量随 ALA
浓度的降低逐渐增加,但在喷施 12. 5 mg·L -1ALA后
又有所降低;其中,喷施 25. 0、16. 7 和 12. 5 mg·L -1
ALA后根中表告依春含量显著高于 NaCl 单一胁迫处
理 组, 且 喷 施 16. 7 mg · L -1 ALA
后根中表告依春含量最高(0. 229 mg·g -1)。
对来源于山西运城的菘蓝幼苗根中表告依春含
量的分析结果(表 2)显示:在 100 mmol·L -1 NaCl单
一胁迫条件下,幼苗根中表告依春含量显著低于对
照。在 100 mmol·L -1 NaCl 胁迫过程中喷施 50. 0 ~
12. 5 mg·L -1 ALA 后,根中表告依春含量随 ALA 浓
度降低呈低浓度时降低、高浓度时增加的趋势,其中
喷施 12. 5 mg·L -1 ALA 后根中表告依春含量最高
(0. 301 mg·g -1) ,显著高于其他处理组但显著低于
对照。
比较结果表明:在 100 mmol·L -1 NaCl胁迫条件
下,来源于安徽亳州的菘蓝幼苗根中表告依春含量比
对照高 7. 10%,而来源于山西运城的幼苗根中表告依
春则比对照低 52. 85%;在 100 mmol·L -1 NaCl 胁迫
过程中喷施 16. 7 和 12. 5 mg·L -1 ALA后,来源于安
徽亳州和山西运城的幼苗根中表告依春含量均最高,
分别比 NaCl单一胁迫处理组高 26. 52%和 21. 37%。
上述研究结果说明:100 mmol·L -1 NaCl 胁迫对
来源于安徽亳州的菘蓝幼苗根中表告依春的积累有
利,而对来源于山西运城的菘蓝幼苗根中表告依春的
积累则有抑制作用。而在 NaCl 胁迫条件下喷施适宜
浓度 ALA 则有利于菘蓝幼苗根中表告依春的积累有
利,其中喷施 25. 0 和 16. 7 mg·L -1ALA 对来源于安
徽亳州的菘蓝幼苗根中表告依春的积累有利,而喷施
12. 5 mg·L -1ALA 则对来源于山西运城的菘蓝幼苗
根中表告依春的积累有利。
3 讨论和结论
适宜浓度的 ALA能够有效缓解植物所遭受的各
种逆境胁迫伤害[13 - 15];Balestrasse 等[16]认为:ALA 能
通过提高血红素蛋白的活性有效减轻低温胁迫对大
豆〔Glycine max (Linn.)Merr.〕植株的破坏性伤害,而
对大豆植株的生长则没有任何不利影响;高年春
等[17]的研究结果表明:外源 ALA 可以缓解盐胁迫对
草莓(Fragaria × ananassa Duch.)叶片 PSⅡ的伤害,
使其能保持较高的光能转化效率和光合能力,使光合
产物的积累量较高。本研究中,100 mmol·L -1 NaCl
胁迫条件下来源于安徽亳州和山西运城的菘蓝幼苗
单株叶片鲜质量均低于对照,来源于山西运城的幼苗
单株根鲜质量也低于对照,表明菘蓝幼苗的生长均受
到一定程度的抑制;但来源于安徽亳州的幼苗单株根
鲜质量则高于对照,表明来源于安徽亳州的菘蓝幼苗
耐盐性可能强于来源于山西运城的幼苗。在同水平
NaCl胁迫过程中喷施不同浓度 ALA 后菘蓝幼苗叶片
和根的生长差异较大,其中喷施 16. 7 ~ 25. 0 mg·L -1
ALA后来源于安徽亳州的幼苗单株叶和根鲜质量总
体上高于对照和 NaCl 单一胁迫处理组,表现出一定
的耐盐性;而来源于山西运城的幼苗在喷施 ALA 后
单株叶鲜质量均低于对照,其中,仅 25. 0 和 16. 7
mg·L -1 ALA处理组单株叶鲜质量高于 NaCl 单一胁
迫处理组,说明适宜浓度 ALA 能在一定程度上缓解
NaCl胁迫对山西运城菘蓝幼苗的伤害。综合比较结
果显示:产自山西运城的菘蓝幼苗的耐盐性明显低于
产自安徽亳州的菘蓝幼苗。
菘蓝是重要的药用植物,因此在栽培生产过程中
不仅要关注其药材产量还要注重其体内主要活性成
分的积累量。菘蓝叶片所含的靛玉红及其根中所含
06 植 物 资 源 与 环 境 学 报 第 23 卷
的表告依春是其重要的次生代谢产物,分别是中药大
青叶和板蓝根的质量控制指标[7]21,191,其含量直接关
系到临床药效。因此,在菘蓝生长过程中应该采取适
宜的栽培管理措施,促进菘蓝产量的增加以及药用有
效成分含量的提高,提升其药材产量和质量。由药材
质量控制指标可见:大青叶中靛玉红含量应不低于
0. 02%(即 0. 2 mg·g -1)[7]21,板蓝根中的表告依春
含量应不低于 0. 02%(即 0. 2 mg·g -1)[7]191。本研
究结果显示:在正常栽培(对照)条件下,供试 2 个产
地菘蓝幼苗叶片中靛玉红含量均显著高于 0. 2 mg·
g -1,但来源于安徽亳州的幼苗根中的表告依春含量
低于 0. 2 mg·g -1,来源于山西运城的幼苗根中表告
依春含量则达到 0. 2 mg·g -1;而在 100 mmol·L -1
NaCl胁迫条件下喷施适宜浓度 ALA 处理后,2 个产
地幼苗叶片中的靛玉红含量和根中的表告依春含量
均高于 0. 2 mg·g -1,其中喷施 16. 7 ~ 25. 0 mg·L -1
ALA后产自安徽亳州的菘蓝幼苗叶片中靛玉红含量
和根中表告依春含量均较高,而喷施较低浓度(12. 5
mg·L -1)ALA则对产自山西运城的菘蓝幼苗体内靛
玉红和表告依春的积累有利。
研究结果[18]表明:适宜浓度(50 mg·L -1)ALA
处理可以显著提高 100 mmol·L -1 NaCl 胁迫条件下
半夏〔Pinellia ternata (Thunb.)Tenore ex Breit.〕幼苗
的耐盐能力及其主要药用成分(总生物碱)的含量。
本研究结果显示:喷施适宜浓度 ALA 可以有效减轻
NaCl胁迫对菘蓝幼苗的伤害,并能促进其体内靛蓝、
靛玉红及表告依春等生物碱类成分的积累。因此,为
充分利用盐碱土资源,可在盐渍化土壤中种植菘蓝;
为减轻盐渍化土壤对菘蓝生长的影响,可喷施适宜浓
度 ALA,以达到促进植株生长、增加药用活性成分含
量的双重目的。
参考文献:
[1] 汪牧耘,李雨晴,朱毅斌,等. 外源 5 -氨基乙酰丙酸(ALA)对
菘蓝苗期生长及有效成分含量的影响[J]. 植物资源与环境学
报,2013,22(2) :47 - 51.
[2] NAEEM M S,WARUSAWITHARANA H,LIU H B,et al. 5-
aminolevulinic acid alleviates the salinity-induced changes in
Brassica napus as revealed by the ultrastructural study of chloroplast
[J]. Plant Physiology and Biochemistry,2012,57:84 - 92.
[3] 张春平,何 平,袁凤刚,等. 外源 5 -氨基乙酰丙酸对干旱胁
迫下甘草种子萌发及幼苗生理特性的影响[J]. 西北植物学报,
2011,31(8) :1603 - 1610.
[4] KORKMAZ A,KORKMAZ Y,DEMIRKIRAN A R. Enhancing
chilling stress tolerance of pepper seedlings by exogenous application
of 5-aminolevulinic acid[J]. Environmental and Experimental
Botany,2010,67:495 - 501.
[5] 汪良驹,姜卫兵,黄保健. 5 -氨基乙酰丙酸对弱光下甜瓜幼苗
光合作用和抗冷性的促进效应[J]. 园艺学报,2004,31(3) :
321 - 326.
[6] 曾洪学,王 俊. 盐害生理与植物抗盐性[J]. 生物学通报,
2005,40(9) :1 - 3.
[7] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典:2010 年版(一部)
[M]. 北京:中国医药科技出版社,2010.
[8] 陈 暄,周家乐,唐晓清,等. 水分胁迫条件下不同栽培居群菘
蓝中 4 种有机酸的变化[J]. 中国中药杂志,2009,34(24) :
3195 - 3198.
[9] 唐晓清,王康才,温建云. 根部淹水对菘蓝活性成分的影响 J].
天然产物研究与开发,2009,21(5) :832 - 836.
[10] 段 飞. 逆境胁迫对菘蓝有效成分和耐逆基因的影响[D]. 西
安:陕西师范大学生命科学学院,2006:29.
[11] 唐晓清,王康才,肖云华,等. 5 -氨基乙酰丙酸(ALA)对遮光
环境下菘蓝的生长、叶片气孔气体参数和生物碱含量的影响
[J]. 生态学杂志,2013,32(5) :1155 - 1160.
[12] 吕婷婷,肖云华,吴 群,等. 外源5 -氨基乙酰丙酸对盐胁迫
下菘蓝种子萌发及幼苗抗氧化酶活性的影响[J]. 西北植物学
报,2013,33(10) :2037 - 2042.
[13] 赵艳艳,胡晓辉,邹志荣,等. 不同浓度 5 - 氨基乙酰丙酸
(ALA)浸种对 NaCl 胁迫下番茄种子发芽率及芽苗生长的影
响[J]. 生态学报,2013,33(1) :62 - 70.
[14] 徐 刚,刘 涛,高文瑞,等. ALA对低温胁迫下辣椒植株生
长及光合特性的影响[J]. 江苏农业学报,2011,27(3) :612 -
616.
[15] LI D M,ZHANG J,SUN W J,et al. 5-aminolevulinic acid
pretreatment mitigates drought stress of cucumber leaves through
altering antioxidant enzyme activity[J]. Scientia Horticulturae,
2011,130(4) :820 - 828.
[16] BALESTRASSE K B,TOMARO M L,BATLLE A,et al. The role
of 5-aminolevulinic acid in the response to cold stress in soybean
plants[J]. Phytochemistry,2010,71(17 /18) :2038 - 2045.
[17] 高年春,孙永平,张 琼,等. 外源 5 -氨基乙酰丙酸(ALA)
对 NaCl胁迫下草莓植株光合作用的影响[J]. 江苏农业学报,
2010,26(6) :1329 - 1333.
[18] 梁 琴,谢英赞,王朝英,等. 外源 ALA对半夏幼苗耐盐性及
其总生物碱含量的影响[J]. 广东农业科学,2013,40(15) :
31 - 35.
(责任编辑:佟金凤)
16第 4 期 唐晓清,等:NaCl胁迫过程中喷施 ALA对菘蓝幼苗生长及主要活性成分含量的影响